组织特异性启动子及其在肿瘤基因治疗中的应用

随着基因治疗研究的深入,愈来愈多的组织特异性启动子已被用于调控目的基因在靶器官中的表达,尤其是携带治疗性基因可以实现对肿瘤组织的特异性杀伤作用,组织特异性启动子的应用已成为基因治疗中的一个重要手段,现综述各系统启动子的分类及其应用.     

基因矫正治疗中的启动子研究

利用组织或器官特异性启动子限制目的基因只在靶肿瘤或靶器官中表达是基因治疗的一种有效途径,如AFP启动子、CEA启动子、Tyr启动子等.而利用应激刺激的可诱导启动子则可能解决组织或器官特异性启动子的弱表达问题,如Hsp启动子、hTERT启动子等.现综述基因矫正治疗在肿瘤基因治疗领域有应用价值的启动子研究进展.     

基因矫正治疗中的启动子研究

利用组织或器官特异性启动子限制目的基因只在靶肿瘤或靶器官中表达是基因治疗的一种有效途径,如AFP启动子、CEA启动子、Tyr启动子等.而利用应激刺激的可诱导启动子则可能解决组织或器官特异性启动子的弱表达问题,如Hsp启动子、hTERT启动子等.现综述基因矫正治疗在肿瘤基因治疗领域有应用价值的启动子研究进展.     

Egr-1启动的融合肿瘤治疗基因研究进展

目前，一种新的提高恶性肿瘤基因治疗特异性的方法是应用放射线诱导的早期生长反应基因-1（Egr-1）启动子来启动治疗基因的表达。现就近几年来放射诱导Egr-1启动子启动下游目的基因的表达在恶性肿瘤治疗方面的研究进展作一综述。     

Egr-1启动的融合肿瘤治疗基因研究进展

目前,一种新的提高恶性肿瘤基因治疗特异性的方法是应用放射线诱导的早期生长反应基因-1(Egr-1)启动子来启动治疗基因的表达。现就近几年来放射诱导Egr-1启动子启动下游目的基因的表达在恶性肿瘤治疗方面的研究进展作一综述。     

自杀基因治疗恶性肿瘤研究进展

恶性肿瘤的基因治疗是现代医学领域的研究热点，其中自杀基因疗法可能成为一种极具潜力和临床应用价值的治疗手段，在治疗范围上，已扩大到全身所有脏器及各种组织类型的恶性肿瘤，在提高其转录靶向调控机制上，已发现了许多特异性启动子元件，来增强自杀基因作用的特异性及可调控性，并已尝试利用辐射诱导来提高其转基因表达的外源性调控机制；此外，采用自杀基因与集落刺激因子(GM—CSF)、细胞因子等联合应用，诱导产生更强的抗肿瘤免疫，进一步增强杀伤肿瘤的效力。     

肿瘤特异性调控元件在基因治疗中的研究进展

肿瘤自杀基因疗法，要求目的基因选择性地表达于肿瘤靶细胞中，方能准确地杀伤肿瘤细胞，保护正常组织，减少毒副作用，特别是随着药物的旁杀作用愈来愈强，对基因表达的肿瘤细胞特异性的要求就显得尤为重要，本文就肿瘤特异性调控元件在基因治疗中的研究作一综述，并对将来可能出现的肿瘤基因治疗模式作一展望。     

增强子对基因表达调控的研究进展

增强子是能够增强启动子转录活性的DNA顺式作用序列,生物信息学的诞生为其研究带来了极大的便利.利用增强子修饰的肿瘤特异性启动子使治疗或效应基因在特定的组织、细胞或器官中表达,实现对肿瘤靶向性治疗,是一种非常有意义的基因治疗途径.     

肿瘤特异性启动子驱动的RNA干扰与肿瘤基因靶向治疗

应用肿瘤特异性启动子如甲胎蛋白启动子、人端粒酶逆转录酶启动子、存活素启动子等,驱动RNA干扰(RNAi)可在肿瘤组织中发挥靶向治疗效应.该方法把肿瘤启动子的特异性和RNAi的高效性有机结合起来,可以实现对肿瘤组织的特异、高效杀伤作用.肿瘤特异性启动子驱动的RNAi在肿瘤基因靶向治疗中发挥重要作用.     

细胞周期特异性Survivin启动子在胶质瘤细胞T98G中活性的初步研究

目的　研究在细胞周期G2 /M期特异性的Survivin基因启动子在多型性胶质母细胞瘤 (glioblastomamultiform ,以下简称胶质瘤 )细胞株T98G中的活性 ,为该启动子在胶质瘤靶向性基因治疗中的应用提供依据。方法　用RT PCR法检测Survivin基因在胶质瘤细胞株T98G及正常肝中的表达 ,用转染荧光素酶报告基因的方法 ,比较不同长度的Survivin基因启动子在非同步化和阻断于G1期细胞中的活性。结果　Survivin基因在T98G胶质瘤细胞中表达 ,而在正常肝细胞中不表达。Survivin基因启动子在非同步化细胞中的活性大约是G1期细胞中的 11倍。结论　Survivin启动子在转录水平上可以选择性地使报告基因在胶质瘤细胞中表达 ,这使它成为一个在胶质瘤基因治疗中有潜力的启动子。     

肺腺癌组织特异性自杀基因治疗实验研究

目的 探讨肺腺癌组织特异性自杀基因治疗的安全性及有效性。方法 采用病毒感染法，将癌胚抗原(CEA)基因启动子所驱动的CD基因的组织特异性逆转录病毒载体(G1CEACDNa)，导入分泌CEA的肺腺癌细胞系A549细胞．研究裸鼠体内抑瘤效果；应用重组逆转录病毒裸鼠体内治疗A549肿瘤，观察G1CEACDNa／5-氟胞嘧啶(5-FC)对A549细胞致瘤裸鼠的治疗作用及毒副反应。结果 (1)将转基因的A549细胞和未转基因的A549细胞接种至裸鼠皮下．两者成瘤性无明显差异；(2)在转基因细胞致瘤裸鼠实验中，5-FC对转CEA启动子调控自杀基因的肿瘤生长具有明显的抑制作用；(3)将G1CEACDNa重组逆转录病毒上清直接注射到裸鼠成瘤部位．然后腹腔内注射5-FC同样获得明显的抑瘤效果；(4)与直接注射5-FU相比，组织特异性自杀基因治疗对骨髓的抑制明显降低。结论 组织特异性自杀基因治疗可能成为肿瘤治疗个体化的重要方法之一。     

肿瘤特异性启动子及其在肿瘤基因靶向治疗中的应用

肿瘤特异性启动子可驱动目的 基因在肿瘤细胞中高效特异性表达,目前常用的有甲胎蛋白启动子、癌胚抗原启动子、前列腺特异性抗原启动子、人端粒酶逆转录酶启动子和多药耐药基因启动子等.利用双启动子、增强子、调控元件或其他物化因素对启动子进行修饰或改造,可增强目的 基因在肿瘤细胞中的表达和定位.肿瘤特异性启动子可耦联自杀基因、抑癌基因、反义核酸、细胞凋亡基因和BNA干扰等,在肿瘤基因靶向治疗中发挥重要作用.     

甲胎蛋白抗肝细胞癌研究进展

甲胎蛋白(AFP)在肝细胞癌(HCC)组织特异高效表达.将外源治疗基因(如自杀基因、免疫基因等)置于AFP启动子/增强子下游,构建靶向特异性转录载体,靶向基因治疗HCC.AFP基因编码的抗原表位多肽可激活人体细胞免疫机制,诱导特异性CTL产生,杀伤HCC细胞.因此AFP完全有可能被利用作为HCC免疫及基因治疗的有效靶向途径.     

卵巢癌中 ECRG4基因启动子甲基化的研究

目的：探讨人食管癌相关基因4（esophageal cancer related gene 4,ECRG4）基因启动子区域在卵巢癌组织中的甲基化状态及临床意义。方法：应用甲基化特异性 PCR 检测 ECRG4基因启动子在50例卵巢癌组织和10例正常卵巢组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析。结果：在卵巢癌组织中 ECRG4甲基化阳性率为36%（18/50）,正常卵巢组织未出现 ECRG4甲基化。ECRG4甲基化与肿瘤淋巴结转移及 Ki -67表达密切相关（P <0.05）。结论：ECRG4甲基化可能是参与卵巢癌发展的重要分子事件。     

甲胎蛋白抗肝细胞癌研究进展

甲胎蛋白（AFP）在肝细胞癌（HCC）组织特异高效表达。将外源治疗基因（如自杀基因、免疫基因等）置于AFP启动子／增强子下游,构建靶向特异性转录载体,靶向基因治疗HCC。AFP基因编码的抗原表位多肽可激活人体细胞免疫机制,诱导特异性CTL产生,杀伤HCC细胞。因此AFP完全有可能被利用作为HCC免疫及基因治疗的有效靶向途径。     

癌症的靶向基因-病毒治疗新进展及抗癌策略

我们创导的“靶向基因-病毒治疗”又有新进展,即癌症的靶向双基因-病毒治疗,能将小鼠移植性肿瘤全部杀灭,研究结果发表于Hepatology及CancerResearch(Highlightpaper)等杂志。在得到好的抗癌作用后,我们着重研究其安全性,故本文又介绍一种独特的癌症双靶向病毒-双基因治疗,其特点是利用癌症特异性启动子调控其特异性抑制基因,如用甲胎蛋白(!-fetoprotein,AFP)调控肝癌特异性抑癌基因LFIRE或HCCS1等,并在此基础上再加一个癌症特异性启动子如hTERT控制腺病毒E1A,构成癌症的双靶向病毒-基因治疗药物,即hTERT-E1A-AFP-E1B-HCCS1(或LFIRE),然后再与一个杀伤功能很强的hTERT-E1A-AFP-E1B-IL-24联合作用,构成癌症的双靶向病毒-双基因治疗。双基因有很好的杀伤性,双靶向有很好的安全性,因此,成为目前开发前景良好的抗癌药物。此外,本文还介绍了一种新型干扰素,它也有可能成为理想的抗癌药物。     

肿瘤基因治疗研究的现状和展望

肿瘤基因治疗取得了飞速发展，我国在肿瘤的基因治疗方面已开展了上当广泛的研究并取得了一定的进展，但在研究的规模和水平上与国外相比仍有差距。把握住肿瘤基因治疗研究的发展方向如获取治疗效果显著的抗肿瘤目的的基因、构建肿瘤细胞特异性表达载体、实现肿瘤靶向性的基因转染并使具体治疗方式简便实用化且清醒地去对待和研究将会有益于肿瘤基因治疗研究的发展。     

核酶在肿瘤基因治疗中的研究进展

核酶是一类具有酶活性的RNA分子，它可以序列特异性地定点切割靶RNA，从而阻断有害基因的表达。作为一种新的基因治疗手段，核酶技术近年来发展迅速，在基因调控、抗病毒复制和灭活癌基因方面有很大的应用潜力。本文就核酶在肿瘤的基因治疗方面的应用作一介绍。     

基因治疗联合放射治疗恶性肿瘤

肿瘤基因治疗就是应用基因工程的方法校正和修复与肿瘤发生有关的变异基因，或通过改变某些细胞的生物学特性增强宿主的抗瘤能力，从而达到治疗肿瘤目的的一类疗法。近年来，随着肿瘤病因学研究的不断深入和生物医学技术的飞速发展，肿瘤基因治疗已成为肿瘤治疗研究的热点之一。虽然目前该疗法中的某些方案已进入临床试验阶段，但由于肿瘤的发生涉及很多基因的改变，很难想象只针对个别基因进行基因治疗就能彻底治愈肿瘤；另外，目前基因转移系统的效率尚难以使每一个肿瘤细胞都受到基因治疗的作用。     

hTERT启动子的克隆及在MCF7乳腺癌细胞中的特异转录活性

背景与目的：利用肿瘤特异性启动子增强肿瘤细胞中治疗基因的转录选择性是达到基因治疗靶向性的有效途径。人端粒酶催化亚基（hTERT）在大部分肿瘤细胞中呈特异性高表达，有可能成为肿瘤特异性启动子。本文扩增了hTERT基因启动子并分别克隆于报告基因重组质粒pEGFP-1和pGL3-Basic，检测并证实hTERT启动子在乳腺癌细胞MCF7中的特异转录活性。方法：采用套式PCR法扩增hTERT启动子，将其分别克隆到含报告基因增强绿色荧光蛋白（EGFP）的重组质粒pEGFP-1和含Luciferase的重组质粒pGL3-Basic，经脂质体分别转染人乳腺正常上皮细胞系HBL100和乳腺癌细胞MCF7，荧光显微镜观察EGFP的表达情况，并测定两种细胞中荧光素酶转录表达差异。结果：与正常细胞HBL100相比，hTERT启动子在MCF7细胞呈现强的绿色荧光表达；荧光素酶活性检测与其一致，hTERT启动子在MCF7乳腺癌细胞的荧光素酶相对活性RLU／U值（33784）约相当于HBL100细胞中（2400）的15倍。结论：hTERT启动子在乳腺癌MCF7细胞中具有很强的特异性，为进一步开发肿瘤的特异性基因治疗奠定实验基础。