一起肠炎沙门菌食物中毒实验室检测及溯源分析

目的对一起沙门菌引起的食物中毒进行病原菌检测及溯源分型分析。方法常规分离沙门菌,对分离到的肠炎沙门菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型。结果 14名食物中毒学生标本检出肠炎沙门菌4株;57名食堂工作人员肛拭标本检出肠炎沙门菌6株、纽波特沙门菌1株;9份冷冻预包装食品中检出肠炎沙门菌1株。对11株肠炎沙门菌进行脉冲场凝胶电泳分型,学生、食堂工作人员检出的10株菌株PFGE条带完全一致,与1份冷冻预包装食品中检出的肠炎沙门菌的PFGE聚类分析的同源性为86%。结论这起食物中毒是由肠炎沙门菌引起,通过PFGE分型分析,本次食物中毒与预包装食品肠炎沙门菌污染无关联。PFGE可有效应用于食物中毒溯源分析及分子流行病学研究。     

食物中毒肠炎沙门菌的生物学特性及分子分型研究

目的:对一起食物中毒分离的肠炎沙门菌进行生物学特性和分子分型研究。方法:菌株分离、生化鉴定和血清型确定参照GB/T4789.4-2008方法进行,用VITEK-32全自动微生物鉴定系统检测菌株药物敏感性,用实时荧光PCR法检测沙门菌invA基因,用PFGE方法进行分子分型。结果:17份样品检出10株肠炎沙门菌;经耐药性分析,菌株对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑啉、头孢他啶等15种抗生素均为100%敏感,对呋喃妥因70%耐药;invA基因阳性率为100%;经PFGE分型,10株源于食物中毒患者和涂抹物样品的肠炎沙门菌带型一致,为相同菌株。结论:invA基因可作为沙门菌病快速诊断基因;PFGE是一种非常实用的分子分型方法,能用于沙门菌食物中毒细菌同源性的分析。     

一起肠炎沙门菌食物中毒病原学检测与溯源分析

目的调查一起由西式糕点引起的食物中毒事件,对分离出的沙门菌进行毒力基因检测和分子分型分析,为溯源提供依据,也为今后处理此类事件提供借鉴。方法采集患者粪便标本和剩余食物标本,分离致病菌并对病原菌分离鉴定,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对所分离的5株肠炎沙门菌菌株进行同源性分析,并用PCR方法对其毒力基因inv A、ipa B和sef A进行检测。结果 2份剩余的肉松面包和3份患者粪便标本均检出肠炎沙门菌,血清型为9,12:g,m:-。5株肠炎沙门菌PFGE图谱完全相同,同源性为100%。inv A、ipa B和sef A 3种毒力基因均被检出。结论结合本次流行病学调查资料、菌株分离鉴定结果和PFGE检测结果,证实本次食物中毒是由肠炎沙门菌污染肉松面包引起,且菌株均携带多种毒力基因。     

一起由阿贡纳沙门菌引起的食物中毒的病原学研究及溯源分析

目的 对引起2022年夏季绍兴市某区一起食物中毒事件的沙门菌进行血清型、耐药表型及分子分型分析，研究分析其相关性。方法 使用玻片凝集法对6株沙门菌进行血清分型；采用微量肉汤稀释法测定分离株对14种抗生素的耐药性；采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)法对分离株进行分子分型和同源性分析，并与数据库中其他沙门菌比较。结果 6份患者肛拭子样本中检出1株阿贡纳沙门菌，7份从业人员肛拭子样本中检出2株阿贡纳沙门菌、1株婴儿沙门菌及1株阿姆德尼斯沙门菌，7份餐馆环境涂抹样本中检出1株阿贡纳沙门菌。对6株沙门菌进行脉冲场凝胶电泳分型，患者肛拭子样本、从业人员肛拭子样本、环境涂抹样本检出的3株阿贡纳沙门菌PFGE条带完全一致。6株分离菌株耐药谱相同。在绍兴市沙门菌PFGE数据库中未发现相同带型的菌株。结论 该事件是绍兴市首起由阿贡纳沙门菌感染引起的食物中毒事件，PFGE分型揭示分离株之间的相关性，为事件的分析和溯源提供了依据。     

不同来源肠炎沙门菌的溯源研究

目的:应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对不同来源的肠炎沙门菌进行分子分型,为政府部门修订相关的卫生法规提供了重要科学依据。方法:采用限制性内切酶Xba I,对广州地区2009-2011年间从业人员健康体检和食物中毒中检出的36株肠炎沙门菌进行PFGE分子分型,用BioNumerics Version 4.0软件(复选Dice相关系数和UPGMA方法)进行聚类分析。结果:36株肠炎沙门菌PFGE图谱显示菌株之间密切相关,相似度在88.8%～100%。结论:从业人员健康体检和食物中毒分离的肠炎沙门菌菌株之间存在较高分子水平的同源性,提示健康带菌从业人员是沙门菌食物中毒不可忽视的污染源。     

脉冲场凝胶电泳技术在一起食物中毒中的应用

目的利用沙门菌分子分型技术,分析不同来源的菌株之间的遗传相关性,通过同源性分析追溯新疆某县一起食物中毒发生的原因。方法对样品进行培养获得3株疑似沙门菌。通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对菌株进行鉴定及分子溯源。结果 5份患者粪便标本中有2份分离到菌株,3份食品样品中有1份分离到菌株。3株菌株初步生化鉴定结果为TSI(K/A)、产气、H2S:+;赖氨酸脱梭酶:+;血清学分型结果相同,均为O:9:12:+;H:g:m:+;H2相:-,鉴定为肠炎沙门菌。药敏检测结果显示对四环素等8种药物100%敏感,对萘啶酸100%耐药。PFGE分子分型及同源性分析,3株肠炎沙门菌的DNA图谱完全相同。结论 3株肠炎沙门菌株的DNA图谱100%同源,确认为一起由肠炎沙门菌污染了食品而引起的食物中毒。     

一起鼠伤寒沙门菌引起食物中毒的病原鉴定与同源性分析

目的对引起本次食物中毒主要病原菌鼠伤寒沙门菌进行生物学鉴定,血清学分型以及分子的溯源分析,研究分析其相关性,从而达到准确溯源的目的。方法对3份患者肛拭子样本和1份食品样本分离到的沙门菌进行菌株鉴定,采用美国临床实验室标准化研究所CLSI标准推荐微量肉汤稀释法,对分离株进行15种抗生素敏感实验,利用限制性内切酶Xba I酶切沙门菌基因组进行脉冲场凝胶电泳,通过Bio Numerics 6.6软件对电泳图谱进行同源性比较。结果3份患者样本和1份食品留样中共检出鼠伤寒沙门菌4株,均对氨苄西林、四环素、红霉素耐药。运用PFGE对所分离到的鼠伤寒沙门菌进行基因分型,其PFGE图谱相似性系数为100%。结论本次食源性疾病暴发疫情是由进食被鼠伤寒沙门菌污染的食品所致,通过PFGE对致病菌进行溯源,分析其溯源关系,能追踪到菌株来源,PFGE可有效应用于食物中毒溯源分析及分子流行病学研究。     

合肥市肉鸡沙门菌携带情况调查

目的了解合肥市养殖屠宰环节中肉鸡沙门菌的带菌率、血清型分布、抗生素耐药谱分布以及脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子分型情况,为合肥市食品安全提供科学的基础数据,为进一步加强合肥市公共卫生安全提供科学依据。方法2010年7—9月对合肥市10家肉鸡养殖场和14家屠宰户分别采用肛拭法和胴体漂洗法采集45份肉鸡活体和45份肉鸡胴体标本,根据GB／T4789．4—2010对沙门菌进行分离、鉴定以及血清学分析;并采用PCR方法进行复核鉴定;对最终确定的阳性菌株使用临床实验室标准化协会（CLSI）推荐的纸片法进行药敏试验;同时采用PFGE方法确定其分子分型。结果在45份肉鸡活体样本中未检出沙门菌;45份肉鸡胴体样本中检出12株沙门菌,检出率为26．7％,经PCR复核检测,所分离的12株沙门菌对invA和hilA基因的携带率均为100％;12株沙门菌分为3种血清型,其中9株为印第安纳沙门菌,2株为鼠伤寒沙门菌,1株为肠炎沙门菌;12株沙门菌对实验中所采用的15种抗生素总耐药以及多重耐药菌株数均为10株;12株沙门菌共分出7种PFGE带型,9株印第安纳沙门菌共分离出5种不同的PFGE带型;同一血清型的沙门菌分子分型结果,基本位于同一大簇中;相同PFGE带型的菌株,耐药谱非常接近。结论合肥市肉鸡胴体沙门菌检出率高,沙门菌的血清型、药敏性以及基因型具有多样性特征,耐药现象严重,相同PFGE带型的菌株,耐药谱非常接近。     

一起由维尔肖沙门菌引起的食物中毒事件的病原溯源

目的:运用基因分型技术对一起由维尔肖沙门菌引起的食物中毒进行溯源分析,探讨分子分型技术在沙门菌食物中毒中病原菌溯源和应用可能性。方法:采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)法对一起食物中毒事件中分离的11株维尔肖沙门菌进行基因分型和溯源性分析。结果:从病人肛拭中分离出的8株维尔肖沙门菌和引起该食物中毒的食物中分离的3株菌株都属于同一克隆。结论:此次食物中毒由同一株维尔肖沙门菌引起,PFGE分型技术可以直观的判断分离菌的亲缘关系,为流行病学调查和溯源提供可靠而实际的依据。     

肠炎沙门菌食物中毒的病原学检测分析

目的 对一起食物中毒事件进行病原学分析和流行病学调查,探讨其中毒原因、传染源及传播途径。方法 通过现场流行病学调查对数据资料进行Fisher确切概率检验,对患者肛拭子、剩余食品、原材料等28份样品进行实时荧光PCR检测及分离培养;对分离菌株进行生化鉴定和血清分型,用改良K-B法进行药敏试验,应用脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型技术进行同源性分析。 结果 从可疑食品蛋糕和6个患者中共分离到7株肠炎沙门菌,生物学性状、血清型和药敏试验结果一致, PFGE条带聚类分析显示所有菌株属同一克隆株。结论 这是一起肠炎沙门菌污染引起的食物中毒事件。食品卫生监督部门应加强网购食品卫生管理,减少食物中毒的发生。     

南京市一起斯坦利沙门氏菌食物中毒的病原学检测及溯源分析

目的 对食物中毒事件中所采集样本进行食源性致病菌的分离鉴定,快速查明食物中毒原因并进行同源性分析。方法 应用实时荧光PCＲ技术对一起食物中毒10份可疑食品、2份餐具涂抹样和5份患者粪便进行检测,同时进行病原菌培养分离鉴定,分离菌株采用CLSI 推荐的改良K-B纸片法进行抗生素敏感试验,应用PFGE分型技术进行同源性分析。结果 1份可疑食物和3份患者粪便经实时荧光PCR检测为沙门菌阳性,同时分离到4株斯坦利沙门氏菌,4株沙门氏菌的药敏试验结果一致,PFGE 带型完全一致。结论 本次食物中毒是由斯坦利沙门氏菌污染引起。实时荧光PCR技术能够快速准确地对食物中毒做出病原学诊断,PFGE基因分型技术可对病原菌进行溯源分析,对研究病原菌流行病学规律具有重要意义。     

脉冲场凝胶电泳在一起慕尼黑沙门菌食源性暴发中的应用研究

目的 脉冲场凝胶电泳(PFGE)在食源性疾病病原菌诊断中的应用.方法 采集19例患者和18名厨师的肛拭子、9份自制冷饮、2份井水以及5例患者的急性期和恢复期血清.同时采集未发病学生大便10份,血清5份,作为正常人对照.用传统的方法进行致病菌的分离和表型鉴定,对所分离的菌株参照美国疾病预防控制中心(CDC)的实验方法用PFGE进行DNA分子分型,使用BioNumerics软件进行聚类分析.方法 从19份食物中毒患者肛拭子中分离出14株慕尼黑沙门菌、从9份可疑食物中分离出3株慕尼黑沙门菌、从18名厨师肛拭子中分离出7株慕尼黑沙门菌,所分离菌株生化结果一致、耐药性相同,患者恢复期血清比急性期血清对所分离的菌株抗体有4倍以上增长.23株分离株的PFGE型完全一致.结论PFGE能直观判断肠道致病菌的亲缘关系,及时确定传染源、传播途径和流行范围,是有效控制食源性疾病大面积暴发的早期预警手段.     

Molecular epidemiological analysis and microbial source tracking of Salmonella enterica serovars in a preharvest turkey production environment

Epidemiological studies were conducted to source track and delineate horizontal transmission pathways of Salmonella serovars in a turkey production environment. Salmonella enterica serovar Heidelberg (n = 111), Salmonella Senftenberg (n = 14), Salmonella Muenster (n = 10), unidentifiable "roughs" (n = 5), Salmonella Anatum (n = 3), and Salmonella Worthington (n = 2) were isolated from the birds' cecal and crop contents, litter, environmental swabs, drinkers, and feed samples. These strains (n = 145) were analyzed for their antimicrobial susceptibility profiles and the bacterial horizontal transmission pathways were tracked by XbaI-digested pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) macrorestriction profiles. Nearly 79% of the strains were resistant to one or more antimicrobials, while 44% of the strains were resistant to two to six antimicrobials. Nearly 21% of the strains were susceptible to all of the antimicrobials tested. Twenty-seven distinct PFGE fingerprint profiles (90-95% similarity) were observed among 110 Salmonella Heidelberg strains (one strain was untypeable), and 13 of the 27 profiles (48%) elicited 100% similarity among the fingerprint patterns. The prevalence of Salmonella Heidelberg strains at weeks 2 (n = 20), 10 (n = 20), and 18 (n = 70) among the sampled pens suggested cross-colonization among pens during the 20-week production cycle. Salmonella Heidelberg strains were first isolated from the birds at week 2, and identical fingerprint profiles of this serovar were subsequently isolated from birds within the same pen; birds in other pens; and litter, air, and swab samples at weeks 10 and 18, suggesting possible horizontal transmission of this serovar across the production facility during the grow-out period.     

Molecular epidemiological investigation of a diffuse outbreak caused by Salmonella enterica serotype Montevideo isolates in Osaka Prefecture, Japan

In Osaka Prefecture, Japan, three foodborne outbreaks were caused by Salmonella enterica serotype Montevideo in rapid succession between September 2007 and May 2008. Further, Salmonella Montevideo was also isolated from several sporadic diarrhea patients and asymptomatic carriers examined during approximately the identical period. To investigate the relatedness of the isolates, we performed antimicrobial susceptibility testing, pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) analysis, and multiple-locus variable-number tandem repeat (VNTR) analysis (MLVA) for 29 Salmonella Montevideo isolates obtained in this region between 1991 and 2008. Although antimicrobial susceptibility tests had low discriminatory power, PFGE patterns revealed 17 unique types with <90% similarity in combined analyses involving XbaI and BlnI. Moreover, we detected three VNTR loci that were useful to genotype Salmonella Montevideo isolates, with our method ultimately classifying the isolates into 11 MLVA types based on differences in repeat unit number in each examined locus. Six isolates obtained from patients of two separate foodborne disease outbreaks, one sporadic patient, and three different carriers between 2007 and 2008 had nearly identical PFGE patterns and were classified into the identical MLVA type; further, the isolates with this PFGE and MLVA pattern appeared only at that time between 1991 and 2008. These data strongly suggest that genetically identical Salmonella Montevideo strains may have caused the 2007 and 2008 outbreaks in Osaka Prefecture. Our results demonstrate that PFGE using XbaI and BlnI is useful for discriminating between Salmonella Montevideo isolates, even within a limited area, and reconfirm that continuous epidemiological surveillance for bacterial intestinal infections such as salmonellosis may be useful to not only monitor changes in the genetic diversity of isolates, but to also detect diffuse outbreaks.     

一起维尔肖沙门菌食物中毒病原学检测分析

目的对一起食物中毒事件中分离的维尔肖沙门菌（Salmonella virchow）进行病原学检测分析,为该事件的处置提供实验依据。方法采集患者肛拭、饭店厨师手拭和肛拭、菜板涂抹样、抹布共10份样品,依照GB/T4789.4-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》进行菌株分离、生化反应、血清学分型、药敏试验等;根据国际食源性疾病分子分型国家电子网络（National Molecular Subtyping Netwok for Foodborne Surveillance,PulseNet）公布的沙门菌脉冲场凝胶电泳分型方案,用BioNumerics软件对酶切图谱进行聚类分析。结果在4份患者肛拭和1份饭店菜板涂抹样中检出5株维尔肖沙门菌,生化谱均为0017610541566210,血清型为6,7：r：1,2,均对大部分抗生素敏感,但对阿米卡星、妥布霉素和庆大霉素等氨基糖苷类抗生素耐药;对头孢唑啉、头孢替坦等部分头孢类抗生素耐药。经XbaⅠ和BlnⅠ两种限制性内切酶酶切,脉冲场凝胶电泳后,菌株带型相似性均达到100%,提示为同脉冲场凝胶电泳（PFGE）带型。结论病原学检测分析结果结合流行病学调查证实,这是一起因食用被维尔肖沙门菌污染的食物而发生的中毒事件。     

肠炎沙门菌PFGE分子分型及耐药性研究

目的：对本地区及相邻地区2004～2007年分离的肠炎沙门菌菌株的分子分型及耐药性进行分析。方法：采用PFGE进行分子分型,利用药敏卡通过仪器对分离菌株进行药敏检测。结果：5起肠炎沙门菌食物中毒分离的菌株分成3型,其中2型之间存在3条带的差异,菌株间有相近关系。结论：PFGE是一种非常有效的分子分型方法,建立细菌PFGE指纹图谱数据库及PulseNet,对于控制食源性疾病非常重要。     

脉冲场凝胶电泳在沙门菌食物中毒溯源中的应用研究

目的用脉冲场凝胶电泳（PFGE）方法,追踪某次沙门菌食物中毒的来源,确定中毒食品,快速控制传染源。方法对食物中毒中分离的肠炎沙门菌用XbaI酶切总DNA,用脉冲场凝胶电泳（PFGE）法进行分子分型,用BioNumerics软件对PFGE分型图谱进行电子化数据分析,绘出聚类分析图。结果脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型方法对患者样本分离的242株肠炎沙门菌进行分子分型,型别基本一致,表明是同一批食物中毒;从三文治等蛋糕制品中分离的9株菌株与患者分离株图谱完全一致,表明此次食物中毒的源头为某蛋糕厂生产的三文治等食品。结论脉冲场凝胶电泳技术适用于菌株的同源性的分析和传染源的追踪。     

脉冲场凝胶电泳检测一起汤卜逊沙门菌食物中毒

目的:用脉冲场凝胶电泳对一起食物中毒所分离的汤卜逊沙门菌进行同源性分析。方法:对分离的沙门菌进行生化鉴定、血清学分型、药敏试验后,进行PFGE检测并用Bio Numerics软件对PFGE分型图谱进行分析并绘出聚类分析图。结果:此次食物中毒分离到8株沙门菌,其中5株是从病人大便或肛拭分离,1株是从厨房抹布分离,2株是从剩余食物分离。经PFGE分析,病人的5株和剩余羊肉的1株完全相同,牛肉和抹布中的2株有1～2条电泳条带的差异。结论:此次食物中毒是由羊肉携带的汤卜逊沙门菌引起。     

2010—2011年上海市闵行区腹泻患者病原菌检测结果

目的了解上海市闵行区腹泻病原菌的分布和药物敏感情况,为临床合理用药及预防控制工作提供科学依据。方法对闵行区中心医院、市五医院及各社区卫生服务中心腹泻患者的肛拭子标本进行病原菌分离检测,并用K-B法对检测出的致病菌进行药物敏感试验。结果 2010—2011年标本共计11 035件,阳性检出率为9.41%。检出的致病菌以副溶血性弧菌为主,其次是志贺菌和沙门菌。其每年的阳性检出率分别为9.59%、9.19%。这3种致病菌对环丙沙星、庆大霉素、头孢类抗生素敏感,对利福平、萘啶酸高度耐药。结论该区腹泻患者中的致病菌以副溶血性弧菌为主,其次是志贺菌和沙门菌,有明显的季节性。根据药物敏感试验结果,应加强耐药性监测和防治,临床上使用抗菌药更应慎重。     

广州市市售食品中部分沙门菌耐药性及分子分型特征

目的 分析近年来广州市市售食品中部分沙门菌的耐药情况和分子分型特征,为广州市沙门菌疾病的防控提供实验室数据.方法 对分离到的沙门菌进行血清分型,药物敏感性试验和脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE),并用BioNumerics软件分析菌株间的同源性.结果2016-2...