miR-34a、CD133在胰腺癌中的表达及临床意义

目的:检测胰腺癌肿瘤组织中微小RNA-34a与CD133表达情况，并探究其临床意义。方法:选取2012年12月至2014年2月本院收治的胰腺癌患者74例，取胰腺癌肿瘤组织及癌旁组织。采用实时定量PCR（qRT-PCR）法检测胰腺癌肿瘤组织及癌旁组织中miR-34a表达水平，采用免疫组化法检测CD133表达水平。结果:胰腺癌肿瘤组织miR-34a表达水平低于癌旁组织（P＜0.05），CD133 mRNA表达水平较癌旁组织显著升高（P＜0.05）；CD133在胰腺癌肿瘤组织中阳性表达率显著高于癌旁组织（P＜0.05）。miR-34a、CD133表达与胰腺癌肿瘤分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移有关（P＜0.05）；miR-34a、CD133表达与胰腺癌患者年龄、性别无显著相关性（P＞0.05）。miR-34a低表达胰腺癌患者3年总生存率显著低于高表达患者（P＜0.05），CD133高表达胰腺患者3年总生存率显著低于CD133低表达者（P＜0.05）。miR-34a、CD133表达、肿瘤大小和肿瘤分化程度是影响胰腺癌患者预后的独立危险因素。胰腺癌肿瘤组织miR-34a与CD133 mRNA相对表达水平显著负相关（P＜0.05）。结论:miR-34a在胰腺癌组织中低表达，CD133高表达，与患者肿瘤分化程度、肿瘤大小、临床分期有关，可能作为胰腺癌病情监测及术后预后的生物学指标。     

OTUD3和PTEN在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系

目的:检测乳腺癌组织中OTUD3与PTEN表达,分析其与临床病理特征及预后的关系。方法:选取2014年1月至2014年12月于我院行手术治疗的79例乳腺癌患者癌组织及其对应癌旁正常组织标本。采用免疫组化染色法、Western blot 检测、RT-PCR法分别检测癌组织及癌旁正常组织中OTUD3与PTEN表达,并分析两者表达相关性;探究OTUD3、PTEN与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。结果:乳腺癌组织中PTEN阳性主要定位于细胞核,OTUD3阳性主要定位于细胞质。乳腺癌组织中OTUD3和PTEN阳性率、蛋白表达量及mRNA水平显著低于癌旁正常组织（P均<0.05）。乳腺癌组织中OTUD3、PTEN表达呈正相关（r=0.580,P=0.000）。PTEN与肿瘤直径、组织学分级、TNM分期、淋巴结转移、分子分型及ER/PR/HER-2/p53状态显著相关（P＜0.05）;OTUD3与组织学分级、TNM分期、淋巴结转移及p53显著相关（P＜0.05）。OTUD3及PTEN阴性表达组患者生存率显著低于阳性表达组（Log-rank检验P＜0.05）,两者不同表达是影响乳腺癌预后生存的独立危险因素之一（P＜0.05）。结论:乳腺癌组织中OTUD3、PTEN低表达,两者表达呈正相关,与组织学分级、TNM分期、淋巴结转移及p53等临床病理特征及预后显著相关,有望成为临床预后预测的有效因子。     

食管癌组织中EGFR和PTEN蛋白的表达

目的 探讨食管癌组织中表皮生长因子受体(EGFR)和PTEN蛋白表达及意义.方法 选择食管癌组织标本60例和正常食管组织60例,对所有标本采用免疫组化方法进行EGFR和PTEN蛋白检测.结果 EGFR在食管癌组织中表达阳性率为56.67％,高于在癌旁正常食管组织中的11.37％ (P ＜0.05);PTEN在食管癌组织中表达阳性率为46.67％,低于癌旁正常食管组织中的96.67％ (P ＜0.05).EGFR和PTEN蛋白的表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P＜0.05),而与患者年龄、性别无关(P＞0.05).食管癌组织中EGFR与PTEN的蛋白表达呈负相关(r=-0.616,P＜0.05).结论 EGFR蛋白的高表达和PTEN蛋白的低表达可能参与了食管癌的发生、发展过程,在食管癌的侵袭和转移过程中发挥了重要作用,可作为预测食管癌预后的重要指标.     

长链非编码RNA PVT1和miR-30d-5p在肝内胆管癌组织中的表达及其与预后相关性分析

目的:分析肝内胆管癌（ICC）组织中长链非编码RNA PVT1（lncRNA PVT1）和miR-30d-5p的表达，探讨其与ICC患者临床病理因素及预后的关系。方法:收集2012年3月至2015年9月间经手术切除的47例ICC组织和相应癌旁组织（≥5 cm）。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测组织中lncRNA PVT1、miR-30d-5p表达水平，分析二者表达与临床病理因素及3年总生存率（OS）的关系。结果:ICC组织中lncRNA PVT1表达水平显著高于癌旁组织（P＜0.05），miR-30d-5p表达水平明显低于癌旁组织（P＜0.05）。lncRNA PVT1表达与ICC患者肿瘤直径、组织分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关（P＜0.05），miR-30d-5p表达与ICC患者组织分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关（P＜0.05）。ICC组织中lncRNA PVT1表达与miR-30d-5p表达呈负相关（P＜0.05）。lncRNA PVT1低表达者3年OS明显高于高表达者（P＜0.05），miR-30d-5p高表达者3年OS显著高于低表达者（P＜0.05）。组织分化程度、TNM分期、lncRNA PVT1表达、miR-30d-5p表达均是影响ICC患者预后的独立危险因素（P＜0.05）。结论:ICC组织中lncRNA PVT1高表达、miR-30d-5p低表达，二者表达与ICC患者组织分化程度、TNM分期及预后有关。     

肝细胞癌组织中lncRNA H19、miR-200a表达变化与临床预后的相关性分析

目的:观察肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中lncRNA H19、miR-200a表达情况,并探讨其与HCC患者临床病理特征及预后的关系。方法:选取57例HCC患者经手术切取的HCC组织和相应癌旁组织（≥癌灶边缘5 cm）,以及60例因肝血管瘤行手术切除的周围正常肝组织。采用qRT-PCR法检测组织中lncRNA H19和miR-200a表达水平;分析其与HCC患者临床病理特征及5年总生存率（overall survival,OS）的关系。结果:HCC组织中lncRNA H19表达水平明显高于癌旁组织和正常肝组织（P＜0.05）;HCC组织中miR-200a表达水平显著低于癌旁组织和正常肝组织（P＜0.05）。HCC组织中lncRNA H19、miR-200a表达与HCC患者分化程度、TNM分期、AFP值及是否侵袭转移有关（P＜0.05）。HCC组织中lncRNA H19表达与miR-200a表达呈负相关（P＜0.05）。HCC患者lncRNA H19低表达5年OS明显高于高表达（P＜0.05）;HCC患者miR-200a高表达5年OS显著高于低表达（P＜0.05）。分化程度、TNM分期、lncRNA H19及miR-200a表达均是影响HCC患者预后的独立危险因素（P均＜0.05）。结论:HCC组织中lncRNA H19表达上调、miR-200a表达下调,二者异常表达与病情程度及5年OS关系密切,可能相互作用参与HCC发展。     

miR-24-3p在胰腺癌中的表达及意义

目的:分析57例胰腺癌患者的癌组织与癌旁组织中的miR-24-3p的表达情况及临床意义。方法:收集57例胰腺癌初诊患者术后的癌组织及癌旁组织，用实时荧光定量PCR技术检测miR-24-3p在胰腺癌组织和相应癌旁组织中的表达情况，用χ2检验分析miR-24-3p的表达与胰腺癌患者临床病理指标之间的相关性；用Kaplan－Meier单因素分析计算累积生存率和Log-rank检验分析胰腺癌组织中miR-24-3p的表达量与胰腺癌患者术后预后的关系。结果:miR-24-3p在胰腺癌组织中相对高表达；miR-24-3p的表达与患者的年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤位置和血管浸润无关（P＞0.05）,而与肿瘤的大小、TNM分期和淋巴结转移相关（P＜0.05）；miR-24-3p高表达组患者的3年累计生存率明显低于miR-24-3p低表达组患者（P＜0.05）。结论:miR-24-3p在胰腺癌组织中的表达明显高于其癌旁组织，提示其参与了胰腺癌的发生发展过程。     

结肠癌组织中miR-802和RAB23的表达水平及临床意义

目的:检测微小RNA-802(miR-802)和RAB23在结肠癌组织中的表达水平，探究其临床意义。方法:以本院2014年3月至2015年4月收治的结肠癌患者84例为研究对象，所有患者经诊断后行结肠癌根治术，术中取患者癌组织及癌旁正常组织。实时荧光定量PCR检测miR-802和RAB23 mRNA表达水平，免疫组化分析RAB蛋白表达水平。结果:miR-802在结肠癌组织中的表达水平显著低于癌旁正常组织，RAB23表达水平显著高于癌旁正常组织（P<0.05）；结肠癌组织中RAB23蛋白表达阳性率显著高于癌旁正常组织（P<0.05）；相关性分析表明结肠癌组织中miR-802表达水平与RAB23 mRNA表达水平呈负相关（P<0.05）；miR-802和RAB23表达水平与患者肿瘤大小和淋巴转移情况有关（P<0.05）；结肠癌患者中miR-802低表达者、RAB23阳性表达者生存率分别显著低于miR-802高表达者、RAB23阴性表达者（P<0.05）；COX分析显示miR-802和RAB23表达水平是影响结肠患者不良预后的独立危险因素（P<0.05）。结论:miR-802在结肠癌患者癌组织中表达水平显著降低，RAB23表达水平显著升高，与结肠癌患者预后有关，可为结肠癌患者预后判断提供参考。     

microRNA-21 预测食管癌放疗敏感性和预后的意义

目的:探讨食管癌中microRNA-21（miR-21）表达水平与放疗敏感性和预后的关系。方法:收集在我院接受放疗的食管癌患者60例,采用RT-PCR方法检测miR-21的相对表达量,并分析其与临床病理特征、放疗疗效和预后的相关性。结果:miR-21的表达水平与肿瘤大小、淋巴结和远处转移明显相关(P＜0.05)。在60例食管癌患者中,CR、PR和NC组患者中miR-21的表达水平分别为1.56±0.35、2.82±0.84和3.31±1.32,miR-21的表达水平与食管癌的放疗敏感性呈负相关(P＜0.05)。Kaplan-Meier分析显示miR-21低表达组放疗后的生存时间明显高于高表达组,差异有显著统计学意义(P＜0．05)。结论:肿瘤组织中miR-21表达量可作为评价食管癌放疗敏感性和预后的预测指标。     

PTEN在食管鳞状细胞癌中的表达和临床意义

目的：研究抑癌基因PTEN蛋白表达与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系,探讨其在食管癌变中的可能作用。方法：应用免疫组织化学SP法检测60例食管鳞状细胞癌及20例癌旁正常组织中PTEN蛋白的表达,结合临床资料进行分析。结果：PTEN蛋白阳性反应主要定位于胞浆。食管鳞状细胞癌组织中PTEN蛋白表达阳性率56．7％明显低于正常组织阳性率90．0％（P〈0．05）。PTEN蛋白在低分化、中分化、高分化鳞癌组的阳性表达率分别是21．4％、55．0％、76．9％,三组之间相互比较有极显著统计学差异（P〈0．01）,肿瘤分化程度越低PTEN蛋白表达越低。有淋巴细胞转移的食管癌组织中VrEN表达的阳性率42．9％明显低于无淋巴细胞转移的食管癌组织阳性率76．0％（P〈0．05）。有外膜浸润的食管癌组织中PTEN表达的阳性率26．1％明显低于无外膜浸润的食管癌组织阳性率75．7％（P〈0．05）。PTEN蛋白在食管癌早期表达高于晚期（P〈0．01）。结论：PTEN蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的低表达可能与食管鳞癌的发生发展有重要关系。     

microRNA-21通过Bcl-2通路调节胃癌紫杉醇化疗耐药性

目的:研究miR-21在胃癌组织中的表达水平及对胃癌生物学行为的影响,探讨miR-21与紫杉醇化疗耐药性的关系及机制。方法:实时荧光定量（real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）比较25例胃癌组织和癌旁组织中miR-21的表达差异;细胞实验探讨miR-21对胃癌细胞增殖、凋亡能力的影响;MTT法测定紫杉醇对SGC-7901细胞的生长抑制率;Western blot验证Bcl-2、Bax、PTEN蛋白表达和miR-21的关系。结果:miR-21在胃癌组织中表达水平高于癌旁正常组织（P=0.015）;与NC组比较,转染miR-21模拟物的胃癌SGC-7901细胞增殖能力（P＜0.05）增强,下调miR-21表达水平可促进胃癌细胞凋亡(P＜0.05);转染miR-21 mimic组的紫杉醇对胃癌细胞的抑制率明显低于miR-21 inhibitor组;miR-21 inhibitor组较NC组中Bcl-2的蛋白水平下降（P=0.000）,而PTEN（P=0.039）、Bax（P=0.037）表达升高。结论:miR-21在胃癌组织中过表达,且过表达的miR-21可能通过升高Bcl-2表达并降低Bax、PTEN蛋白表达从而促进胃癌细胞增殖,抑制胃癌细胞凋亡,并增加紫杉醇化疗耐药性。     

血清和尿液中外泌体miRNAs的表达水平对肾细胞癌的诊断价值

目的:研究血清和尿液中外泌体miRNAs的表达水平对肾细胞癌(RCC)的诊断价值。方法:选择本院2018年11月至2020年08月诊治的68例RCC患者（RCC组）进行前瞻性分析，并将RCC患者根据临床分期进行分组，以本院同期收治的60例肾脏良性病变患者作为对照组。检测患者血清和尿液中外泌体miRNAs相对表达量，分析血清和尿液中外泌体miRNAs在肾细胞癌中的诊断价值。结果:RCC组患者血清、尿液中miR-210、miR-21、miR-153、miR-1233和miR-221表达量均明显高于对照组，miR-34a表达量均明显低于对照组（P＜0.05）；血清中ROC曲线显示AUC最大的为miR-221，其诊断敏感度为79.40%，特异度为95.00%；尿液中最大的为miR-34a，其敏感度为85.30%，特异度为88.30%；不同临床分期RCC患者的血清miR-210、miR-153表达量以及尿液miR-153表达量无显著差异（P＞0.05），但血清和尿液中的miR-21、miR-34a、miR-1233、miR-221表达量以及尿液miR-210表达量在不同分期RCC患者中存在显著差异（P＜0.05）；血清中，miR-210、miR-153与临床分期无相关性（P＞0.05），miR-21、miR-1233、miR-221与临床分期呈正相关，miR-34a与临床分期呈负相关（P＜0.05）；尿液中，miR-210、miR-153与临床分期无相关性（P＞0.05），miR-21、miR-1233、miR-221与临床分期呈正相关，miR-34a与临床分期呈负相关（P＜0.05）。结论:RCC患者血清、尿液外泌体miR-210、miR-21、miR-34a、miR-153、miR-1233和miR-221表达量较良性肾脏病变患者存在显著差异，同时miR-21、miR-34a、miR-1233、miR-221表达量均与RCC患者病理分期存在显著相关性，可为疾病进展评估提供参考。     

miR-34a-3p、DDX27在结直肠癌组织中的表达水平及临床意义

目的:检测结直肠癌患者组织中微小RNA-34a-3p（miR-34a-3p）、DEAD盒多肽27（DDX27）的表达水平,并探讨二者表达水平与结直肠癌预后的相关性。方法:选取2016年01月至2017年04月于本院住院的102例结直肠癌癌组织作为结直肠癌组,选取其癌旁正常组织作为癌旁对照组。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测组织miR-34a-3p、DDX27 mRNA表达水平;分析结直肠癌患者组织中miR-34a-3p、DDX27 mRNA表达水平与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier法分析结直肠癌组织中miR-34a-3p、DDX27表达水平与患者生存率的相关性;多因素Cox回归分析影响结直肠癌预后的因素。结果:Targetscan网站在线预测结果显示miR-34a-3p与DDX27的3' UTR之间存在碱基互补关系。双荧光素酶实验结果显示,与miR-NC相比,miR-34a-3p-mimics与野生型3' UTR区（WT-DDX27）共转出现了荧光减弱,而与突变3' UTR区（MUT-DDX27）共转后荧光强度未出现明显变化;Ualcan数据库中,结肠癌组织中DDX27水平高于正常结肠组织（P＜0.05）;结直肠癌组DDX27 mRNA水平高于癌旁对照组,miR-34a-3p水平低于癌旁对照组（P＜0.05）,且DDX27表达趋势与Ualcan数据库一致;miR-34a-3p、DDX27表达与肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关（P＜0.05）;miR-34a-3p低表达组三年内存活率（64.00%）低于高表达组（94.23%）,DDX27高表达组三年内存活率（66.67%）低于低表达组（92.16%）,差异均有统计学意义（P＜0.05）;DDX27、组织分化程度、TNM分期是影响结直肠癌不良预后的独立危险因素（P＜0.05）,miR-34a-3p是影响结直肠癌不良预后的保护因素（P＜0.05）。结论:结直肠癌组织中miR-34a-3p、DDX27表达水平与组织分化程度、TNM分期等临床病理特征密切相关,且均是影响结直肠癌预后的因素,可对结直肠癌的病情评价及治疗提供一定理论依据。     

lnc SNHG20和miR-495在胶质瘤中的表达关系及临床意义

目的:探讨lnc SNHG20和miR-495在人胶质瘤中的表达关系及临床意义。方法:通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测85例人胶质瘤组织和85例正常脑组织中lnc SNHG20和miR-495的表达水平，并分析lnc SNHG20和miR-495表达与临床病理特征的关系，采用Spearman相关分析法分析人胶质瘤组织中lnc SNHG20和miR-495表达相关性，Kaplan-Meier法评估lnc SNHG20和miR-495与患者生存期的关系，采用Cox回归模型分析影响患者预后因素。结果:与正常脑组织相比，人胶质瘤组织中lnc SNHG20表达水平显著升高（P＜0.05），miR-495表达水平显著下降（P＜0.05）。lnc SNHG20和miR-495表达与胶质瘤患者年龄、性别以及肿瘤位置无关（P＞0.05），与肿瘤直径和肿瘤分级相关（P＜0.05）。Spearman相关分析结果显示，lnc SNHG20和miR-495表达呈负相关（r=-0.795，P＜0.05）。Kaplan-Meier生存分析结果显示，lnc SNHG20高表达患者3年总存活率明显低于lnc SNHG20低表达患者（P＜0.05），miR-495高表达患者3年总存活率明显高于miR-495低表达患者（P＜0.05）。lnc SNHG20和miR-495是影响胶质瘤患者预后的独立因素。结论:人胶质瘤组织中lnc SNHG20和miR-495表达异常，两者呈负相关，且与胶质瘤的恶性程度、患者的生存期及预后关系密切，可能成为胶质瘤诊断、治疗及预后的新靶点。     

miR-106a负调控PTEN促进骨肉瘤细胞增殖并抑制凋亡

目的:研究miR-106a在骨肉瘤组织和MG-63细胞中的表达水平及其对MG-63细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法:用荧光实时定量PCR法检测20对骨肉瘤和相邻正常组织及MG-63和成骨细胞hFOB 1.19中miR-106a的表达。用miR-106a mimics、miR-106a antagomir 及两者相应的对照物转染MG-63细胞,然后分别用CCK-8法检测四组细胞增殖活性和FCM法检测细胞凋亡率。miR-106a mimics和mimics control与野生型或突变型PTEN 3'-UTR 重组载体共转染后,应用荧光素酶基因报告系统检测miR-106a是否与PTEN基因3'-UTR 结合。利用Western blot技术检测PTEN蛋白在上述四组转染MG-63细胞和骨肉瘤标本中的表达水平。结果:与相邻正常组织（1.19±0.15）相比,肿瘤组织miR-106a的表达水平（2.60±0.86）显著升高;同时,miR-106a在MG-63中的表达水平（2.60±0.92）明显高于hFOB 1.19（1.19±0.39）,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）。CCK-8和FCM检测结果显示,与mimics control组相比,miR-106a mimics组的增殖率明显增加,而细胞凋亡率下降;反之,miR-106a antagomir组与antagomir control组相比,增殖率前者低于后者,而凋亡率前者高于后者,上述差异均有统计学意义（P＜0.05）。荧光素酶报告实验显示,miR-106a mimics和wt PTEN 3'-UTR共转染组的荧光强度值明显低于mimics control和wt PTEN 3'-UTR组（P＜0.05）。Western blot发现,与对照组相比,miR-106a mimics组PTEN表达下调,而miR-106a antagomir表达上调;临床标本,肿瘤组织PTEN表达明显低于正常组织,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论:miR-106a在骨肉瘤组织及细胞中过表达,并靶向负调控PTEN表达,促进骨肉瘤细胞增殖并抑制其凋亡,从而发挥促癌作用。因此,miR-106a可为骨肉瘤的诊治提供新的潜在分子靶点。     

miR-506和FGF2在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的:检测上皮性卵巢癌组织微小RNA-506（miR-506）和成纤维细胞生长因子2（FGF2）表达情况，并探究其临床意义。方法:选取2011年3月至2012年12月本院收治的上皮性卵巢癌患者56例，选择同期因子宫良性病变在平煤神马医疗集团总医院接受全子宫双附件切除的患者56例（对照组）；采用实时定量PCR（qRT-PCR）法检测miR-506表达水平，采用免疫组化法检测FGF2表达水平，采用全自动化学发光免疫分析仪检测血清糖类抗原125（CA125）水平。结果:上皮性卵巢癌组织miR-506表达水平较正常卵巢组织显著降低（P＜0.05），FGF2表达量显著高于正常卵巢组织（P＜0.05），FGF2蛋白表达阳性率较正常卵巢组织显著升高；上皮性卵巢癌组织中miR-506、FGF2表达与患者临床分期、有无淋巴结转移、血清CA125水平有关（P＜0.05），与患者年龄、组织学类型无关（P＞0.05）；miR-506高表达上皮性卵巢癌患者术后5年总生存率显著高于低表达者（P＜0.05），FGF2高表达上皮性卵巢癌患者术后5年总生存率显著低于低表达患者（P＜0.05）；Pearson检验结果显示，卵巢癌肿瘤组织miR-506与FGF2表达水平负相关。结论:miR-506在上皮性卵巢癌组织中低表达，FGF2高表达，与患者临床分期、淋巴结转移、血清CA125水平有关，可能作为上皮性卵巢癌患者病情监测及预后的生物指标。     

非小细胞肺癌患者血浆miR-21水平与化疗疗效的相关性

目的:探讨miRNA-21（miR-21）在非小细胞肺癌（NSCLC）患者血浆中的表达及治疗前后NSCLC患者血浆中miR-21水平与化疗药物疗效的相关性。方法:使用荧光定量PCR法检测并比较15例正常人和26例晚期NSCLC患者血浆中miR-21的表达差异；检测并比较晚期NSCLC患者化疗前后血浆中miR-21的变化水平。结果:NSCLC患者血浆中的miR-21表达水平显著高于正常人（P<0.01）。化疗后患者血浆中miR-21表达水平较化疗前存在差异（P<0.05）。miR-21在（SD+PD）组的表达量高于（CR+PR）组（P<0.05）；而（CR+PR）组血浆miR-21的水平与正常对照组比较，无显著差异（P>0.05）。分析miR-21表达与NSCLC患者临床病理参数相关性，发现miR-21表达与患者临床特征无关。结论:血浆中miR-21的表达水平，对于NSCLC早期诊断及化疗药物治疗后评估患者疗效有较好地评判价值。