丙烯酰胺对NB-1细胞钙稳态的影响

目的研究丙烯酰胺(AM)对神经细胞钙稳态的影响,探讨AM致神经损伤的可能机制。方法将人神经母细胞瘤(NB-1)细胞诱导分化成熟后,以不同浓度AM进行体外染毒,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测神经元损伤程度,并应用ATP酶检测试剂盒测定不同损伤程度的细胞Ca2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力的变化。以Fluo-3/AM为荧光指示剂,用激光共聚焦方法检测细胞内游离钙离子浓度的瞬时变化情况。结果 AM染毒组成熟NB-1细胞存活率有明显下降,提示AM对神经细胞有毒性作用;AM染毒组Ca2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力值也均下降,差异具有统计学意义(P<0.05);AM作用于成熟NB-1细胞可立即引起细胞内钙离子浓度升高。结论 AM可能通过影响神经细胞钙稳态产生毒性作用。     

丙烯腈对小鼠红细胞膜ATP酶活性的影响

将40只小鼠分为4组,以不同剂量的丙烯腈（0、18.60、9.30、4.65 mg/kg）灌胃染毒35 d后,测定红细胞膜Na＋-K＋-ATP酶和Ca2＋-Mg2＋-ATP酶的活性。各染毒组两种酶的活性有不同程度的降低,与对照组相比,差异有统计学意义（P≤0.05）。Na＋-K＋-ATP酶和Ca2＋-Mg2＋-ATP酶活性随染毒剂量的增加而降低,呈负相关（r=-0.901,r=-0.921）。说明丙烯腈有抑制小鼠红细胞膜Na＋-K＋-ATP酶和Ca2＋-Mg2＋-ATP酶活性的作用。     

锰对神经元细胞内钙稳态影响的研究

目的研究锰对神经细胞内钙稳态的影响,重点观察神经元细胞钙离子浓度、Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性的改变。方法选用原代培养神经元为模型,待细胞生长至最佳状态时,予以分组处理:锰处理组为含不同浓度氯化锰(0,25,100,400μmol/L)的培养液,培养神经细胞12h后,通过倒置相差显微镜观察细胞形态的改变,并检测神经元细胞内钙离子浓度、Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性的变化。结果随着染Mn剂量的加大,神经元形态出现异常,细胞内钙离子浓度逐渐升高;细胞Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性也逐渐下降。结论锰通过影响与维持钙稳态相关的酶(Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase)活性,干扰神经元细胞内钙稳态,进而造成神经元细胞损伤。     

苯并[a]芘对大鼠海马组织氧化应激及ATP酶的影响

目的 通过研究苯并[a]芘(B[a]P)对大鼠行为学、海马氧化应激及ATP酶的影响,探讨B[a]P的神经行为毒性分子机制.方法 将120只21d龄雄性SD大鼠,随机分为空白对照组、植物油组(溶剂对照组),2.5、5.0、10.0 mg/kg B[a]P染毒组,每组24只.腹腔注射给药,每天1次,连续4周.染毒结束后,用Morris水迷宫和穿梭箱检测学习记忆能力;用化学比色法测定海马超氧化物歧化酶(SOD)、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活力及丙二醛(MDA)含量;用荧光标记方法测定海马Ca2+浓度.结果 各染毒组大鼠的水迷宫逃避潜伏期、穿梭箱主动回避反应潜伏期(AARL)和被动回避反应潜伏期(RARL)均明显高于空白对照组和溶剂对照组,水迷宫末次跨平台次数和穿梭箱主动回避反应次数(AARF)均明显低于空白对照组和溶剂对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);且呈剂量-效应关系.与空白对照组和溶剂对照组比较,染毒组大鼠海马组织SOD活力、Na+-K+-ATP酶和ca2+-Mg2+-ATP酶活力明显下降,且呈剂量-效应关系,差异均有统计学意义(P＜0.05).染毒组大鼠海马组织MDA含量、Ca2+浓度均明显高于空白对照组和溶剂对照组,且呈剂量-效应关系,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 B[a]P所致神经行为毒性,可能与染毒后大鼠海马组织氧化应激受损,Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力下降有关.     

右美沙芬对甲基汞致大鼠神经毒性的影响

将56只Wistar大鼠按体重随机分成4组,分别为对照组,低、高剂量甲基汞染毒组,右美沙芬(DM)预处理组。染毒28 d后处死大鼠,检测大鼠大脑皮质细胞形态学改变、Na+-K+-ATP酶活力、Ca2+-ATP酶活力、Ca2+含量、活性氧簇(ROS)含量及细胞凋亡情况。结果显示,随着甲基汞剂量的增加,病理形态损伤明显加剧;Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活力均明显降低;Ca2+和ROS含量及细胞凋亡率明显升高。与高剂量组比较,DM预处理组大鼠大脑皮质中上述指标均得到显著改善。提示右美沙芬对甲基汞致大鼠神经毒性有一定保护作用。     

混配杀虫剂对小鼠学习记忆功能及大脑组织ATP酶活力的影响

[目的]研究混配杀虫剂对小鼠学习记忆功能的影响,初步探讨染毒后大脑组织ATP酶活力对小鼠学习记忆功能发生改变的作用。[方法]将小鼠随机分为混配杀虫剂染毒A组(丙溴磷与氰戊菊脂混配染毒组)、混配杀虫剂染毒B组(丙澳磷与灭多威混配染毒组)和1个对照组,每组10只。A、B组分别给予高、中、低3种染毒剂量,染毒前及染毒24h后进行跳台试验;应用化学比色法测定各组小鼠大脑组织中Na -K ATP酶、Ca2 -Mg2 -ATP酶的活力。[结果]①与对照组比较,A、B组的高剂量组跳台试验受电击次数分别为(2．90±1．45)次、(3．60±1．96)次,明显增多(P <0．05,P<0．01);总电击时间分别为(86．90±31．12)s、(101．30±38．74)s,明显增加(P<0．05,P<0．01);首次错误潜伏期分别为(74．20±27．88)s、(76．40±35．28)s,明显缩短(P<0．01)。②与对照组比较,A、B组的高剂量组大脑组织中Na -K -ATP酶活力分别为(5．50±2．17)、(5．50±2．97)μmol Pi／(mg prot·h),Ca2 -Mg2 -ATP酶的活力分别为(98．10±19．59)、(81．65±13．12)μmol Pi／(mg prot·h),明显降低(P<0．05,P<0．01)。③跳台试验各指标的改变及大脑组织ATP酶活力的降低,均以高剂量组更明显。[结论]混配杀虫剂能降低小鼠学习记忆功能,这种改变可能与大脑组织中Na -K - ATP酶、Ca2 -Mg2 -ATP酶的活力下降有关。     

氰戊菊酯对小鼠组织中ATP酶活性的影响

[目的]探讨氰戊菊酯对小鼠组织中ATP酶活性的影响. [方法]将小鼠随机分为高剂量组(染毒剂量27.2 mg/kg)、中剂量组(染毒剂量13.6mg/kg)、低剂量组(染毒剂量6.8mg/kg)和1个对照组,染毒后测定组织中ATP酶活性. [结果]染毒后,高、中、低染毒组和对照组肝组织中Na+-K+-ATP酶活性分别为16.879±4.587、18.659±3.314、21.174±4.006、24.175±3.832 μmol·L-1·mg pro-1·h-1;肾组织中各组活性分别为9.275±3.580、12.012±2.640、13.093±1.883、15.034 ± 3.383 μmol·L-1·mg pro-1·h-1;脑组织中各组活性分别为15.490±3.399、18.208±3.127、19.825±2.520、21.065±2.658μmol·L-1·mg pro-1·h-1;高、中、低染毒组和对照组肝组织中Ca2+-Mg2+-ATP酶活性分别为15.371±3.386、18.297±3.654、20.307±3.835、22.146±3.746 μmol·L-1·mg pro-1·h-1;肾组织中各组活性分别为7.753±2.025、11.711±2.396、15.284±3.812、17.047±4.042 μmol·L-1·mg pro-1·h-1;脑组织中各组活性分别为13.835±3.415、16.895±2.778、18.446±2.243、20.027±3.380 μmol·L-1·mg pro-1·h-1.与对照组相比,各染毒组Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性有降低的趋势.肝、脑、肾的高剂量组和中剂量组的Na+-K+-ATP和Ca2+-Mg2+-ATP酶均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05). [结论]氰戊菊酯对ATP酶有抑制作用,可能对机体组织和细胞有损害作用.     

乙醇对家兔脑组织中生化指标的影响及其意义

目的探讨乙醇对家兔脑组织T生化指标的影响及意义。方法将家兔随机分为3个染毒剂量组,用45%的乙醇染毒,并对染毒后脑组织脂质过氧化指标、ATP酶活力进行测定与分析。结果与对照组比较,高、中剂量染毒组超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)浓度均显著增高,差异具有统计学意义(P0.05,P0.01),同时Na+-K+-ATP酶活力、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力均显著降低,差异亦具有统计学意义(P0.01)。结论脑组织脂质过氧化增强、ATP酶活力降低,可能是乙醇引起家兔中枢神经系统功能紊乱的生化机制之一。     

急性羰基镍中毒大鼠不同脏器Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的动态观察

目的通过研究大鼠急性羰基镍中毒后肺脏、肝脏和心脏Ca2+-Mg2+-ATP酶活性变化,探讨急性羰基镍中毒对脏器损伤的机制。方法 SD大鼠静态吸入方式染毒一次,染毒时间为30 min,其中羰基镍染毒低剂量组为20 mg/m3、中剂量组为135 mg/m3、高剂量组为250 mg/m3,并设氯气染毒组,染毒浓度为250 mg/m3,并设正常对照组,染毒后分别于1、2、3和7 d应用化学显色法测定肺脏、肝脏和心脏Ca2+-Mg2+-ATP酶活性变化。结果低、中、高剂量羰基镍染毒后,肺脏、肝脏和心脏Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均有下降,以高剂量组下降最为明显(P<0.05);氯气染毒组也显著下降(P<0.05);羰基镍染毒不同的时间段下,肺脏、肝脏、心脏Ca2+-Mg2+-ATP酶活性于1 d时已开始降低、3 d降低最为明显,7 d时渐升高;氯气染毒组大鼠肝脏和心脏以2 d时降低最为明显。结论羰基镍可通过抑制肺脏、肝脏和心脏Ca2+-Mg2+-ATP酶活性导致细胞内钙稳态失调,引起组织器官细胞损伤。     

汞对大鼠肾皮质线粒体ATP酶和膜电位的影响

目的 通过线粒体孵育液染汞并用N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预研究汞对大鼠肾皮质线粒体损伤的影响.方法 提取Wistar大鼠肾皮质线粒体液并分设为阴性对照组,5、50、500 μmol/L氯化汞(HgCl2)直接染毒组及线粒体液NAC预处理后50 μmol/L HgCl2染毒组5组.各组于培养箱内37℃孵育1 h后,测定Na+-K+-三磷酸腺苷(ATP)酶活力、Ca2+-ATP酶活力、线粒体膜电位及孵育液中细胞色素C含量.结果 与阴性对照组比较,50、500 μmol/L HgCl2染毒组Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力及线粒体膜电位显著降低(P<0.05),细胞色素C含量显著升高(P<0.05);与50 μmol/L HgCl2染毒组比较,NAC预处理后Na+-K+-ATP酶活力及线粒体膜电位显著升高,细胞色素C含量显著降低(P<0.05).结论 汞可以剂量依赖性地诱导大鼠肾皮质线粒体损伤,NAC预处理在某种程度上能有效地预防汞所致大鼠肾皮质线粒体损伤.     

大豆硒蛋白对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用

目的探讨大豆硒蛋白对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用。方法 Wistar大鼠50只,,随机分为正常对照组(NC)、糖尿病对照组(DM)、低剂量Se治疗组(L-Se)、中剂量Se治疗组(M-Se)、高剂量Se治疗组(H-Se)。后4组腹腔注射链脲佐菌素55 mg/kg制备DM模型。第7w起,NC、DM组予0.5%CMC-Na 10ml/(kg.d),L-Se、M-Se、H-Se组分别予大豆硒蛋白2,4,8g/(kg.d)灌胃。第12w末处死大鼠,检测血糖、血清及心肌组织中SOD、GSH-Px、NOS活性和MDA、NO含量以及心肌组织中Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性。结果与模型组比较,补充外源性大豆硒蛋白后,M-Se、H-Se组可明显降低糖尿病大鼠血糖及MDA含量(均P<0.001),显著增加血清GSH-Px、NOS活性(P<0.001),同时使心肌线粒GSH-Px活性、NO含量明显增加(均P<0.001),并且使心肌组织Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性显著增加(P<0.01,P<0.001)。结论大豆硒蛋白对糖尿病大鼠心肌损伤具有保护作用。     

地卓西平对甲基汞致大鼠脑皮质细胞内钙稳态失调的影响

目的研究地卓西平对甲基汞致大鼠脑皮质细胞内钙稳态失调的影响。方法 Wistar大鼠32只,按体重随机分成4组,每组8只。第1组为对照组,腹腔注射0.9%氯化钠;第2组为低剂量甲基汞染毒组,腹腔注射4μmol/kg的甲基汞溶液;第3组为高剂量甲基汞染毒组,腹腔注射12μmol/kg的甲基汞溶液;第4组为地卓西平预处理组,隔日皮下注射0.3μmol/kg地卓西平,2 h后腹腔注射12μmol/kg的甲基汞溶液;注射容量均为5 ml/kg,染毒4周,每周5次。观察神经细胞内Ca2＋浓度及其凋亡情况,同时测定脑皮质Hg含量和与维持钙稳态相关的酶Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-ATPase活性。结果染毒4周后,随着染毒剂量的增加,脑皮质Hg含量和细胞内Ca2＋浓度均明显升高（P〈0.01）;细胞凋亡率明显高于对照组（P〈0.01）;脑皮质Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-ATPase活性均不同程度的受到抑制。地卓西平预处理可以明显缓解神经细胞凋亡和细胞内Ca2＋超载,对Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-ATPase活性也有一定程度的恢复作用。结论甲基汞通过抑制与维持钙稳态相关的酶Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-ATPase活性,干扰神经细胞内钙稳态,进而造成神经细胞凋亡。地卓西平可以阻断Ca2＋通道对钙稳态失调引起的细胞损伤有拮抗作用。     

bFGF对慢性酒精中毒大鼠脑和肝组织ATP酶活力的影响

[目的]观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对慢性酒精中毒大鼠脑组织及肝组织Na+-K+-ATP酶活力和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力,探讨bFGF对慢性酒精中毒所致的脑损伤、肝损伤的保护作用。[方法]选择成年Wistar雄性大鼠,采用白酒灌胃建立慢性酒精中毒模型,慢性酒精中毒模型建立成功的大鼠随机抽签法分为酒精中毒对照组、生理盐水(NS)对照组和bFGF治疗组,每组10只。另10只不灌白酒作为正常对照组。bFGF治疗组大鼠白酒灌胃的同时,1 h后按12μg/kg剂量肌肉注射,共14 d。各组大鼠到相对应的时间点取出各组大鼠脑组织、肝组织制成匀浆,测定脑组织、肝组织匀浆中Na+-K+-ATP酶活力和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力。[结果]与正常对照组相比,慢性酒精中毒后大鼠脑组织及肝组织中Na+-K+-ATP酶活力和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力均明显降低(P﹤0.01);经bFGF治疗后脑组织及肝组织中Na+-K+-ATP酶活力和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力均明显高于酒精中毒对照组及NS对照组(P﹤0.05)。[结论bFGF能提高慢性酒精中毒脑组织和肝组织中Na+-K+-ATP酶活力及Ca2+-Mg2+-ATP酶活力,提示bFGF对慢性酒精中毒所致的脑损伤和和肝损伤具有保护作用。     

硫酸镍对大鼠心肝肾ATPase毒性的实验研究

目的 探讨硫酸镍对心、肝、肾的毒作用及其机理。方法 对大鼠腹腔注射硫酸镍2.5、5.0、10.0dmg/kg连续10d染毒,制备心肌、肝及肾小管细胞膜,定磷比色法检测细胞Na^ .K^ -ATPase、Ca^2 -ATPase活性。结果 硫酸镍明显抑制心肌、肝、肾小管细胞膜Na^ .K^ -dATPasc、Ca^2 -ATPase活性,其抑制作用肾脏最强,心脏次之,肝脏最轻。结论 硫酸外长致心肝肾损伤与其抑制细胞膜ATPase活性有关。     

硝酸铈对大鼠组织中ATP酶活性的影响

研究了硝酸铈对大鼠内脏、大脑、肌肉中ＡＴＰ酶活性的影响。结果显示,连续腹腔注射低浓度硝酸铈后,大鼠肝脏、肾脏、心脏等组织中Ｃａ２＋ －ＡＴＰ酶,Ｋ＋ 、Ｎａ＋ －ＡＴＰ酶,Ｍｇ２＋ －ＡＴＰ酶活性明显增强;而当注射高浓度硝酸铈时,酶活性均未发生明显变化。估计这是机体受到外界毒物影响后的一种保护机制     

氟对大鼠红细胞膜Na~＋－K~＋－ATPase、Ca~（2＋）－ATPase活性的影响及“抗氟灵”的拮抗作用研究

选择健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只,随机分为５组,观察氟对大鼠红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性的影响及“抗氟灵”的拮抗作用。染毒及给药方式为自由饮式,染毒剂量为１８０ｍｇＦ－／Ｌ“抗氟灵浓度为２４ｇ％;染毒时间为２个月,“抗氟灵”治疗时间为１个半月。结果显示,染氟组动物红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性均有显著升高,给予氟＋“抗氟灵”组比染氟组显著降低;氟中毒后给予“抗氟灵”治疗组明显低于治疗对照组。提示氟对红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性有促进作用,而“抗氟灵”具有拮抗氟的作用     

茶多酚对甲基汞致大鼠神经毒性影响

目的研究甲基汞致大鼠神经毒性的作用机制,探讨茶多酚对甲基汞致神经毒性作用的影响。方法36只Wistar大鼠随机分成3组,对照组,染汞组(12μmol/kg),茶多酚干预组(1 mmol/kg),连续干预染毒4周,最后1次染毒后24 h,将大鼠麻醉后处死,断头取脑,冰浴下分离大脑皮质,测定Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力及细胞内Ca2+、活性氧簇(ROS)含量及细胞凋亡情况。结果与对照组比较,单纯染汞组Na+-K+-ATP酶[(2.72±0.46)μmol/(h.mg)]、Ca2+-ATP酶活力[(1.52±0.26)μmol/(h.mg)]明显降低(P<0.01),细胞内Ca2+含量(239.52±44.84)nmol/L、ROS含量(313.86±35.11)及细胞凋亡率[(40.84±6.26)%]明显升高(P<0.01);与染汞组比较,茶多酚干预组Na+-K+-ATP酶活力[(3.58±0.71)μmol/(h.mg)]、Ca2+-ATP酶活力[(1.98±0.29)μmol/(h.mg)]明显升高(P<0.05或P<0.01),细胞内Ca2+含量(188.39±7.43)nmol/L、ROS含量(238.03±22.99)及细胞凋亡率[(28.31±4.34)%]明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论茶多酚对甲基汞致大鼠神经毒性有一定拮抗作用。     

魔芋多糖对小鼠肠道吸收功能的抑制作用与机制

目的探讨魔芋多糖(konjac polysaccharide,KP)对小鼠肠道吸收功能的抑制作用与机制。方法将实验动物分为正常对照(N)、高脂(HF)和KP高、中、低剂量(KPH、KPM、KPL)共5个组,连续喂饲20d。紫外分光光度法测定小肠粘膜Na+-K+-ATP酶活性,血糖仪测定血糖并称量体重和粪便湿、干重等。结果HF组和KPH组的Na+-K+-ATP酶活性分别为16.2±1.48和11.2±1.10μmolPi/(mgpro·h),体重和餐后血糖分别为34.3±2.07g、7.5±1.15mmol/L和28.1±1.95g、4.8±0.73mmol/L。两组间各项指标的差别均有显著性意义(P<0.05)。结论KP降低小鼠餐后血糖和血清胆固醇水平,抑制体重增长、降低小肠粘膜Na+-K+-ATP酶活性,对肠道吸收功能有抑制作用。