HPLC-PDA联合Box-Behnken响应面法优选五苓散低极性部位提取工艺

目的 应用HPLC-PDA联合响应曲面法,筛选五苓散低极性部位乙醇提取最佳工艺。方法 采用多波长切换定量测定,以23-乙酰泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇C、麦角甾醇、茯苓酸、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III、肉桂酸、桂皮醛9种有效成分为评价指标,采用Box-Behnken响应曲面法考察提取乙醇体积分数、料液比、提取时间对提取工艺的影响,确定最佳工艺。结果 色谱柱为Agilent Proshell 120 EC-C₁₈柱（100 mm×4.6 mm,2.7 μm）,体积流量为0.8 mL/min,柱温为40℃。流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱：0~10 min,37%~60%乙腈;10~20 min,60%乙腈;20~23 min,60%~95%乙腈;23~36 min,95%乙腈;36~37 min,95%~37%乙腈;37~42 min,37%乙腈。检测波长为280、247、220、208 nm多波长切换。最佳提取工艺为10倍量75%乙醇提取2次,每次1.5 h。结论 建立的HPLC-PDA法稳定可行,适合多种成分同时测定。响应曲面法所建模型准确,可以较好地预测9种成分含量综合评分;优选的提取工艺方法重现性良好,稳定可行,为五苓散临床应用、药效物质基础研究和新药开发提供技术参考。     

透明质酸联合糖皮质激素关节腔注射治疗膝关节骨关节炎的短期疗效

目的探讨膝关节骨关节炎患者关节腔注射透明质酸联合糖皮质激素的短期疗效。方法 2017年10月至2018年6月诊断为膝关节骨关节炎并行关节腔注射的患者188例,根据WOMAC膝关节功能评分分为轻度60例、中度72例、重度56例,根据膝关节X线Kellgren-Lawrence分级分为Ⅰ级48例、Ⅱ级49例、Ⅲ级45例、Ⅳ级46例。统一治疗方案为:首次以透明质酸钠(Sodium Hyaluronate,SHA)注射液2.5 ml关节腔注射,第2周SHA 2.5ml+复方倍他米松注射液(compound betamethason injection,CBI)1 ml关节腔注射,第3周SHA 2.5 ml关节腔注射。在首次注射前、SHA及SHA+CBI注射后采用WOMAC评分和Lequesne指数评估膝关节功能,Lequesne指数改善率≥30%为有效、WOMAC评分改善率≥25%为有效。结果轻度、中度和重度组在连续3周注射后Lequesne指数和WOMAC评分均逐渐降低。其中轻度组SHA注射后及SHA+CBI注射后Lequesne指数改善率分别为36.44%±8.46%和49.26%±13....     

四氯化碳对HL-7702肝细胞甘油三酯含量影响

目的 探讨四氯化碳（CCl₄)对人正常二倍体HL-7702肝细胞内甘油三酯含量（TG)和极低密度脂蛋白（VLDL)分泌影响。方法 实验设阴性对照组、CCl₄组（10 mmol/L)和阳性对照组（1 mmol/L油酸),染毒结束后检测TG含量,采用磷钨酸盐沉淀和蛋白印迹法检测VLDL含量,用蛋白印记法检测甘油三酯转移蛋白（MTP),二脂酰甘油酰基转移酶2（DGAT2)和肉碱酰基转移酶（CPT1A)蛋白表达水平,用酶联免疫法检测ApoB100含量。结果 染毒24 h后,CCl₄组细胞内TG含量[（3.235 3±1.116 8)mmol/g prot]明显高于阴性对照组[（1.221 8±0.527 2）mmol/g prot]（P<0.05);VLDL分泌水平无明显改变;细胞内MTP、DGAT2蛋白表达量明显增加;染毒24、48 h后,CCl₄处理组肝细胞培养上清中ApoB100蛋白含量分别为231.79、263.33 ng/mL,较阴性对照组（135.12、143.59 ng/mL)明显增加（P<0.05)。结论 四氯化碳可能通过促进DGAT2 蛋白表达而引起肝细胞内TG含量增加,或通过MTP 途径促进ApoB100分泌,但对VLDL分泌无影响。     

大黄总蒽醌对免疫性肝纤维化大鼠的保护作用及机制探讨

目的探索大黄总蒽醌对免疫性肝纤维化大鼠的作用及对基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的调控。方法 SD大鼠按体重随机分为正常组、模型组、秋水仙碱阳性组、大黄总蒽醌低、中、高剂量组,除正常组外,其余大鼠均腹腔注射猪血清建立免疫性肝纤维化模型。从第7周开始灌胃给药,每天1次,连续60d,末次给药后,分析血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性和层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(PCⅢ)的含量,观察肝组织病理学改变,Western blot分析MMP-13和TIMP-1的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠ALT、AST、LN、HA和Ⅳ-C水平显著升高,肝组织中MMP-13水平降低,TIMP表达增加(P0.05);与模型组相比,大黄总蒽醌中、高剂量组大鼠ALT、AST、LN、HA和Ⅳ-C的水平均不同程度地降低,肝中MMP-13的表达增加,TIMP的表达减少(P0.05);病理显示,各给药组均能减轻猪血清造成的肝损伤。结论大黄总蒽醌可有效改善肝纤维化,其机制可能与MMP-13、TIMP-1的表达调控有关。     

甲醛和三氯乙烯联合染毒对小鼠行为功能的影响

目的研究甲醛和三氯乙烯联合染毒对小鼠神经行为的影响,为评价室内装修材料中甲醛和三氯乙烯对人体健康的危害提供科学依据。方法通过Morris水迷宫实验筛选健康清洁级昆明小鼠108只(雌雄各半),按照3×3析因的要求进行随机分组,采用静式吸入染毒,将小鼠暴露于不同浓度的甲醛、三氯乙烯及其二者的混合气体中,每天2 h,连续14 d。染毒结束后,采用Morris水迷宫实验和旷场实验对小鼠进行神经行为学测试。结果 Morris水迷宫实验结果显示,在定位导航实验中,单独及联合染毒组小鼠逃避潜伏期随着训练次数的增多均呈缩短趋势、且随着染毒剂量的增加小鼠逃避潜伏期延长,训练天数、甲醛和三氯乙烯对小鼠逃避潜伏期的影响差异均有统计学意义(P<0.01),同时甲醛和三氯乙烯对小鼠逃避潜伏期的影响存在交互作用(P<0.05)。在空间探索实验中,甲醛和三氯乙烯单独及联合染毒均可致小鼠第一次跨越原平台位置的时间延长。二者联合染毒对小鼠第一次跨越原平台位置的时间和原平台象限游泳距离占总距离百分比的影响存在交互作用(P<0.05),且表现为协同。旷场实验结果显示,甲醛和三氯乙烯染毒致小鼠在中央区活动时间延长,站立次数下降,中央区活动距离占总距离百分比增大,二者对小鼠在旷场实验中的中央区活动时间、直立次数以及中央区活动距离占总距离百分比的影响均有交互作用(P<0.01),且表现为协同。结论甲醛和三氯乙烯能降低小鼠的学习记忆能力,影响神经行为表现,二者联合染毒具有一定的协同作用。     

甲醛和苯联合染毒对雄性小鼠睾丸的毒性作用

目的 研究甲醛和苯联合染毒对雄性小鼠睾丸组织的毒性作用,为综合评价甲醛和苯的安全性提供科学依据.方法 选用78只健康清洁级昆明种纯系雄性小鼠为研究对象,按染毒剂量分为低(0.2 mg/kg)、中(2 mg/kg)、高(20 mg/kg)剂量甲醛组,以生理盐水为阴性对照组;低(100.0mg/kg)、中(200.0mg/kg)、高(400.0mg/kg)剂量苯组,以花生油为阴性对照组;低(0.1 mg/kg甲醛 50.0 mg/kg苯)、中(1 mg/kg甲醛 100.0 mg/kg苯)、高(10 mg/kg甲醛 200.0 mg/kg苯)剂量联合染毒组,以生理盐水 花生油为阴性对照组;以环磷酰胺(40 mg/kg)为阳性对照组.采用腹腔注射染毒,注射容量为0.01 ml/g,每日1次,连续5 d.染毒结束次日,处死小鼠,测定睾丸组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)、Cu、Zn含量.结果 甲醛、苯单独染毒组及联合染毒组的SOD活力、Cu、Zn含量均低于其阴性对照组,且随染毒剂量的升高而下降;MDA含量均高于其阴性对照组,且随染毒剂量的升高而上升.联合染毒组染毒剂量与SOD活力呈负相关(r=-0.967,P＜0.01),与MDA含量呈正相关(r=0.941,P＜0.01).与甲醛、苯单独染毒比较,联合染毒组SOD活力、Cu、Zn含量呈下降趋势,MDA含量呈升高趋势.结论 甲醛和苯联合染毒对小鼠睾丸组织的毒性作用大于甲醛、苯单独染毒时的作用;二者对小鼠睾丸组织的联合毒性作用可能具有协同作用.     

汾河一库水体富营养化调查

目的 了解汾河一库水体的营养化现状,为实现水资源的可持续利用提供理论依据.方法 分别于2005年枯水期(5月)和平水期(10月)采集汾河一库的入口、中心、出口处水样,检测透明度、总氮、总磷、叶绿素-a、藻细胞密度等指标,并通过计算水质综合营养状态指数[TLI(∑)]对其富营养化程度进行综合评价.结果 透明度由高到低为中心＞出口＞入口,且总体上,枯水期＞平水期.TN在枯水期各采样点水中的含量均超标,而在平水期各采样点水中的含量均未超标.TP在枯水期和平水期各采样点水中的含量都未超标.枯水期和平水期各采样点水中叶绿素-a含量均较低.枯水期各采样点水中的藻细胞数目均高于平水期;在检测到的藻细胞中,以绿藻门和硅藻门较为多见,蓝藻门少见.枯水期和平水期汾河一库水质的TLI(∑)分别为43.70和43.29.结论 汾河一库水质处于中等营养化状态.     

居室装修后室内空气污染及变化趋势

[目的]调查居室装修后的室内空气污染状况,分析甲醛及挥发性有机污染物浓度随时间推移的变化趋势。[方法]随机选择95户装修竣工时间分别为〈3个月、3个月～、6个月～、9个月～、12～24个月的居室作为装修组,20户装修时间超过5年的居室作为对照组,测定室内空气中甲醛、苯、甲苯、（对、间、邻）二甲苯和乙苯浓度。[结果]装修组室内甲醛、苯、甲苯、二甲苯、乙苯的平均含量分别为0.139、0.163、0.294、0.325、0.152mg/m^3,均明显高于对照组（P〈0.05）;各污染物的超标率在37.9%～80.0%,其中超标率最高的是甲醛。装修后3个月内甲醛、苯、甲苯、二甲苯和乙苯浓度较高,分别为0.297、0.391、0.535、0.594、0.454mg/m^3。3个月以后,室内污染物浓度逐渐降低,约于1年后下降到国家标准。[结论]居室装修可造成较严重的室内空气污染,随着竣工时间的延长,室内污染物浓度逐渐下降。     

案例教学法在卫生学教学中的实践与体会

卫生学是非预防医学专业学生学习预防医学的重要课程,也是一门实践性很强的应用学科.在卫生学教学中引入案例教学法,强调对学生能力的培养,取得了较好的效果.就案例教学法在卫生学教学中实施的必要性、可行性、实施过程、存在问题及解决方法等进行初步探讨.     

痛泻要方加减引经药防风对肠易激综合征大鼠水液代谢和5-HT系统的调控作用

目的:探讨引经药防风对痛泻要方调控腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠水液代谢和5-羟色胺(5-HT)信号系统的影响。方法:将40只IBS-D SD大鼠随机分为模型组,痛泻要方缺防风组(26 g·kg^-1),痛泻要方全方组(30 g·kg^-1)和痛泻要方倍用防风组(34 g·kg^-1),另取10只正常SD大鼠作为正常组,除正常组外,其余各组采用母子分离联合乙酸灌肠法,建立腹泻型肠易激综合征大鼠模型,造模后各组灌胃给予相应药物,连续14 d,观察并计算腹泻指数和粪便含水量,微量法检测肠黏膜Na^+-K^+-ATP酶活性,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测5-HT的含量,化学发光法检测单胺氧化酶-A(MAO-A)活性,通过免疫组化法检测结肠中水通道蛋白4(AQP4)的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测下丘脑和结肠中5-HT受体3(5-HT3R),5-HT受体4(5-HT4R)和5-HT转运体(SERT)的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠的粪便含水量,5-HT含量,MAO-A酶活性,5-HT3R表达均显著升高(P<0.01),肠黏膜Na^+-K^+-ATP酶活性,AQP4,5-HT4R和SERT表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠的腹泻指数和粪便含水量、下丘脑与结肠中的5-HT含量,MAO-A酶活性,5-HT3R蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),但痛泻要方缺防风组5-HT3R蛋白表达未见明显差异,各给药组肠黏膜Na^+-K^+-ATP酶活性,AQP4,5-HT4R和SERT表达均明显增加(P<0.05,P<0.01);与痛泻要方缺防风组比较,痛泻要方全方组和痛泻要方倍用防风组大鼠腹泻指数和粪便含水量,5-HT含量及MAO-A酶活性,5-HT3R的蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),Na^+-K^+-ATP酶活性和SERT的蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论:防风可增强痛泻要方改善IBS-D水液代谢、调控5-HT信号系统多靶点的效应,进一步证实了防风的引经增效作用。