卡马西平所致药疹与CYP3A4*18B基因型的关联性初探

目的初步探讨卡马西平所致药疹与CYP3A4*18B基因型的关系,以寻找预测药疹的分子学手段。方法用PCR-RFLP法检测65例卡马西平所致药疹组患者(重型药疹患者11名,轻型药疹患者54名)、100例卡马西平耐受组患者及100例健康对照组患者的CYP3A4*18B(intron10,G20338→A)基因多态性。结果卡马西平所致药疹组CYP3A4*1/CYP3A4*1(G/G)基因型30例,CYP3A4*1/CYP3A4*18B(G/A)基因型30例,CYP3A4*18B/CYP3A4*18B(A/A)基因型5例,等位基因A频率为30.8%;卡马西平耐受组G/G基因型51例,G/A基因型42例,A/A基因型7例,等位基因A频率为28%;健康对照组G/G基因型44例,G/A基因型49例,A/A基因型7例,等位基因A频率为31.5%。各组间基因型与等位基因频率差异均无统计学意义。结论由于病例数较少,目前尚没有发现卡马西平药疹与CYP3A4*18B相关联。     

GSTA1/GSTM3基因多态性与抗结核药物性肝损伤的相关性分析

目的 探讨GSTA1、GSTM3基因多态性与汉族人群抗结核药物性肝损伤的关系.方法 采用病例对照研究设计,随机选取抗结核治疗致肝损伤患者199例作为病例组,无肝损伤患者199例作为对照组.应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测研究对象GSTA1、GSTM3基因多态性,应用SPSS 17.0统计软件进行分析.结果 GSTA1基因C-69T位点的C、T等位基因在病例组的分布频率分别82.4％、17.6％,在对照组的分布频率分布为88.2％、11.8％,经检验得差异有统计学意义(x2 =5.30,P=0.027);GSTM3在内含子6处3个碱基未缺失型(即野生型A)与缺失型(即突变型B)在病例组的分布频率分别为69.3％、30.7％;在对照组的分布频率为72.1％、27.9％,组间差异无统计学意义(x2 =0.73,P=0.436).GSTA1(T)/ GSTM3(B)与GSTA1(C)/GSTM3 (A)比较,差异有统计学意义(x2 =5.31,P=0.021).GSTA1 (T)/GSTM3 (A)与GSTA1(C)/GSTM3 (A)相比较差异无统计学意义,但GSTA1(T)/GSTM3(A)发生ADIH风险升高(OR=1.572).在调整了吸烟、饮酒影响因素后,GSTA1 C-69T位点基因多态性与ADIH发生仍相关,其调整OR值为1.773.结论 GSTA1基因多态性可能与抗结核药物性肝损伤发生相关;尚不能认为GSTM3基因多态性与抗结核药物性肝损伤发生存在相关性;GSTA1/GSTM3联合突变会导致抗结核药物性肝损伤的发生风险升高,GSTA1单一突变与均不突变相比,也会使ADIH发生的风险升高.     

CYP1B1、CYP3A4和CYP3A5基因多态性与急性淋巴细胞白血病风险的相关性

目的分析CYP1B1、CYP3A4和CYP3A5基因多态性与急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)风险的相关性。方法选择2015年1月-2018年1月威海市立医院血液内科收治的ALL患者120例为病例组,同期选择健康人群120例为对照组,分别采集两组血液样本。采用焦磷酸测序基因分型技术对rs1056836、rs2740574和rs776746三个位点进行分型。应用SPSS 19.0软件统计候选基因多态性与ALL患病风险的相关性。结果三个候选SNP均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P-HWE0.05)。病例组CYP1B1基因rs1056836位点和CYP3A4基因rs2740574位点的最小等位基因G频率显著高于对照组;而CYP3A5基因rs776746位点的最小等位基因A频率显著低于对照组(P0.05)。此外,病例组rs1056836位点的GC和GG基因型频率高于对照组,rs2740574位点的AG和GG基因型频率亦高于对照组,而rs776746位点的AG基因型频率低于对照组(P0.05)。遗传模型分析表明,rs1056836位点在显性、隐性、加性三个遗传模型下均与增加ALL风险具有相关性; rs2740574位点在显性和加性模型下与增加ALL风险具有相关性;而rs776746位点在显性模型下与降低ALL风险具有相关性(P0.05)。结论 CYP1B1基因rs1056836位点和CYP3A4基因rs2740574位点可能与增加ALL风险相关,而CYP3A5基因rs776746位点可能与降低ALL风险相关。     

CYP4F2基因G20597A多态性与高血压病相关性研究

目的分析我国汉族人群CYP4F2基因多态性与原发性高血压的关系。方法选择189例高血压病患者和187例年龄相匹配的健康人群为研究对象,采用PCR．RFLP方法对CYP4F2G20597A多态性位点进行基因型分析。结果CYP4F2G20597A基因型、等位基因在高血压病组和对照组差异无统计学意义,但是在以性别为基础进行分层分析时,携带CYP4F220597G等位基因男性在患高血压组与无高血压组差异有统计学意义（81．6％vs71．3％,P〈0．05）,在多元Logistic回归分析予以校正心血管病多种危险因子后（吸烟,TC,基因型,年龄及BMI）,男性CYP4F220597GG携带者患高血压病风险约为CYP4F220597GA和AA基因型携带者的2．689倍。结论CYP4F2基因G20597A多态性与我国男性高血压病具有相关性,并且CYP4F220597GG基因型可能为我国汉族男性高血压病的一个独立危险因子。     

CYP3A5基因多态性与高血压个体化精准治疗的相关性研究

目的:通过对药物代谢酶CYP3A5的检测,研究CYP3A5基因多态性与苯磺酸氨氯地平血药浓度及临床疗效的关系。方法:选取2016年9月～2017年7月门诊或住院的原发高血压患者90例,随机选取30例为对照组进行常规治疗,选取60例为基因导向治疗组,患者晨起口服苯磺酸氨氯地平5 mg 7日,第8日空腹采静脉血。采集标本分2份,2管2 ml血样,用于分析血药浓度及基因型。然后应用突变扩增法进行CYP3A5基因多态性检测,确定基因型及血药浓度的关系。根据基因型与血药浓度检测结果进行分组,分为3组即慢代谢A组(GG型,n=29)、中代谢B组(AG型,n=22)、快代谢C组(AA型,n=9),并通过CYP3A5基因型调整用药,慢代谢A组GG型口服苯磺酸氨氯地平,剂量为2. 5 mg/d,中代谢B组AG型口服苯磺酸氨氯地平,剂量为5 mg/d,快代谢C组AA型口服苯磺酸氨氯地平,剂量为10 mg/d,其余30例进入常规治疗对照组,口服苯磺酸氨氯地平,剂量为5 mg/d。所有患者于治疗4周、8周、12周回访时测量血压进行记录与对比观察降压和不良反应等情况。结果:(1) GG型、AG型、AA型3组血药浓度分别为(14. 767±1. 347)、(12. 253±1. 555)、(5. 861±1. 285) ng/ml,差异有统计学意义(P 0. 05),因此可明确GG型属于慢代谢型,AG型属于中代谢型,AA型属于快代谢型;(2)治疗前与治疗后各组的收缩压(SBP)与舒张压(DBP)相比较,差异有统计学意义(P 0. 05);治疗后基因导向治疗组的收缩压(SBP)与舒张压(DBP)组间比较,同一时间点对应的SBP和DBP,差异无统计学意义(P 0. 05);治疗后,基因导向治疗组分别与对照组比较SBP与DBP,同一时间点对应的SBP与DBP,差异有统计学意义(P 0. 05);(3)基因导向治疗组的不良反应发生率为3. 85%,对照组的不良反应发生率为18. 52%,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:高血压病患者CYP3A5的不同基因多态性对苯磺酸氨氯地平血药代谢浓度不同。药物基因导向治疗组与常规药物治疗组相比,均能达到降压目的,但前者在导向治疗下,不仅能有效降压且可减少不良事件的发生。     

雌激素代谢酶CYP17、CYP1A2基因多态性与子宫肌瘤易感性的关系

目的:探讨参与雌激素合成和代谢的CYP17和CYP1A2基因多态性与成都地区子宫肌瘤发病的关系。方法:应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,对100例子宫肌瘤患者和100例对照组人群CYP17基因启动子区T-C多态和CYP1A2基因2964位点G-A多态性进行分析。结果:两组均存在CYP17基因T-C多态,但两组基因型TT、TC、CC频率和等位基因T、C频率的比较差异均无统计学意义(P>0.05);两组均存在CYP1A2基因G-A多态,但两组基因型GG、GA、AA频率和等位基因G、A频率的比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:CYP17基因启动子区T-C多态和CYP1A2基因2964位点G-A多态性与成都地区子宫肌瘤发病风险无相关性。     

CYP19和CYP1B1基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症易感性的研究

目的:探讨P450酶系的CYP19和CYP1B1基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段多态性技术(PCR-RFLP)和等位基因特异性PCR技术(AS-PCR)对100例ICP患者和100例正常对照孕妇CYP19基因第3外显子Rsal酶切多态和CYP1B1基因外显子3密码子432(C-G)多态性进行分析。结果:①对照组CYP19的基因型AA、AG、GG频率分别为30.0%、50.0%、20.0%,ICP组分别为38.0%、45.0%、17.0%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组等位基因A、G频率分别为55.0%、45.0%,ICP组分别为60.5%、39.5%,两组比较差异也无统计学意义(P>0.05)。②对照组CYP1B1的基因型CC、CG频率分别为80.0%、20.0%,ICP组分别为70.0%、30.0%,两组均无突变纯合子(GG),两组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组等位基因C、G频率分别为90%、10%,ICP组分别为85%、15%,两组比较差异也无统计学意义(P>0.0S)。结论:CYP19外显子3基因多态性和CYP1B1外显子3密码子432基因多态性与ICP发病无关。     

CYP1A1和CYP1B1基因多态性与RPL易感性

目的 探讨CYP1A1、CYP1B1基因多态性与复发性流产(RPL)遗传易感性关系,为预防和治疗该病提供新靶点.方法 本研究采用等位基因特异性PCR (As-PCR)和聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCRRFLP)方法,针对CYP1A1基因MspI酶切位点和CYP1B1 L432V多态位点,检测81例患有原因不明RPL病例组和98名有生育史健康女性对照组之间差异.结果 RPL组和对照组CYP1A1 MspI位点3种基因型m1/m1、m1/m2、m2/m2分布频率差异无统计学意义(x2=0.335,P＞0.05);CYP1B1 L432V多态位点3种基因型C/C、C/G、G/G在病例组和对照组分布差异有统计学意义(x2=7.467,P＜0.05);2组间C、G等位基因分布差异有统计学意义(x2=9.129,P=0.003);G/G、C/G基因型与C/C基因型比较,RPL危险度分别提高2.620、1.954倍;等位基因G使RPL危险性增加2.038倍.结论 CYP1B1 L432V突变基因型增加RPL发病风险,尚不能认为CYP1A1基因MspI位点多态性与RPL易感性有关.     

基于Taqman荧光ARMS-PCR技术检测CYP3A5基因多态性方法的建立

目的建立一种基于Taqman荧光的ARMS-PCR技术检测人外周全血样本CYP3A5*3(rs776746)基因多态性的新方法。方法根据CYP3A5和内参基因的保守序列分别设计特异性引物及探针,建立CYP3A5*1和CYP3A5*3 Taqman荧光ARMS-PCR检测体系及其测序体系,并对200例人外周全血样本进行检测及金标准测序对比验证,分析2种检测方法的一致性,并统计分析CYP3A5*3基因多态性的分布。结果该方法可检测人外周全血样本CYP3A5*3(rs776746)基因多态性,其检测结果与sanger测序一致性为100%。200例外周血样本CYP3A5*3基因型分布:*1/*1型19例(9.5%),*1/*3型为62例(31.0%),*3/*3型为119例(59.5%)。结论本研究建立的基于Taqman荧光ARMS-PCR技术的检测方法能够简单、快速、准确地检测CYP3A5*3基因型,适用于临床推广。     

河北省汉族人群CYP450 2C9和VKORC1基因多态性与华法林剂量相关性研究

目的 了解河北省汉族人群CYP450 2C9和VKORC1的基因多态性分布与其他不同民族之间的差异,探讨CYP450 2C9~*3+1075C/A和VKORC1-1639A/G基因多态性与华法林剂量的关系.方法 随机选取门诊体检的健康人487名,检测CYP450 2C9~*3+1075C/A和VKORC1-1639A/G基因型及其分布频率,并与国外多个民族的CYP450 2C9~*3+1075C/A和VKORC1-1639A/G的基因多态性进行比较.选取服用华法林稳定剂量的患者101例,检测其基闪型并结合其个体差异和华法林的稳定剂量进行分析.结果 487名正常人CYP450 2C9*3+1075C/A基因型中,AA型为449名(92.2%),AC型36名(7.4%),CC型2名(0.4%);VKORC1-1639A/G基因型中AA型为415名(85.2%),GA型72名(14.8%),未发现GG型(0.0%).采用多元逐步回归得出有关华法林稳定剂量的方程:In(D)=0.346+0.017(体重)-0.376(CYP450 2C9~*3+1075C/A)+0.148(VKORC1-1639A/G)-0.002(年龄)(r=0.827,P=0.02).结论 汉族人群CYP450 2C9和VKORC1存在明显的基因多态性.CYP450 2C9~*3+1075C/A和VKORC1-1639A/G的基因型和患者个体之间的体重、年龄差异是影响华法林稳定剂量的因素.     

Impact of CYP3A7*1C polymorphism on bone mineral content in postmenopausal women

INTRODUCTION: CYP3A7*1C polymorphism has been shown to be associated with lower levels of serum dehydroepiandrosterone sulphate in men. The age-related decline of dehydroepiandrosterone sulphate levels is believed to contribute to the development of osteoporosis. We hypothesized that CYP3A7*1C may lead to bone loss through decreased levels of dehydroepiandrosterone sulphate in postmenopausal women. PATIENTS AND METHODS: 319 postmenopausal women were studied and divided into two subgroups: 217 women with osteoporosis and 102 aged-matched women without osteoporosis. The CYP3A7*1C polymorphism was genotyped. Serum dehydroepiandrosterone sulphate levels and bone mineral density were measured. RESULTS: Homozygous CYP3A7*1C carriers had significantly lower bone mineral density at lumbar spine than that of wild type (T-score with CYP3A7*1C mutant type: -3.27 +/- 1.02, T-score with wild type: -1.35 +/- 1.53, p = 0.041) after adjusting for age and DHEAS levels. No association was found between genotypes and dehydroepiandrosterone sulphate levels. CONCLUSION: Our data suggest that CYP3A7 polymorphism might have an influence on bone mass at the lumbar spine independently of serum dehydroepiandrosterone sulphate concentrations.     

Effects of the antifungal imidazole ketoconazole on CYP1A and CYP3A in rainbow trout and killifish

The use of N-substituted imidazoles is widespread, and imidazole and triazole fungicides have been detected in the aquatic environment and shown to bioaccumulate in fish. We have investigated effects of the model imidazole, ketoconazole, on drug-metabolizing cytochrome P450 (CYP) forms. We focused on cytochrome P4501A (CYP1A) and cytochrome P4503A (CYP3A) expression and activities in juvenile rainbow trout and in adult killifish. The CYP1A expression (mRNA, protein) and activity was induced in rainbow trout, whereas in killifish no effect of ketoconazole on CYP1A protein expression was observed. A biphasic dose-response relationship was observed between ketoconazole exposure and hepatic CYP1A-mediated ethoxyresorufin O-deethylase (EROD) activity in rainbow trout in vitro and in vivo, implying that higher doses of ketoconazole inhibit CYP1A activities. Slight induction of CYP3A protein levels was observed in rainbow trout exposed in vivo to ketoconazole. However, the CYP3A-mediated benzyloxy-4-[trifluoromethyl]-coumarin (BFC) O-debenzyloxylase activity was reduced in rainbow trout and killifish treated with ketoconazole. In vitro inhibition studies confirmed that ketoconazole was a potent inhibitor of both CYP3A and CYP1A enzyme activities in these species. This study showed that ketoconazole induced CYP1A and CYP3A expression in rainbow trout. However, the most pronounced effect of ketoconazole was a 60 to 90% decrease in CYP3A catalytic activities in rainbow trout and in killifish.     

Absence of the human CYP2C8*3 allele in Ugandan children exposed to Plasmodium falciparum malaria

Study of host pharmacogenetics can improve our knowledge of mechanisms of drug resistance selection and spread. This issue has recently been addressed with respect to chloroquine and amodiaquine in malaria endemic areas of West and East Africa. Here we report, from surveys performed in two different areas of Uganda, that the human CYP2C8*3 allele, which had been reported to be strongly associated with parasite drug resistance in Zanzibar, is absent, being a marker of genetic admixture of the Zanzibari population with a Caucasoid component. Moreover, a retrospective analysis of CYP2C8*2 and the Plasmodium falciparum drug resistant pfmdr1 86Y allele does not show any association, which may be related to the high level of drug resistance.     

Effect of influenza immunization on CYP3A4 activity.

A number of clinical reports of drug interactions with influenza vaccine have been made. We hypothesized that CYP3A4 activity would decrease following influenza immunization. Fifteen healthy subjects had erythromycin breath tests (ERMBT) and influenza antibody titer hemagglutinin inhibition assay (HIA) before and after receiving influenza vaccine. The mean age of the subjects was 31.9 years (S.D. 10.2). The change in ERMBT following influenza immunization was not significant (mean -4%, S.D. 17%, P=0.25). Influenza immunization does not significantly change CYP3A4 activity. Changes in serum drug concentrations noted previously after influenza immunization are either due to very small changes in CYP3A4 activity or other pharmacokinetic interactions.     

CYP3A4和CYP2D6基因多态性与美沙酮维持治疗反应的关联研究

目的探讨CYP3A4和CYP2 D6基因多态性与海洛因成瘾者美沙酮维持治疗反应的关联性。方法随机选取6所美沙酮维持治疗门诊中进行维持治疗的海洛因成瘾者作为研究对象,收集研究对象的一般社会人口学特征,相关吸毒史和美沙酮维持治疗信息,并收集外周血测定CYP3A4和CYP2 D6多态位点的基因型。结果共纳入研究对象820例。其中,治疗反应好组210例,治疗反应差组610例。不同治疗反应组间治疗者的年龄比较,差异有统计学意义(P0.05)。CYP3A4 rs2242480和CYP2 D6 rs16947在治疗反应好组和治疗反应差组间的基因型频率分布和等位基因频率分布差异均无统计学意义(均P0.05)。结论尚未发现CYP3A4rs2242480和CYP2 D6 rs16947与治疗反应有关联。     

贵州省苗族及布依族人群CYP1A1＊2C基因多态性研究

[目的]检测贵州省苗族及布依族正常人群细胞色素氧化酶1A1＊2C（CYP1A1＊2C）基因多态性。[方法]采用Taqman-MGB探针,通过实时定量PCR（real-time PCR）对贵州省三都县125名苗族及122名布依族人群的血液样本进行CYP1A1＊2C基因多态性分析,并采用χ2检验比较两民族该基因分布的差异。[结果]CYP1A1＊2C野生纯合子（基因型AA）、突变杂合子（基因型AG）、突变纯合子（基因型GG）在苗族及布依族中基因型频率分别为65.6%、28.0%、6.4%及68.9%、25.4%、5.7%;A和G在苗族及布依族中基因频率分别为79.6%、20.4%及81.6%、18.4%,两民族人群的基因多态性分布差异无统计学意义。[结论]中国贵州省苗族及布依族人群中CYP1A1＊2C基因型频率分布没有明显不同。     

四氯化碳与乙醇对3种细胞色素P450酶基因表达的影响

目的探讨四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl4)和乙醇(ethanol,EtOH)对人体淋巴细胞瘤细胞株(MCL-5)中3种细胞色素P450酶基因(CYP1A1、CYP2E1、CYP3A4)表达的影响,并研究剂量与效应的关系.方法用常规的细胞培养方法,用DMSO,0.05、0.10、0.15、0.20 mmol/L CCl4和50、100、150、200 mmol/L EtOH处理细胞48 h,利用提纯RNA和合成cDNA的药盒,合成cDNA,然后通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)表达3种CYP450酶基因,以β-Actin作为内对照,分析不同处理剂量时基因表达强度.结果 3种CYP450酶基因在MCL-5细胞株中都有基本表达,CYP2E1和CYP3A4表达在用0.05、0.10、0.15、0.20 mmol/L CCl4和50、100、150、200 mmol/L EtOH处理细胞48 h后有被上调的趋势.结论本研究结果提示,CCl4和EtOH对CYP450酶系统中的CYP2E1、CYP3A4基因有明显的诱导作用;这些基因被诱导后,可能会导致相对应酶活性的增加,同时加强对CCl4、EtOH的代谢,使他们的毒性代谢产物增加.     

SAM肝细胞色素P450 3A对衰老的作用

为探讨衰老与细胞色素Ｐ４５０３Ａ（ＣＹＰ３Ａ）活性的关系,用红霉素Ｎ－脱甲酶活性测定法分别检测了ＳＡＭ－Ｒ１、ＳＡＭ－Ｐ１和ＳＡＭ－Ｐ８三组衰老加速鼠（ＳＡＭ）中肝微粒体细胞色素Ｐ４５０３Ａ的活性,每组动物分为７、１３、３６周龄组。结果发现ＳＡＭ随年龄增长ＣＹＰ３Ａ的活性均降低,１３周龄组尤为显著,ＳＡＭ－Ｒ１组ＣＹＰ３Ａ活性下降约７２％（ｔ＝２６１,Ｐ＜００２）;ＳＡＭ－Ｐ１组ＣＹＰ３Ａ活性下降约７３％（ｔ＝２．７４,Ｐ＜００２）;ＳＡＭ－Ｐ８组中ＣＹＰ３Ａ活性降低约８６％（ｔ＝３．１４,ｐ＜０．００５）。ＳＡＭ－Ｐ１组ＣＹＰ３Ａ活性３６周龄比３周龄组下降约３５％,呈缓慢进行;ＳＡＭ－Ｒ１和ＳＡＭ－Ｐ８组中１３至３６周龄组均无明显变化。提示细胞色素Ｐ４５０３Ａ对衰老有重要影响作用。