可溶性CD40配体对白血病HL-60细胞Caspase-3及Caspase-8表达的影响

目的 Caspase-3和Caspase-8在多种肿瘤中异常表达,与白血病的疗效等密切相关.本研究分析可溶性CD40配体(soluble CD40 ligand,sCD40L)对人白血病HL-60细胞Caspase-3及Caspase-8表达的影响,探讨其对HL-60细胞的作用机制.方法 2.0、4.0和6.0 mg/L的sCD40L作用HL-60细胞48 h,采用流式细胞术检测HL-60细胞凋亡水平及细胞周期,RT-PCR检测HL-60细胞中Caspase-3和Caspase-8基因的表达水平,蛋白质免疫印迹法检测HL-60细胞中Caspase-3和Caspase-8的蛋白表达.结果 2.0、4.0和6.0 mg/L的sCD40L作用HL-60细胞48 h后,浓度依赖性诱导HL-60细胞的凋亡,凋亡率分别为(48.17±3.22)％、(60.73±5.46)％及(71.26±5.83)％,与对照组(36.42±2.75)％比较,差异有统计学意义,F=36.373,P=0.003.sCD40L阻滞HL-60细胞在G0/G1期,RT-PCR结果显示,Caspase-3和Caspase-8 mRNA的表达上调;蛋白质印迹法结果显示,Caspase-3和Caspase-8蛋白表达增强.结论 sCD40L在体外能够以浓度依赖性促进HL-60细胞凋亡,阻滞细胞在G0/G1期,其可能机制是通过激活Caspase-3和Caspase-8.     

骨肉瘤组织FLIP和FADD及Caspase-8蛋白表达与细胞凋亡相关性的研究

目的:探讨FLIP、FADD和Caspase-8在人骨肉瘤组织及骨软骨瘤组织中的表达及其与骨肉瘤细胞凋亡的关系.方法:应用免疫组化法检测FLIP、FADD和Caspase-8蛋白在43例骨肉瘤组织及30例骨软骨瘤组织中的表达,并经图像分析系统检测FLIP、FADD和Caspase-8蛋白的平均光密度(OD)值.用激光扫描共聚焦显微镜检测骨肉瘤及骨软骨瘤中细胞凋亡分布情况并对各因子之间进行相关性分析.结果:FLIP蛋白阳性物质在骨肉瘤中的表达高于骨软骨瘤,P<0.05;而FADD 和 Caspase-8蛋白在骨肉瘤中的表达低于骨软骨瘤,P<0.05.FLIP和Caspase-8蛋白在骨肉瘤中表达呈负相关,r=-0.843,P<0.05;而FLIP、FADD蛋白在骨肉瘤中表达无相关性.骨肉瘤组细胞凋亡指数(AI) 显著低于骨软骨瘤组,P<0.05;FLIP蛋白表达与细胞凋亡指数呈负相关,r=-0.726,P<0.05;而Caspase-8蛋白表达与骨肉瘤细胞凋亡呈正相关,r=0.446,P<0.05; FADD蛋白表达与与凋亡指数无相关性.结论:FLIP蛋白对骨肉瘤细胞凋亡有抑制作用,Caspase-8蛋白在骨肉瘤中呈低表达,抑制了肿瘤细胞凋亡.如能抑制FLIP的表达,促进Caspase-8的表达,可提高骨肉瘤细胞对凋亡的敏感性.     

泛素-蛋白酶体通路对TRAIL诱导结肠癌细胞株SW1116凋亡作用的影响

目的:探讨泛肽-蛋白酶体通路对于TRAIL诱导结肠癌细胞凋亡作用的影响.方法:MTT及流式细胞术分析不同药物分组的细胞抑制率及凋亡率;Western Blot检测Caspase-4,Caspase-8的表达丰度;光镜及电镜动态观察各个时点的细胞形态.结果:单纯TRAIL组诱导凋亡效果并不理想,联合MG-132蛋白酶体抑制剂后抑制效果显著增强.结论:泛肽-蛋白酶体通路参与了TRAIL诱导结肠癌细胞凋亡的调节,在该进程中Caspase-4,Caspase-8是必须的关键性分子.     

TRAIL、Caspase-8和NF-кB蛋白在人骨肉瘤中的表达及其与细胞凋亡的相关性研究

目的 探讨TRAIL、Caspase-8和NF-кB在人骨肉瘤组织及骨软骨瘤组织中的表达规律及其与骨肉瘤细胞凋亡的相互关系.方法 应用免疫组化方法,检测TRAIL、Caspase-8和NF-кB蛋白在43例骨肉瘤及15例骨软骨瘤中的表达,并经图像分析系统测量TRAIL、caspase-8和NF-кB蛋白的平均光密度(OD)值;用TUNEL方法检测骨肉瘤及骨软骨瘤中细胞凋亡.结果 TRAIL、Cuspase-8蛋白在骨肉瘤中的阳性表达均低于骨软骨瘤组织(P<0.05);而NF-кB蛋白在骨肉瘤中的表达高于骨软骨瘤(P<0.05).TRATL与Caspase-8蛋白在骨肉瘤中表达呈正相关(P<0.01);而TRATL与NF-кB蛋白在骨肉瘤中表达呈负相关(P<0.01).骨肉瘤组细胞凋亡指数(AI)显著低于骨软骨瘤组(P<0.05);TRAIL、Caspase-8蛋白表达与细胞凋亡均呈正相关(P<0.01);而NF-кB蛋白表达与骨肉瘤细胞凋亡呈负相关(P<0.01).结论 TRAIL基因可能是诱导骨肉瘤细胞凋亡的分子基础,参与了其发生发展过程中细胞凋亡的调控.Caspuse-8作为影响细胞凋亡过程的因子,在骨肉瘤发生、发展中发挥作用.NF-кB在骨肉瘤细胞增殖与凋亡中具有重要作用.TRAIL、Caspase-8蛋白呈低表达,可能受NF-кB高表达的调控而不能诱导细胞凋亡.提示三者在骨肉瘤的发生、发展中起协同作用.     

下调CK2α基因表达抑制肺腺癌A549细胞的增殖和凋亡

目的:探讨下调CK2α基因表达后对肺腺癌A549细胞的影响.方法:构建pSilencerTM4.1-shCK2α-eGFP慢病毒表达载体,建立稳定干扰CK2α表达的A549细胞株.利用MTT、克隆形成、凋亡实验检测干扰CK2α基因表达后,A549细胞的增殖和凋亡的能力.利用Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Bcl-xl、Bcl-2的表达.结果:下调CK2α基因表达后肺腺癌A549细胞增殖能力减低,促进细胞凋亡.细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8上调,但Bcl-xl、Bcl-2蛋白明显下调.结论:下调CK2α基因表达后抑制肺腺癌A549细胞增殖、促进凋亡.     

DAPK诱导肺癌PGCl3细胞凋亡时Caspases的表达变化

目的:探讨死亡相关蛋白激酶(deathassociatedproteinkinase,DAPK)诱导PGCl3细胞凋亡的可能机制及其对半胱氨酸蛋白酶(Caspases)表达的影响。方法:真核表达载体pcDNA3·1-DAPK导入PGCl3细胞中。荧光染色法观察细胞凋亡,流式细胞仪检测凋亡峰、细胞周期和线粒体膜电位的变化。RT-PCR检测Caspase-3、Caspase-6和Caspase-8表达变化。结果:pcDNA3·1-DAPK转染导致PGCl3细胞发生凋亡。pcDNA3·1-DAPK不影响PGCl3细胞周期和线粒体膜电位,t=1·816,P=0·328。DAPK诱导PGCl3细胞凋亡时,Caspase-3和Caspase-8基因表达上调,Caspase-6基因表达无明显变化。Caspase的抑制剂crmA(100μmol/L)不能完全抑制细胞凋亡,t=0·969,P=0·423。结论:过表达的DAPK诱导PGCl3细胞凋亡与Caspase-8和Caspase-3途径有关,Caspase-6相关途径可能不是主要路径,同时可能存在不依赖于Caspase激活途径。     

桔梗皂苷D对人移行细胞癌5637细胞株的诱导凋亡作用及其分子机制

目的 探讨桔梗皂苷D对人移行细胞癌5637细胞诱导凋亡作用及分子机制。方法 HE染色和透射电子显微镜观察细胞的形态学变化;流式细胞学技术检测细胞凋亡率的变化;Western blot法检测凋亡通路相关蛋白的表达变化;PCR法检测p53、Bcl-2、Bax mRNA表达;免疫组织化学法检测凋亡相关蛋白表达的影响。结果 通过HE染色和电子显微镜观察桔梗皂苷D组5637细胞,可见凋亡细胞,凋亡指数明显高于对照组（P<0.01）;与对照组细胞相比,桔梗皂苷D组5637细胞Survivin、Livin表达量明显下降（P<0.05）;Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、Cyt-c表达量与对照组比较,明显增加（P<0.05）;p53、Bax mRNA水平明显升高,Bcl-2 mRNA表达下降（P<0.01）; Bax、Caspase-9、Caspase-8以及Caspase-3表达较对照组增多,而Bcl-2表达则明显下降（P<0.01）。结论 桔梗皂苷D能诱导人移行细胞癌5637细胞凋亡,其作用机制可能与上调Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、Cyt-c、p53和下调Bcl-2表达、激活线粒体途径和死亡受体途径有关。     

TRAIL、Caspase-8和NF-κB蛋白在人骨肉瘤中的表达及其与细胞凋亡的相关性研究

目的探讨TRAIL、Caspase-8和NF—κB在人骨肉瘤组织及骨软骨瘤组织中的表达规律及其与骨肉瘤细胞凋亡的相互关系。方法应用免疫组化方法,检测TRAIL、Caspase-8和NF—κB蛋白在43例骨肉瘤及15例骨软骨瘤中的表达,并经图像分析系统测量TRAIL、Caspase-8和NF—κB蛋白的平均光密度（0D）值;用TUNEL方法检测骨肉瘤及骨软骨瘤中细胞凋亡。结果TRAIL、Caspase-8蛋白在骨肉瘤中的阳性表达均低于骨软骨瘤组织（P〈0．05）;而NF—κB蛋白在骨肉瘤中的表达高于骨软骨瘤（P〈0．05）。TRATL与Caspase-8蛋白在骨肉瘤中表达呈正相关（P〈0．01）;而TRATL与NF-κB蛋白在骨肉瘤中表达呈负相关（P〈0．01）。骨肉瘤组细胞凋亡指数（AI）显著低于骨软骨瘤组（P〈0．05）;TRAIL、Caspase-8蛋白表达与细胞凋亡均呈正相关（P〈0．01）;而NF—κB蛋白表达与骨肉瘤细胞凋亡呈负相关（P〈0．01）。结论TRAIL基因可能是诱导骨肉瘤细胞凋亡的分子基础,参与了其发生发展过程中细胞凋亡的调控。Caspase-8作为影响细胞凋亡过程的因子,在骨肉瘤发生、发展中发挥作用。NF-κB在骨肉瘤细胞增殖与凋亡中具有重要作用。TRAIL、Caspase-8蛋白呈低表达,可能受NF—κB高表达的调控而不能诱导细胞凋亡。提示三者在骨肉瘤的发生、发展中起协同作用。     

尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞凋亡及Survivin和Caspase-3表达的影响

目的:观察环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖及凋亡的影响,研究其对凋亡抑制蛋白Survivin和Caspase-3表达的影响,探讨尼美舒利诱导Eca-109细胞凋亡的作用机制.方法:尼美舒利作用Eca-109细胞后,MTT法测定尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制率;电子显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡:RT-PCR法检测Eca-109细胞Survivin mRNA表达变化,Western blot检测Survivin和Caspase-3蛋白表达变化.结果:尼美舒利(50～400μmol/L)对Eca-109细胞生长有抑制作用,随浓度升高、时间延长抑制作用增强,并诱导Eca-109细胞凋亡,呈剂量-时间效应关系;尼美舒利可降低Survivin mRNA和蛋白表达,增加Caspase-3蛋白表达.结论:尼美舒利可诱导人食管癌细胞株Eca-109凋亡,其机制可能与下调Survivin表达及激活Caspase-3表达有关.     

Livin影响水疱口炎病毒诱导肺癌A549细胞凋亡效应的实验观察

 目的　探讨Livin表达影响水疱口炎病毒（VSV）对肺癌A549细胞的促凋亡效应。方法　利用RNA干扰技术下调Livin在肿瘤细胞中的表达,通过Tunel染色观察VSV对肺癌A549细胞的凋亡效应,Western blot法检测Livin蛋白的表达,荧光定量法检测Caspase-3的活性。结果　VSV（感染复数＝ 0.1 pfu／细胞）对A549细胞有促凋亡作用;抑制Livin的表达增强了VSV对A549细胞的促凋亡作用,增强了Caspase-3的活性。结论　Livin表达沉默后可能通过影响Caspase-3活性而增强了VSV对A549细胞的促凋亡效应。     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

Assessment of the degree of carcinogenicity of small doses of nitrites

Chronic experiments on CBA and C57B1 mice and acute experiments on CBA mice established: (a) carcinogenic effect of sodium nitrite given continuously with drinking water (0.1; 1.0 and 10.0 maximum allowable concentration) in combination with morpholine fed with bread, and (b) endogenous synthesis of nitrosomorpholine as a result of simultaneous intragastric administration of same doses of sodium nitrite and morpholine. Also, nitrosomorpholine and N-nitrosodimethylamine synthesis was observed in vitro following addition of low-dose sodium nitrite, morpholine and amidopyrine to human gastric juice. Carcinogenic hazard associated with low-dose nitrite consumption in humans is discussed.     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

食管贲门癌切除术黏膜层单层吻合法疗效分析

目的探讨食管、胃及空肠黏膜单层吻合法预防吻合口瘘、吻合口狭窄及返流性食管炎的效果.方法 1996年3月～2002年8月手术治疗食管癌235例,贲门癌195例,采用食管-胃及空肠黏膜延长、黏膜单层缝合法.结果术后10 d X线吞钡照片示钡剂通过顺畅,吻合口直径1.5～2 cm.术后随访1年,吞咽顺利,未见吻合口狭窄.结论该术式吻合口径宽,对预防吻合口瘘、狭窄及返流性食管炎效果显著,是食管及胃肠吻合较为理想的方法.     

胰头癌手术切除可能性的术前评价

目的通过总结胰头癌病人的临床表现和影象学检查结果来评价手术切除的可能性。方法总结32例胰头癌病人的临床表现和CT、磁共振（MRI）检查结果,判断肿瘤是否已发生邻近浸润或远处转移,以此来评价其手术切除的可能性。结果在22例作CT检查的病例中,判断正确的为17例,准确率为77．3%。作MR检查9例,全部判断正确,准确率为100%。结论某些特殊的临床表现和CT、MR检查对判断肿瘤是否发生邻近浸润或转移有较大价值,为术前评价手术切除的可能性提供依据。