非小细胞肺癌中Snail、HIF-1α和E-cadherin表达的临床意义及相关性

目的探讨Snail、乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、E-钙黏素(E-cadherin)在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达的临床意义及相关性。方法采用免疫组织化学法检测62例NSCLC患者肺癌组织和20例癌旁组织Snail、HIF-1α、E-cadherin蛋白表达,并分析与临床病理因素的关系。结果肺癌组织中Snail、HIF-1α及E-cadherin阳性表达率分别为64.5%、59.7%和54.8%,癌旁组织分别为15%、10%和100%。三种蛋白在肺癌组织及癌旁组织表达差异有统计学意义(P<0.05)。Snail和HIF-1α表达升高及E-cadherin降低与肺癌临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。HIF-1α和Snail表达均与E-cadherin表达呈负相关性(P<0.05),但HIF-1α和Snail表达未显示相关性(P>0.05)。结论 Snail和HIF-1α表达升高、E-cadherin表达降低与肺癌发生发展和转移有关,Snail、HIF-1α和E-cadherin检测有助于评估肺癌恶性程度及预后。     

食管癌99mTc-HL91乏氧显像和HIF-1α表达水平的相关性研究

目的:研究食管癌99mTc-HL91乏氧显像以及与乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平的相关性。方法:50例食管癌患者行SPECT99mTc-HL91乏氧显像,利用感兴趣区技术分别勾画各时相肿瘤(T)和相应正常食管部位(N)放射性计数比值,即T/N值,免疫组化方法检测肿瘤组织HIF-1α表达水平。结果:50例病灶对99mTc-HL91的摄取均高于相应正常组织,99mTc-HL91摄取程度与肿瘤病理分级无相关关系(P>0.05);注射99mTc-HL91 4小时后SPECT显像颈段和胸上段食管癌T/N值为2.04±0.38,胸中段食管癌T/N值为2.16±0.32,胸下段食管癌T/N值为2.18±0.41,三者无显著性差异(P>0.05);病灶的T/N值为1.36-4.43(中位值2.45),免疫组化结果显示表达HIF-1α的细胞数为23.1%-76.9%(中位数52.9%),两者之间呈正相关(P<0.05)。结论:食管癌组织对乏氧显像剂99mTc-HL91有显著摄取,摄取值与肿瘤病理分级及病变部位无相关性,但与HIF-1α的表达正相关。     

热疗通过下调Notch1/Jagged1/Hes1诱导舌鳞癌细胞凋亡的初步研究北大核心CSCD

目的观察舌鳞癌细胞Cal-27短时多次热疗的最佳间隔时间并探究Notch信号通路在热疗诱导舌鳞癌细胞凋亡中的作用。方法将Cal-27细胞置入42℃培养箱热疗45 min,分别在6、12、24、48、72 h后进行第2次热疗,并在热疗结束后0、12、24 h通过CCK-8实验检测细胞增殖能力变化。确定最佳热疗间隔时间后进行多次热疗,分别通过CCK-8实验及流式细胞术检测热疗对Cal-27细胞增殖及凋亡能力的影响。通过实时反转录PCR实验及蛋白质印迹法实验分析Notch1、Jagged1、发状分裂相关增强子1(Hes1)的mRNA及蛋白表达变化。实验数据以x^(-)±s表示,两组间比较采用单因素方差分析。结果每隔12 h给予42℃45 min热疗1次可持续抑制舌鳞癌Cal-27细胞的增殖(P<0.05)。在热疗持续进行7次后与对照组相比,热疗可明显抑制舌鳞癌Cal-27细胞的增殖并诱导其凋亡(P<0.05),且热疗组细胞的Notch1、Jagged1、Hes1的mRNA及蛋白表达均显著降低(P值均<0.05)。结论12 h热疗1次为抑制舌鳞癌Cal-27细胞增殖的最佳间隔时间,其机制可能与热疗通过抑制Notch信号通路的表达诱导舌鳞癌Cal-27细胞凋亡有关。     

热疗通过下调Notch1/Jagged1/Hes1诱导舌鳞癌细胞凋亡的初步研究

目的观察舌鳞癌细胞Cal-27短时多次热疗的最佳间隔时间并探究Notch信号通路在热疗诱导舌鳞癌细胞凋亡中的作用。方法将Cal-27细胞置入42℃培养箱热疗45 min, 分别在6、12、24、48、72 h后进行第2次热疗, 并在热疗结束后0、12、24 h通过CCK-8实验检测细胞增殖能力变化。确定最佳热疗间隔时间后进行多次热疗, 分别通过CCK-8实验及流式细胞术检测热疗对Cal-27细胞增殖及凋亡能力的影响。通过实时反转录PCR实验及蛋白质印迹法实验分析Notch1、Jagged1、发状分裂相关增强子1(Hes1)的mRNA及蛋白表达变化。实验数据以xˉ±s表示, 两组间比较采用单因素方差分析。结果每隔12 h给予42℃ 45 min热疗1次可持续抑制舌鳞癌Cal-27细胞的增殖(P<0.05)。在热疗持续进行7次后与对照组相比, 热疗可明显抑制舌鳞癌Cal-27细胞的增殖并诱导其凋亡(P<0.05), 且热疗组细胞的Notch1、Jagged1、Hes1的mRNA及蛋白表达均显著降低(P值均<0.05)。结论 12 h热疗1次为抑制舌鳞癌Cal-27细胞增殖...     

舌鳞状细胞癌组织中硫氧还蛋白和硫氧还蛋白还原酶-1的表达及其意义

目的：研究硫氧还蛋白（Trx）和硫氧还蛋白还原酶-1（TrxR1）在舌鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法：收集28例舌鳞癌组织和10例癌旁上皮组织,采用免疫组织化学SP三步法检测Trx和TrxR1蛋白在两种组织中的表达水平,并分析其表达与临床病理特征的关系。结果：舌鳞状细胞癌组织中的Trx和TrxR1蛋白表达水平明显高于癌旁正常上皮组织,癌组织和癌旁正常组织的Trx IOD值分别为（2.84±0.34）×10⁸和（3.91±3.00）×10⁷（P < 0.01）,TrxR1 IOD分别为（1.88±0.29）×10⁸和（0.69±0.32）×10⁷（P < 0.05）;Trx和TrxR1蛋白表达水平在不同肿瘤大小、分化程度组间表达的差异均具有统计学意义（P均 < 0.05）;Trx和TrxR1表达水平之间呈正相关关系（r=0.504,P < 0.05）,且Trx和TrxR1高表达组与低表达组的生存率差异具有统计学意义（P < 0.05）。结论：硫氧还蛋白及其还原酶-1可能为舌鳞状细胞癌的药物治疗靶点和早期诊断、肿瘤筛查的重要临床指标。     

乏氧条件下HIF-1α通过上调PD-L1促进鼻咽癌恶性发展的机制

目的 探讨乏氧条件下HIF-1α通过上调PD-L1促进鼻咽癌恶性发展的机制。方法 选取人类鼻咽癌细胞系CNE2细胞进行实验。设置常氧组（20%O2）、乏氧组（1%O₂）、HIF-1α-siRNA+乏氧组和NCsiRNA+乏氧组。MTT实验检测各组细胞增殖率;流式细胞术检测各组细胞凋亡;RT-PCR检测各组细胞中HIF-1α、STAT3和PD-L1 mRNA表达的变化;Western blot检测不同处理条件下各组细胞HIF-1α、STAT3和PD-L1蛋白表达的变化及STAT3磷酸化情况。结果 MTT实验显示,乏氧组和转染细胞增殖率显著高于常氧组（P=0.000）,HIF-1α-siRNA+乏氧组的细胞增殖率明显低于常氧组、乏氧组和NC-siRNA+乏氧组（P=0.000）。流式分析显示,HIF-1α-siRNA+乏氧组的细胞凋亡率显著高于其他三组（P=0.001）。RT-PCR检测显示,HIF-1α-siRNA+乏氧组的HIF-1α、PD-L1和STAT3 mRNA水平显著低于乏氧组和NC-siRNA+乏氧组。蛋白印迹结果显示,HIF-1α、PD-L1和STAT3蛋白表达趋势与mRNA分子水平趋势一致。HIF-1α-siRNA+乏氧组pSTAT3蛋白水平也显著低于乏氧组和NC-siRNA+乏氧组（P=0.001）。结论 乏氧微环境下HIF-1α有可能通过STAT3上调PD-L1表达,进而促进癌细胞免疫逃逸,导致鼻咽癌恶性发展。     

紫云英苷通过上调PHD2抑制缺氧诱导的卵巢癌细胞增殖和侵袭

目的 探索紫云英苷(ATG)抑制卵巢癌细胞HIF-1α表达及细胞增殖和侵袭的作用及机制。方法 分别给予缺氧条件培养的OVCAR-8和SK-OV-3细胞ATG(ATG组)或ATG联合PHD2抑制剂IOX2(ATG+IOX2组)处理24h,并以仅缺氧培养24h的细胞为空白对照。采用Western blot和实时荧光定量PCR检测各组细胞HIF-1α、PHD2、PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白和mRNA表达变化;以正常条件培养的细胞为阴性对照,采用缺氧试剂盒检测ATG处理后细胞缺氧状态变化;采用Transwell实验检测各组细胞侵袭能力;采用CCK-8试剂盒检测各组细胞增殖活力。分别以梯度浓度的ATG联合梯度浓度的卡铂或顺铂处理OVCAR-8和SK-OV-3细胞72h后采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖活力,并进行联合效应分析。结果 缺氧培养条件下,与空白对照组相比,ATG组OVCAR-8和SK-OV-3细胞PHD2蛋白及mRNA表达均升高,细胞增殖和侵袭能力均降低,HIF-1α蛋白表达均减少,PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白及mRNA表达均降低,但HIF-1α的mRNA水平以及细胞缺氧状态无明显变化;而与ATG组相比,ATG+IOX2组OVCAR-8和SK-OV-3细胞增殖和侵袭能力均增加,PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白和mRNA表达及HIF-1α蛋白表达均升高,但HIF-1α的mRNA水平无明显变化。此外,ATG可明显增强OVCAR-8和SK-OV-3细胞对顺铂和卡铂的敏感性,具有较好的联合效应。结论 ATG可通过上调PHD2表达,促进缺氧诱导的HIF-1α降解,进而抑制卵巢癌细胞增殖和侵袭。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂对乏氧宫颈癌HeLa细胞放射敏感度的影响

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(trichostatin A,TSA)对乏氧状态下人宫颈癌HeLa细胞放射敏感度的影响。方法:应用不同浓度TSA作用经乏氧预处理的人宫颈癌HeLa细胞12、24、48和72 h,MTT法检测HeLa细胞的增殖率,计算半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)和IC10值;克隆形成实验检测TSA(IC10)作用24 h对乏氧HeLa细胞的放射增敏效应;免疫细胞化学法检测TSA(IC10)对HeLa细胞中乏氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达的影响。结果:TSA对乏氧宫颈癌HeLa细胞的增殖率有明显的抑制作用,且随着TSA浓度的增加和作用时间的延长,其抑制作用逐渐增强。与乏氧照射组比较,TSA(IC10)作用乏氧HeLa细胞24 h,可增加细胞的放射敏感度(P<0.05)。乏氧HeLa细胞中HIF-1α和VEGF蛋白的表达明显高于常氧组细胞;与乏氧组比较,TSA(IC10)作用乏氧HeLa细胞24 h后,细胞中HIF-1α和VEGF蛋白表达下调。结论:TSA可能通过抑制乏氧HeLa细胞中HIF-1α和VEGF蛋白的表达而发挥放射增敏效应。     

RNA干扰沉默乏氧诱导因子-1a对紫杉醇诱导食管鳞癌EC9706细胞凋亡的影响

目的:探讨食管癌乏氧耐药机制,观察乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)对紫杉醇诱导的人食管鳞癌EC9706细胞凋亡的影响。方法:用CoCl2化学乏氧法建立乏氧模型;应用Western blot测定RNA干扰前后,乏氧条件下HIF-1α蛋白表达的变化;应用原位末端标记TUNEL法及AnnexinⅤ/PI双标记法检测RNA干扰前后紫杉醇对乏氧培养细胞EC9706细胞凋亡的影响。结果:EC9706细胞经75μmol/L的CoCl2作用4 h后,即可诱导HIF-1α蛋白表达。RNA干扰技术能明显抑制乏氧诱导的HIF-1α蛋白表达。相同的乏氧条件下,转染HIF-1α-siRNA组细胞的凋亡率与未转染组或转染control-siRNA组相比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乏氧条件下HIF-1α蛋白对紫杉醇诱导的EC9706细胞凋亡具有抑制作用。以HIF-1α为新的靶点可望提高食管癌的治疗水平。     

人肺癌组织E-cadherin和PTEN及HIF-1α蛋白表达临床意义的探讨

目的:探讨E-cadherin(E-cd)、PTEN和HIF-1α蛋白在肺癌组织中表达及其临床意义。方法:应用免疫组化方法检测99例肺癌组织E-cd、PTEN和HIF-1α蛋白的表达情况。结果:E-cd、PTEN和HIF-1α蛋白在99例肺癌组织中的阳性率分别为63.6%(63/99)、62.6%(62/99)和56.6%(56/99),在癌旁正常组织中的阳性表达率分别为100%(20/20)、100%(20/20)和0,差异均有统计学意义,P<0.05。E-cd蛋白在细支气管肺泡癌组的表达高于小细胞癌组,而HIF-1α蛋白在细支气管肺泡癌组的表达低于小细胞癌组,差异均有统计学意义,P<0.05;其余各组织学类型之间3种蛋白表达差异均无统计学意义,P>0.05。E-cd和PTEN蛋白在淋巴结无转移组的表达均高于淋巴结转移组,P<0.05;而HIF-1α蛋白在两组间的表达差异无统计学意义,P>0.05。E-cd和PTEN蛋白在Ⅰ～Ⅱ期的表达高于Ⅲ～Ⅳ期,P<0.01;而HIF-1α蛋白在Ⅰ～Ⅱ期的表达低于Ⅲ～Ⅳ期,P<0.05。E-cd蛋白表达与PTEN蛋白表达呈正相关,P<0.05;HIF-1α蛋白与E-cd、PTEN蛋白表达均呈负相关,P<0.05。结论:E-cd、PTEN和HIF-1α蛋白的异常表达可能在肺癌的恶性演进中起重要作用,3者在肺癌的侵袭转移中可能起某种协同作用。     

缺氧状态下人胰腺癌细胞对吉西他滨反应的实验研究

目的:观察缺氧状态对人胰腺癌细胞吉西他滨化疗敏感性的影响并分析其相关机制。方法:将人胰腺癌细胞SW1990分为常氧组、缺氧组、常氧+吉西他滨组和缺氧+吉西他滨组。MMT法检测各组细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡、Real-time PCR和Western blot分别检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、多药耐药基因(MDR-1)mRNA和蛋白的表达。结果:与常氧+吉西他滨组相比,低氧+吉西他滨组的细胞增殖率明显增加,细胞凋亡率显著下降(P<0.05);低氧组和低氧+吉西他滨组HIF-1α蛋白表达分别显著高于常氧组(P<0.05或P<0.01);与常氧组相比,低氧组和低氧+吉西他滨组的MDR1 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:缺氧状态可增加人胰腺癌细胞SW1990对吉西他滨的化疗抵抗,其机制与缺氧环境可诱导HIF-1α和MDR1基因表达有关。     

肝癌组织中Glut1与HIF-1α基因蛋白表达及意义

背景与目的:葡萄糖转运蛋白(Glut)作为葡萄糖跨过细胞膜进入细胞的载体,在恶性肿瘤糖酵解增强的过程中起着重要的作用.缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是介导细胞对缺氧微环境进行适应性反应的关键性转录调控基因,能激活许多缺氧反应性基因的表达,其中包括促进肿瘤细胞Glut基因的表达,以满足在乏氧状态下,肿瘤生长的能量需求.本文旨在探讨肝细胞癌组织中Glut1和HIF-1α的表达情况及其临床意义,并分析两者的相关性.方法:用免疫组织化学EnVision法检测45例肝细胞癌、11例肝正常组织中Glut1和HIF-1α的表达.结果:Glut1和HIF-1α在肝癌组织中的阳性率(66.7%,73.3%)明显高于正常肝组织(0,0)(P＜0.01).在肝癌组织中Glut1和HIF-1α的表达均与肿瘤大小、病理分级、临床分期、有无淋巴结转移、有无门静脉癌栓有关(P＜0.05).肝癌组织中Glut1表达越强,HIF-1α表达也越强,两者的表达呈正相关(r=0.583, P＜0.01).结论:Glut1和HIF-1α的异常表达与肝癌的发生、发展有一定的关系.可能存在HIF-1α通过上调Glut1的表达促进肝细胞癌的发展的机制.     

乏氧诱导因子-1α在非小细胞肺癌中的表达研究

目的探讨乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义。方法采用免疫组织化学技术检测乏氧诱导因子-1α在68例非小细胞肺癌标本中的表达。结果(1)HIF-1α在非小细胞肺癌中的总的阳性表达率为57.35%(39/68);(2)腺癌中HIF-1α的阳性表达率为54.76%(23/42),鳞癌中HIF-1α的阳性表达率61.54%(16/26),腺癌与鳞癌之间HIF-1α的阳性表达率无显著差异(P>0.05);中高分化的肿瘤标本中HIF-1α的阳性表达率为74.28%(26/35)高于低分化的肿瘤标本中HIF—1α的阳性表达率39.39%(13/33)(P<0.05);(3)HIF-1α的表达与性别、年龄及有无淋巴结转移和临床分期无关。结论HIF-1α在非小细胞肺癌中有着较高的表达率,且与肿瘤的分化程度有一定的关系。     

siAKAP12对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及机制

目的:探讨常氧和乏氧环境下下调AKAP12表达对人宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响,并探索其可能作用机制。方法:常氧和乏氧环境下体外培养人宫颈癌CaSki细胞并转染siRNA阴性片段、siAKAP12特异性片段,应用CCK-8和流式细胞术检测细胞的增殖活性、凋亡率,应用Real-time PCR、Western blot法检测各组细胞中AKAP12、HIF-1α、CAⅨ mRNA和蛋白的表达。结果:在常氧及乏氧状态下,siAKAP12后,CaSki 细胞增殖能力均明显增强(P＜0.05),但乏氧下细胞增殖能力低于常氧状态(P＜0.05)。乏氧相对常氧,CaSki细胞凋亡增加(P＜0.01),siAKAP12后,CaSki细胞凋亡率却明显降低(P＜0.05);AKAP12相同处理情况下,HIF-1α、CAⅨmRNA表达水平均呈上升趋势(P＜0.05);siAKAP12后AKAP12蛋白水平显著下调,而HIF-1α、CAⅨ蛋白均呈上调表达,但两者乏氧下低于常氧表达水平(P＜0.05)。结论:常氧和乏氧环境下,抑制AKAP12基因可上调CaSki细胞增殖能力,并降低其凋亡,其作用可能是通过调控 HIF-1α-CAⅨ信号通路实现的。     

基于槲皮素标记的金属有机框架放疗联合阿霉素诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的研究

目的 探讨基于槲皮素(Quercetin,QU;3,3′,4′,5,7-五羟基黄酮)标记的金属有机框架(Zr metal organic frameworks,Zr-MOF)放疗(Radiation therapy,RT)联合阿霉素(Doxorubicin,DOX)对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法 将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、RT组、阿霉素处理组(Zr-MOF-DOX+RT)、QU处理组(Zr-MOF-QU+RT)及联合处理组(Zr-MOF-QU-DOX+RT);采用细胞克隆形成法检测各处理组HeLa细胞的增殖活性;蛋白印迹法及免疫荧光法检测各组细胞凋亡蛋白Caspase-3及缺氧诱导因子1α(Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达水平。结果 联合处理组细胞的增殖能力明显低于其他各组,差异具有统计学意义(P＜0.05);联合处理组HIF-1α蛋白表达量明显低于其他各组(P＜0.05),联合处理组Caspase-3蛋白的表达含量明显高于其他各组(P＜0.05)。结论 基于槲皮素标记的金属有机框架放疗联合阿霉素对HeLa细胞的抑制作用更显著,联合处理组通过上调凋亡蛋白Caspase-3及下调HIF-1α蛋白表达进而产生更强的抗肿瘤作用。     

缺氧调控端粒酶活性及抑制鼻咽癌细胞增殖实验研究

目的探讨缺氧及siRNA沉默缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)后对鼻咽癌细胞中端粒酶催化亚单位(telomerase catalytic subunit,hTERT)、细胞周期和化疗耐药的影响。方法采用三气培养箱对鼻咽癌细胞5-8F和CNE2进行缺氧处理(1%O2),蛋白质印迹法检测不同乏氧时相(0~72h)HIF-1α和hTERT蛋白的表达。将HIF-1α基因特异性siRNA分别转染鼻咽癌细胞株5-8F和CNE2,筛选出沉默效率最高的siRNA,实验分为未处理组(常氧)、未处理组(缺氧)、Negative-siRNA(缺氧)和HIF-1α-siRNA(缺氧),荧光定量PCR及蛋白质印迹检测瞬时转染后hTERT及HIF-1α的表达。流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析缺氧或沉默HIF-1α后对细胞周期的影响。MTT法检测缺氧或沉默HIF-1α后,鼻咽癌细胞对顺铂(DDP)和5-氟尿嘧啶(5-FU)的化疗敏感性。结果缺氧处理0~72h后鼻咽癌5-8F细胞HIF-1α(F=37.147,P<0.001)和hTERT(F=70.069,P<0.001)蛋白的表达上调,差异有统计学意义。HIF-1α-siRNA对5-8F细胞瞬时转染率>98%。HIF-1α-siRNA组hTERT mRNA表达量为0.37±0.05,显著低于未处理组(缺氧)的1.00±0.00和Negative-siRNA(缺氧)的0.95±0.01,F=360.339,P<0.001;hTERT蛋白表达量为(0.27±0.05),显著低于未处理组(缺氧)0.54±0.00和Negative-siRNA组(缺氧)0.53±0.01,F=24.010,P<0.001。未处理组(缺氧)G0/G1期细胞比例明显增加(45.63±2.01)%,显著高于未处理组(常氧)的(26.75±1.28)%,P<0.001。5-8F细胞未处理组(常氧)对5-FU的IC50分别为(17.30±3.31)μg/mL,未处理组(缺氧)为(32.04±12.75)μg/mL,Negative-siRNA组为(33.90±0.87)μg/mL,HIF-1α-siRNA组为(13.72±2.36)μg/mL,F=3.704,P<0.001。5-8F细胞缺氧组对DDP的化疗敏感性也降低,沉默HIF-1α后,5-8F细胞对DDP的化疗敏感性明显提高。除细胞周期外,CNE2与5-8F的结果均一致。结论缺氧促使鼻咽癌细胞发生G1/S阻滞及化疗耐药,可能与上调hTERT表达,进而上调端粒酶活性有关;沉默HIF-1α显著逆转缺氧诱导的肿瘤耐药并下调端粒酶活性。     

HIF-1α基因表达沉默对鼻咽癌组织VEGF和CXCR4表达影响的研究

目的：探讨在乏氧条件下，HIF-1α、VEGF及CXCR4在鼻咽癌细胞中的表达，并探讨HIF-1α与VEGF和CXCR4的关系。方法：利用荧光定量PCR方法检测不同乏氧时相HIF-1α、VEGF及CXCR4mRNA表达。利用Westernbolt检测HIF-1α蛋白表达。构建特异性的HIF-1α慢病毒干扰载体，利用慢病毒感染鼻咽癌细胞，杀稻瘟菌素进行药物筛选，利用荧光定量PCR和Westernblot检测干扰效果。利用荧光定量PCR检测HIF-1α表达沉默后，鼻咽癌细胞VEGF和CXCR4的表达变化。结果：在乏氧条件下，鼻咽癌细胞CNE2HIF-1αmRNA表达稳定，蛋白表达增强，VEGF及CXCR4的mRNA表达均明显增强。利用特异性的HIF-1α慢病毒干扰鼻咽癌细胞CNE2，CNE2细胞中HIF-1α表达降低了81％，说明HIF-1α载体构建成功。HIF-1α表达沉默后，VEGF及CXCR4的表达水平也明显降低。结论：乏氧可以诱导鼻咽癌细胞HIF-1α、VEGF和CXCR4的表达，且VEGF和CXCR4的表达受HIF-1α的表达调控。     

乏氧诱导因子-1α在非小细胞肺癌中的表达研究(英文)

目的探讨乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义。方法采用免疫组织化学技术检测乏氧诱导因子-1α在68例非小细胞肺癌标本中的表达。结果 (1)HIF-1α在非小细胞肺癌中的总的阳性表达率为57.35%(39/68);(2)腺癌中HIF-1α的阳性表达率为54.76%(23/42), 鳞癌中 HIF-1α的阳性表达率61.54%(16/26),腺癌与鳞癌之间 HIF-1α的阳性表达率无显著差异(P>0.05);中高分化的肿瘤标本中 HIF-1α的阳性表达率为74.28%(26/35)高于低分化的肿瘤标本中 HIF-1α的阳性表达率39.39%(13/33)(P<0.05);(3)HIF-1α的表达与性别、年龄及有无淋巴结转移和临床分期无关。结论 HIF-1α在非小细胞肺癌中有着较高的表达率,且与肿瘤的分化程度有一定的关系。     

HIF-1α和碳酸酐酶Ⅸ在鼻咽癌中表达及其与患者预后关系

肿瘤内血管结构和功能异常及肿瘤内氧分压下降或氧弥散障碍,均可导致恶性实体瘤内乏氧^[1]。乏氧可诱导启动一系列复杂的基因表达程序,此过程常由HIF-1α介导调控。碳酸酐酶Ⅸ是HIF-1α下游的一个与肿瘤乏氧相关的靶基因。目前已发现多种恶性肿瘤组织中HIF-1α和碳酸酐酶Ⅸ呈高表达状态,且其表达状况与肿瘤发生发展、放化疗抗拒和不良预后相关^[2-3]。本研究对129例鼻咽癌标本HIF-1α和碳酸酐酶Ⅸ蛋白表达进行检测,探讨两者表达状况与鼻咽癌临床病理特征及患者预后关系。