白细胞介素2基因转导对卵巢癌细胞系SKOV3免疫原性的影响

目的 探讨白细胞介素２（ＩＬ－２）基因转导对卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ３免疫原性的影响。方法 应用流式细胞术,测定ＳＫＯＶ３细胞组织相容性白细胞抗原（ＨＬＡ）ＨＬＡ－ＡＢＣ、ＨＬＡ－ＤＱ及ＨＬＡ－ＤＲ分子的表达,＾５１Ｃｒ－４ｈ释放实验显示ＳＫＯＶ３、ＳＫＯＶ３／Ｎｅｏ、ＳＫＯＶ３／ＩＬ－２细胞对自然杀伤（ＮＫ）细胞和淋巴因子激活杀伤（ＬＡＫ）细胞杀伤的敏感性。结果 ＳＫＯＶ３／ＩＬ－２细胞中ＨＬＡ－Ａ     

IL-2基因转移对卵巢癌细胞系SKOV3致瘤性的影响

目的：探讨ＩＬ－２基因转移对卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ３致瘤性的影响。方法：通过贴壁集落形成检查、软琼脂集落形成检查和裸鼠皮下成瘤试验，测定ＩＬ－２基因转移对卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ３致瘤性的影响。结果：ＳＫＯＶ３、ＳＫＯＶ３／Ｎｅｏ和ＳＫＯＶ３／ＩＬ－２细胞贴壁集落形成率、软琼脂集落形成率分别为５２％、４５％、０．７％和３１．４％、２８．５％、２．４％，ＳＫＯＶ３／ＩＬ－２细胞所形成的集落内细胞少，结构松散；裸鼠皮下成瘤实验显示，３组细胞皮下成瘤率分别为１００％（１２／１２）、９１．７％（１１／１２）及５６．３％（９／１６）；成瘤潜伏期平均分别为６．７±０．９ｄ、１１．４±４．０ｄ、１５．１±６．４ｄ，肿瘤终体积平均分别为１６０４．３±１４６９．４ｍｍ３、１１３０．３±１１５９．７ｍｍ３及２３３．３±１２６．４ｍｍ３；ＳＫＯＶ３／ＩＬ－２细胞皮下瘤增殖较ＳＫＯＶ３／Ｎｅｏ和ＳＫＯＶ３细胞明显缓慢（Ｐ＜０．００１）。镜下见ＳＫＯＶ３及ＳＫＯＶ３／Ｎｅｏ组肿瘤呈浸润性生长，并于皮下和肌肉间形成转移病灶，ＳＫＯＶ３／ＩＬ－２组肿瘤呈假包膜状生长，瘤内见大量单个核细胞浸润。结论：ＩＬ－２基因转移可降低细胞系ＳＫＯＶ３的致瘤?     

脂质体-C-erbB2反义脱氧寡核苷酸对卵巢癌细胞的作用

目的 探讨脂质体Ｃ－ｅｒｂＢ２反义脱氧寡核苷酸（脂质体－ＣｅｒｂＢ２ Ｓ－ＯＤＮｓ）对卵巢癌细胞系Ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因表达及细胞增殖的影响。方法 应用流式细胞仪技术,＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷参入方法,观察脂质体－ＣｅｒｂＢ２ Ｓ－ＯＤＮｓ对卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ３ Ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因表达及细胞生长、细胞周期的作用。结果 脂质体Ｃ－ｅｒｂＢ２ Ｓ－ＯＤＮｓ能够降低Ｃ－ｅｒｂＢ２的表达,并抑制细胞生长;脂     

c—erbB2反义核酸对卵巢癌细胞系生物学行为及药物敏感性的影响

目的：探讨ｃ－ｅｒｂＢ２反义核酸对卵巢癌细胞生物学行为及其化疗药物敏感性的影响。方法：应用ｐＵＣ－ｅｒｂＢ２和ｐＤＯＲ－ｎｅｏ质粒，构建了含反义ｅｒｂＢ２ｃＤＮＡ３．８ｋｂ的重组逆转录病毒表达载体ｐＤＯＲ－ｅｒｂＢ－ｎｅｏ，经脂质体转染ｅｒｂＢ２高表达的人卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ３，再经Ｇ４１８（一种新霉素类似物）筛选得到新霉素抗性细胞，命名为ＳＫＯＶ３－Ａ２。结果：Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析表明，反义ｅｒｂＢ２３．８ｋｂ已完全整合到ＳＫＯＶ３细胞中，与亲本细胞及转染ｐＤＯＲ－ｎｅｏ的对照组细胞相比，ＳＫＯＶ３－Ａ２的生长和ＤＮＡ合成均受到抑制，且对５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）及顺铂（ＤＤＰ）的药物敏感性明显增加。结论：ｃ－ｅｒｂＢ２反义核酸在卵巢癌基因治疗中有一定作用；ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因可能与卵巢癌细胞耐药有关。     

单纯疱疹病毒胸苷激酶基因转染联合药物对卵巢癌细胞的杀伤效应

目的：探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＨＳＶ－ＴＫ）基因转染联合抗病毒药物羟基无环鸟苷（ＧＣＶ）对人卵巢癌细胞系的杀伤效应。方法：采用基因工程技术，将ＨＳＶ－ＴＫ基因的ＤＮＡ序列插入逆转录病毒载体ｐＬＮＳＸ的ＨｉｎｄⅢ位点，构建重组体ｐＬＮＳ／ＨＳＶ－ＴＫ，并采用磷酸钙介导贴壁细胞基因转染法将重组体导入ＰＡ３１７包装细胞，建立重组逆转录病毒载体分泌细胞株ＰＡ３１７／ＴＫ。并采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测ＨＳＶ－ＴＫ／ＧＣＶ系统对人类卵巢癌ＡＯ细胞系的生长抑制率。结果：重组逆转录病毒载体ｐＬＮＳ／ＨＳＶ－ＴＫ能有效地将ＨＳＶ－ＴＫ基因导入ＡＯ细胞系内并使其获得对ＧＣＶ的敏感性。当培养液内ＧＣＶ达４０μｍｏｌ时，其对转ＨＳＶ－ＴＫ基因后ＡＯ细胞的生长抑制率为９８．０％。结论：ＡＯ细胞转染ＨＳＶ－ＴＫ基因后，能有效地被ＧＣＶ杀灭。     

低浓度化学药物配合淋巴因子激活的杀伤细胞对人卵巢癌细胞体外杀伤敏感性的研究

目的探讨低浓度化学药物配合淋巴因子激活的杀伤（ＬＡＫ）细胞能否增强对卵巢癌细胞的体外杀伤敏感性。方法应用１．５μｇ／ｍｌ泰素、４μｇ／ｍｌ顺铂、２５μｇ／ｍｌ氟尿嘧啶,与人卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ３作用１８小时后,采用５１Ｃｒ释放法,观察ＳＫＯＶ３对被白细胞介素２（ＩＬ２）激活的ＬＡＫ细胞的杀伤敏感性;应用Ｇｒｉｍｍ的方法,测定ＳＫＯＶ３细胞与ＬＡＫ结合率的变化;应用流式细胞仪,检测ＳＫＯＶ３细胞表面粘附分子（ＩＣＡＭ１）表达的变化,并与未经药物作用的ＳＫＯＶ３细胞进行对照。结果经泰素、顺铂、氟尿嘧啶作用及未经药物作用的ＳＫＯＶ３细胞对ＬＡＫ细胞的杀伤敏感性分别为２９．７％、４５．９％、３７．２％及２８．５％;与ＬＡＫ细胞的结合率分别为２０．１％、２６．１％、２４．９％及１８．７％;ＳＫＯＶ３细胞表面ＩＣＡＭ１表达率分别为５２．５％、６５．５％、６８．１％及４９．７％。结论经低浓度化疗药物作用后的卵巢癌ＳＫＯＶ３细胞对被ＩＬ２激活的ＬＡＫ细胞的杀伤敏感性增强,其机理可能与ＩＣＡＭ－１表达的增加有关。     

野生型p53基因cDNA转染对卵巢癌细胞系SKOV-3生物学行为的影响

目的：研究野生型ｐ５３基因ｃＤＮＡ转染对卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ－３生物学行为的影响。方法：用脂质体介导的转染技术，将含有全长人野生型ｐ５３ｃＤＮＡ的真核表达重组质粒和空载体质粒，分别导入不表达ｐ５３的ＳＫＯＶ－３细胞，观察细胞生物学行为的改变。结果：（１）共获２个ｐ５３ｃＤＮＡ转染克隆（ｐＣ５３）和２个空载体转染克隆（ｐＮｅｏ）；（２）ｐＣ５３和ｐＮｅｏ细胞形态学与ＳＫＯＶ－３无显著差别；（３）ｐＣ５３细胞生长明显比ＳＫＯＶ－３慢，而ｐＮｅｏ细胞生长与ＳＫＯＶ－３相当；（４）ｐＣ５３在软琼脂中形成集落数显著少于ＳＫＯＶ－３细胞和ｐＮｅｏ细胞；（５）ｐＣ５３Ｇ１／Ｇ０期细胞百分比高于ＳＫＯＶ－３和ｐＮｅｏ。结论：野生型ｐ５３ｃＤＮＡ可作为卵巢癌基因治疗的目的基因之一。     

卵巢癌细胞对顺铂耐药及其逆转的实验研究

目的：探明卵巢癌对顺铂耐药的发生机理，并筛选出逆转其耐药性的有效调节剂。方法：建立对顺铂耐药的人卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ３／ｃｐ，采用微囊包裹肿瘤细胞技术建立人类卵巢癌小鼠异种移植耐药模型。比较耐药细胞和非耐药细胞生化特征的差异，采用相应的耐药调节剂来进行耐药逆转实验。结果：在ＳＫＯＶ３细胞内，铂（Ｐｔ）累积浓度、Ｐｔ－ＤＮＡ加合物、ＤＮＡ链间交联指数（ＩＳＣ）分别是ＳＫＯＶ３／ｃｐ细胞的５．１、２．４和４．８倍（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；二性霉素Ｂ（ＡｍＢ）和新生霉素（ＮＶＢ）能提高ＳＫＯＶ３／ｃｐ细胞内铂浓度或Ｐｔ－ＤＮＡ加合物浓度，从而完全或部分逆转ＳＫＯＶ３／ｃｐ对顺铂的耐药性。结论：导致ＳＫＯＶ３／ｃｐ对顺铂耐药的主要原因是细胞内药物浓度下降和对Ｐｔ－ＤＮＡ清除能力增强。ＡｍＢ和ＮＶＢ能够逆转ＳＫＯＶ３／ｃｐ对顺铂的耐药性。     

应用肿瘤引流区淋巴结细胞诱导淋巴因子激活杀伤细胞的特性

对７例妇科恶性肿瘤患者肿瘤引流区域淋巴结的淋巴细胞，在体外进行短期淋巴因子激活杀伤（ＬＡＫ）细胞的诱导培养。结果表明，ＬＡＫ细胞对肺癌细胞系、卵巢癌ＣＡＯＶ＿３细胞系及新分离的卵巢癌细胞杀伤能力不同，且效应细胞与靶细胞比例在４０：１以上时，ＬＡＫ细胞活性维持在一定水平；该ＬＡＫ细胞对同种分离卵巢癌细胞杀伤能力更强。白细胞介素。２（ＩＬ－２）和ＯＫＴ＿３联合应用诱导ＬＡＫ细胞，随着培养时间的延长，其杀伤靶细胞的能力强于单独使用ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ细胞。肿瘤引流区域淋巴结经分离可获得大量的淋巴细胞。     

卵巢癌细胞浸润性的研究

目的：研究卵巢癌细胞的浸润性。方法：采用膜浸润培养系统（ＭｅｍｂｒａｎｅＩｎｖａ－ｓｉｏｎＣｕｌｔｕｒｅＳｙｓｔｅｍ．ＭＩＣＳ）及重建基底膜模式（ＲｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆＢａｓｅｍｅｎｔＭｅｍｂｒａｎｅ）定量研究卵巢癌细胞的浸润性。用细胞外介质胶（ｍｅｔｒｉｇｅｌ）涂布微孔碳素膜构成重建基底膜形成酷似活体中癌细胞所处的环境，以真实定量地反映癌细胞的浸润力。结果：用以试验的６种卵巢癌细胞株Ｂｉｘｌｅｒ、Ｂｉｘ３、Ｂｉｘ２ＮＭＢ．Ｈｅｙ、ＤＫ２ＮＭＡ及ＳＫＯＶ－３浸润基底膜的能力不同，Ｂｉｘｌｅｒ浸润能力最强，为１０．４４％。Ｈｅｙ次之，为８％，Ｂｉｘ３最弱。仅为０．６３±０．０８％。卵巢癌细胞株的浸润性与尿激酶类纤溶激活因子（ｕＰＡ）的基因转录表达有关，与克隆刺激因子（ＣＳＦ－１）的基因转录表达高度相关，ｒ＝０．Ｐ＜０．０１。以外源性ＣＳＦ－１处理癌细胞。则ｕＰＡＲＮＡ转录及该细胞的浸润性均增加２倍，说明卵巢癌细胞的浸润性受ｕＰＡ介导及ＣＳＦ－１调控。外源性ｕＰＡ抗体处理使卵巢癌细胞株的浸润能力阻断５０％。结论：卵巢癌细胞具有分泌ｕＰＡ的能力，是其具有浸润性的重要机制，但不是全部机制。关键词     

沉默β-catenin对卵巢癌干细胞特性的影响

目的:探讨β-catenin蛋白对卵巢癌干细胞特性及细胞增殖的影响。方法:采用β-catenin siRNA技术沉默SKOV3中β-catenin基因,形成SKOV3-RNAi细胞。转染空载体siRNA的SKOV3-NC细胞作为对照。流式细胞技术测定CD44、CD117表达;通过卡铂作用后细胞的平板克隆计数及MTT法检测沉默β-catenin基因后细胞增殖能力,通过裸鼠背部皮下移植瘤实验检测细胞的体内成瘤能力。结果:与SKOV3-NC细胞相比,SKOV3-RNAi细胞在无血清培养条件下细胞球形成明显减少(P0.05),且CD44、CD117荧光强度均明显降低(P0.05)。卡铂作用于细胞后,SKOV3-RNAi细胞克隆数的减少量比SKOV3-NC细胞更为显著,同时细胞生长速度明显减慢;裸鼠体内,SKOV3-RNAi的成瘤能力较SKOV3-NC细胞明显降低。结论:沉默β-catenin基因后,卵巢癌细胞系SKOV3的干细胞特性明显减弱,细胞增殖也受到抑制。     

白细胞介素-2基因转导对卵巢癌细胞SKOV3形态及增殖的影响

OBJECTIVE: To study the effect of interleukin-2 (IL-2) gene transfer on the proliferation and morphology of ovarian cancer cell line SKOV3. METHOD: IL-2 gene was introduced into ovarian cancer cell line SKOV3. The morphologic changes, mitosis, proliferation curve, 3H-uptaking and cell cycle were studied. RESULTS: IL-2 cDNA, 490 bp, was transduced. IL-2 gene expression was detected. IL-2 activity was 30-318 U/10(6) cells/24hr. IL-2 gene modified cell is squamas like with smaller nucleus/cytoplasm ratio, larger cell area and more homogeneous. The ultrastructural study showed that the cytoplasma of IL-2 gene modified cells is markedly vacuolized and the chromatin is condensed. There was less mitosis found in SKOV3/IL-2 cells. SKOV3/IL-2 cell proliferate more slowly, the doubling time prolonged from 38.40 hr to 65.36 hr, 3H-uptaking decreased 52.3% of the parent cell. The cell cycle study showed that SKOV3/IL-2 cell was blocked to phase G1/G0. CONCLUSIONS: The retrovirous vector can transduce Il-2 gene into ovarian cancer cell line SKOV3 effectly. IL-2 gene transfer can induce morphologic changes of SKOV3 cells, which may indicate the biologic behavior changes of the targets. IL-2 gene transfer can induce the proliferation inhibition of SKOV3 cells.     

白细胞介素-1α对卵巢上皮细胞及卵巢癌细胞11β类固醇脱氢酶基因表达的影响

目的探讨白细胞介素1α(IL1α)对正常人卵巢上皮细胞及卵巢癌细胞株11β类固醇脱氢酶(11βHSD)基因表达的影响。方法体外培养人卵巢上皮细胞(HOSE)及卵巢癌细胞株SKOV3、PEO4和PEO14,应用逆转录多聚酶链反应(RTPCR)和实时荧光定量聚合酶链反应(realtimePCR)方法比较上述4种细胞中11β类固醇脱氢酶1(11βHSD1)、11β类固醇脱氢酶2(11βHSD2)和白细胞介素1受体(IL1R)mRNA水平的表达及加入不同浓度的IL1α后,4种细胞中11βHSD1和11βHSD2mRNA表达水平的变化。结果正常卵巢上皮细胞中11βHSD1和IL1RmRNA表达水平较高,11βHSD2mRNA表达水平较低;而卵巢癌细胞株SKOV3和PEO4中11βHSD1和IL1RmRNA表达水平较低,11βHSD2mRNA表达水平较高。加入不同浓度的IL1α后,正常卵巢上皮细胞11βHSD1mRNA表达水平明显升高(P<0.01);PEO14细胞11βHSD1mRNA表达水平也升高(P<0.05);SKOV3和PEO411βHSD1mRNA表达水平无明显变化;正常卵巢上皮细胞11βHSD2mRNA表达水平无明显变化,卵巢癌细胞株PEO4、SKOV3及PEO1411βHSD2mRNA表达水平不同程度升高(P<0.05)。结论卵巢癌细胞丧失了对炎性细胞因子白细胞介素1反应的能力;11β类固醇脱氢酶异构体表达形式的不同是肿瘤细胞转化的一种特征,它可能与卵巢上皮细胞的恶性转化有关。     

绒毛膜癌耐药细胞系的建立及人白细胞介素2基因转染后对其多药耐药性的逆转作用

目的 建立绒毛膜癌（绒癌）的耐药细胞系,应用基因工程技术将人白细胞介素2（hIL-1) 基因导入绒癌耐药细胞系,观察hIL-2基因转染后对绒癌耐药细胞耐药性的逆转作用。方法 采用间歇诱导的方法,用鬼臼乙叉甙（VP－16）诱导绒癌细胞系JEG－3,建立耐药细胞系,四甲基偶氮唑蓝比色法检测该耐药细胞系对多种化学治疗药物的耐药指数,及多种耐药基因包括肺耐药蛋白、多药耐药相关蛋白、谷胱甘肽转移酶、二氢叶酸还原酶和多药耐药基因（MDR1）的mRNA表达情况。用逆转录聚合酶链反应技术,克隆hIL-2基因,将hIL-2基因插入真核表达载体pcDNA3.1( )中,提取质粒,通过阳离子脂质体将hIL-2基因转染绒癌耐药细胞系,用新霉素筛选含hIL-2 DNA片段的单个细胞克隆,检测转染hIL-2基因后该细胞耐药指数的变化,测定转染后细胞hIL-2和多种耐药基因mRNA的表达。结果 用VP－16采用间歇诱导法,成功建立绒癌的VP－16耐药细胞系JEG－3／VP－16,并检测出MDR1 mRNA表达。转染hIL-2基因后,绒癌细胞中检测出hIL-2 mRNA表达,转染hIL-2基因的细胞的耐药指数降低,JEG－3／VP－16细胞转染pcDNA3.1( )-hIL-2后,对VP－16的耐药指数由38．7降至6．0－6．1,对甲氨蝶呤的耐药指数由14．5降至2．6－2．5,对更生霉素的耐药指数由13．0降至2．0;MDR1 mRNA表达转阴。结论 hIL-2基因转染后可通过调节MDR1的表达,从而逆转绒癌耐药细胞系的耐药性。     

IL-2基因转导对卵巢癌细胞化疗药物敏感性的影响

目的:探讨IL-2基因转导能否改变卵巢癌细胞对化疗药物的敏感性。方法:用MTT法测定导入人IL-2基因的卵巢癌细胞对化学治疗药物顺铂、阿霉素、泰素及足叶乙甙治疗的敏感性及IC_50,以导入新霉素基因的卵巢癌细胞系及野生型卵巢癌细胞系为对照。结果:IL-2基因转移使SKOV3细胞对上述化疗药物治疗的敏感性有所提高,但仅对VP-16治疗敏感性的提高差异有显著性（P<0.05）。结论:IL-2基因导入SKOV3细胞没有降低其对实验药物治疗的敏感性。     

Infectivity enhanced adenoviral-mediated mda-7/IL-24 gene therapy for ovarian carcinoma

OBJECTIVE: Melanoma differentiation associated gene-7 [mda-7/Interleukin (IL)-24] has been identified as a novel anti-cancer agent, which specifically induces apoptosis in cancer cells but not in normal epithelial, endothelial and fibroblast cells. The objective of this study was to evaluate the anti-tumor effect of adenovirus-mediated mda-7/IL-24 (Ad.mda-7) gene therapy in ovarian carcinoma and further improve anti-tumor effect by enhancing infectivity of Ad.mda-7. METHODS: A panel of human ovarian carcinoma cells, OV-4, HEY, SKOV3, SKOV3.ip1 and control normal human mesothelial cells, were infected by a replication deficient recombinant adenovirus encoding mda-7/IL-24 and control virus Ad.CMV.Luc. After 72 h, apoptosis was evaluated by TUNEL and Hoechst staining and further quantified by fluorescent activated cell sorter (FACS) analysis. Infectivity of Ad.mda-7 was enhanced by retargeting it to CD40 or EGF receptors overexpressed on ovarian cancer cells. Subsequently, enhancement in apoptosis of CD40- or epidermal growth factor receptor (EGFR)-retargeted Ad.mda-7 was evaluated. RESULTS: Adenoviral-mediated delivery of mda-7 induces apoptosis ranging from 10-23% in human ovarian cancer cells tested with the highest percentage of apoptosis noted in SKOV3 cells. Minimal apoptosis was noted in normal mesothelial cells. CD40- or EGFR-retargeted Ad.mda-7 increased apoptosis by 10-32% when compared to that achieved with untargeted Ad.mda-7. CONCLUSION: Ad.mda-7 exhibits ovarian cancer-specific apoptosis, but does not affect normal human mesothelial cells. Infectivity enhanced CD40- and EGFR-retargeted Ad.mda-7 augments apoptosis induction, thus increasing the therapeutic index and translational potential of Ad.mda-7 gene therapy.     

CO_2对人卵巢癌细胞株生长转移相关因子表达及顺铂敏感性的影响

目的:探讨体外模拟腹腔镜二氧化碳(CO2)气腹环境对人卵巢癌细胞株SKOV3生长转移相关因子表达的影响及CO2气腹环境作用后SKOV3对顺铂(DDP)敏感性的变化。方法:将体外培养的处于对数生长期的SKOV3细胞分为4组,即CO2组、DDP组、CO2+DDP组及对照组。用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)法及免疫细胞化学法检测各组细胞的PCNA、VEGF和CD44v6mRNA和蛋白的表达。结果:(1)CO2气体与顺铂间无交互作用(P0.05);(2)CO2处理组肿瘤细胞的PCNA、VEGF和CD44v6mRNA和蛋白表达均明显升高(P0.01);(3)DDP组与对照组、CO2+DDP组与CO2组比较,DDP处理组肿瘤细胞的PCNA、VEGF和CD44v6mRNA和蛋白表达均明显降低(P0.01,P0.01)。结论:CO2环境能促进人卵巢癌细胞株SKOV3生长转移相关因子表达;DDP对肿瘤细胞生长转移因子的表达有抑制作用;CO2环境作用后,肿瘤细胞对DDP敏感性的变化不明显。     

Prognostic value of CD44 expression in invasive squamous cell carcinoma of the vulva.

OBJECTIVE: CD44 is a cell adhesion molecule that binds extracellular matrix. CD44 isoforms arising from alternative mRNA splicing are implicated in tumor metastases. The aim of our study is to investigate the expression of CD44 splice variants and its correlation to lymph node metastases and disease-free survival in squamous cell carcinoma (SCC) of the vulva. METHODS: Thirty-five cases of SCC of the vulva were evaluated for CD44 splice variants -3v, -4v, -5v, and -7v expression by immunocytochemistry. When available one nonmetastatic lymph node (LN) was also studied. In cases with LN metastases, the metastatic LN as well as a nonmetastatic LN from the same patient were evaluated. RESULTS: All CD44 variants studied were expressed in all epithelium: normal, dysplastic, and SCC. CD44 variants showed decreased immunostaining in the tumor cells when compared to normal epithelium. Furthermore, intensity of expression of the CD44 isoforms changed within the tissue containing invasive cancer. Interestingly, CD44-4v expression was downregulated in the most differentiated cells within the carcinoma, mainly in patients who had disease recurrence or died of disease (P = 0.004). Confirming prior publications, CD44-5v and -7v expression did not correlate with survival. One hundred percent of metastatic tumors to LNs were immunoreactive with CD44-3v and only 1/30 normal LN had CD44-3v expression. Eighty percent of metastatic tumors to LNs were immunoreactive for CD44-4v. However, 3 LNs without tumor were also immunoreactive with CD44-4v. CONCLUSION: CD44-4v is a potential molecular marker of disease recurrence in vulvar carcinoma. A larger multiinstitutional study is needed to evaluate the specificity of CD44-3v expression in LN metastasis. If a larger scale study confirms our findings, a CD44-3v antibody could be used for radioimmunoimaging of occult lymph node metastases in patients with vulvar cancer.