持续给予hPTH1-34对体外成骨细胞增殖与分化的影响

目的研究持续给予人甲状旁腺激素（human parathyroid hormone,hPTH）1-34对体外培养成骨细胞增殖与分化的干预作用。方法体外培养乳鼠成骨细胞,将细胞分为空白培养液对照组和10^-6、10^-7、10^-8mol·L^-1hPTH（1-34）3个不同剂量的给药组。每48h换1次液,换液时采用MTT法进行细胞增殖测定,同时检测细胞裂解液中的碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）和骨钙素（bone gla protein,BGP）的水平,持续培养6d。结果持续给予hPTH1-34作用48h后,各给药组的MTT均明显高于对照组且各给药组间差异均有显著性（P〈0.05）,至第6天时各给药组则均明显低于对照组（P〈0.05）。ALP和BGP测定结果显示持续给予hPTH1-34作用48h后,10^-6mol·L^-1PTH给药组的BGP含量明显高于对照组（P〈0.01）,其余各组ALP及BGP含量与对照组比较差异虽无显著性,但均值高于对照组,至第6天各给药组均明显低于对照组（P〈0.05）。结论持续给予hPTH（1-34）对体外培养成骨细胞增殖与分化的影响与作用的时间和给药浓度密切相关。短期持续用药有促进作用,并且在10^-6-10^-8mol·L^-1浓度范围内呈剂量依赖性;长期持续用药抑制成骨细胞的增殖与分化,给药浓度越高抑制作用越强。     

辛伐他汀促进大鼠骨髓基质细胞的成骨分化

目的观察辛伐他汀体内给药对去卵巢大鼠骨髓基质细胞(BMSC)增殖和分化的影响,探讨辛伐他汀的成骨作用机制.方法24只12周龄雌性SD大鼠随机分成4组,每组6只假手术组(G1)和去卵巢组(G2)每天蒸馏水灌胃;去卵巢大鼠10mg·kg-1·d-1辛伐他汀灌胃(G3);去卵巢大鼠20mg·kg-1·d-1辛伐他汀灌胃(G4).实验持续4周,第29天处死所有大鼠取骨髓细胞培养.用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测成骨细胞的增殖能力;细胞培养第14天用半定量RT-PCR和western blot检测Runx2/Cbfal mRNA和蛋白的表达、第16天检测碱性磷酸酶活性(ALP)和第21天检测茜素红染色.结果辛伐他汀不能促进去卵巢大鼠成骨细胞增殖.G3组和G4组的Runx 2/Cbfa1 mRNA表达水平和ALP活性都显著高于G2组,给药两组之间无显著差别.G4组的Runx 2/Cbfal蛋白表达水平比G2组和G3组显著增加,G2组与G3组无明显差别.茜素红染色表明辛伐他汀能促进成骨细胞的矿化能力,两种剂量组之间无明显差别.结论辛伐他汀体内给药能够促进去卵巢大鼠BMSC向成骨细胞分化,但是不能促进细胞增殖.     

补肾活血方通过调节MGP、BMP-7因子对慢性肾脏病大鼠血管钙化的抑制作用

目的:观察补肾活血方通过调节基质Gla蛋白(matrix Gla protein,MGP)、骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)因子对慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)大鼠血管钙化(vascular calcification,VC)的抑制作用,探讨补肾活血方抑制CKD大鼠VC的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组及中药组,每组20只,模型组与中药组大鼠实验第1~4周给予250 mg·kg-1·d-1腺嘌呤混悬液灌胃及含1. 8%高磷饲料喂养,第5~8周腺嘌呤改为隔日灌胃。中药组同时按55 g·kg-1·d-1剂量给予补肾活血方灌胃治疗,每日1次。正常组灌胃等量生理盐水。给药8周后,HE染色观察肾组织变化,茜素红染色观察主动脉钙化结节情况,检测主动脉钙含量及ALP活性,腹主动脉取血检测血清钙(Ca2+)、磷(P3-)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、全段甲状旁腺激素(i PTH),Western blot法检测主动脉α-平滑肌蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)蛋白的表达,Real-time PCR法检测主动脉MGP、BMP-7mRNA表达。结果:HE染色观察提示:中药组较模型组正常肾小球数目增多,肾小管扩张程度降低,炎性细胞数量下降,腺嘌呤结晶减少。茜素红染色观察提示:与正常组比较,模型组主动脉出现钙化结节,广泛红色颗粒物沉着;与模型组比较,中药组钙化结节减少。与正常组比较,模型组主动脉钙含量及ALP活性升高,血P3-、Scr、BUN、i PTH水平升高,血Ca水平下降(P 0. 01),主动脉ALP蛋白表达明显升高、α-SMA蛋白表达明显下降(P 0. 01),模型组主动脉MGP、BMP-7 mRNA表达下调(P 0. 01);与模型组比较,中药组主动脉钙含量及ALP活性明显降低(P 0. 05),血P3-、Scr、BUN、i PTH水平均下降(P 0. 01,P 0. 05),血Ca2+水平升高(P 0. 01),中药组主动脉ALP蛋白表达降低、α-SMA蛋白表达升高(P 0. 01),且中药组MGP、BMP-7 mRNA表达上调(P 0. 01)。结论:补肾活血方能够改善CKD大鼠肾脏组织学、肾功能、改善钙磷代谢,上调MGP、BMP-7因子表达,这可能是其抑制CKD大鼠VC的作用机制。     

尼古丁对体内外成骨活性的影响

目的 观察尼古丁对体外培养的成骨细胞活性和体内成骨活性因子的影响.方法 用含不同浓度尼古丁(1×10-4 mol/L)的DMEM培养基体外培养成骨细胞,分别用噻唑蓝(MTT)比色法检测成骨细胞的增殖,并检测尼古丁对成骨细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性和钙结节形成能力的影响,用酶联免疫吸附试验( ELISA)测定大鼠血清中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和ALP水平,逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)测量尼古丁作用后大鼠股骨中骨桥蛋白(OPN)、ALP、Ⅰ型胶原蛋白(COL1)的mRNA表达变化.结果 与对照组比较,体外尼古丁处理对成骨细胞的增殖起抑制作用,尼古丁可降低成骨细胞的ALP活性,抑制成骨细胞钙结节形成,尼古丁可以导致大鼠血清中BMP-2和ALP水平下降,并抑制股骨中OPN、ALP、COL1 mRNA表达.结论 尼古丁可抑制成骨细胞的活性,并对体内成骨相关因子也有抑制作用.     

胰岛素样生长因子1对成骨细胞中BMP-2、BMP-7基因表达的影响

目的研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)对成骨细胞中BMP-2、BMP-7基因表达的影响,探讨IGF-1促进成骨细胞增殖、分化的分子机理.方法以不同浓度的IGF-1刺激分离培养的大鼠成骨细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR扩增BMP-2及BMP-7基因cDNA,同时扩增管家基因βactin作为内对照.扫描PCR产物电泳照片,计算BMP-2/β-actin及BMP-7/-βactin的积分光密度比值,推算BMP-2及BMP-7基因的相对表达水平.结果 IGF-1可以在转录水平增加大鼠成骨细胞中BMP-2及BMP-7基因的表达,并呈明显的剂量依赖关系.结论 IGG-1促进成骨细胞增殖、分化的作用可能是通过增加BMP-2及BMP-7基因的表达来实现的.     

rhPTH(1-34)对成骨细胞增殖、Collagen I及Osterix mRNA表达的影响

目的 观察间歇给予重组人甲状旁腺激素(1-34)[rhPTH(1-34)]对体外成骨细胞增殖、I型胶原蛋白(CoHagen I)及Osterix mRNA表达的影响,初步探讨rhPTH(1-34)对体外成骨细胞的作用机制.方法 体外培养新生大鼠成骨细胞,间歇循环给予0、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7 M rhPTH(1-34)干预,(24 h为一循环,前12h给药),共2次,用MTT法检测细胞的增殖;RT-PCR法半定量测定成骨细胞Collagen I、Ostefix mRNA的表达.结果 显示rhPTH(1-34)可明显促进成骨细胞的增殖(P<0.05),促进成骨细胞Collagen I和Ostefix mRNA表达(P<0.05),101-9 M增殖、表达最明显,呈剂量依赖关系.结论 rhPTH(1-34)可促进成骨细胞的增殖、分化,可能是通过Collagen I和Ostefix mRNA表达来调节.     

rhPTH(1-34)对成骨细胞增殖、Collagen I及Osterix mRNA表达的影响

目的 观察间歇给予重组人甲状旁腺激素(1-34)[rhPTH(1-34)]对体外成骨细胞增殖、I型胶原蛋白(CoHagen I)及Osterix mRNA表达的影响,初步探讨rhPTH(1-34)对体外成骨细胞的作用机制.方法 体外培养新生大鼠成骨细胞,间歇循环给予0、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7 M rhPTH(1-34)干预,(24 h为一循环,前12h给药),共2次,用MTT法检测细胞的增殖;RT-PCR法半定量测定成骨细胞Collagen I、Ostefix mRNA的表达.结果 显示rhPTH(1-34)可明显促进成骨细胞的增殖(P<0.05),促进成骨细胞Collagen I和Ostefix mRNA表达(P<0.05),101-9 M增殖、表达最明显,呈剂量依赖关系.结论 rhPTH(1-34)可促进成骨细胞的增殖、分化,可能是通过Collagen I和Ostefix mRNA表达来调节.     

流体切应力下SIVA-1凋亡诱导因子促成骨细胞增殖分化的双向调节作用

目的探讨流体切应力（fluid shear stress,FSS）对KM小鼠成骨细胞增殖分化及相关细胞凋亡诱导因子（SIVA-1）的调节作用。方法将传至3代成骨细胞分为应力刺激组（试验组）和非应力刺激组（对照组）。5个试验组分别给予1.2PaFSS作用0.25,0.5,1,2,4h;对照组为0h。MTT法测定细胞增殖,检测碱性磷酸酶（ALP）活性,半定量RT-PCR测定凋亡诱导因子SIVA-1的表达水平。结果FSS促增殖作用在短期（0.25,0.5h）明显,且细胞生长曲线前移;但在1,2,4h却有明显抑制增殖作用。FSS同样增加了ALP活性,尤其在应力作用0.5h时显著（ALP含量为2.4320±0.205金氏单位/100ml,相对对照达158%）（P〈0.05）;而应力作用1,2,4h后减低了ALP的表达。应力初期SIVA-1mRNA表达量明显下降,尤其在FSS作用0.5h后SIVA-1/GAPDH相对表达量为0.099±0.002,相对对照明显下调了71.3%（P〈0.01）,此效应在作用1h后减退,SIVA-1mRNA表达开始升高,4h后升高明显。结论1.2PaFSS在短时间刺激下可刺激成骨细胞增殖分化,尤其在0.5h后效应明显。早期促细胞增殖和ALP水平升高主要与SIVA-1mRNA表达下调有关,而后期抑制作用可能与SIVA-1mRNA表达升高有关。     

骨化三醇治疗对血液透析患者矿物质、骨代谢紊乱及FGF23的影响

目的:评价骨化三醇不同给药方案对血液透析患者矿物质及骨代谢紊乱(CKD-MBD)及FGF23的影响。方法:选取血甲状旁腺素(PTH)水平在300~621 pg/ml(正常的4~9倍)之间的血液透析患者,随机分成骨化三醇常规治疗组(常规组,22例)和间歇给药组(间歇组,26例),疗程16周,检测治疗前后血清FGF-23水平、钙磷代谢等指标变化。结果:(1)两组患者治疗终点与治疗前比较,血PTH均明显下降、血维生素D及FGF23均明显升高(P0.05)。间歇组在治疗终点,血钙明显升高、碱性磷酸酶明显下降(P0.05),而持续组,治疗前后血钙、碱性磷酸酶无明显变化。(2)在不同治疗时间点,持续组PTH明显下降(P0.05);间歇组PTH、碱性磷酸酶明显下降,血钙明显升高(P0.05)。治疗第4周、第8周,间歇组PTH下降较持续组明显(P0.05)。(3)治疗期间,持续组有6例患者血磷升高,间歇组无血磷升高患者。治疗期间无高钙血症发生。结论:骨化三醇不同给药方案能不同程度下降患者血PTH、升高FGF23,间歇组较持续组明显;间歇给药组血钙明显升高、碱性磷酸酶明显下降。两组治疗方案均能改善继发性甲状旁腺功能亢进,间歇给药组降PTH效果更佳。骨化三醇治疗轻中度继发性甲状旁腺功能亢进安全有效。     

rhPTH（1-34）对成骨细胞增殖、CollagenⅠ及Osterix mRNA表达的影响

目的观察间歇给予重组人甲状旁腺激素(1-34)[rhPTH(1-34)]对体外成骨细胞增殖、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)及Osterix mRNA表达的影响,初步探讨rhPTH(1-34)对体外成骨细胞的作用机制。方法体外培养新生大鼠成骨细胞,间歇循环给予0、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7M rhPTH(1-34)干预,(24 h为一循环,前12h给药),共2次,用MTT法检测细胞的增殖;RT-PCR法半定量测定成骨细胞Collagen Ⅰ、Osterix mRNA的表达。结果显示rhPTH(1-34)可明显促进成骨细胞的增殖(P<0.05),促进成骨细胞Collagen Ⅰ和Osterix mRNA表达(P<0.05),10-9 M增殖、表达最明显,呈剂量依赖关系。结论 rhPTH(1-34)可促进成骨细胞的增殖、分化,可能是通过Collagen Ⅰ和Osterix mRNA表达来调节。     

骨形态发生蛋白-2对人脐带间充质干细胞增殖和分化的影响

目的 观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖和分化的影响.方法 体外培养hUCMSCs,在培养基中加入20 mg/L BMP-2,噻唑蓝(MTT)比色法观察BMP-2对hUCMSCs的增殖效果,流式细胞术检测BMP-2作用后细胞表面STRO-1的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测量BMP-2作用后hUCMSCs骨桥蛋白(OPN)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原蛋白(COL1)的mRNA表达变化,碱性磷酸酶染色观察hUCMSCs在BMP-2培养基作用下ALP染色变化,Von kossa染色实验观察BMP-2对hUCMSCs钙结节的形成.结果 细胞在未加BMP-2和加BMP-2培养基中培养1、3、5、7 d,虽然细胞的增殖率上升,但各组间比较差异无统计学意义(P＞0.05),同时发现在2%血清的培养基中培养7 d后,hUCMSCs的增殖促进约10%左右.BMP-2培养7 d后细胞表面STRO-1阳性细胞比例上升明显,由25.1±4.0上升至51.1±6.4,差异有统计学意义(P＜0.01).BMP-2培养条件下COL1 mRNA的表达增强,差异有统计学意义(P＜0.05),OPN mRNA出现表达,ALP mRNA比无BMP-2培养明显增强,差异有统计学意义(P＜0.05).在BMP-2培养条件下ALP染色出现大片细胞阳性染色.在培养28 d,Von kossa染色出现明显的钙结节.结论 BMP-2对hUCMSCs成骨诱导分化作用明显,而增殖作用很弱.     

静磁场不同处理时间对体外培养成骨细胞增殖与分化的影响

目的:研究静磁场不同处理时间对体外培养成骨细胞增殖与分化成熟的影响。方法:原代培养大鼠颅骨成骨细胞,传代后随机分为9组,用磁场强度为3.9mT的静磁场,分别处理0(对照组)、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0h。倒置相差显微镜下观察细胞形态;48h后检测细胞增殖情况;第3、6、9、12天测定碱性磷酸酶活性和钙盐沉积量;第8天进行碱性磷酸酶染色;第10天进行茜素红钙化结节染色;在SMFs(static magnetic fields)处理0、24、48、72h后,Real-time PCR检测骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein-2,BMP-2),Runx-2,骨保护素(osteoprotegerin,Opg)的mRNA表达水平变化。结果:与对照组相比,磁场组均促进细胞增殖(P<0.01或P<0.05),也能明显促进其分化成熟,表现为提高细胞的ALP活性,促进钙盐沉积量,提高BMP-2、Runx-2和Opg的mRNA表达。结论:磁感应强度为3.9mT的静磁场处理体外培养成骨细胞2.5h时,其对成骨细胞的增值与分化效果最为明显。     

持续性甲状旁腺素抑制成骨细胞分化 的实验研究

目的探讨持续性给与甲状旁腺素(PTH)对成骨细胞分化过程的抑制作用。方法培养MC3T3-E1成骨前体细胞,持续性给与PTH处理,碱性磷酸酶(ALP)染色方法,检测细胞内ALP的分泌;免疫荧光方法检测细胞内Osterix(Osx)蛋白的表达;real-time RT-PCT法和Westernblot方法检测细胞内成骨因子基因和蛋白的表达。结果 MC3T3-E1成骨前体细胞具有自发向成骨细胞方向分化的特征,与对照组相比,经PTH持续性处理的细胞ALP染色强度明显降低,Osx免疫荧光强度较弱,细胞内成骨因子基因和蛋白的表达亦显著低于对照组。结论持续性给与PTH具有抑制成骨细胞分化的作用。     

牵张成骨术整复猕猴腭裂后胰岛素样生长因子-1与碱性磷酸酶表达研究

目的 以牵张成骨术整复猕猴腭裂骨缺损,定量分析不同时段新生成骨胰岛素样生长因子-1(insulin.1ike growth factor-I,IGF-1)与碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表达水平,探讨其成骨调控机制.方法 用猕猴建立腭裂动物模型.实验组动物21只以牵张成骨术整复其腭部软硬组织缺损,关闭裂隙后固定.于牵张成骨术后第1、2,4…6 8 12及24周分别取材,各3只动物.采用实时定量PCR法分析比较IGF-I与ALP的mRNA表达水平,并以酶联免疫吸附试验法(ELISA)定量分析其IGF-I与ALP含量,结果与实验对照及健康对照组(动物各2只)进行比较.结果 固定期第1～2周为成骨早期,第1周时IGF-1和AIJP的mRNA表达明显上调,分别为3.67±0.35和3.30±0.21,第2周时达最高峰,分别为7.55±0.32和5.91±0.21,随后逐渐下降,至第12周与健康对照组无明显差异(P>0.05).ELISA结果显示:固定期第1～2周,IGF-1和ALP表达均增强.IGF-1含量于第2周表达最高,为(2.0±0.06)ng/mg,第4周为(1.46±0.08)ns/mg,第6周为(0.84±0.11)ng/mg,其表达逐渐下降;同期ALP则呈高水平表达,第4周为(25.34±0.44)U/mg,第6周为(26.21±0.82)U/mg.第8～12周,IGF-1和ALP的表达均下降至接近健康对照组.结论 腭骨牵张成骨区域,新骨的原位增量生成明确,增殖过程正常,最终以膜内成骨的方式形成新骨整复了腭裂骨切开牵张间隙区域.     

胰岛素样生长因子1对酒精干预体外培养成骨细胞增殖和功能抑制的影响

目的探讨体外培养成骨细胞在不同血清浓度条件下酒精干预后增殖和功能的改变，以及胰岛素样生长因子1（insulin—likegrowth factor1，IGF-1）的保护作用。方法体外分离培养新生SD大鼠颅骨成骨细胞，分6组在不同条件下进行培养，分别为正常血清浓度组（F15组，含15％新生牛血清）、正常血清浓度加酒精组（F15／EtOH组，酒精浓度为100mmol／L）、血清饥饿组（F2组，含2％新生牛血清）、血清饥饿加酒精组（F2／EtOH组）、血清饥饿加IGF-1组（F2／IGF-1组，IGF-1浓度为25ng／m1）和血清饥饿、IGF-1加酒精组（F2／IGF-1／EtOH组）。于培养24、48、72、96h检测细胞增殖、细胞内碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，ALP）活性和骨钙素（boneglaprotein，BGP）mRNA表达。结果各时间点F15／EtOH组成骨细胞吸光度（A）值及ALP活性、BGPmRNA表达较F。。组均下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。F2组较F15组A值及ALP、BGPmRNA降低（P〈0．05），F2／EtOH组较F2组降低（P〈0．05），F2／IGF-1组较F2组增加（P〈0．05）；F2／IGF-1／EtOH组较F2／IGF-1组除24h外A值无明显降低（P〉0．05），ALP、BGPmRNA均降低（P〈0．05），A值及ALP、BGPmRNA较F2／EtOH组增加（P〈0．05）。结论酒精能引起成骨细胞增殖和功能抑制，加重血清饥饿对成骨细胞的抑制作用，可能是酒精性骨损害的机制之一。IGF-1能改善血清饥饿引起的成骨抑制，并抵抗酒精抑制细胞增殖的作用，可能成为探索治疗酒精性骨损害的途径之一。     

黄芩素通过BMP-2/Smad通路促进MC3T3-E1成骨作用的实验研究

目的 探讨黄芩素（BAI）对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞（MC3T3-E1）成骨分化的作用及其分子机制。方法 将MC3T3-E1分为对照组（正常培养）和BAI组（以Baicalein处理）,在成骨分化条件培养下采用CCK-8检测BAI对MC3T3-E1细胞增殖的影响;分别以碱性磷酸酶染色（ALP）、茜素红染色（ARS）检测MC3T3-E1细胞成骨分化水平与矿化能力,实时荧光定量PCR检测成骨标志基因ALP、COL1A1、RUNX2、OSX的mRNA表达水平,通过免疫印迹法（Western-blot）检测MC3T3-E1细胞中BMP-2、Smad1、p-Smad1蛋白表达水平,通过免疫荧光技术（IF）检测RUNX2、COL1A1表达水平。结果 与对照组比较,BAI干预1 d后发现,BAI组COL1A1（P<0.001）、RUNX2（P <0.05）、OSX（P <0.05） mRNA表达水平在成骨分化中表达上升;干预3 d后发现,与对照组比较,BAI组ALP（P <0.05）、RUNX2（P <0.001）mRNA表达上升;干预7 d后发现,与对照组比较,BAI组COL1A1（P <0.05）mRNA表达水平较对照组上升,BMP-2、p-Smad1/Smad1蛋白表达水平上升（P <0.05）。免疫荧光中成骨标志蛋白RUNX2、COL1A1表达增多（P <0.05）。结论 BAI可通过激活BMP-2/Smad通路促进MC3T3-E1成骨分化。     

Mechanisms for the enhancement of fracture healing in rats treated with intermittent low-dose human parathyroid hormone (1-34).

Recent reports have demonstrated that intermittent treatment with parathyroid hormone (1-34) [PTH(1-34)] increases callus formation and mechanical strength in experimental fracture healing. However, little is known about the optimal dose required for enhancement of fracture repair or the molecular mechanisms by which PTH regulates the healing process. In this study, we analyzed the underlying molecular mechanisms by which PTH affects fracture healing and tested the hypothesis that intermittent low-dose treatment with human PTH(1-34) can increase callus formation and mechanical strength. Unilateral femoral fractures were produced and a daily subcutaneous injection of 10 microg/kg of PTH(1-34) was administered during the entire healing period. Control animals were injected with vehicle solution alone. The results showed that on day 28 and day 42 after fracture, bone mineral content (BMC), bone mineral density (BMD), and ultimate load to failure of the calluses were significantly increased in the PTH-treated group compared with controls (day 28, 61, 46, and 32%; day 42, 119, 74, and 55%, respectively). The number of proliferating cell nuclear antigen (PCNA)-positive subperiosteal osteoprogenitor cells was significantly increased in the calluses of the PTH-treated group on day 2, and TRAP+ multinucleated cells were significantly increased in areas of callus cancellous bone on day 7. The levels of expression of type I collagen (COLlA1), osteonectin (ON), ALP, and osteocalcin (OC) mRNA were increased markedly in the PTH-treated group and accompanied by enhanced expression of insulin-like growth factor (IGF)-I mRNA during the early stages of healing (days 4-7). The increased expression of COL1A1, ON, ALP, and OC mRNA continued during the later stages of healing (days 14-21) despite a lack of up-regulation of IGF-I mRNA. These results suggest that treatment of fractures with intermittent low dose PTH(1-34) enhances callus formation by the early stimulation of proliferation and differentiation of osteoprogenitor cells, increases production of bone matrix proteins, and enhances osteoclastogenesis during the phase of callus remodeling. The resultant effect to increase callus mechanical strength supports the concept that clinical investigations on the ability of injectable low-dose PTH(1-34) to enhance fracture healing are indicated.