吗啡对HIV-1在MT2细胞内复制影响

目的 探讨吗啡对人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)在MT2细胞中复制的影响.方法 将MT2细胞按单纯随机分组的原则分为吗啡处理组、吗啡+纳洛酮处理组、纳洛酮处理组和病毒对照组,先用浓度为10-8 mol/L的纳洛酮预处理吗啡+纳洛酮处理组和纳洛酮处理组0.5h,再用10-12、10- 10和10-8 mol/L 3个浓度的吗啡处理吗啡+纳洛酮处理组和吗啡处理组24h,然后每组细胞加入HIV -1感染MT2细胞,并分别于感染的第3、4、5和6d取培养上清测定HIV -1 p24抗原表达.结果 HW-1感染MT2细胞第3、4、5、6d,10-12、10-10和10-8 mol/L 3个浓度吗啡处理组的HIV-1 p24抗原表达均高于病毒对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01);吗啡+纳洛酮处理组、纳洛酮处理组与病毒对照组HIV-1 p24抗原表达比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);第3、4、5、6d,3个浓度吗啡处理组的HIV-1 p24抗原表达量比对照组增加的倍数比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);10-12、10-10和10-8 mol/L 3个浓度吗啡处理组在不同时间HIV-1 p24抗原表达量比对照组增加倍数比较,3个吗啡处理组的HIV-1 p24抗原表达量比对照组增加倍数均随着感染时间的延长而呈现递增的趋势(P＜0.05).结论 吗啡能够促进HIV-1在MT2细胞和内的复制,并且随感染时间的延长呈现递增趋势;吗啡促进HIV-1复制的作用可被阿片受体阻滞剂纳洛酮阻断.     

肝细胞生长因子对铅致人肾小球系膜细胞损伤的保护效应的机制

目的初步探讨肝细胞生长因子（HGF）防护铅处理致人肾小球系膜细胞（HMC）损伤的作用机制。方法将HMC分为对照组（C组）、Pb10μmol／L组和HGF＋Pb10μmol／L组,在6、12、24、48h分别通过噻唑蓝（MTY）法检测细胞存活率和用流式细胞仪检测凋亡率;实时荧光定量一PCR检测各组细胞中Caspase-3的表达水平。结果MTr检测结果显示。Pb10pμmol／L组HMC在6、12、24、48h细胞生长存活率均显著低于HGF＋Pb10μmol／L组（P〈0．01）;流式凋亡检测结果显示,HMC在10μmol／L醋酸铅染毒6、12、24和48h后,HGF＋Pb10μmol／L组在各个时间点细胞凋亡率显著低于Pb10μmol／L组（P〈0．01）。实时荧光定量-PCR检测结果显示,在HMC铅染毒48h后,HGF＋Pb10μmol／L组Caspase-3的表达量显著低于Pb10μmol／L组（P〈0．01）。结论铅促进HMC细胞的凋亡,而HGF通过降低Caspase．3的表达抑制HMC的凋亡,从而发挥对铅致HMC细胞损伤的保护作用。     

无机砷对Chang肝细胞株血红素单加氧酶-1 mRNA和蛋白表达的诱导作用

[目的]观察亚砷酸钠（sodium arsenite,NaAsO2）对Chang肝细胞株血红素单加氧酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）mRNA和蛋白表达的诱导作用。[方法]以5μmol／L和10μmol／L的NaAsO2作用Chang肝细胞株2、6、12h和24h,分别用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western Blot法检测细胞内HO-1的mRNA和蛋白表达情况。[结果]5μmol／L和10μmol／LNaAs02暴露2h开始出现HO-1mRNA的诱导表达;6h的表达水平明显高于对照组和2h暴露组（P〈0．01）。其中,10μmol／LNaAsO2暴露12h和24h的mRNA表达均明显高于该浓度的6h暴露组（P〈0．01）;但24h的HO-1 mRNA表达水平与12h组相比没有明显升高。NaAsO2暴露诱导的HO-1蛋白表达则从6h开始出现,12h组明显高于6h组,24h组明显高于12h组（均P〈0．01）;5μmol／L和10μmol／L NaAsO2分别暴露6、12h和24h的HO-1蛋白表达量分别是对照组的2．80、9．34、18．15和3．97、12．92、23．29倍;此外,10μmol/LNaAsO2暴露12h和24h的HO-1 mRNA和蛋白表达均明显高于对应时间的5μmol／L组（P〈0．01）。[结论]NaAsO2暴露能够有效和持续性诱导Chang肝细胞株HO-1的mRNA和蛋白表达,是无机砷暴露的一种细胞保护性适应性反应。     

硒对镉诱导的大鼠肝脏端粒酶逆转录酶和c-Myc及p53表达的影响

目的研究亚硒酸钠时氯化镉诱导的大鼠肝脏端粒酶逆转录酶（TERT）mRNA、c-Myc蛋白、p53蛋白表达的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分为6组，对照组、硒组（5μmol／kg亚硒酸钠）、5μmol／kg氯化镉组、10μmol／kg氯化镉组、研（5μ／kg亚硒酸钠）＋5μmol／kg氯化镉组、硒（5μmol／kg亚硒酸钠）＋10μmol／kg氯化镉组。每组动物5只，染毒48h后取出肝脏，用RT-PCR方法检测TERP基因的表达，用免疫组织化学方法检测c-Myc蛋白和p53蛋白的表达。结果与对照组比较，5μmol／Lkg氯化镉组和10μmol／kg氯化镉组TERP表达增多，10μmol／L kg氯化镉组c-Myc蛋白表达增多，5μmol／L kg氯化镉组和10μmol／L kg氯化镉组p53蛋白表达增多。TERT的表达，硒＋10μmol／Lkg氯化镉组与10μmol／L kg氯化镉组比较降低；硒＋10μmol／L kg氯化镉组比10μmol／L kg氯化镉组c-Myc蛋白表达降低；硒＋5μmol／L kg氯化镉组、硒＋10μmol／L kg氯化镉组与相对应的镉组比较p53蛋白表达降低。结论镉在5～10μmol／L kg的剂量条件下可以诱导大鼠肝脏高表达TERT、c-Myc蛋白和p53蛋白，而硒对镉引起的TERT、c-Myc蛋白和p53蛋白的表达增高具有一定的拮抗作用。     

聚合酶链反应快速诊断酿酒工人浅部真菌病的实验研究

采用RT-PCR技术检测细胞内p53及bcl-2基因的改变,以观察六价铬[Cr（Ⅵ）]对人胚肺细胞（HEL）内癌基因和抑癌基因的影响及绿茶对其的拮抗作用。结果显示,不同浓度的Cr（Ⅵ）溶液和绿茶浸泡液处理HEL细胞24h后,5μmol／L 及10μmol／L Cr（Ⅵ）单独处理组细胞内p53 mRNA和bcl-2 mRNA含量显著高于阴性对照组（P〈0．05）。绿茶浸泡液处理组与Cr（Ⅵ）单独处理组相比,细胞内p53 mRNA和bcl-2mRNA含量降低（P〈0．05）。提示六价铬可引起p53及bcl-2 mBNA水平升高,绿茶浸泡液可以降低其表达水平。     

p38MAPK和ERK1／2对镉诱导NRK肾细胞c-myc与c-fos基因mRNA表达的影响

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和细胞外信号调节激酶（ERK）1／2抑制剂对镉染毒NRK肾细胞后原癌基因c—myc与c—fos表达的影响。方法用不同剂量CdCl2（0、2．5、5．0、10．0μmol／L）染毒大鼠NRK细胞12h,p38MAPK抑制剂SB20358010．0μmol／L和ERK1／2抑制剂PD9805910μmol／L预处理NRK细胞0．5h后,再加入10．0μmol／LCdCl2染毒细胞,用流式细胞技术检测细胞凋亡率,SYBRGreenI荧光定量PCR检测c-rnyc与c-fosmRNA表达。结果流式细胞仪检测NRK细胞染镉后细胞凋亡率随染毒剂量增加而增加;p38MAPK抑制剂SB203580＋10．0μmol／LCdCl2组与单独染镉组比较,细胞凋亡率显著下降;但ERK1／2抑制剂PD98058＋10．0μmol／LCdCl2组与单独染镉组比较,细胞凋亡率显著升高。实时荧光定量PCR检测NRK细胞染镉后c—myc和c—fosmRNA表达明显增强;单独用SB203580和PD98058刺激NRK细胞后c-myc和c—fosmRNA表达与对照组比较,差异无统计学意义,但SB203580和PD98058预处理NRK细胞0.5b后加入10．0μmol／LCdCl2与单纯10．0μmol／L染镉组比较,c—myc和c-fosmRNA表达显著降低。结论MAPK信号转导通路可能在镉诱导原癌基因c—myc和c—fos表达中发挥作用。     

吗啡对拉米夫定抗HIV-1药效影响的体外MT2细胞实验研究

目的 探讨吗啡是否影响拉米夫定(3TC)抗HIV-1的抗病毒效果.方法 MT2细胞随机分为吗啡+3TC、吗啡+纳洛酮+3TC、纳洛酮+3TC处理组及3TC对照组和病毒对照组;用纳洛酮处理相应组的MT2细胞0.5 h后,加入吗啡处理细胞24 h,然后每组细胞加入等量的HIV-1ⅢB病毒和3TC溶液;病毒感染细胞第3、4、5和6天,取培养上清,用ELISA法检测培养上清的HIV-1 p24抗原,根据p24抗原表达量,计算各个处理组的3TC抗HIV-1 p24抗原抑制率.结果 HIV-1感染细胞第3和第4天,吗啡+3TC处理组的3TC抗HIV-1 p24抗原抑制率最低,与3TC对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);吗啡+纳洛酮+3TC处理组和纳洛酮+3TC处理组的3TC抗HIV-1 p24抗原抑制率相当,两组差异无统计学意义(P>0.05),这两组分别与3TC对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);病毒感染细胞第5和第6天,各处理组的3TC抗HIV-1 p24抗原抑制率与3TC对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);各个处理组的3TC抗HIV-1 p24抗原抑制率随感染时间延长而降低,呈现时间一效应关系.结论 吗啡在病毒感染初期能降低3TC 的抗HIV-1药效;纳洛酮能够阻滞吗啡降低3TC的抗HIV-1药效作用.

Abstract：

Objective To determine whether morphine having the ability to influence the antiviral effect of lamivudine(3TC)in vitro study.Methods MT2 cells were randomly assigned into morphine+3TC treatment group,morphine+naloxone+3TC treatment group,naloxone+3TC treatment group.Both 3TC and virus control groups were set up.The corresponding MT2 cells were treated with opiates antagonist(naloxone)for 0.5 hours before the 24-hours morphine treatment program was implemented while all of the groups were then infected with equal amounts of cell-free HIV-1 ⅢB strain and 3TC.HIV-1 p24 antigen in culture supernatants collected at days 3,4,5 and 6after infection status was tested and the inhibition of 3TC anti-HIV-1 p24 antigen of various treatment groups calculated.Results Inhibition of 3TC anti-HIV-1 p24 antigen of Morphine+3TC treatment group was the lowest when HIV-1 infected cells at 3rd and 4th day and showed significant difierence (P<0.05)when compared to the 3TC control.However,there was no statistically significant difference among them(P>0.05),when virus was infected the cells at 5th and 6th day.The difference of 3TC anti-HIV-1 p24 antigen inhibition between the morphine+naloxone+3TC treatment group and the naloxone+3TC treatment group was not significant(P>0.05).Similar results were obtained when these two groups were compared to the 3TC control group(P>0.05),respectively.The 3TC anti-HIV-1 p24 antigen inhibition of each treatment group reduced as the time of infection prolonged,showing a significant and time-course effbct.Conclusion The 3TC antiviral effect was reduced by morphine in the early stage of infection,and could be blocked by naloxone.     

氧化型低密度脂蛋白促进巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1表达及辛伐他汀干预研究

目的：观察氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）对大鼠腹腔巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）表达的影响，探讨LOX-1在泡沫细胞形成中的作用。方法：无菌分离、培养大鼠腹腔巨噬细胞，分别以终浓度10mg／L，25mg／L，50mg／L，75mg／L，100mg／L ox—LDL与巨噬细胞共孵育24h，以RT—PCR和Western blotting检测LOX-1基因表达水平；以终浓度75mg／L ox—LDL与巨噬细胞分别共孵育0．5h，3h，6h，12h，24h和36h后检测LOX-1表达水平；以不同浓度辛伐他汀预处理巨噬细胞后，再与ox-LDL共培养，检测LOX-1基因表达。结果：ox-LDL终浓度为10—75mg／L时，随着浓度增大，LOX-1mRNA和蛋白表达均增强，75mg／L时达高峰，ox-LDL 100mg／L时LOX-1表达显著降低（均P〈0．05）；自ox-LDL与巨噬细胞共孵育6h开始，LOX-1表达逐渐增强，24h达高峰，36h时LOX-1表达下降（均P〈0．01）；不同浓度辛伐他汀均使LOX-1表达降低，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：ox-LDL在一定范围内以剂量和时间依赖方式增强大鼠腹腔巨噬细胞LOX-1表达，LOX-1在巨噬细胞摄入ox-LDL的过程中可能具重要作用，辛伐他汀可抑制巨噬细胞LOX-1表达。     

姜黄素抑制人肝癌细胞BEL-7402中VEGF和HIF-1α表达通过PI3K／AKT／FRAP信号传导通路

目的探讨MAPK和PI3K信号传导通路在姜黄素调节VEGF和HIF-1α表达中的作用。方法分别加入LY29400225μmol／L、50μmol／L，U012610μmol／L、20μmol／L，rapamycin 5ng／ml、10ng／ml处理人肝癌细胞BEL-7402，30min后加入姜黄素10μmol／L，对照组单独加入0、10μmol／L姜黄素，缺氧环境中培养6h后，行RT—PCR和Western Blot检测VEGF蛋白、mRNA和HIF-1α蛋白表达；分别加入不同浓度的的姜黄素以及LY294002 25 μmol／L处理人肝癌细胞BEL-7402，缺氧环境中培养6h后，行Western Blot检测磷酸化AKT和总AKT蛋白表达。结果姜黄素10μmol／L＋LY29400225μmol／L组、姜黄素10μmol／L＋LY294002 50 μmol／L组、姜黄素10μmol／L＋rapamycin 5 ng／ml组、姜黄素10μmol／L＋rapamycin 10 ng／na组HIF-1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10μmol／L组相比降低，差异有统计学意义（P〈0．01）；而姜黄素10μmol／L＋U012610μmol／L组、姜黄素10μmol／L＋U0126 20 μmol／L组HIF—1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10μmol／L组相比差异无统计学意义（P〉0.05）；不同浓度的姜黄素、LY294002 25 μmol／L处理的人肝癌细胞BEL-7402缺氧6h后磷酸化AKT蛋白表达逐渐降低，LY294002 25 μmol／L可以基本阻断磷酸化AKT蛋白的表达，而对总AKT蛋白表达无明显变化。结论姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α蛋白和VEGF的表达通过P13K／AKT／FRAP信号传导通路。     

苯并(a)芘引起静止期二倍体人胚肺成纤维细胞可逆的G1期阻滞

目的研究苯并（a）芘[B（a）P]对静止期的二倍体人胚肺成纤维细胞（HELF）细胞周期的影响。方法血清饥饿法使细胞同步化于G0期;20μmol／LB（a）P作用细胞4h后,采用流式细胞术分别检测遗传损伤发生后0、24、48h细胞周期分布的改变,并采用Western blotting分析0、5、10、20μmol／LB（a）P作用24h后及20μmol／LB（a）P作用4h后24h内细胞周期主要调节基因p53、p21和p16表达的改变。结果0．5％低血清培养48h能够较好的达到G0同步化效果,处于G0期细胞占78％;正常培养细胞持续进入细胞周期进行DNA合成,24h时S期细胞达43．9％,而20μmol／LB（a）P处理组细胞发生G1期阻滞;48h后对照组细胞完成一个细胞周期回到以G1期为主的状态,B（a）P处理组细胞则从G1期阻滞中恢复,继续进入细胞周期,S期细胞达到了26．5％,延迟约24h。不同浓度B（a）P作用后引起P53、P21蛋白表达明显增加,20μmol／LB（a）P处理后4h即可诱导蛋白表达增加。P53在12h后逐渐恢复,P21直至24h仍未下降。P16初始略有下降,24h恢复。结论B（a）P引起同步化于G0期的细胞发生可逆转的G。期阻滞,该阻滞和p53-p21途径相关。     

二甲双胍对子宫内膜异位症在位内膜细胞增殖与凋亡的影响

目的研究二甲双胍（metformin）对体外培养子宫内膜异位症（EMS）在位内膜细胞增殖与凋亡的影响。方法选择2012年1月至7月于河北医科大学附属邢台市人民医院妇科就诊的50例EMS患者的在位子宫内膜为研究对象,并纳入研究组（均经腹腔镜或开腹手术确诊）。选择同期在本院因宫颈病变、子宫纵隔、卵巢畸胎瘤、单纯卵巢囊肿行手术治疗的88例患者的子宫内膜为对照组（均排除EMS）。两组患者的年龄等一般临床资料比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。建立细胞模型,以不同浓度（1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L、1 000μmol/L）二甲双胍干预24h、48h、72h,通过3-（4,5二甲基噻唑-2）-2,5二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测不同浓度二甲双胍对EMS在位内膜细胞增殖的影响,并应用流式细胞术（FCM）检测细胞周期改变及细胞凋亡情况,应用酶联免疫吸附（ELISA）法测定检测其对Bcl-2、Bax表达水平的影响。本研究遵循的程序符合河北医科大学附属邢台市人民医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并与受试对象签署临床研究知情同意书。结果不同浓度二甲双胍对对照组患者的正常在位内膜细胞增殖无明显抑制作用。二甲双胍干预48h、72h后,EMS患者的在位内膜细胞增殖明显受到抑制（P〈0.05）,以二甲双胍浓度为1 000μmol/L时最为明显（P〈0.01）,并呈时间-剂量依赖性。二甲双胍干预后EMS患者在位内膜细胞G1期比例明显高于对照组（P〈0.05）。二甲双胍浓度为10μmol/L、100μmol/L、1 000μmol/L时,EMS在位内膜细胞的Bcl-2表达水平较对照组降低,Bax表达水平较对照组升高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论二甲双胍可显著抑制EMS在位内膜细胞增殖,促进其凋亡,阻滞细胞周期进程。     

组蛋白去乙酰化酶2基因在苯并（a）芘致神经细胞凋亡中的量效和时效表达

[目的]通过体外培养细胞途径研究组蛋白去乙酰化酶2（HDAC2）基因在苯并（a）芘[B（a）P]所致神经细胞凋亡中的量效和时效表达。[方法]大鼠原代培养的神经元细胞分为两批：第一批分4个组,以B（a）P同时加入s9对细胞染毒,分别为二甲基亚砜（DMSO）组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,使其终浓度为0、10、20、40gmol／L,继续培养48h;第二批分5个组,以20gmol／LB（a）P染毒,分别于染毒0、6、12、24、48h处理细胞。用流式细胞术检测神经细胞的凋亡率,实时荧光定量PCR法检测caspase-3,HDAC2基因的量效和时效表达情况。[结果]①流式细胞术结果显示,与DMSO组相比,中、高剂量组神经细胞的凋亡率明显增加（P〈O．05）;与低剂量组相比,高剂量组凋亡率增加（P〈0．05）。与0h组相比,染毒24、48h组神经细胞的凋亡率明显增加（P〈0．05）。②与DMSO组相比,高剂量组caspase-3、HDAC2mRNA的表达量明显增加（P〈0．01）;与低剂量组相比,高剂量组caspase-3mRNA表达量明显增加（P〈0．05）。与0h组相比,染毒48h组caspase-3、HDAC2mRNA表达量明显升高（P〈0．01,P〈0．05）。[结论]B（a）P可引起神经细胞凋亡,HDAC2基因表达上升,该基因可能在B（a）P所导致的神经细胞凋亡中起重要作用。     

铝对PC12细胞淀粉样前体蛋白β位点裂解酶-1蛋白及基因表达的影响

[目的]探讨铝对PC12细胞淀粉样前体蛋白（APP）β位点裂解酶-1（beta-site amyloid precursor proteincleaving enzyme-1,BACE1）蛋白及基因表达的影响。[方法]采用PC12细胞进行培养及麦芽酚铝[Al（mal）3]染毒,将细胞分为6组,分别为：200μmol/L生理盐水组;0、50、100、200和400μmol/L Al（mal）3组。分别采用酶联免疫吸附测定法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）、荧光实时定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chainreaction,qRT-PCR）于染毒12、24和48 h后测定BACE1蛋白含量及基因表达。[结果]细胞计数试剂盒-8（CCK-8）细胞活力测定结果显示,不同浓度Al（mal）3染毒PC12细胞,可使其细胞活力呈现随染毒时间延长而逐渐下降的趋势。qRT-PCR结果显示,100μmol/L Al（mal）3组在染毒48 h后BACE1基因表达明显高于生理盐水组、0μmol/L Al（mal）3组,差异有统计学意义（P〈0.05）;200、400μmol/L Al（mal）3组染毒12、24、48 h后BACE1基因表达明显高于生理盐水组和0μmol/L Al（mal）3组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。ELISA测定结果显示,染毒12 h后400μmol/L Al（mal）3组BACE1表达量明显高于生理盐水组和0μmol/L Al（mal）3组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;染毒24 h后200、400μmol/L Al（mal）3组BACE1表达量明显高于生理盐水组和0μmol/L Al（mal）3组,差异有统计学意义（P〈0.05）;染毒48h后400μmol/L Al（mal）3组的BACE1表达量明显高于生理盐水组和0μmol/L Al（mal）3组,差异有统计学意义（P〈0.05）。[结论]Al（mal）3对PC12细胞具有明显毒性作用,该作用可能与麦芽酚铝致PC12细胞BACE1蛋白和基因表达增强有关。     

不同剂量的丙种球蛋白对新生儿ABO溶血病的治疗效果

目的探究不同剂量的丙种球蛋白对新生儿ABO溶血病的治疗效果。方法回顾性分析承德市兴隆县人民医院2012年1月—2013年7月收治的新生儿ABO溶血病患儿159例,随机平均分为3组,每组各53例。其中研究1组采用1g／kg大剂量丙种球蛋白进行治疗,研究2组采用0．5g／kg小剂量丙种球蛋白进行治疗,3组均进行常规治疗,包括蓝光照射、人工按摩等。测量患儿治疗1和3d后总胆红素含量,并记录黄疸消退的时间。同时采血观察3组患者红细胞计数和血红蛋白含量。结果入院治疗前,3组总胆红素含量差异无统计学意义（F=0．09,P=0．914〉0．05）。治疗1d后,对照组含量上升,研究1、2组大幅度下降,1组较于2组下降更加明显;治疗3d,研究1组总胆红素含量下降至（182±14）μmol／L,研究2组总胆红素含量下降至（213±16）μmol／L,对照组开始下降至（254±11）μmol／L,差异有统计学意义（F=68．29,P=0．000〈0．05）。3组患儿治疗1个月后,研究1组红细胞数量为（3．95±0．64）×10^12／L,研究2组红细胞数量为（3．74±0．42）×10^12／L,对照组红细胞数量为（3．49±0．52）×10^12／L,3组差异具有统计学意义（F=13．41,P=0．001〈0．05）。研究1组血红蛋白含量（122．82±7．90）g／L,研究2组血红蛋白含量（110．43±10．01）g／L,对照组血红蛋白含量（101．82±7．93）g／L,差异有统计学意义（F=143．32,P=0．000〈0．05）。结论丙种球蛋白对新生儿ABO溶血病的治疗效果显著,尤其以大剂量丙种球蛋白效果更佳,值得在临床上进行推广应用。     

双歧杆菌黏附素对应激大鼠肠黏膜核因子-κB和细胞因子的影响

目的 研究双歧杆菌黏附素对大鼠肠黏膜核因子-κB （NF-κB）和细胞因子的影响.方法 将48只实验大鼠按随机数字表法分成应激组、黏附素组,每组24只,以束缚为应激条件建立应激模型,造模后持续实验8d.两组大鼠肠内营养供给量为热量125.4 kJ/（kg·d）,氮量0.2 g/（kg·d）.黏附素组大鼠喂养肠内营养加双歧杆菌黏附素5 mg/（kg·d）,应激组大鼠喂养肠内营养加等量的生理盐水5 mg/（kg·d）.测定造模前、造模后、实验第3天和第8天两组大鼠肠黏膜NF-κB定性表达结果以及肠黏膜和血浆NF-κB、白细胞介素-10 （IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）定量表达结果.透射电镜下观察小肠黏膜形态学变化.结果 （1） NF-κB的表达：造模前、造模后、实验第3天、实验第8天应激组肠黏膜NF-κB的阳性表达率分别为O、79.2％ （19/24）、63.5％（15/24）、66.7％ （16/24）,黏附素组分别为O、68.4％ （17/24）、55.7％ （14/24）、45.8％ （11/24）;与造模前比较,造模后两组肠黏膜NF-κB表达明显上调（均P=0.000）,实验第3天和实验第8天,两组肠黏膜细胞核NF-κB表达阳性率仍明显高于造模前（均P=0.000）,与造模后和应激组比较,实验第8天黏附素组肠黏膜NF-κB表达明显下调（P值分别为0.015、0.021）.（2） TNF-α、IFN-γ与IL-10的定量表达：与造模前比较,造模后应激组与黏附素组大鼠肠黏膜TNF-α[应激组：（154.63±17.52）、（198.72±26.59） pg/g,黏附素组：（154.63±17.52）、（201.45±28.16） pg/g]、IFN-γ[应激组：（39.47±5.76）、（55.32±5.93） pg/g,黏附素组：（39.47±5.76）、（60.75±7.68）pg/g]浓度量和血浆TNF-α[应激组：（83.31±9.78）、（117.64±15.37） ng/L,黏附素组：（83.31±9.78）、（114.82±13.78） ng/L]、IFN-γ[（应激组：（17.35±2.62）、（28.73±4.17） ng/L,黏附素组：（17.35±2.62）、（30.56±4.85） ng/L]浓度明显升高（均P＜0.05）;实验第3天和第8天,应激组大鼠肠黏膜IFN-γ[（58.16±7.38）、（56.37 ±7.29） pg/g]、TNF-α[（215.76±31.54）、（211.83±33.61） pg/g]浓度和血浆IFN-γ[（29.35±4.76）、（30.25±3.67） ng/L]、TNF-α浓度[（125.71±17.38）、（141.26±19.65） ng/L]明显高于造模前（P均＜0.05）;实验第3天和第8天,黏附素组大鼠肠黏膜TNF-α[（165.43±24.58）、（171.57±26.87） pg/g]、IFN-γ[（42.35±4.92）、（40.58±4.65） pg/g]和血浆TNF-α[（103.96±13.68）、（94.53±12.66） ng/L]、IFN-γ[（20.78±2.84）、（19.65±2.45） ng/L]水平明显低于造模后（P均＜0.05）,而IL-10[肠黏膜：（62.82±8.34）、（75.16±9.65） pg/g,血浆：（43.32±5.28）、（55.64±6.87） ng/L]水平明显高于造模后（P均＜0.05）;与应激组比较,实验第3天和第8天,黏附素组大鼠肠黏膜TNF-α、IFN-γ和血浆IFN-γ、TNF-tα水平明显降低（P均＜0.05）,而IL-10水平明显升高（P均＜0.05）.（3）组织形态学观察：实验第8天,在电镜下可见黏附素组较造模后和应激组回肠绒毛、隐窝结构显著恢复.应激组较造模后肠黏膜绒毛、隐窝结构有一定程度的损害,固有膜水肿,膜内有炎性细胞浸润.结论 双歧杆菌黏附素通过调节肠黏膜炎性递质和细胞因子释放,对应激后肠黏膜损伤修复有一定作用.     

普罗布考、厄贝沙坦对人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的保护作用及PAI-1含量的影响

目的探讨抗氧化剂普罗布考、AT1受体拮抗剂厄贝沙坦对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤及PAI-1含量的影响。方法采用H2O(2100μmol/L)制作氧化应激损伤的细胞模型,给予不同浓度普罗布考、厄贝沙坦预孵育细胞:(1)空白对照组;(2)H2O2组;(3)Pro1组:H2O2+普罗布考(2.5μmol/L);(4)Pro2组:H2O2+普罗布考(5μmol/L);(5)Pro3组:H2O2+普罗布考(10μmol/L);(6)Irb1组:H2O2+厄贝沙坦(2.5μmol/L);(7)Irb2组:H2O2+厄贝沙坦(5μmol/L);(8)Irb3组:H2O2+厄贝沙坦(10μmol/L);(9)Pro3+Irb3组:H2O2+普罗布考(10μmol/L)+厄贝沙坦(10μmol/L)。用MTT法检测普罗布考及厄贝沙坦对HUVEC氧化损伤的影响;用ELISA方法测定培养液中PAI-1含量。结果 MTT:空白对照组、Pro2组、Pro3组、Irb3组、Pro3+Irb3组吸光度值高于H2O2组(空白对照组、Pro2组、Pro3组、Pro3+Irb3组P0.01,Irb3组P0.05);空白对照组、Irb1组、Irb2组和Irb3组培养液中PAI-1均高于H2O2组(空白对照组、Irb2组、Irb3组P0.01;Irb1组P0.05);与Pro+Irb组比较,H2O2组、Pro3组细胞培养液中PAI-1水平均较高(P0.01)。结论普罗布考和厄贝沙坦可通过不同机制减轻氧化应激对HUVEC的影响,从而对血管内皮细胞产生保护作用;二者在改善氧化应激引起的PAI-1水平升高方面存在一定的协同作用。     

TERE1基因在小鼠胚胎双前肢正常发育和异常发生中的表达

[目的]观察移行上皮反应基因（TERE1）在小鼠胚胎双前肢正常发育和异常发生中的表达,探讨TERE1在短肢发生中的作用。[方法]ICR小鼠受孕后,将其随机分为实验、对照两组,各64只。于孕第10天（GD10）,经口灌胃一次给予实验组孕鼠80 mg/kg的全反式视黄酸（atRA）、对照组孕鼠给予等体积的大豆油,并分别于GD11～GD18取两组胎鼠的双前肢。于GD12取下小鼠胚胎双前肢,以atRA诱导,培养72 h后收获肢。利用实时荧光定量聚合酶链反应方法检测TERE1在各样本中的表达情况。[结果]在整体动物试验中,atRA可诱致小鼠胚胎明显的短肢畸形;在体外试验中,atRA可诱致小鼠胚胎前肢多种骨骼发育异常。TERE1在正常、异常肢及培养肢芽中均有表达。在正常和异常肢中,TERE1的表达模式一致;除GD15外,实验肢中TERE1的表达均低于相同时点正常肢的表达水平。在体外培养肢,各组的表达量随培养时间的延长而增加。实验组在培养24 h,atRA各剂量组的表达量均低于对照组（P〈0.05）;培养48 h和72 h,在2.5×10-6 mol/L～1.0×10-5 mol/L剂量范围有随剂量增加表达量增加的趋势,但在高剂量组（2.0×10-5 mol/L）表达又下降。[结论]TERE1与小鼠胚胎前肢的发育过程有关,atRA在诱致小鼠前肢异常发生中可引起TERE1 mRNA的表达改变。