γ-干扰素增强他莫昔芬抗乳腺癌作用的体外研究

研究γ-干扰素（γ-IFN）对他莫昔芬（TAM）抗乳腺癌细胞的增强作用。方法：在体外培养条件下，分别或联合应用γ-干扰素、TAM或雌二醇（E2）作用于雌激素受体（estrogen receptor，ER）阳性的MCF-7和ER阴性的MDA-MB-231人乳腺癌细胞株，用MTT比色法分析细胞生长抑制作用，流式细胞仪检测细胞周期分布，DNA凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：TAM能抑制ER阳性和阴性的乳腺癌细胞的生长，阻滞细胞周期于GO／G1期，并可诱导细胞凋亡；相同浓度条件下，TAM对ER阳性乳腺癌细胞的抑制作用强于对ER阴性的乳腺癌细胞。同时，TAM能拈抗外源性雌激素对MCF-7细胞的促生长作用，而对MDA-MB-231细胞的生长抑制作用与雌激素的存在与否无关。γ-干扰素预处理细胞24h后，TAM抗乳腺癌细胞的作用增强。结论：体外条件下，TAM有抗ER阳性和阴性乳腺癌细胞作用，作用机制是通过影响细胞周期，诱导细胞凋亡，γ-干扰素能加强TAM的抗乳腺癌作用。     

丁酸钠诱导MCF-7细胞凋亡的研究

目的:观察丁酸钠诱导培养的乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响。方法:用终浓度分别为0、1.25、2.5、5.0、10.0mmol/L的丁酸钠处理MCF-7细胞48h,用MTT比色法分析丁酸钠对细胞的抑制率,倒置显微镜观察细胞生长情况的改变,流式细胞术,末端脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)及DNA琼脂糖凝胶电泳检测凋亡。结果:不同浓度的丁酸钠对MCF-7细胞有明显的抑制作用,光镜下观察到细胞贴壁性随作用时间延长而下降;流式细胞术检测不同浓度丁酸钠处理细胞的凋亡率分别为4.8%、9.4%、26.1%和51.9%;TUNEL检测可见阳性细胞胞体缩小,核固缩,呈棕黄色或黄褐色颗粒;DNA琼脂糖凝胶电泳检测到10mmol/L处理细胞出现“DNA ladders”。结论:丁酸钠可以诱导MCF-7细胞发生凋亡。     

三羟异黄酮对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞体外抑瘤效应、细胞周期及凋亡的影响

 目的探讨三羟异黄酮（Genistein GEN）对体外培养人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM抑瘤作用、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法采用MTT法检测GEN单独及联合阿霉素对体外培养人乳腺癌MCF-7/ADM细胞的抑制作用;荧光分光光度法检测GEN对阿霉素在MCF-7/ADM细胞的蓄积作用;用流式细胞仪（FCM）检测细胞周期及凋亡率的变化。结果GEN单独及联合阿霉素对体外培养MCF-7/ADM细胞均有明显生长抑制作用,GEN单独作用48 h后表现为随时间的延长抑制作用明显增强,当GEN浓度达到60 μg/ml时,其抑制作用急剧上升（P<0.01）。联合阿霉素后与对照组相比抑制率明显上升（P<0.01）,并随GEN浓度的加大其抑制作用增强,细胞内阿霉素的浓度也随之升高。与对照组相比,细胞周期均有G2/M期阻滞作用,细胞凋亡百分比以联合组最高（P<0.01）,G₁期前出现典型的亚二倍体凋亡峰。结论GEN单独及联合阿霉素对体外培养人乳腺癌MCF-7/ADM细胞具有抑瘤增效作用,可以提高阿霉素在MCF-7/ADM细胞内的蓄积、对细胞周期具有G₂/M期阻滞作用,显著诱导MCF-7/ADM细胞凋亡,可能是其发挥逆转多药耐药分子生物学机制之一。     

红参含药血清对人乳腺癌MCF?鄄7细胞增殖和细胞周期的影响

[目的]研究红参含药血清对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和细胞周期的影响.[方法]采用MTT法观察红参含药血清对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖活性.流式细胞术检测人乳腺癌细胞MCF-7的细胞周期、细胞凋亡率.[结果]红参低剂量含药血清对MCF-7细胞有促增殖作用,24、48、72h时增殖率分别为105.9％、115.9％和121.5％.而高剂量对MCF-7细胞表现为抑制作用.红参低剂量组使MCF-7细胞S期DNA含量比例明显增多,高剂量组使细胞周期阻滞在G0/G1期,并能够诱导细胞凋亡,凋亡率达26.86％.[结论]红参含药血清在高剂量时抑制MCF-7细胞生长,低剂量时对细胞具有促增殖作用.     

Apatinib联合5-Fu协同抑制乳腺癌MCF-7细胞的体外研究

目的 探讨阿帕替尼(Apatinib)联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用.方法 采用人乳腺癌细胞株MCF-7,首先采用MTr法及应用流式细胞仪测定不同浓度apatinib作用后对其细胞增殖和周期的影响,其次将MCF-7细胞分为4组,即对照组、Apatinib单药组、5-Fu单药组、Apanitib+ 5-Fu联合组.对各组细胞给予相应药物处理,48 h后分别应用流式细胞仪检测各组药物对MCF-7细胞株凋亡的作用.结果 Apatinib单药对MCF-7细胞有增殖抑制作用,且存在时间剂量依赖关系,而对其细胞周期影响不大.与对照组相比,Apatinib联合5-Fu作用后有协同诱导凋亡作用,经流式细胞仪检测,Apatinib组诱导的细胞凋亡率为12.05％,5-Fu组为25.76％.与单药组比,Apatinib+5-Fu联合组凋亡率升高更为明显,达34.90％ (P＜ 0.05).结论 Apatinib和5-Fu的联合应用在体外协同抑制乳腺癌MCF-7细胞并诱导凋亡,使抗肿瘤活性显著增强.     

重组腺病毒介导的ING-4用于人MCF-7乳腺癌细胞的体外基因治疗

目的研究重组腺病毒介导的ING-4感染人MCF-7乳腺癌细胞后对其的生长抑制作用。方法将搭载有ING-4基因的重组腺病毒载体Ad-ING-4感染人MCF-7乳腺癌细胞,用荧光显微镜、RTPCR和Western-Blot法检测ING-4在MCF-7细胞中的转录和表达;CCK法与流式细胞技术检测ING-4基因对MCF-7细胞的生长抑制和促凋亡作用;半定量RT-PCR法检测ING-4基因表达对MCF-7细胞中相关凋亡基因表达的影响。结果在MCF-7细胞中ING-4基因的表达对其细胞增殖有明显抑制作用,并显著促进其凋亡,ING-4表达使MCF-7细胞中Bax表达上调,Bcl-2、Survivin表达下调。结论 MCF-7细胞在转染ING-4基因后其增殖受到了明显抑制,且更易凋亡,可能是通过改变Bax,Bcl-2及Survivin表达水平来实现。     

siRNA 沉默MEKK3基因促进TRAIL诱导乳腺癌MCF-7细胞的凋亡

目的：研究抑制促分裂原活化蛋白激酶／细胞外信号调节激酶-激酶3（mitogen—activated protein／extraeellular signal regulated kinase—kinase3，MEKK3）基因表达促进TRAIL诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用，寻找乳腺癌临床治疗新策略。方法：应用MTT法检测人TRAIL对MCF-7细胞生长的抑制作用。合成MEKK3-siRNA，应用脂质体介导MEKK3-siRNA转染人人乳腺癌细胞MCF-7，以RT，PCR和Westernblotting法检测MCF-7细胞MEKK3mRNA和蛋白的表达。应用MTr法和流式细胞术检测MEKK3-siRNA与TRAIL联合处理后MCF-7细胞的增殖和凋亡。结果：TRAIL具有抑制MCF-7细胞增殖作用，但其抑制作用较弱。MEKK3-siRNA转染后能有效而稳定地抑制MCF-7细胞中MEKK3mRNA和蛋白的表达（P〈0．01）。TRAIL与MEKK3-siRNA联合处理MCF-7细胞较TRAIL单独处理更明显地抑制细胞增殖活力（P〈0．05），更明显地增加细胞凋亡率（P〈0．01）。结论：siRNA沉默MEKK3基因能显著促进TRAIL对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的诱导作用，为探讨乳腺癌治疗新方案提供了实验依据。     

Livin反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖和凋亡影响的研究

目的：探讨Livin mRNA反义寡核苷酸（ASODN）对人乳腺癌MCF-7细胞抑制增殖及诱导凋亡的影响。方法：设计合成特异性的Livin硫代磷酸ASODN及其对照错义寡核苷酸（MSODN），脂质体转染至培养的MCF-7细胞。采用MTT法检测Livin ASODN对MCF-7细胞的增殖抑制作用，RT-PCR检测Livin mRNA的表达水平，电镜、流式细胞仪与吖啶橙／溴化乙锭（AO／EB）细胞染色法检测细胞凋亡水平和形态学改变。结果：Livin ASODN在终浓度为600nmol／L作用MCF-7细胞48h时，能明显地抑制其增殖（IC50=604.4），降低Livin mRNA的表达;电镜、流式细胞仪与A0／EB细胞染色法则表明MCF-7细胞在形态学上出现明显的凋亡改变，细胞凋亡率显著增加，而对照组寡核苷酸未见抑制效应。结论：Livin ASODN能够特异性下调MCF-7细胞中Livin基因表达，在诱导肿瘤细胞凋亡、抑制增殖中发挥重要作用。     

青蒿琥酯对乳腺癌MCF-7细胞株增殖功能及形态结构的影响

目的探讨青蒿琥酯（Artesunate,ART）对乳腺癌MCF-7细胞株的增殖、分化功能及细胞形态和结构的影响。方法ART作用乳腺癌MCF-7细胞后,采用MTT（四唑盐）比色法检测细胞增殖功能,观察细胞形态和结构的改变,流式细胞仪分析细胞周期相分布及细胞凋亡率。统计学分析采用重复测量设计资料的方差分析。结果ART对乳腺癌细胞MCF-7有抑制作用,随浓度增加和时间延长抑制作用增强（P〈0．05）,呈浓度依赖及时间依赖,并可导致细胞形态和结构的改变,抑制MCF-7细胞增殖,阻滞MCF-7细胞于S期和G2／M期。6 μmol／L和8 μmol／LART诱导MCF-7细胞的凋亡率分别为3．15％和8．43％。结论ART可导致MCF-7细胞形态的改变,抑制MCF-7细胞增殖和生长,阻滞MCF-7细胞于S期和G2／M期,并有诱导细胞凋亡的作用。     

香加皮乙酸乙酯提取物诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的研究

目的:研究香加皮乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract from Cortex Periplocae,CPEAE)诱导人乳腺癌细胞系MCF-7凋亡作用及其作用机制。方法:采用MTT法观察不同浓度CPEAE对乳腺癌细胞株MCF-7增殖的抑制作用;应用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光染色法和透射电镜观察凋亡细胞形态;应用流式细胞术分析CPEAE对细胞凋亡率的影响;RT-PCR法检测用药前后细胞凋亡相关基因survivin和bax的mRNA表达情况。结果:CPEAE呈浓度及时间依赖性抑制MCF-7细胞的增殖(P<0.05),作用48 h的IC50为(0.943±0.005)μg/mL。CPEAE作用48 h后MCF-7细胞发生了特征性的凋亡形态学改变,流式细胞仪检测可见典型的凋亡峰,2.0μg/mL CPEAE作用72 h时细胞的凋亡率达(30.24±1.26)%。CPEAE作用后MCF-7细胞的survivin mRNA表达降低,而bax mRNA表达增加。结论:香加皮乙酸乙酯提取物(CPEAE)可诱导乳腺癌细胞系MCF-7发生凋亡,可能通过下调survivin基因、上调bax基因的mRNA水平而发挥诱导细胞凋亡作用。     

绿色荧光蛋白pAcGFP标记的人乳腺癌细胞株的建立

目的 构建绿色荧光蛋白（pAcGFP）标记的MCF-7细胞系.方法 应用Fugene HD Transfection Reagent转染MCF-7细胞.经G418筛选获得稳定表达pAcGFP的MCF-7细胞系,用倒置荧光显微镜检测pAcGFP的表达,用流式细胞仪检测pAcGFP转染率.通过生长曲线和体外侵袭实验,对转染和未转染pAcGFP细胞的生物学行为进行综合分析.结果 获得了稳定表达pAcGFP的乳腺癌细胞株MCF7-pAcGFP,转染率约为85%.生长曲线和体外侵袭力与未转染前相似（P＞0.05）.结论 MCF7-pAcGFP细胞株具备稳定表达AcGFP的能力,转染pAcGFP对MCF-7细胞的生长和转移特性并没有影响.     

缺氧对人乳腺癌细胞系MCF-7生物学行为的影响

目的:研究缺氧对人乳腺癌细胞系MCF-7的生物学行为,增殖、侵袭能力的影响。通过影响缺氧诱导因子1α(hypoxic-induciblefactor1α,HIF-1α)的表达,检验其在这一过程中的作用,并进一步探讨作用机制。方法:慢病毒感染细胞,干扰乳腺癌细胞系MCF-7中HIF-1α的表达,得到HIF-1α表达正常的乳腺癌细胞系MCF-7-NC和HIF-1α表达受干扰的细胞系MCF-7-HIF△。分别低氧培养及化学药物诱导缺氧,用MTT法检测2组细胞系在缺氧和正常培养条件下的增殖能力,ANOVA检验检测其增殖能力的区别。Transwell实验检验缺氧和正常培养条件下人乳腺癌细胞的侵袭能力,计数通过Transwell小室的细胞,ANOVA检验检测细胞侵袭能力的区别。共聚焦免疫荧光法检测缺氧后2组乳腺癌细胞的上皮和间质标记物的表达,检验细胞系是否发生了上皮-间质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)。结果:MTT实验结果:正常表达HIF-1α的MCF-7-NC的增殖能力在缺氧后与正常培养条件下相比明显减弱,其差别具有统计学意义(P<0.05)。HIF-1α表达受干扰的MCF-7-HIF△的增殖能力在缺氧和正常培养条件下相比无显著区别。Transwell实验检测细胞的侵袭能力,缺氧后正常表达HIF-1α的MCF-7-NC的侵袭能力较正常培养的细胞明显增强,其差别具有统计学意义(P<0.05)。HIF-1α表达受干扰的MCF-7-HIF△侵袭能力在缺氧和正常培养下无显著区别。缺氧后,正常表达HIF-1α的细胞系MCF-7-NC发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)。共聚焦荧光染色显示:在诱导缺氧后,正常表达HIF-1α的MCF-7-NC细胞极性发生变化,呈长梭形改变,上皮标志物人广谱角蛋白(pan-cytokeratin,P-CK)表达下调,间质标志物人α平滑肌动蛋白(α-SMA)表达上调;而HIF-1α表达受干扰的MCF-7-HIF△无明显EMT变化。结论:在体外条件下,缺氧可以引起乳腺癌细胞系MCF-7增殖能力减弱、侵袭能力增强,可以诱导乳腺癌细胞MCF-7发生EMT,干扰缺氧诱导因子亚基HIF-1α的表达,则缺氧对乳腺癌细胞增殖、侵袭的影响消失。     

绿色荧光蛋白基因标记的人乳腺癌细胞株MCF7-pAcGFP体外生长特性的研究

目的 研究增强型绿色荧光蛋白(pAcGFP)标记的人乳腺癌细胞株MCF7-pAcGFP的生长特性。方法 应用Fugene HD Transfection Reagent转染MCF-7细胞,经G418筛选获得稳定表达pAcGFP的MCF-7细胞系。采用MTT方法检测MCF7-pAcGFP的增殖能力,采用流式细胞仪检测细胞周期,同时采用Western blot方法检测11种蛋白的表达情况。结果 稳定表达pAcGFP的乳腺癌细胞株MCF7-pAcGFP的生长曲线和细胞周期分布与未转染前相似(P＞0.05),Cyclin D1、p27、Fas、FasL、Bcl-2、Bax、Akt、p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308)、ERK以及p-ERK在两种细胞中表达情况无差别。结论 与亲本细胞相比,MCF7-pAcGFP细胞株的生长特性并没有发生改变,为构建理想的动物模型来研究乳腺癌生长机制奠定了基础。     

乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群的初步研究

目的 通过乳腺癌细胞系及其干细胞的培养,化疗药干预和流式细胞仪筛选鉴定,探讨不同乳腺癌细胞系中CD44⁺CD24^-/low细胞比例,及富集乳腺癌干细胞相关亚群的方法。方法 通过细胞培养乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231,观察生长曲线,比较化疗药物干预下生长情况;利用流式细胞仪检测两种乳腺癌细胞系中CD44⁺CD24^-/low细胞比例;无血清悬浮培养,化疗药(多西紫杉醇、表阿霉素)干预这两种乳腺癌细胞系,观察其是否形成细胞球。结果 (1)MDA-MB-231细胞系倍增时间短,生长速率高于MCF-7细胞系;(2)MCF-7细胞系中可能存在较大比例肿瘤干细胞,其对化疗抵制,能自我更新;(3)化疗敏感性用两独立样本t检验,MCF-7细胞,差异没有统计学意义;MDA-MB-231细胞,差异有统计学意义,提示MDA-MB-231细胞系对该方案化疗较敏感;(4)无血清悬浮培养,MDA-MB-231细胞系未发现明显细胞球;MCF-7细胞系初次无血清培养约6天出现细胞球。加入化疗药筛选后两种细胞,见大部分肿瘤细胞逐渐死亡,未发现明显细胞球;(5)流式细胞仪检测,MCF-7、MDA-MB-231两种细胞系中主要是CD44⁺CD24⁺亚群和CD44^-CD24⁺亚群,CD44⁺CD24^-/low细胞比例分别2.07%和0.20%。结论 (1)MDA-MB-231细胞系增值较快,恶性度相对较高,其对TA联合化疗药物较敏感;MCF-7细胞系中可能存在少量肿瘤干细胞,对化疗抵制,能自我更新;(2)无血清培养液培养MCF-7细胞系能形成悬浮细胞球;流式细胞仪检测两种细胞系中CD44⁺CD24^-/low细胞比例小;(3)CD44⁺CD24^-/low表型可能不是乳腺癌干细胞唯一特异性的表面标志。     

阿司匹林联合曲妥珠单抗对HER-2阳性乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响#br# #br#

目的 探讨阿司匹林联合曲妥珠单抗对表皮生长因子受体2（HER 2）阳性乳腺癌SKBR 3细胞增殖和凋亡的影响。方法 将SKBR 3细胞分为对照组、阿司匹林组（5 mmol／L）、曲妥珠单抗组（30 μg／ml）和联合组（5 mmol／L 阿司匹林+30 μg／ml 曲妥珠单抗）,采用MTT法、流式细胞术分别观察不同药物处理对SKBR-3细胞增殖和凋亡的影响。结果 阿司匹林组SKBR 3细胞增殖率为（79.6±2.61）％,曲妥珠单抗组为（48.2±3.35）％,联合组为（21.5±1.66）％,组间差异有统计学意义（P＜0.05）。阿司匹林、曲妥珠单抗联合作用指数（CI）为1.0,属于叠加作用。阿司匹林组SKBR 3细胞凋亡率为（273±347）％,曲妥珠单抗组为（35.3±2.80）％,联合组为（56.2±3.95）％,组间差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 阿司匹林联合曲妥珠单抗能有效抑制HER-2阳性乳腺癌细胞的增殖,两药联合有可能成为HER 2阳性乳腺癌的临床治疗新模式。     

hCLP46基因在不同侵袭转移潜能乳腺癌细胞表达中的差异及其意义

目的 探讨hCLP46基因在MCF-7和MDA-MB-231乳腺癌细胞中表达的差异性及其意义。方法 采用RT-PCR的方法检测2个细胞系(乳腺癌低度侵袭转移细胞系MCF-7、中度侵袭转移细胞系MDA-MB-231)中hCLP46 mRNA的表达差异。取MCF-7和MDA-MB-231细胞株进行培养,分别加入100 μmol/L的转化生长因子-β(TGF-β)并设对照组,培养72 h,用Western-blot方法分析P15蛋白表达。结果 RT-PCR检测hCLP46结果显示,在MCF-7和MDA-MB-231细胞系中,内参基因GAPDH的表达量相近,hCLP46基因在两个细胞系中均表达,其中MDA-MB-231细胞系中的表达高于MCF-7细胞系。两个细胞系分别加入TGF-β培养72 h后,与相应的对照细胞系相比,P15的表达均有降低,hCLP46基因高表达的MDA-MB-231细胞中P15表达较MCF-7细胞显著降低。结论 hCLP46基因过表达可能抑制TGF-β对MDA-MB-231和MCF-7乳腺癌细胞P15基因的上调,hCLP46可能在乳腺癌的发病中起到一定作用。     

miR-124参与紫杉醇诱导的乳腺癌细胞株MCF-7生长抑制

目的探讨miR-124对紫杉醇诱导的乳腺癌细胞株MCF-7生长抑制作用的影响。方法应用MTr法检测紫杉醇对MCF-7的生长抑制作用,流式细胞仪检测紫杉醇对细胞周期的影响,应用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测紫杉醇处理MCF-7细胞后,miR-124表达水平的变化,进一步转染miR-124抑制剂至MCF-7细胞中,用MTr法检测细胞生长抑制情况。结果MrI-T法检测结果显示紫杉醇能显著抑制MCF-7细胞生长。流式细胞仪检测结果显示紫杉醇能明显将细胞阻滞于G：期。qRT-PCR检测结果显示紫杉醇能诱导miR-124表达水平升高,并呈现剂量依赖关系。进一步研究发现,抑制细胞miR-124的表达后,紫杉醇对MCF-7的增殖抑制作用受到显著影响。结论紫杉醇能显著诱导MCF-7上调表达miR-124,并且这种上调表达是剂量依赖性的。而miR-124抑制剂能明显降低紫杉醇对MCF-7细胞的生长抑制作用。表明miR-124可能在细胞对紫杉醇的化疗耐药中起着重要作用,也为将来解决紫杉醇临床耐药提供了新思路。     

CisoDGR 多肽对乳腺癌 MCF －7细胞增殖、凋亡的影响及其机制探讨

目的：探讨 CisoDGR 多肽对乳腺癌 MFC －7细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。方法：采用 MTT 法检测 CisoDGR 多肽对乳腺癌 MCF －7细胞的抑制率;流式细胞术检测 CisoDGR 多肽对 MCF －7细胞凋亡的影响;Western blot 法检测 Caspase －3、Bcl －2蛋白的表达。结果：CisoDGR 多肽能明显抑制乳腺癌 MCF －7细胞的增殖,诱导细胞凋亡,并存在一定的时－效及量－效关系。其对凋亡的诱导作用可能与 Caspase －3蛋白表达增加及 Bcl －2蛋白表达下降有关。结论：CisoDGR 多肽具有抑制 MCF －7细胞增殖,诱导 MCF －7细胞凋亡的作用,其作用机制可能与 Caspase －3、Bcl －2蛋白的表达变化有关。     

下调Skp2表达诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的 探讨在乳腺癌细胞系MCF-7中下调S期激酶相关蛋白(Skp2)表达诱导细胞凋亡及其机制。方法 应用RNAi方法在体外下调乳腺癌细胞系MCF-7中Skp2的表达水平,48小时后表阿霉素处理细胞,TUNEL和Hoechst 33258染色检测凋亡,Western Blot检测细胞周期调控相关因子及凋亡相关蛋白表达情况,研究其机制。结果 下调MCF-7中Skp2表达水平后,乳腺癌细胞凋亡增加。下调Skp2使p27、p21和CyclinE蛋白表达水平升高。表阿霉素处理MCF-7细胞后,Skp2蛋白水平下调。Skp2 siRNA与表阿霉素有协同诱导凋亡的作用,p53蛋白水平升高。结论 p27、p21和CyclinE在通过下调Skp2诱导的凋亡中发挥作用。Skp2 siRNA和表阿霉素协同诱导细胞凋亡,与p53依赖的凋亡途径有关。Skp2可能是乳腺癌治疗的靶点。     

siRNA沉默c-FLIP基因表达与表柔比星联合应用对MCF-7细胞凋亡的影响

目的 探讨RNA干扰技术沉默c-FLIP基因表达联合应用表柔比星对人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响。方法 体外化学合成c-FLIP序列特异性双链小干扰RNA(siRNA),转染MCF-7细胞,应用Western blot方法检测c-FLIP蛋白的抑制水平、检测Caspase-8的表达差异;应用流式细胞术检测细胞凋亡的变化及表柔比星与c-FLIP-siRNA联合应用对细胞凋亡的影响。结果 c-FLIP-siRNA能有效地抑制c-FLIP蛋白的表达(P＜0.05),促进细胞的凋亡(P＜0.05)。c-FLIP-siRNA和表柔比星联合应用较单用表柔比星能明显促进MCF-7细胞的凋亡(P＜0.05)。结论 c-FLIP-siRNA能够促进MCF-7细胞的凋亡,并且能够增强表柔比星的抗肿瘤作用。