甘草素对B16F10黑色素瘤细胞侵袭转移的抑制作用及其机制探讨

目的研究甘草素(liquirigenin,LQ)对黑色素瘤B16F10侵袭转移的抑制作用及分子机制。方法采用四甲基氮唑兰MTT比色法检测甘草素对B16F10细胞存活力的影响;划痕实验检测甘草素对细胞迁移的影响;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;蛋白质印迹法分析甘草素对侵袭转移相关蛋白和信号通路的影响。结果在无毒剂量下,甘草素能明显抑制B16F10细胞的侵袭转移能力,并且随着浓度增加,其细胞的迁移和侵袭逐渐减弱;甘草素能通过抑制PI3K/AKT信号通路,下调基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9蛋白表达。结论甘草素可能通过阻碍PI3K/PTEN/AKT信号通路传导,下调MMP-2和MMP-9的表达,从而抑制黑色素瘤B16F10细胞的侵袭转移。     

lncRNA PlncRNA-1对胃癌SGC-7901细胞生物学行为及PI3K/AKT信号通路的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)PlncRNA-1对胃癌SGC-7901细胞增殖、周期、凋亡和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测PlncRNA-1在SGC-7901细胞和正常胃黏膜上皮GES-1细胞中的表达水平,将体外培养的SGC-7901细胞分为未转染组(正常培养)、阴性组(转染阴性对照siRNA)和干扰组(转染PlncRNA-1-siRNA),qPCR检测SGC-7901细胞中PlncRNA-1表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测SGC-7901细胞增殖活力,流式细胞仪检测SGC-7901细胞周期和凋亡情况,免疫印迹法检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、AKT、磷酸化(p)-AKT、细胞周期素D1(CyclinD1)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达情况。结果与GES-1细胞比较,SGC-7901细胞中PlncRNA-1表达水平明显升高,差异有统计学意义(P 0.05);与未转染组比较,干扰组细胞中PlncRNA-1表达水平、细胞增殖活力和细胞在S期、G2/M期所占百分比以及PI3K、p-AKT、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达水平均明显降低,而细胞凋亡率和细胞在G0/G1期所占百分比明显升高,差异有统计学意义(P 0.05);但阴性组和未转染组之间各指标差异均无统计学意义(P0.05)。结论 PlncRNA-1在胃癌SGC-7901细胞中表达升高,干扰其表达可抑制SGC-7901细胞增殖并诱导细胞周期阻滞和凋亡,其作用机制与抑制PI3K/AKT信号通路的活化有关。     

PI3K/AKT/mTOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞中的相互作用机制

目的探讨磷脂酰肌醇3–激酶/蛋白激酶B/哺乳动物靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)两条信号通路对胃癌细胞功能的影响及相互作用机制。方法使用PI3K抑制剂LY294002、mTOR抑制剂AZD8055、MEK抑制剂AZD6244单独或联合作用于胃癌MGC-803细胞。应用CCK8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;蛋白印迹法(Western blot)检测通路关键蛋白的表达。结果联合使用LY294002(25μmol/L)与AZD6244(125μmol/L)、AZD8055(0.1μmol/L)与AZD6244(125μmol/L)能够显著抑制胃癌MGC-803细胞的增殖活性,且联用组比单独作用组具有更强的抑制效果(P 0.05);联用组诱导细胞凋亡数量和阻滞于G0/G1期的MGC-803细胞数量增多,高于单独作用组(P 0.05)。与LY294002、AZD8055和AZD6244单独作用相比,LY294002与AZD6244、AZD8055与AZD6244联用组MGC803细胞p-AKT、p-P70S6K和p-ERK1/2蛋白表达明显受到抑制(P 0.05)。结论 PI3K/AKT/mTOR和MAPK/ERK两条信号通路在胃癌MGC-803细胞的生长中具有协同调控作用,对于两条信号通路的多靶点抑制能够更加明显的抑制癌细胞生长。     

异甘草素对宫颈癌细胞生物学特性及mTOR/P70S6K信号通路的影响

目的探讨异甘草素对宫颈癌细胞生物学特性及mTOR/P70S6K信号通路的影响。方法选择Si Ha人宫颈癌细胞,将浓度为25、50、100μg/ml的异甘草素培养液加入Si Ha细胞中,其中一组Si Ha细胞不加入异甘草素培养液作为Si组(Si Ha细胞),Ds组(25μg/ml)、Zs组(50μg/ml)、Gs组(100μg/ml),RT-PCR、Westernblot法分别检测mTOR、P70S6K水平、蛋白变化,Transwell法、MTT法对Si Ha细胞的迁移、增值变化,流式细胞仪测定Si Ha细胞凋亡率。结果 Si组mTOR、P70S6K水平高于其他3组,其余3组Ds组mTOR、P70S6K最高,Zs组其次、Gs组最低,4组比对差距显著(P0.05)。Si组为正常Si Ha细胞mTOR、P70S6K蛋白最高,其余3组mTOR、P70S6K蛋白表达从低至高依次为Gs组、Zs组、Ds组,4组比对差距显著(P0.05)。Ds组Si Ha细胞凋亡率最高,其次为Ds组、Zs组,Si组Hep-G2细胞凋亡率最低,4组调亡率比对差距显著(P0.05)。Si组Si Ha细胞迁移能力最高,其余3组Siha细胞迁移能力,Gs组迁移能力最低,Zs组迁移能力高于Ds组,Gs组较Zs组低,4组细胞迁移能力比对差距显著(P0.05)。Gs组Si Ha细胞增殖能力最低,Nc组细胞增值能力最高,Zs组低于Ds组高于Gs组,4组增值能力比对差距显著(P0.05)。结论异甘草素在si Ha细胞的凋亡中发挥重要作用,其作用机制可能降低mTOR/P70S6K水平的表达从而抑制细胞增值和迁移。     

异丙酚对食管癌细胞侵袭能力的影响及机制探讨

目的探讨异丙酚对食管癌细胞侵袭能力的影响及其机制。方法分别以30、60和120μg/ml异丙酚处理Eca109细胞,采用平板克隆实验、Transwell实验和划痕实验检测细胞的克隆形成能力、侵袭和迁移能力,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶2/9(MMP-2/9)、磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白的表达情况。结果 30μg/ml异丙酚对Eca109细胞的克隆形成能力无显著影响,但60和120μg/ml异丙酚能够显著抑制Eca109细胞克隆形成能力;异丙酚能够呈浓度依赖性抑制Eca109细胞的侵袭和迁移,且抑制MMP-2、MMP-9、PI3K和p-AKT蛋白的表达。结论异丙酚能够抑制食管癌Eca109细胞的侵袭和迁移,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。     

小檗碱对卵巢癌SKOV3细胞S1P/S1PR1通路调控作用及对血管生成的影响

目的 探讨小檗碱(BBR)对卵巢癌SKOV3细胞血管生成的影响及对鞘氨醇-1-磷酸/鞘氨醇-1-磷酸受体1(S1P/S1PR1)通路调控作用,为临床研究提供理论参考。方法 将卵巢癌SKOV3细胞分为空白对照(Control)组、BBR不同浓度(5、10、25、50、100 mmol/ml)处理干预SKOV3细胞组,用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖抑制率;划痕实验及Transwell小室法分别观察各组细胞的迁移及侵袭能力;管腔实验检测各组细胞血管生成情况;Western blot检测各组细胞通路蛋白S1P和S1PR1、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-8(IL-8)、金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶-2(MMP-2)相对表达水平。结果 与Control组相比,5、10、25、50、100 mmol/ml BBR组人卵巢癌细胞株SKOV3癌细胞增殖抑制率明显增高(P<0.05),侵袭和迁移能力、S1P、S1PR1、MMP-9、MMP-2、VEGF和IL-8蛋白相对表达水平均明显降低(P<0.05),且BBR不同浓度组呈剂量依赖性。结论 BBR可下调S1P/S1PR1通路相关蛋白表达,抑制人卵巢癌SKOV3细胞侵袭、迁移及血管生成。     

多囊卵巢综合征胰岛素抵抗与信号通路缺陷

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)通路是胰岛素作用的两条主要信号途径,主要完成胰岛素调节代谢、调控细胞生存与凋亡的重要生理学功能。多囊卵巢综合征患者体内两通路状态呈现出其特异性,即胰岛素信号通路缺陷并可表现为明显的胰岛素抵抗。多囊卵巢综合征患者胰岛素抵抗学说众多,主要包括胰岛素抵抗的通路选择性、组织特异性、内在性和(或)获得性、循环胰岛素抵抗和局部胰岛素敏感等不同学说,多囊卵巢综合征患者不同组织器官PI3K/AKT和MAPK/ERK通路状态各异。     

MAPK在三羟异黄酮抑制静脉内皮细胞中作用

目的探讨丝裂素活化蛋白激酶(mitogen activator protein kinase，MAPK)在三羟异黄酮(genistein)抗肿瘤血管生成中的作用。方法以脐静脉内皮细胞(ECV304)为研究对象，通过四甲基偶氮唑盐(MTT)实验检测三羟异黄酮和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)对ECV304细胞增殖的影响。应用免疫细胞化学和激酶活性分析方法检测ECV304细胞MAPK磷酸化水平和激酶活性。结果血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)单独处理能使ECV304细胞增殖，MAPK磷酸化水平和活性升高，而三羟异黄酮单独处理能抑制ECV304细胞增殖，MAPK磷酸化水平和活性降低，三羟异黄酮和VEGF同时处理时，细胞增殖受抑，MAPK磷酸化和MAPK激酶活性比VEGF单独处理组低，而比三羟异黄酮单独处理组高。结论MAPK在三羟异黄酮抑制ECV304细胞增殖中发挥着重要作用，可能是三羟异黄酮抑制肿瘤血管生成的机制之一。     

Rapamycin抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路对胃癌MGC-803细胞影响

目的探讨rapamycin作用于胃癌细胞株MGC-803后对细胞生长影响及其作用机制。方法体外培养胃癌细胞株MGC-803,使用不同浓度rapamycin干预MGC-803细胞。采用MTT法检测细胞增殖变化;实时荧光定量PCR(QPCR)检测关键基因的表达;蛋白印迹法(WB)检测相关蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期及凋亡的变化。结果与对照组相比,rapamycin对胃癌MGC-803细胞的增殖活性有明显的抑制作用,呈现出剂量依赖性(P0.05)。Rapamycin显著抑制PI3K、AKT、m TOR、4EBP、P70S6K基因的m RNA表达,差异有统计学意义(P0.05);Rapamycin能抑制p-m TOR、p-P70S6K蛋白的表达;Rapamycin将细胞周期阻滞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡(P0.05)。结论靶向m TOR抑制剂rapamycin可通过调控PI3K/AKT/m TOR信号通路进而调控胃癌细胞的生长。     

铁调素对NF-κB介导血管内皮细胞炎症反应的影响北大核心CSCD

目的探讨铁调素(hepcidin)对血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)炎症通路中核转录因子κB(Nuclear Factor-κB,NF-κB)家族的影响。方法使用不同浓度的人铁调素处理人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell;HUVEC)24h后,利用蛋白印迹技术(Western blot)检测细胞中核转录因子κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κB;IκBα)、细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的蛋白表达;免疫荧光法观察NF-κB p65转核、ICAM-1蛋白表达;体外粘附实验检测干预后的HUVEC的粘附能力。结果铁调素能剂量依赖的降低HUVEC中IκBα及促进ICAM-1表达,其中干预剂量大于300 ng/ml处理组时的相比对照组差异均具有统计学意义(P<0.05);激光共聚焦成像结果显示,600 ng/ml铁调素处理24h后,HUVEC中NF-κB p65转入核内,ICAM-1蛋白表达增加;粘附实验的结果显示,剂量量大于75 ng/ml铁调素处理能剂量依赖性的上调HUVEC的粘附能力,与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05)结论铁调素可诱导血管内皮细胞IκBα的下调,促使NF-κB p65转核,升高血管内皮细胞ICAM-1的表达水平。铁调素可通过调控NF-κB通路介导血管内皮细胞炎症反应。[营养学报,2014,36(1):31-34]     

Quercetin Regresses Dalton's Lymphoma Growth via Suppression of PI3K/AKT Signaling Leading to Upregulation of p53 and Decrease in Energy Metabolism

Various oncogenes are associated with deregulation in cell proliferation, apoptosis, and cell survival, which ultimately cause cancerous growth. Phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) mediated signaling plays a key role in malignant transformation. Cell proliferation and cell survival of tumor cell are induced by hyper activation of PI3K, AKT1, glycolytic enzyme LDH-A, and inactivation of tumor suppressor gene p53. Dietary flavonoids such as quercetin are considered a powerful modulator of different cellular signaling pathways. The present study is focused on the role of quercetin on regulation of PI3K/AKT pathways in Dalton's lymphoma mice. Effect of quercetin was analyzed in ascite cells in terms of cell viability, glycolytic metabolism as well as expression, and level of PI3K (regulatory and catalytic subunit), AKT1, and p53 using standard methods. Results reflect hyperactivation of PI3K signaling in ascite cells of Dalton's lymphoma mice, leading to activation of AKT1 and inactivation of p53. Quercetin modulates the pathway toward suppression of lymphoma. Glycolytic metabolism was also downregulated by quercetin. Its tumor suppressor activity was confirmed by morphological parameters and longevity of mice. The findings suggest that quercetin may contribute to lymphoma prevention by downregulating PI3K–AKT1–p53 pathway as well as by glycolytic metabolism.     

人参皂甙Rg3作用PI3K/AKT通路诱导人子宫内膜癌Hec-1-B细胞凋亡的研究

目的:探讨人参皂甙Rg3(ginsenoside Rg3,GS-Rg3)作用PI3K/AKT通路对Hec-1-B细胞的诱导凋亡作用。方法:采用MTT法观察GS-Rg3对Hec-1-B细胞生长的抑制作用;流式细胞术观察GS-Rg3作用Hec-1-B细胞后对Hec-1-B细胞凋亡的影响;Transwell小室分析细胞体外的侵袭力;Western blotting检测PI3K、AKT的表达。结果:GS-Rg3对Hec-1-B细胞的体外增殖有明显的抑制作用(P<0.05),并随着药物浓度和时间增加其抑制作用更加明显,在一定浓度范围内呈剂量、时间依赖性。GS-Rg3能够诱导Hec-1-B细胞凋亡,细胞端粒酶PI3K、AKT表达水平及活性显著降低。结论:GS-Rg3能够通过诱导人子宫内膜癌Hec-1-B细胞发生凋亡而发挥抑制细胞生长作用,抑制PI3K、AKT的活性是GS-Rg3体外诱导人子宫内膜癌Hec-1-B细胞发生凋亡的重要作用机制之一。     

垂体肿瘤转化基因1对结肠癌SW480细胞增殖的影响及其机制研究

目的 研究垂体肿瘤转化基因 1(Pituitary Tumor Tansforming Gene1,PTTG1)过表达对人结肠癌细胞SW480增殖和周期的影响及其可能机制。方法 采用脂质体转染法将pcDNA3.1(+)-PTTG1及空载pcDNA3.1(+)质粒转染人结肠癌SW480细胞,G418法筛选阳性克隆。Western blot法检测PTTG1和cyclin D、cyclin E、p21的表达。MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期。结果 （1）成功获得PTTG1高表达的SW480细胞pcDNA3.1(+)-PTTG1及对照pcDNA3.1(+)细胞,Western blot结果显示pcDNA3.1(+)-PTTG1细胞PTTG1表达量分别为pcDNA3.1(+)细胞和SW480细胞的3.58倍和3.42倍;（2）过表达PTTG1基因后,SW480细胞周期改变,G0/G1期细胞减少而S期和G2/M期细胞增加;细胞周期调控蛋白cyclin D和cyclin E表达升高,p21表达降低;SW480细胞增殖显著性加快。（3） 过表达PTTG1基因后,SW480细胞中PI3K/AKT信号活化增强,使用PI3K/AKT信号抑制剂LY29400干预后,细胞增殖减弱,周期蛋白cyclin D和cyclin E表达降低,p21表达升高。结论 PTTG1基因过表达可能通过活化PI3K/AKT信号加速SW480细胞从G1期向S期的转化促进细胞增殖,提示PTTG1蛋白可能成为结肠癌治疗的一个潜在靶点。     

姜黄素抑制人肝癌细胞BEL-7402中VEGF和HIF-1α表达通过PI3K／AKT／FRAP信号传导通路

目的探讨MAPK和PI3K信号传导通路在姜黄素调节VEGF和HIF-1α表达中的作用。方法分别加入LY29400225μmol／L、50μmol／L，U012610μmol／L、20μmol／L，rapamycin 5ng／ml、10ng／ml处理人肝癌细胞BEL-7402，30min后加入姜黄素10μmol／L，对照组单独加入0、10μmol／L姜黄素，缺氧环境中培养6h后，行RT—PCR和Western Blot检测VEGF蛋白、mRNA和HIF-1α蛋白表达；分别加入不同浓度的的姜黄素以及LY294002 25 μmol／L处理人肝癌细胞BEL-7402，缺氧环境中培养6h后，行Western Blot检测磷酸化AKT和总AKT蛋白表达。结果姜黄素10μmol／L＋LY29400225μmol／L组、姜黄素10μmol／L＋LY294002 50 μmol／L组、姜黄素10μmol／L＋rapamycin 5 ng／ml组、姜黄素10μmol／L＋rapamycin 10 ng／na组HIF-1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10μmol／L组相比降低，差异有统计学意义（P〈0．01）；而姜黄素10μmol／L＋U012610μmol／L组、姜黄素10μmol／L＋U0126 20 μmol／L组HIF—1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10μmol／L组相比差异无统计学意义（P〉0.05）；不同浓度的姜黄素、LY294002 25 μmol／L处理的人肝癌细胞BEL-7402缺氧6h后磷酸化AKT蛋白表达逐渐降低，LY294002 25 μmol／L可以基本阻断磷酸化AKT蛋白的表达，而对总AKT蛋白表达无明显变化。结论姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α蛋白和VEGF的表达通过P13K／AKT／FRAP信号传导通路。     

咖啡酸苯乙酯对人结肠癌PI3K/AKT信号通路的影响

目的探讨咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)对人结肠癌Lovo细胞内PI3K/AKT信号通路的影响。方法以体外培养人结肠癌细胞Lovo为实验对象,随机分为5组:CAPE浓度分别为0、2.5、5.0、7.5、10.0μg/ml。运用MTT法检测CAPE对人结肠癌Lovo细胞的生长增殖的影响,并通过Western blotting检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白磷酸化AKT、caspase-3和caspase-9表达的情况。计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 CAPE以浓度和时间依赖的方式抑制人结肠癌Lovo细胞的增殖,10μg/ml的CAPE作用72 h后对Lovo细胞的抑制率达(61.28±5.15)%,明显高于2.5μg/ml作用72 h后(29.63±0.69)%的抑制率(P<0.05),也明显高于10μg/ml作用24 h后(37.84±3.05)%的抑制率(P<0.05);Western blot-ting结果显示CAPE以剂量依赖性的方式使人结肠癌Lovo细胞内磷酸化AKT的表达下降,10μg/ml组的p-AKT的蛋白相对表达量为(0.52±0.11),caspase-3、caspase-9的表达上升,10μg/ml组的caspase-3、caspase-9蛋白相对表达量分别为(1.58±0.07)、(1.23±0.12)。结论 CAPE可能通过调节PI3K/AKT信号通路中磷酸化AKT、caspase-3和caspase-9的表达以剂量依赖性的方式抑制人结肠癌Lovo细胞的增殖。     

小凹蛋白-1改善2型糖尿病小鼠内皮祖细胞血管生成的机制研究

目的 探究小凹蛋白-1（caveolin-1,Cav-1）是否通过调节PI3K/AKT表达改善2型糖尿病小鼠内皮祖细胞（endothelial progenitor cells, EPCs）血管生成能力的机制研究。方法 分离培养20只8周龄雄性2型糖尿病小鼠骨髓EPCs,通过免疫荧光染色法鉴定EPCs,并将细胞分为过表达组、沉默表达组、过表达空白载体组、沉默表达空白载体组及对照组。构建Cav-1基因过表达和沉默表达慢病毒载体,分别转染至各组EPCs。qPCR及Western-blotting检测转染后Cav-1、PI3K及AKT蛋白表达情况,并比较各组EPCs血管生成能力。结果 Western blot结果显示,过表达组Cav-1表达水平较过表达空白载体组升高（P＜0.001）,而过表达组PI3K表达水平较过表达空白载体组降低（P＜0.001）。沉默表达组Cav-1、PI3K、Phospho-PI3K及AKT的表达水平较沉默表达空白载体组均降低（P＜0.05）。EPCs功能检测结果显示,过表达组EPCs形成管状结构数和主干长度均低于过表达空白载体组（均P＜0.05）;沉默表达组EPCs形成管状结构数和主干长度均低于沉默表达空白载体组（均P＜0.05）。结论 Cav-1过表达和沉默表达均对EPCs血管生成能力产生抑制作用,PI3K/AKT通路可能参与Cav-1对EPCs功能的调节。     

二甲双胍联合阿帕替尼对胃癌细胞的增殖抑制作用

目的 探讨二甲双胍联合阿帕替尼对胃癌BGC823细胞系的增殖抑制作用及其可能的机制。方法 MTT法检测不同浓度二甲双胍（0～30 mmol/L)、不同浓度阿帕替尼（0～60 μmol/L）及两药联合应用处理BGC823细胞24、48、72 h的增殖抑制率,结晶紫染色法检测细胞集落形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡,western blot检测细胞中血管内皮生长因子信号通路及凋亡相关蛋白VEGFR2、PI3K、p - AKT、AKT、Bax、Bcl - 2表达水平。结果 二甲双胍和阿帕替尼单独处理BGC823后,细胞增殖抑制率均增加（P＜0.05）,联合用药产生协同作用（CI＜1）,二甲双胍和阿帕替尼单独及联合应用均能抑制细胞集落形成并使总凋亡比例增加（P＜0.05）。与对照组和单药组相比,联合用药可明显下调细胞中VEGFR2、PI3K、p - AKT、AKT、Bcl - 2蛋白的表达水平,上调Bax蛋白表达水平（P＜0.05）。结论 二甲双胍联合阿帕替尼具有协同抑制胃癌BGC823细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其机制可能与抑制VEGF信号通路有关。     

Resveratrol protects intestinal epithelial cells against radiation-induced damage by promoting autophagy and inhibiting apoptosis through SIRT1 activation

Intrinsic autophagy is important for the maintenance of intestinal homeostasis and intestinal regeneration. Ionizing radiation suppresses intrinsic autophagy and reduces damage-induced regeneration in the intestine, resulting in intestinal injury. Resveratrol, a sirtuin 1 (SIRT1) agonist, promotes autophagy and exerts radioprotective effect. In this study, the protective effect of resveratrol against radiation-induced intestinal injury and its potential mechanism were investigated. Intestinal epithelial cells (IEC-6) were exposed to 10 Gy ionizing radiation and resveratrol (0.1–40.0 μM). Cell viability was investigated using Cell Counting Kit 8 (CCK8), apoptosis was observed by Annexin V-fluorescein isothiocyanate/propidium iodide (PI) staining and flow cytometry, and the expression of apoptotic and autophagic proteins was determined by western blotting. Resveratrol exerted a high toxicity against IEC-6 cells, but at low concentrations, it inhibited ionizing radiation-induced apoptosis. Resveratrol increased SIRT1 expression after irradiation and inhibited ionizing radiation-induced p53 acetylation and pro-apoptotic protein, Bax, expression. Furthermore, resveratrol promoted autophagy via the phosphoinositide 3-kinase (PI3K)/AKT/mammalian target of rapamycin (mTOR) pathway, thereby protecting IEC-6 cells against radiation-induced damage. These results suggest that resveratrol reduces radiation-induced IEC-6 cell damage by inhibiting apoptosis and promoting autophagy via the activation of SIRT1, and that the PI3K/AKT/mTOR signaling pathway is involved in the induction of autophagy.     

Inhibitory effect of liquiritigenin on migration via downregulation proMMP-2 and PI3K/Akt signaling pathway in human lung adenocarcinoma A549 cells

Liquiritigenin (LQ) is a flavanone extracted from Glycyrrhizae, which has multiple biological effects, such as antiinflammation and anticancer. This study is the first to investigate the effect of LQ on the migration of human lung adenocarcinoma A549 cells in vitro. First, LQ exhibited inhibitory effects on the adhesion and migration of A549 cells in the absence of cytotoxicity. Gelatin zymography and Western blot analysis showed that LQ significantly reduced the expression of promatrix metalloproteinase-2 (proMMP-2) in A549 cells in terms of both activity and protein level. Second, LQ inhibited the phosphorylation of Akt and activated the phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase 1 and 2 (ERK1/2). Furthermore, the treatment of inhibitors specific for Akt (LY294002) and ERK1/2 (U0126) to A549 cells resulted in reduced activity of proMMP-2. These results suggested that the inhibition on proMMP-2 expression by LQ may be through suppression on PI3K/Akt signaling pathway, which in turn led to the inhibition of lung adenocarcinoma A549 cells migration. However, activation of ERK might not be involved in the regulation of proMMP-2. Taken together, LQ may be considered as a potential interfering agent of cancer progression.