前列腺癌组织中凋亡抑制基因Livin的表达研究

目的：探讨前列腺癌组织中凋亡抑制基因Livin的表达及其与临床病理特征的关系。方法：应用RT-PCR和免疫组化（SP）法，检测Livin在62例PCa组织中的表达情况，其中高分化癌14例，中分化癌30例，低分化癌18例，正常前列腺组织10例。结果：62例PCa组织中Livin基因高表达，正常的前列腺组织中Livin均无明显表达。62例PCa组织中Livin蛋白阳性表达共有37例（59．7％），低分化组Livin蛋白阳性表达率（83．3％）明显高于高分化组（28．6％），其差异有统计学意义（P〈0．05），中、高分化组间及低、中分化组间Livin蛋白阳性表达率无统计学差异（P〉0．05）。Livin蛋白阳性表达与PCa的临床分期比较，T1-T2 65．0％，T3-T4 77．3％，亦有统计学意义（P〈0．05），临床分期愈晚，Livin蛋白阳性表达率愈高。结论：Livin与PCa的发生、发展有关，检测PCa组织中Livin表达可能对判断PCa预后有一定意义。     

凋亡抑制基因Livin在食管癌中的表达及其与P53、Bcl-2的关系

目的探讨凋亡抑制基因Livin在食管癌组织中的表达及其与P53和Bcl-2表达的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）结合银染技术检测36例食管癌组织和18例癌旁正常组织中Livin mRNA的表达，采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶（S—P）法检测食管癌组织中Livin、P53和Bcl-2蛋白的表达。结果RT—PCR检测结果显示：Livin mRNA在食管癌组织中的阳性表达较癌旁正常组织明显增强，两种异构体基本同时表达。免疫组织化学检测结果显示：Livin蛋白在食管癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常组织（P〈0.01）。癌组织侵及食管外膜的Livin阳性表达率高于癌组织侵及食管肌层者（P〈0.05）；有淋巴结转移者的Livin阳性表达率高于无淋巴结转移者（P〈0.05）。Livin蛋白表达与P53蛋白表达无关（x^2=1．00，P=0．505），与Bcl-2蛋白表达有关（x^2=10．60，P=0．003）。结论Livin在食管癌组织中异常表达，有望成为食管癌诊断和基因治疗的新靶点。凋亡相关基因Bcl-2与Livin基因的异常表达可能在食管癌癌变中起协调作用。     

前列腺组织中PTTG的表达及其意义

目的：研究垂体肿瘤转化基因（PTTG）在前列腺组织，尤其是前列腺癌组织中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学二步法检测正常前列腺（8例）、BPH（16例）、无远处转移的前列腺癌（47例）以及有远处转移的前列腺癌（19例）组织中PTTG的表达情况。用Stata统计软件分别对BPH和前列腺癌组织中PTTG的表达情况与PSA和Gleason分级间的关系进行分析。结果：PTTG在正常前列腺和BPH组织中无表达或弱表达，而63．7％（42／66）的前列腺癌中有阳性或强阳性表达，在良恶性前列腺组织之间的表达差异有统计学意义（x2=25．2487，P=0．000），无远处转移的前列腺癌和有远处转移的前列腺癌之间的表达差异无统计学意义（x2=0．3568，P=0．837）。PTTG在前列腺癌中的表达与PSA和Gleason分级之间无相关性。结论：PTTG在前列腺癌组织中高表达，可能在前列腺癌的发生发展过程中起重要作用。     

膀胱癌中Livin的表达及其与突变型P53的关系

目的探讨Livin在膀胱癌中的表达及意义，及其与突变型P53表达的相关性。方法采用34例膀胱癌石蜡标本及10例正常膀胱组织标本，通过免疫组化SP法检测Livin与突变型P53的表达。结果Livin在10例正常膀胱组织中不表达，而34例膀胱癌组织标本中有30例Livin阳性表达（P〈0．01）。在膀胱癌中Livin蛋白的阳性表达率和膀胱移行细胞癌的病理分级、临床分期、复发性无明显的相关性（P〉0．05）；突变型P53在正常膀胱组织中不表达，而34例膀胱癌组织标本中有18例突变型P53阳性表达（P〈0．01）；膀胱癌中Livin的表达率与突变型P53无相关性（P〉0．05）。结论Livin蛋白与突变型P53蛋白可作为诊断膀胱癌的特异性指标，亦为抗肿瘤基因治疗提供了新的靶点。     

PDCD5蛋白在人类正常前列腺、良性前列腺增生及前列腺癌组织中的表达

目的：探讨PDCD5在正常前列腺、良性前列腺增生（BPH）及前列腺癌（PCa）组织中的表达特点及其临床意义。方法：通过EnVision法对12例正常前列腺、22例前列腺增生及22例不同病理分级的PCa组织切片进行PDCD5免疫组织化学染色，采用人工阅片评分及计算机辅助染色强度判定2种方法对PDCD5在相应组织中的表达进行定性及定量分析。结果：PDCD5定性及定量检测结果分析显示：正常前列腺与BPH组织中PDCD5表达无显著性差异（P〉0．05），中低危组PCa（Glesaon评分≤7）及高危组PCa（Glesaon评分〉7）组织中PD—CD5表达与正常前列腺与BPH均存在显著性差异（P〈0．01），并且两组间PDCD5表达亦存在显著性差异（P〈0．05）。结论：PDCD5在正常前列腺及BPH组织中近似地呈现较强的阳性表达。PDCD5在PCa组织中的表达较正常组织及BPH均有显著下降，并且随着PCa恶性程度上升，PDCD5的表达进一步下调，提示PDCD5可能在不同程度上参与了PCa发生、发展过程中腺细胞凋亡的调控。     

雄激素受体在前列腺癌中表达和意义的探讨

目的 探讨雄激素受体（AR）在PCa中的表达和意义。方法 应用免疫组化Elivison法，检测45例PCa和10例前列腺增生组织标本中AR的表达，并探讨AR蛋白表达与PCa分期、分级、术前PSA、内分泌治疗效果及预后的关系。结果 AR在PCa和前列腺增生中阳性表达率分别为90％和93、3％，阳性表达率和表达程度无显著性差异（P〉0.05）；D期和A-C期PCa中阳性表达率分别为100％和87．5％，无显著差异（P〉0．05）．但D期PCa AR阳性表达程度显著增强（P〈0．05）；Gleason评分≤7和Gleason评分〉7PCa中阳性表达率分别为85.7％和100％，无显著差异（P〉0.05），但低分化PCa（Gleason评分〉7）AR阳性表达程度显著增强（P〈0．05）：PSA≤10ng／ml和PSA〉10ng／mlPEa中阳性表达率分别为80％和97.1％，阳性表达率和表达程度无显著性差异（P〉0．05）：在内分泌治疗有效和无效PCa中阳性表达率分别为87．5％和90、9％，阳性表达率和表达程度无显著性差异（P〉0．05）。结论 AR阳性表达程度与PCa分期、分级有关，对判断PCa生物学行为有参考价值。     

Livin在膀胱移行细胞癌中的表达及其与ki-67的关系

目的研究凋亡抑制蛋白家族（IAP家族）新的凋亡抑制因子livin在膀胱移行细胞癌（BTCC）中的表达及其与肿瘤分级、分期的关系及livin和ki-67在BTCC中表达的关系。方法采用免疫组化SP法对36例BTCC和8例正常膀胱黏膜livin和ki-67的表达进行检测，分析两者在膀胱癌组织和非膀胱癌组织中的表达，livin的表达与BTCC病理学分级、临床分期及与ki-67表达的关系。结果Livin在8例正常膀胱组织中均不表达，而在36例BTCC组织中的阳性表达率为86．1％（P〈0．01）。livin的表达和BTCC的病理分级，临床分期、k-67的表达无明显相关（P〉0．05）。结论细胞凋亡抑制因子livin在BTCC组织中表达上调，提示livin可能通过抑制细胞凋亡，对BTCC的发生发展起重要作用；但是我们的实验表明livin与调控细胞周期，促进细胞增殖无明显相关。Livin在膀胱癌中的高表达，有望成为一种有效、敏感的瘤标，并为BTCC的基因治疗提供新靶点。     

自噬相关基因Atg5与前列腺腺癌发生的相关性分析

目的:探讨自噬相关基因5(Atg5)与前列腺腺癌发生的相关性。方法:实时荧光定量PCR及免疫组化方法检测50例前列腺上皮内瘤变(PIN)、69例前列腺腺癌及30例良性前列腺增生(BPH)组织标本中Atg5的表达情况。结果:实时定量PCR结果显示,PIN及PCa组织中Atg5 mRNA的相对表达量显著高于BPH组织(5.270±0.230 vs 1.723±0.017,5.131±0.252 vs 1.723±0.017,P<0.01)。免疫组化结果显示Atg5在BPH、PIN及PCa组织中的阳性表达率分别为6.7%、94%及88.4%,BPH组织中Atg5的阳性表达率明显低于PIN及PCa,且差异具有统计学意义(P<0.001),PIN与PCa组别之间无显著差异(P>0.05)。Atg5的表达与前列腺腺癌的Gleason评分分级无显著相关性(P>0.05)。结论:前列腺组织中Atg5的高表达可能对前列腺腺癌的发生起着一定作用。     

FHIT和PTEN在前列腺腺癌中的表达及其意义

目的:探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)、磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)在前列腺腺癌中的表达及其意义。方法:应用免疫组化PV-6000法对85例前列腺腺癌及30例良性前列腺增生(BPH)标本进行FHIT、PTEN检测。结果:FHIT、PTEN在前列腺腺癌组织中阳性表达率分别为34.1%、42.4%;在前列腺结节性增生组织中阳性表达率分别为96.7%、90.0%。前列腺腺癌组织中FHIT、PTEN阳性表达明显低于BPH,差异具有统计学意义(P<0.01)。FHIT、PTEN在前列腺腺癌Gleason分级为高分化组内阳性表达率分别为44.4%、55.6%;中分化组内阳性表达率分别为38.9%、44.4%;低分化组内阳性表达率分别为25.0%、37.5%。FHIT、PTEN阳性表达率在前列腺腺癌高分化、中分化、低分化组别之间有差异,差异亦有统计学意义(P<0.05)。前列腺腺癌组织中FHIT的表达与PTEN的表达无明显相关性(P>0.05)。结论:FHIT和PTEN在前列腺腺癌发生、发展、浸润的过程可能发挥了一定作用。     

Caspase-1在良性前列腺增生组织中的表达及意义

目的:探讨正常和良性前列腺增生(BPH)组织中的caspase-1表达情况及意义。方法:应用免疫组化SP法分别检测21例BPH组织和7例正常前列腺组织标本中caspase-1的表达。结果:caspase-1阳性表达率在BPH组织中为71.4%(15/21),正常前列腺组织中为100%(7/7)。BPH上皮组织和间质组织的caspase-1阳性表达均比正常前列腺明显减少(P<0.01)。在BPH组织内部,上皮的caspase-1阳性表达明显高于间质(P<0.01)。结论:caspase-1在BPH组织中的表达较正常前列腺组织显著减少,提示由caspase-1介导的凋亡过程的减少可能参与了BPH的发病过程。     

前列腺组织中EGF、bFGF的表达

目的：研究EGF、bFGF在前列腺组织中的表达。方法：应用mRNA斑点杂交、原位杂交、免疫组织化学及原位杂交与免疫组织化学双染法检测6例正常前列腺（NP）、27例良性前列腺增生症（BPH）前列腺组织中EGF及bFGF的表达。结果：BPH前列腺组织和NP组织中无均无EGF mRNA表达,EGF蛋白表达呈弱阳性,两组间差异无显著性意义（P＞0.05）;NP组织上皮细胞有较多bFGF mRNA表达,但无bFGF翻译,基底基质细胞有少量mRNA及蛋白表达,二者表达水平基本一致;BPH前列腺组织上皮细胞无bFGF mRNA表达,但局灶性增殖上皮细胞细胞膜上有bFGF,基底基质细胞有大量bFGF mRNA转录及蛋白质翻译,以局灶性增殖区最为明显。结论：NP及BPH的前列腺组织中无EGF分泌细胞;bFGF在前列腺基底基质细胞过度表达,以自分泌、旁分泌方式促进了基质和上皮的非均一性增殖。     

Expression of peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR) in human prostate cancer

BACKGROUND: Recent studies have demonstrated that peroxisome proliferator activator-receptors (PPAR)-gamma is expressed in some cancer cells such as breast, lung, and gastric cancer, and its ligand induces growth arrest of these cancer cells through apoptosis. However, the expression and localization of PPARs in prostate have not been examined. In this study, PPARs expression was investigated in human prostate cancer (PC), prostatic intraepithelial neoplasia (PIN), benign prostatic hyperplasia (BPH), and normal prostate (NP) tissues. METHODS: Tumor specimens were obtained from 156 patients with PC, 15 with PIN, 20 with BPH, and 12 patients with NP tissues. The expressions were investigated by RT-PCR and immunohistochemical methods. RESULTS: Immunoreactive PPAR-alpha and -beta were significantly apparent in PC tissues. Marked expressions of PPAR-alpha and -beta were also detected in PIN, BPH, and NP groups. However, very weak or no expression of immunoreactive PPAR-gamma was found in BPH and NP cases. In contrast, we found significant expression of immunoreactive PPAR-gamma in cancer cells in PC group and in PIN group. CONCLUSIONS: Our results demonstrated that PPAR-gamma is induced in PC, and suggest that PPAR-gamma ligands may mediate its own potent antiproliferative effect against PC cells through differentiation.     

E2F3在前列腺癌中的表达及意义

目的探讨E2F3在前列腺癌中的表达及临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组化技术检测26例前列腺癌、20例良性前列腺增生和10例正常前列腺组织中E2F3 mRNA及蛋白的表达。结果E2F3 mRNA及蛋白的表达与临床分期有关,晚期（C＋D期）E2F3 mRNA及蛋白的表达水平明显高于早期（A＋B期,P〈0．05）,低分化癌E2F3 mRNA及蛋白的表达明显高于高中分化癌（P〈0．05）。前列腺癌中E2F3表达水平明显高于良性前列腺增生（P〈0．05）及正常前列腺组织（P〈0．05）。结论E2F3表达可能与前列腺癌的恶性程度有关,E2F3在前列腺癌的发生发展中起到促进作用。     

DD3 mRNA在前列腺癌组织中定量表达分析

目的:探讨DD3基因在前列腺组织中表达的临床意义。方法:用荧光定量RT-PCR方法对21例前列腺癌(PCa)组织、27例非前列腺部位的肿瘤组织、39例良性前列腺增生(BPH)组织和15例正常前列腺组织中的DD3的表达进行了定量分析,用ROC曲线对DD3 mRNA诊断PCa的性能进行了分析。结果:27例非前列腺组织中均未检测到DD3基因的表达。DD3在PCa组、BPH组和正常前列腺组表达量的中位数分别为7.2×106、2.5×104、1.5×104拷贝/mg组织。PCa组较BPH组和正常前列腺组DD3的表达量显著增高(P<0.01),而BPH组和正常前列腺组间则差异无显著性(P>0.05)。DD3表达量与临床分期和分化程度之间均无明显相关性。DD3 mRNA曲线下面积(AUC-ROC)为0.937(95%CI:0.879～0.995)。当临界值为1.4×105拷贝/mg组织时,灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、阳性拟然比(+LR)、阴性拟然比(-LR)分别为90.5%、85.0%、86.7%、76.0%、94.3%、6.03和0.11。结论:DD3 mRNA的表达仅限于前列腺组织,具有良好的组织特异性。DD3 mRNA表达在PCa组织中显著升高,在正常前列腺和BPH组织中差异无显著性。DD3 mRNA可作为PCa诊断的良好标志物,在PCa早期诊断、微转移诊断、预后判断、指导治疗等方面也具有潜在的应用价值。     

survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达

目的:探讨survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化、RT-PCR和Western印迹法检测survivin和GRIM-19在正常前列腺(NP)组织、良性前列腺增生(BPH)组织和前列腺癌(PCa)组织中的表达情况。结果:免疫组化结果显示survivin在NP、BPH和PCa组织中的表达率分别为6.25%、18.18%和90.62%(P<0.01);GRIM-19的表达率分别为87.50%、81.82%和9.37%(P<0.01)。半定量RT-PCR结果显示,在NP和BPH组织未检测到survivinmRNA表达,而PCa组织可检测到survivinmRNA高表达。Western印迹结果证实,在NP和BPH组织中有微量的survivin蛋白表达;而PCa组织可检测到survivin蛋白高表达;在NP和BPH组织中GRIM-19蛋白表达强阳性,而PCa组织中只有微量表达,两者比较差异均有显著性(P<0.01)。结论:survivin和GRIM-19的表达可能与PCa的发生密切相关。     

组织激肽释放酶基因7在前列腺癌组织中的表达

目的 探讨组织激肽释放酶基因7(KLK7)在不同前列腺组织中的表达情况.方法运用逆转录聚合酶链反应法检测正常前列腺(5例)、良性前列腺增生(BPH)及BPH细胞株(BPH1,13例)、前列腺癌及前列腺癌细胞株(8例)的上皮细胞中KLK7mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测不同前列腺组织上皮细胞中KLK7蛋白表达水平;免疫组化分析正常前列腺(20例)、BPH(50例)、前列腺癌(103例)组织中KLK表达水平.根据染色强度分为4个等级(-,+,++,+++)进行半定量分析,染色强度++及+++者判定为阳性.结果 正常组、BPH组和前列腺癌组KLK7 mRNA表达相对值分别为0.59、0.52、0.02,组间比较差异有统计学意义(F=13.03,P＜0.01),前列腺癌上皮中KLK7 mRNA表达下调(P＜0.01),正常前列腺和BPH上皮中KLK7 mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05).KLK7蛋白在正常前列腺、增生前列腺、DU145、LNCaP、PC3、22RV1、BPH细胞株中表达水平相对值分别为0.22、0.40、0.01、0.05、0、0.03、0.14.免疫组化染色结果 显示正常前列腺组织、BPH组织、前列腺癌中KLK7蛋白表达阳性率分别为65.0%(13/20)、76.0%(38/50)、17.5%(18/103),前列腺癌组与前2组比较差异均有统计学意义(P＜0.01),前2组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 KLK7在前列腺癌组织中表达下调,提示KLK7在前列癌的发生和进展中可能起一定作用.     

蛋白激酶Cε在前列腺癌组织中表达的临床意义

目的 探讨蛋白激酶C ε(PKCε)在不同病理类型前列腺组织中的表达及与前列腺癌病理分级、分期的关系。 方法 正常前列腺(NP)组织标本10例、前列腺增生(BPH)组织标本10例、癌旁(PC)组织标本10例、前列腺癌(PCa)组织标本43例。免疫组化法检测各组织中PKCε的表达情况,分析PKCε表达与不同病理类型及PCa分级、分期的关系。 结果 PCa组PKCε表达阳性27例,BPH组无阳性表达,NP组1例,PC组2例,差异有统计学意义(P＜0.05)。PCa组Gleason评分≥8分组中PKCε表达阳性12/13例,2～4分组4/10例,5～7分组11/20例,组间差异有统计学意义(P＜0.05)。T3期PKCε表达阳性10/12例,T4期9/10例,T1、T2期分别为1/6例和7/15例,高分期与低分期组PKCε表达差异有统计学意义(P＜0.05)。PCa转移组PKCε表达阳性9/10例,未转移组18/33例,组间差异有统计学意义(P＜0.05)。PCa患者血清PSA≤20 ng/ml者PKCε表达阳性7/15例,＞20 ng/ml组20/18例,组间差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论 PCa组织中PKCε的表达率较高,并且与PCa病理分级、分期呈正相关,临床上可考虑作为PCa预后因子之一。     

聚集素在前列腺正常、增生、癌组织中的表达及意义

目的　通过检测聚集素 (Clusterin)在前列腺正常、增生、癌变组织中的表达 ,探讨其与前列腺疾病发生发展的关系。　方法　采用免疫组织化学染色法检测 12例正常前列腺组织、15例良性前列腺增生组织 (BPH)、5 6例前列腺癌标本中Clusterin的表达水平。　结果　 3种组织中Clusterin的阳性及弱阳性表达率为 81% (67/83 ) ,其中前列腺正常、增生、癌组织中阳性及弱阳性表达率分别为17% (2 /12 )、73 % (11/15 )、96% (5 4/5 6)。前列腺癌组织中Clusterin表达水平明显高于前列腺正常 (t=8 82 ,P <0 0 1)及增生 (t =7 63 ,P <0 0 1)组织 ,且在癌组织中与肿瘤病理分级 (r =0 64 9,P <0 0 1)、临床分期 (r=0 60 9,P <0 0 1)呈正相关。　结论　Clusterin可能通过抗凋亡机制在前列腺癌的生物特性中发挥着重要的作用     

前列腺癌患者外周血Matriptase和VEGF检测及其临床意义

目的 联合检测前列腺癌患者外周血中Matriptase和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达、与前列腺癌临床参数的关系,探讨其临床意义。方法 采用酶联免疫吸附ELISA法检测47例前列腺癌（其中20例远处转移）、45例良性前列腺疾病（20例前列腺炎、2...     

F/T PSA在TPSA4～10μg/L之间的前列腺增生和前列腺癌鉴别诊断中的意义

目的：探讨总前列腺特异性抗原（TPSA）与游离前列腺特异性抗原（FPSA）的比值（F／TPSA）在TPSA4～10μg／L之间的良性前列腺增生（BPH）和前列腺癌（PC）中鉴别诊断的意义。方法：采用放免法对281例病人的TPSA和FPSA进行测定，并计算F／TPSA，其中TPSA在4～10μg／L的PC和BPH病人分别是10例和51例。结果：PC组和BPH组的TPSA分别是6．22μg／L和6．04μg／L，两组相比差异不显著（P＞0．05）；而F／TPSA比值分别是0．11和0．21，两组相比差异显著（P〈0．01）。当F／TPSA为0．15～0．20时，诊断的敏感性和特异性分别是70％～90％和88％～67％。结论：F／TPSA有助于鉴别TPSA在4～10μg／L之间的BPH和PC，具有较高的敏感性和特异性，可以减少不必要的活检，是一种较好的鉴别BPH和PC的方法。