丙泊酚对胆道感染患者髓样细胞触发受体-1表达的影响

目的探讨丙泊酚对胆道感染患者外周血髓样细胞触发受体-1(TREM-1)的影响。方法 48例严重胆道感染患者,随机分为两组:丙泊酚处理组(P 组,n=28),术中用丙泊酚6 mg·kg~(-1)·h~(-1)及异氟醚(呼气末异氟醚浓度维持在1%)维持麻醉;对照组(N 组,n=20),术中用异氟醚维持麻醉(呼气末异氟醚浓度维持在2.5%)。上述两组术中均间断静脉注射阿曲库铵、芬太尼维持麻醉.且用量无差异。两组分别在手术前及手术后12、24、48、72 h 留取血液标本,用流式细胞术检测外周血 TREM-1蛋白的表达;用酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测血肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平。结果术前两组患者的 TREM-1及 TNF-α含量差异无统计学意义;P 组患者术后12、24、48、72 h 的 TREM-1及 TNF-α水平均明显低于 N 组(P<0.05)。结论严重胆道感染患者可致外周血TREM-1蛋白高水平表达。丙泊酚可降低 TREM-1蛋白表达水平.减轻炎症反应。     

髓系细胞触发受体1在烧伤后早期患者外周血单核细胞中的表达

目的了解髓系细胞触发受体1（TREM-1）在烧伤后早期患者外周血单核细胞中的表达情况，并探讨其意义。方法选择8例健康志愿献血者（健康对照组）及伤后48h内入院的29例轻、中度烧伤患者（烧伤1组），9例重度、特重度烧伤患者（烧伤2组），采集其外周血分离单核细胞。半定量反转录-PCR法检测单核细胞TREM-1mRNA的表达，流式细胞术检测细胞表面TREM-1蛋白的表达。酶联免疫吸附测定法检测血浆中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）的含量。结果健康对照组、烧伤1组、烧伤2组外周血单核细胞中TREM-1mRNA表达量分别为0．74±0．13、1．24±0．09、1．46±0．07，细胞表面TREM-1蛋白表达率分别为（9±4）％、（51±6）％、（71±7）％。烧伤1组、烧伤2组以上2项指标及血浆中TNF-α、IL-1β含量均较健康对照组明显升高（P=0．000）。3组受试人员血浆中TNF—d、IL-1p的含量与TREM一1mRNA表达水平呈显著正相关（rs=0．68、0．72，P=0．000）。结论严重烧伤后早期患者外周血单核细胞中TREM-1表达增高，这一变化与炎性因子分泌相关；TREM-1参与了烧伤后急性炎性反应的发生与发展。     

吻合肝动脉对大鼠部分肝移植早期损伤的影响

目的探讨吻合肝动脉在大鼠部分肝移植早期损伤中的作用。方法选取雄性SD大鼠180只，随机分成3组：全肝移植组（A组）；部分肝移植组（B组）；部分肝移植肝动脉化组（C组）。在恢复血供后30min，2、3、6、12、24h等6个时间点分别取材，检测：血清肝功能指标；血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平；原位末端标记法（TUNEL）检测肝组织细胞凋亡；荧光半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测TNF-α和TNF-α受体在肝组织中的表达。结果各组总胆红素（TB）、谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）峰值均出现在术后6、12h后逐渐下降，TB、ALT和AST峰值依次为B组〉C组〉A组（P值均〈0．05）；移植术后各组血清TNF-α表达水平在3h时达到峰值，随后逐渐下降，峰值B组〉C组〉A组。其中B组峰值显著高于A和C组，而A、C组峰值差异无统计学意义（P〉0．05）；B组各时间点细胞凋亡数均显著多于A组和C组；B组肝组织TNF-α表达峰值位于术后2h，A、C组峰值位于术后3h，B组12h表达显著减少，A、C组术后12h为阴性表达。B组TNF-α受体2基因表达水平显著高于A、C组。结论吻合肝动脉可显著减轻部分移植肝早期损伤。TNF-α及其受体的表达强度与肝脏损伤程度有密切关系，可能是参与大鼠部分肝移植早期损伤过程的重要细胞因子。     

肝移植术后血氨和乳酸水平与肝性脑病的相关性

目的 研究肝移植术后血氨和乳酸的动态监测结果与发生肝性脑病的相关性,分析乳酸清除率对受者术后存活率的影响.方法 回顾性分析84例肝移植受者的临床资料,动态监测术前、术毕、术后12、24和48 h的血氨和乳酸水平,并计算出术后12 h的乳酸清除率.根据是否发生术后肝性脑病将受者分为肝性脑病组与非脑病组,计量资料采用t检验,计数资料采用x2检验进行分析;另根据术后12 h乳酸清除率的不同,将所有受者分为高乳酸清除率组和低乳酸清除率组,比较两组术后存活率.结果 肝性脑病组术前血氨水平高于非脑病组,差异有统计学意义(P＜0.05),两组术前乳酸水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);两组受者除术后48 h血氨水平外,术后各阶段血氨和乳酸水平均高于术前,差异有统计学意义(P＜0.05);肝性脑病组术毕至术后48 h的血氨和乳酸水平均高于非脑病组,差异有统计学意义(P＜0.05);肝性脑病组术后12 h乳酸清除率明显低于非脑病组,差异有统计学意义(P＜0.01);高乳酸清除率组受者术后1年存活率高于低乳酸清除率组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肝移植术后血氨和乳酸水平与肝性脑病的发生密切相关.术后乳酸清除率高的受者预后较好.乳酸清除率可作为预后的评估指标.     

24h乳酸清除率预测肝移植早期发生并发症临床价值研究

目的 探讨24h血乳酸清除率在肝移植早期并发症发生中的预测价值。方法 前瞻性观察并收集2007年1月至2009年12月中山大学附属第一医院肝移植术后进入外科重症监护病房172例病人的术前MELD评分、术前Child评分,入ICU24h后动脉血乳酸清除率及移植7d内病人发生的早期并发症。分别将病人分成早期并发症组和无早期并发症组,比较两组24h血乳酸清除率差异性。应用临床诊断性能（ROC）曲线,对乳酸清除率在预测肝移植术后发生感染中的应用价值进行评价。 结果 172例肝移植病人中有20.9%（36例）病人发生各种早期并发症。非并发症组、并发症组的早期乳酸清除率分别为（51.4±18.6）%和（17.3±11.2）%,差异有统计学意义（P<0.001）;早期乳酸清除率评价并发症发生ROC曲线You den指数最高时的24h血乳酸清除率截断值为34.5%,ROC曲线下面积为0.951±0.016（P<0.001）,敏感性和特异性分别为95.3%和86.0%。结论 肝移植术后24h血乳酸清除率与肝移植后早期并发症发生率密切相关;24h血乳酸清除率＜34.5%是预测肝移植病人术后早期并发症发生的简易和准确的指标。     

限制性液体复苏对失血性休克大鼠肠损伤的影响

目的 研究不同剂量液体复苏对失血性休克大鼠肠损伤及肠黏膜通透性的影响。方法 将72只SD大鼠随机分成4组（n=18）：高剂量液体复苏组（HLR组）、中剂量液体复苏组（MLR组）、低剂量液体复苏组（LLR组）及未复苏组（Sham组）,前3组的液体复苏剂量分别为45、30和15 mL / （kg · h）。复苏后检测所有大鼠肠黏膜的通透性。于复苏后24、48及72 h,均分别抽取6只大鼠检测动脉血中乳酸和静脉血中肿瘤坏死因子-α （TNF-α）的水平,测量肠湿/干重比,进行小肠组织病理学检查并评分。结果 复苏后,HLR组的肠黏膜通透性高于其余3组（P＜0.05）。复苏3～8 h内,Sham组的所有大鼠均死亡,而其余3组大鼠均存活。术后24 h时LLR组的乳酸水平低于其余2组（P＜0.05）;HLR组的TNF-α水平在术后24、48及72 h均高于其余2组（P＜0.05）,在48 h时,LLR组低于MLR组（P＜0.05）;术后24 h时,LLR组的肠湿/干重比最低,HLR组最高（P＜0.05）。HE染色结果显示,3组大鼠肠黏膜损伤严重程度均随时间好转,但在48和72 h时,LLR组的肠绒毛基本正常。结论 复苏剂量为15 mL / （kg · h）的限制性液体复苏能降低失血性休克大鼠术后早期酸中毒的程度和TNF-α的释放,降低肠黏膜通透性,减轻对肠道的损伤。     

肝移植术后早期合并脓毒症患者外周血炎症因子的变化特点

目的研究肝移植术后患者发生早期脓毒症时外周血炎症因子的动态变化特点。方法 19例肝移植患者,根据术后早期(14 d内)有否发生脓毒症分成脓毒症组(9例)和非脓毒症组(10例),比较两组患者术前30 min、术后1 d、3 d、7 d、14 d外周血炎症因子的动态变化和差异。结果 9例脓毒症的平均诊断时间为6 d。两组患者肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-10水平在术后1 d稍有上升(P>0.05),之后下降,其中非脓毒症组一直维持在较低水平,而脓毒症组TNF-α于术后7 d再次上升。非脓毒症组术后高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein,HMGB1)信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)表达水平较术前有所升高,术后3 d达到高峰后逐渐下降,术后14 d回复至术前水平;脓毒血症组术后HMGB1 mRNA表达均较术前显著上升,并一直维持在较高水平,其在术后各时间点表达均显著高于非脓毒症组(均为P<0.05)。结论肝移植患者发生术后早期脓毒症时,外周血TNF-α上升时间与脓毒症发生时间是平行的,IL-10上升时间晚于TNF-α,但两个指标都并非持续升高,而HMGB1于脓毒症发病早期已明显升高,并一直维持较高水平。提示动态监测HMGB1的表达水平有助于预测肝移植术后早期脓毒症的发生。     

肝移植术后早期肠内营养的临床疗效观察

目的：探讨肝移植术后患者早期肠内营养（EN）支持的疗效。 方法：55例肝移植患者分别在术后48 h内给予EN（27例,EN组）或肠外营养（28例,PN组）支持。比较两组术后第1、9天血清白蛋白（ALB）、前白蛋白（PA）、淋巴细胞计数（LC）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）等指标,及术后2周内感染发生情况、机械通气时间、ICU住院天数、术后住院天数。 结果：两组术后第1天各实验室指标差异无统计学意义（均P>0.05）,术后第9天,EN组ALB、PA、LC水平均明显高于PN组（均P<0.05）;两组间ALT、AST、TBIL、DBIL水平差异无统计学意义（均P>0.05）,但均较术后第1天明显下降。EN组术后2周内感染发生率明显低于PN组（P<0.05）。两组机械通气时间和ICU住院时间差异无统计学意义（均P>0.05）,但EN组术后住院时间明显低于PN组（P<0.05）。 结论：肝移植术后患者早期应用EN支持,可以有效改善机体营养状态和免疫功能,减少感染发生率,促进术后康复。  

     

乌司他丁对肝脏移植早期外周血NF-κB和TNF-α及酶学活性的影响

目的：通过观察乌司他丁对肝脏移植早期外周血NF-κB、TNF-α和酶学活性的影响,研究乌司他丁对肝脏移植术后早期再灌注损伤的保护作用。方法：收集36例肝硬化晚期患者,随机分为实验组和对照组（各18例）,实验组在肝移植时给予乌司他丁30万U＋生理盐水10mL静脉滴注,对照组给生理盐水10mL静脉滴注,在供肝恢复血供后1、2、4及6h抽取患者外周血进行肝酶学检查,用Westernblot技术检测外周血中核转录因子κB（NF-κB）P65表达,用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定外周血中TNF-α表达水平。结果：和对照组相比,实验组肝移植术后早期各时相点外周血肝酶学指标、NF-κBP65和TNF-α的表达水平明显下降,且差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：乌司他丁能抑制肝移植后早期肝脏炎症通路,对肝脏移植后再灌注损伤具有保护作用。     

添加谷氨酰氨强化的早期肠内营养对肝移植大鼠肠屏障的保护作用

目的 观察使用添加谷氨酰胺(Gln)强化的早期肠内营养(EEN)对原位肝移植大鼠肠黏膜屏障的影响.方法 取Wistar大鼠,采用随机数字表法将大鼠分为对照组、肝移植组和EEN组.对照组仅手术分离肝十二指肠韧带;肝移植组和EEN组按两袖套法进行肝移植,供者为同批Wistar大鼠.术前3、2、1d及术后3h开始,给予EEN组受鼠添加了Gln(0.3 g·kg-1 ·d-1)的肠内营养混悬液(125 ml·kg-1 ·d-1)灌胃,肝移植组受鼠给予等体积生理盐水灌胃;对照组无特别处理.术后检测各组小鼠血浆内毒素、D-乳酸及血清肿瘤坏死因子α (TNF-α)的含量,测定肠黏膜TNF-αmRNA的表达,并对回肠肠壁组织进行超微结构观察.观察和记录各组小鼠的存活时间.结果 肝移植组和EEN组术后12、24和72 h的血浆内毒素、D-乳酸及血清TNF-α含量均明显高于对照组(P＜0.01),而EEN组术后24和72 h时较上述指标肝移植组均明显下降(P＜0.01).电镜下,对照组回肠黏膜上皮间隙正常,微绒毛排列整齐;术后12、24和72 h时,肝移植组小肠黏膜上皮间隙扩大,上皮细胞线粒体肿胀,微绒毛肿胀、空泡化,而EEN组超微结构的改变较肝移植组明显减轻.肝移植组和EEN组术后TNF-α mRNA表达明显升高(P＜0.01),而EEN组较同时点肝移植组的TNF-αmRNA表达明显下降(P＜0.01).对照组存活时间明显长于肝移植组和EEN组(P＜0.05),而EEN组存活时间较肝移植组明显延长(P＜0.05).结论 肝移植后可导致肠黏膜屏障损害,添加Gln强化的EEN对肝移植大鼠肠黏膜屏障具有明显的保护作用,可明显延长肝移植后大鼠的存活时间.     

髓样细胞表达触发受体1在重症急性胰腺炎中的表达和意义

目的探讨髓样细胞表达触发受体1(TREM-1)在重症急性胰腺炎(SAP)中的表达和意义。方法反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测轻型胰腺炎、重症急性胰腺炎患者和正常人外周血TREM-1 mRNA的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测SAP外周血中可溶性TREM-1、α和TNF-IL-10的含量。结果 SAP患者外周血中TREM-1 mRNA的相对表达显著高于轻型胰腺炎和正常人对照组(P0.05);患者外周血中TREM-1与TNF-α和IL-10的含量均呈正相关,相关系数分别是0.951SAP(P0.05)和0.873(P0.05)。结论 TREM-1在SAP患者外周血中的呈高表达,与TNF-α和IL-10关系密切,具有重要的临床意义。     

内毒素血症及炎症因子在肝肺综合征中的作用及其在肝移植术后的变化

目的探讨内毒素血症及相关炎症因子在肝肺综合征(hepatopulmonary syndrome,HPS)发生、发展机制中的作用及其在肝移植术后的变化。方法回顾性分析2004年1月至2006年4月中山大学附属第三医院肝移植中心拟行同种异体原位肝移植术的279例患者临床资料,其中HPS患者31例列为HPS组,同时随机选取行肝移植术且未合并HPS的终末期肝病患者30例为非HPS组及10例健康志愿者为正常对照组。HPS组、非HPS组和正常对照组分别于术前或治疗前1 d检测血清Toll样受体(Toll like receptor,TLR)2信使核糖核酸(messenger RNA,mRNA)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)mRNA、脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子(TNF)-α及内皮素(endothelin,ET)-1水平,HPS组和非HPS组分别于术后3、7、14、21、28 d检测总胆红素、TLR2 mRNA、TNF-α和ET-1水平。术后随访,记录随访期间的阳性事件和生存时间。结果截止至2008年7月,平均随访时间2.4年(最长4.4年)。目前,HPS组中26例行肝移植术患者存活15例,死亡11例,非HPS组中存活24例。肝移植术前HPS组患者的LPS、TNF-α、ET-1、TLR2 mRNA,iNOS mRNA的表达均明显高于正常对照组(均为P<0.05),但与非HPS组比较差异无统计学意义(P>0.05)。非HPS组患者的TLR2 mRNA和ET-1明显高于正常对照组(P<0.05),其iNOS mRNA、LPS与TNF-α也高于对照组,但无统计学意义(均为P>0.05)。HPS组患者肝移植术后28 d较术前TLR2 mRNA、TNF-α、ET-1水平有所下降(均为P<0.05)。结论 LPS及其相关炎症因子的释放增加在HPS的发生、发展中起着重要的作用。     

髓系触发受体-1在脆弱类杆菌诱导小鼠脓毒血症中的作用

目的 探讨小鼠TREM-1基因重组慢病毒干扰载体(Lentivector,LV)TREM-1 vshRNA对脆弱杆菌脓毒血症小鼠脾脏中促炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6表达及NF-κB通路的影响.方法 将清洁级BALB/c雄性小鼠分成4组,即正常对照组(C组),脆弱类杆菌脓毒症模型生理盐水组(S组),TREM-1 vshRNA干扰实验组(T组)和GFPvshRNA干扰实验组(G组).观察各组中小鼠脾内TREM-1,TNF-α,IL-1β,IL-6的蛋白表达以及IkBa,pDAP12,NF-κB p65的表达情况的变化.结果 与C组比,T组TREM-1 mRNA及蛋白表达均有显著增加(P＜0.01);T,G,S组脾细胞中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量均较C组显著增加(P＜0.01);T组脾细胞中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量均较S,G组明显降低(P＜0.01).S组脾细胞中的pDAPl2和核内NF-κB p65蛋白表达水平明显增强,IκBa蛋白表达水平降低;而T组与S组比较,pDAP12和NF-κB p65蛋白的表达水平显著下调.结论 小鼠TREM-1基因重组慢病毒干扰载体可选择性抑制TREM-1表达,下调脆弱类杆菌诱导的促炎症因子的分泌,而转染可能是通过下调DAPl2的表达,稳定IkBa/NF-κB复合物,抑制TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-8基因的转录,而对脆弱类杆菌脂多糖炎症反应产生抑制作用.     

失血性低血容量休克多器官功能障碍综合征的机制探讨

目的探讨失血性低血容量休克病人血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1（IL-1）水平与预后的关系。方法应用ELISA法检测29例失血性低血容量休克病人（休克组）血清TNF-α和IL-1浓度，与20例择期手术病人（对照组）进行比较，观察TNF-α和IL-1水平与多器官功能障碍综合征（MODS）的关系。结果休克组全身炎症反应综合征（SIRS）、MODS和感染的发病率明显高于对照组（P〈0．05）；休克组血清TNF-α和IL-1浓度明显高于对照组（P〈0．05）；MODS组血清TNF-α浓度较非MODS组明显升高（P〈0．05），血清IL-1浓度差异无显著性（P〉0．05）；休克组中死亡病人血清TNF-α浓度较存活病人明显增高（P〈0．05），血清IL-1浓度差异无显著性（P〉0．05）。结论失血性低血容量性休克发生SIRS是较为常见的，并且是导致MODS的重要原因之一；血清TNF-α浓度的高低与预后密切相关。     

雷公藤多甙对糖尿病肾病患者微炎症反应的影响

目的探讨雷公藤多甙对糖尿病肾病患者微炎症反应的影响。方法将58例糖尿病肾病患者随机分为普通治疗组（DN组）和雷公藤多甙治疗组（TL组）,共治疗3个月。Ficoll法分离外周血单个核细胞（PBMC）并于体外培养,观察雷公藤多甙对培养的PBMC的作用。用放射免疫法测定患者血清和PBMC上清液肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1（IL-1）的浓度,EMSA测定PBMC核因子-κKB（NF-κB）的活性。选择20名性别、年龄匹配的健康者作为对照组（NO组）。结果①与NO组治疗前相比,DN组和TL组治疗前血自蛋白降低,24h尿蛋白定量升高,血TNF-α和IL-1升高（P〈0．05）。②治疗后,与DN组相比,TL组患者血白蛋白升高,24h尿蛋白定量降低,血TNF-α和IL-1降低（P〈0．05）。③与NO组治疗前相比,DN组和TL组治疗前PBMC基础分泌TNF-α和IL-1增加,PBMC NF-κB活性升高（P〈0．05）。雷公藤多甙处理后,PBMC分泌TNF-α和IL-1明显减少,NF-κB活性降低（P〈0．05）。结论雷公藤多甙通过抑制PBMC活性及循环微炎症反应发挥治疗糖尿病肾病作用。     

门静脉高压症全腹腔镜下巨脾切除术后肠源性感染的风险研究

目的：探讨肝炎后肝硬化门脉高压症患者行全腹腔镜脾切除术后肠源性感染的风险。方法：2009年5月至2013年6月为44例肝炎后肝硬化门静脉高压患者行脾切除术，其中完全腹腔镜手术21例（腹腔镜组，n=21），开腹手术23例（开腹组，n=23）。检测两组患者手术前、后不同时间点外周血内毒素（ET）水平、二胺氧化酶（DAO）活性及肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度。结果：与术前相比，两组患者术后外周血ET、DAO、TNF-α均有所升高（P〈0．05）。腹腔镜组术后第3天、第5天血DAO、ET、TNF-α的浓度较开腹组升高明显（P〈0．05），然后逐渐下降。结论：肝炎后肝硬化门静脉高压患者行腹腔镜脾切除术，由于存在肝硬化失代偿及腹腔镜手术特殊操作等，可能导致肠壁通透性增高，容易引发肠源性感染。     

TNF-α抑制剂对破裂型腰椎间盘突出重吸收影响的实验研究

目的 研究TNF-α抑制剂(益赛普)对破裂型腰椎间盘突出重吸收的影响作用.方法 将42只雄性SD大鼠在适应性喂养2周后随机分为空白组和药物组.空白组分两种模型:随机分为模型组Ⅰ(椎间盘不刺破组)、模型组Ⅱ(椎间盘刺破组);药物组(TNF-α抑制剂组)给以益赛普注射.动物造模成功后给药4周后处死,所取得的大鼠椎间盘进行T...     

人髓样细胞触发性受体-1在急性胆管炎的表达及意义

目的 观察人髓样细胞触发性受体(TREM)-1在急性胆管炎患者中表达的规律及其临床意义,探讨TREM-1在急性胆管炎中与肿瘤坏死因子(TNF)-á,CRP的相关性.方法 分别收集34例急性胆管炎患者(AC),24例急性重症胆管炎(ACST)患者和60例正常人外周血白细胞,以半定量逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)检测中性粒细胞中THEM-1的mRNA表达;免疫细胞化学检测TREM-1的蛋白表达.结果 对照组TREM-1的mRNA半定量比值为0.458±0.043.AC和ACST组治疗前分别为0.809±0.044、0.981±0.089,术后24 h为0.785±0.077、0.954±0.072,48 h为0.565±0.009、0.719±0.047,ACST的TREM-1表达水平明显高于AC(P＜0.05).免疫细胞化学镜下观察结果 与RT-PCR结果 一致.TREM-1与TNF-á,CRP表达水平高度正相关(r1=0.719,r2=0.701,P＜0.01).结论 人TREM-1在急性胆管炎发病初表达增高,与TNF-á,CRP表达高度正相关.提示TREM-1在急性胆管炎的发生发展中起重要作用.