IgA肾病患者外周血miR-34a水平及其与肾功能的关系分析

目的:探讨外周血miR-34a在Ig A肾病患者中的表达水平以及与肾功能的关系。方法:将本院收治的73例Ig A肾病患者记为观察组,另选取78例健康志愿者为健康组,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测并对比两组研究对象外周血miR-34a的表达水平;对比两组研究对象血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白含量和肾小球滤过率水平(eGFR);对比观察组不同肾功能分级患者外周血miR-34a的表达水平;用Pearson相关性分析法探讨观察组患者外周血miR-34a表达水平与肾功能指标的相关性。结果:观察组外周血miR-34a表达水平高于健康组(P 0.05);观察组研究对象Scr、BUN水平和24 h尿蛋白量均高于健康组(P 0.05),eGFR水平低于健康组(P 0.05);观察组不同肾功能分级的患者外周血miR-34a的表达水平差异有统计学意义(P 0.05),且外周血miR-34a表达水平由高到低分别为严重损害中度损害轻度损害轻微(P 0.05);观察组患者外周血miR-34a表达水平与Scr、BUN水平及24 h尿蛋白量均呈正相关(P 0.05),与eGFR水平呈负相关(P 0.05)。结论:外周血miR-34a在Ig A肾病患者中表达水平升高,肾功能损伤越严重,外周血miR-34a表达量越高,而且与Scr、BUN水平及24 h尿蛋白量均呈正相关,与eGFR水平呈负相关。     

miR-34a在IgA肾病患者表达及其可能的生物标志物作用

目的:探讨Ig A肾病(Ig AN)患者血清、尿液及肾组织microRNA-34a(miR-34a)表达及其与临床、病理及预后等指标的相关关系,进而探讨miR-34a作为反映Ig AN进展及预后的生物学标志物可行性。方法:收集新发33例Ig A肾病患者血清、尿液及肾组织标本(Ig AN组),来自于15例健康志愿者血清和尿液标本(健康对照组),来源于15例肾癌行肾脏切除的患者的癌旁正常肾组织(对照组),用荧光实时定量PCR行血清、尿液和肾组织miR-34a检测,比较两组间其表达差异性及相关性。结果:与对照组相比,Ig AN组血清、尿液及肾组织miR-34a表达上调(P0.05)。Ig AN患者血清、尿液和肾组织miR-34a表达与尿蛋白水平呈正相关关系,与e GFR负相关;血清miR-34a与肾小球硬化程度正相关;尿液miR-34a水平与新月体比例、血尿程度正相关;肾组织miR-34a水平与总胆固醇、LDL、肾小球硬化、Lee分级、肾间质纤维化及舒张压呈正相关关系,与血清白蛋白水平负相关。随访进展至透析患者,其基线尿液miR-34a水平较未进入透析组偏高(P=0.029)。预后分析提示,低表达水平的肾组织miR-34a水平可预测较好的尿蛋白缓解情况(P=0.005)。结论:Ig AN患者血清、尿液及肾组织miR-34a表达增加。血清、尿液及肾组织miR-34a水平与Ig AN患者肾功能与尿蛋白水平密切相关。尿液miR-34a水平与Ig AN患者肾脏活动病变及Ig AN肾功能进展密切相关;血清miR-34a可能作为反应肾小球硬化程度的生物学标志物。肾组织miR-34a水平与Ig AN患者肾小球硬化及肾小管间质纤维化密切相关,其过程可能与脂质代谢紊乱有关。肾组织miR-34a水平可预测Ig AN患者尿蛋白缓解情况,可作为反映Ig AN患者预后的重要生物学标志物。     

干扰素诱导基因AIM2与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中干扰素诱导基因AIM2的表达及其与疾病活动度的相关性。方法:运用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测30例SLE患者(SLE组)与25例健康体检者(正常对照组)的AIM2 m RNA表达水平,并且分析它们与尿蛋白、补体C3、补体C4、抗ds-DNA抗体及SLE疾病活动指数(SLEDAI积分)的相关性。结果:1与正常对照组比较,SLE组AIM2 m RNA表达显著增高(P0.01);2 SLE组尿蛋白阳性患者的AIM2 m RNA表达水平较尿蛋白阴性患者及正常对照组显著增高(P0.01),尿蛋白阴性组AIM2 m RNA表达水平与正常对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);3 SLE组AIM2 m RNA表达水平与补体C3呈显著负相关(r=-0.623,P0.05),与抗ds-DNA抗体、SLEDAI积分呈显著正相关(r=0.621、r=0.503,P0.05),与补体C4不相关(r=-0.426,P0.05)。结论:SLE患者AIM2 m RNA的表达水平显著增高,并与肾脏损伤、疾病活动度相关。     

血清miR-130b与糖尿病肾病患者肾脏损伤及远期预后的相关性研究

目的:探讨血清miR-130b与糖尿病肾病患者肾脏损伤及远期预后的相关性。方法:选择在杭州师范大学附属医院诊治的糖尿病肾病患者134例为观察组,同期选择杭州师范大学附属医院门诊正常体检者118例为对照组,测定两组miR-130b水平,分析miR-130b水平与BMI、蛋白尿定量、空腹血糖、糖尿病病程、血肌酐及e GFR水平的关系,分析肾脏损伤程度与miR-130b的关系。结果:观察组miR-130b水平低于对照组(P 0. 05); BMI、蛋白尿定量、空腹血糖、糖尿病病程、血肌酐水平越高,e GFR水平越低,血清miR-130b表达水平越低(P 0. 05);随着肾脏损伤程度的加重,肾小球分级、IFTA评分、间质炎症评分的增加,血清miR-130b水平逐渐降低(P 0. 01); miR-130b与肾小球分级、IFTA评分、间质炎症评分负相关明显(P 0. 05); IFTA评分、miR-130b两者的AUC相近,皆小于e GFR,miR-130b、IFTA评分诊断糖尿病肾病的灵敏度、特异度相近(P 0. 05),皆小于e GFR(P 0. 05); ESRD组血清miR-130b水平低于非ESRD组(P 0. 05),ESRD组血清miR-130b低表达率高于非ESRD组,miR-130b低水平组相对于高水平进入ESRD的风险升高13. 020倍(P 0. 05)。结论:miR-130b低表达能加速糖尿病患者肾脏损伤程度,降低糖尿病肾病患者预后; miR-130b可作为判定糖尿病肾病的生物学标志物,值得在临床上推广应用。     

miR-155和miR-30a在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨胃癌组织和癌旁组织miR-155和miR-30a的表达差异及其临床意义.方法 收集手术切除的胃癌标本52例,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应( RT-qPCR)检测癌及癌旁组织标本miR-155和miR-30a的表达水平,分析其与临床病理的关系.结果 miR-155在胃癌组织中表达量(0.84 ±2.27)显著高于其在配对癌旁组织中的表达值(0.28 ±0.56,P＜0.05);miR-155高表达与淋巴结转移有关(P＜0.05).miR-30a在胃癌组织中表达量(3.16±8.11)显著低于其在配对癌旁组织中的表达值(15.87±35.58,P＜0.05).miR-30a的低表达与肿瘤侵犯层次、淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 miR-155和miR-30a与胃癌发生发展密切相关,可能成为胃癌的潜在诊断及治疗靶点.     

尿液miR-34a作为IgA肾病生物标志物的研究

目的:探讨IgA肾病(IgAN)患者尿液miR-34a表达及其与临床、病理及预后等的相关关系,进而探讨尿液miR-34a作为IgAN生物学标志物可行性。方法:收集新发33例IgA肾病患者尿液标本(IgAN组),来自15例健康志愿者尿液标本(健康对照组),新发33例患者中19例随访大于3个月,收集治疗3个月时患者尿液标本。另外收集我院门诊规律随访1年的IgAN患者79例尿液标本。用荧光实时定量PCR行尿液miR-34a检测,比较新发IgAN组与健康对照组,治疗前后尿液miR-34a表达差异性,并分析尿液miR-34a表达与IgAN患者临床、病理及预后的关系。结果:与对照组相比,IgAN组尿液miR-34a表达上调(P=0.025 5),治疗后其水平下调(P=0.033 6)。新发IgAN及治疗1年的IgAN患者尿液miR-34a表达与尿蛋白、血清肌酐呈正相关关系(P0.05),与e GFR负相关关系(P0.05);治疗1年的IgAN患者尿液miR-34a与病理Lee分级及牛津分级密切相关,Lee分级及牛津分级越高的患者,其尿液miR-34a水平表达越高(均P0.05)。预后分析提示,治疗1年时尿液miR-34低表达的IgAN患者肾功能预后较好(P=0.000 5)。进一步通过ROC曲线发现,尿液miR-34a预测IgAN患者肾功能进展的曲线下面积为0.842,临界点为0.014 3,即尿液miR-34a水平低于0.014 3的患者,其肾功能进展较为缓慢。结论:尿液miR-34a可预测IgAN患者肾功能进展,可作为反映IgAN疾病活动,预测IgAN进展的生物学标志物。     

miR-34a与乳腺癌复发及预后的相关性研究

目的 探讨miR-34a在乳腺癌复发及预后中的作用.方法 88例乳腺癌患者均施行改良根治术,并有完整的随访资料.采用实时定量PCR(real-time qPCR)对原发肿瘤蜡块提取的microRNA进行miR-34a表达水平的测定,配对t检验比较癌组织和正常组织中miR-34a的水平差异,Mann Whitney-U非参数检验比较miR-34a表达水平和乳腺癌临床病理参数的关系,预后分析采用Kaplan-Meier生存分析和Log-rank计算,多因素统计分析采用Cox回归.结果 相比癌旁正常组织,在癌组织中miR-34a表达明显下调(P＜0.001),在组织学高分级的乳腺癌中miR-34a表达水平明显低于中低分级的乳腺癌(P=0.024);在随访中复发的乳腺癌患者中,miR-34a表达水平明显低于无复发的乳腺癌(P =0.008).miR-34a表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、激素受体ER/PR表达、HER2状态、脉管瘤栓、组织学类型、肿瘤病理分期及月经状态等未见明显关联(P＞0.05).以中位值2-△Ct =0.117为截断值,Kaplan-Meier生存分析表明,miR-34a高表达患者其乳腺癌无复发生存率(P =0.026)及总生存率(P=0.019)均高于miR-34a低表达患者.结论 miR-34a可促进组织分化,其表达下调增加肿瘤复发,可做为乳腺癌侵袭潜能的预测指标.     

miR-34a在前列腺癌血清中的表达意义

目的 探讨血清miR-34a在前列腺癌发生过程中的作用及意义.方法 分别提取20例前列腺癌(PCa)、10例前列腺增生(BPH)及10例健康对照者(N)血清样本的miRNA,应用逆转录-实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)的方法检测三组样本中miR-34a的表达差异,并分析miR-34a的表达与PCa转移是否相关.结果 与健康对照组相比,miR-34a在PCa与BPH患者血清中明显低表达(P均＜0.05),平均下调分别约为7.16、8.53倍.但PCa及BPH的血清中miR-34a的表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),并且miR-34a表达水平的高低与PCa是否转移不存在显著相关性(P＞0.05).结论 血清中低表达的miR-34a可能促进了PCa的发生发展,对PCa的诊断及治疗有潜在的临床意义.     

miR-34a表达水平与结直肠癌根治术后复发转移的关系

目的研究miR-34a在Ⅱ-Ⅲ期结直肠癌组织中的表达及其与结直肠癌根治术后复发转移的关系．方法收集根治术后3年内复发转移与未复发的Ⅱ～Ⅲ期结直肠癌新鲜手术标本各40例．采用反转录实时定量PCR方法检测miR-34a的表达水平,并分析其与结直肠癌根治术后复发转移的关系。结果肿瘤组织中miR-34a的表达水平与患者性别、年龄、肿瘤部位、浸润深度、有无淋巴结转移、脉管癌栓和病理分化程度无关（P〉0．05）。有复发转移患者miR-34a的表达水平低于无复发者（P=0．039）。单因素生存分析显示,miR-34a低表达与患者根治术后无病生存时间缩短有关（P=0．010）,且在Ⅲ期患者中这种趋势更加明显（P=0．003）。40例复发患者中,miR-34a低表达者（14例）中位无病生存时间为13．4个月,低于高表达者（26例）的18．4个月（P=0．037）。Cox模型多因素分析miR-34a低表达是影响结直肠癌根治术后无病生存时间的独立因素（RR=0．397．95％CI=0．205～0．768．P=0．006）。结论miR-34a表达水平下降与结直肠癌患者术后无病生存时间缩短有关．miR-34a可作为预测结盲肠痛根治术后复发转移的一个分子指标．     

IgA肾病患者血清miR-200家族水平检测及临床意义

目的:探讨IgA肾病(IgAN)患者血清microRNA-200家族(miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-141、miR-429)表达及其与临床、病理及预后等指标的相关关系,进而探讨血清miR-200家族作为反映IgAN进展及预后的生物学标志物可行性。方法:收集新发33例IgA肾病患者血清标本(IgAN组),来自于15例健康志愿者血清(健康对照组),用荧光实时定量PCR行血清miR-200家族检测,比较两组间其表达差异性及相关性。结果:与对照组相比,IgAN组血清miR-200a、miR-141、miR-429表达上调(P0.05)。IgAN患者血清miR-200b、miR-141、miR-429表达与尿蛋白水平(r=0.413,P=0.021;r=0.452,P=0.014;r=0.370,P=0.040)呈正相关关系;血清miR-200b、miR-200c、miR-141、miR-429表达与e GFR呈负相关关系(r=-0.403,P=0.020;r=-0.517,P=0.002;r=-0.398,P=0.024;r=-0.350,P=0.046);血清miR-200a、miR-200c、miR-429与血尿程度呈正相关(r=0.361,P=0.036;r=0.367,P=0.033;r=0.397,P=0.020);血清miR-200b、miR-429与肾小球硬化程度呈正相关(r=0.377,P=0.034;r=0.335,P=0.047)。IgAN血清miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-141、miR-429之间呈明显正相关关系(P0.001)。随访进展至透析患者,其基线血清miR-200b与miR-200c水平较未进入透析组偏高(P0.05);随访尿蛋白完全缓解的患者,其基线血清miR-200a、miR-200b及miR-429水平较未完全缓解组患者偏低(P0.05)。预后分析提示,在IgAN中,低表达水平的血清miR-200a、miR-200b水平可预测较好的尿蛋白缓解情况(P0.05);高表达水平的血清miR-200c可预测进展至透析的肾功能情况(P=0.042)。结论:IgAN患者血清miR-200a、miR-141、miR-429表达增加。血清miR-200b、miR-141、miR-429与尿蛋白排泄密切相关,血清miR-200b、miR-200c、miR-141、miR-429水平与IgAN患者肾功能密切相关。血清miR-200a、miR-200c、miR-429水平与IgAN患者肾脏病变活动密切相关,而血清miR-200b、miR-429同时与肾小球硬化程度密切相关。IgAN患者血清miR-200家族表达的高度一致性,可能作为IgAN患者肾小管间质纤维化的生物学标记物。预后分析表明,血清miR-200c水平可预测IgAN患者肾功能进展及预后。血清miR-200a、miR-200b水平可预测IgAN患者尿蛋白缓解情况的预后。     

MiR-155、miR-208和miR-499在川崎病患儿中的表达检测与分析

目的本文探讨心血管疾病相关的miR-155、miR-208和miR-499在川崎病患者中的表达水平及临床意义。方法纳入川崎病患儿52例,正常儿童20例作为对照;收集外周血,提取血浆中的RNA;采用实时荧光定量PCR检测这三种miRNA的表达并以RNU6B作为内参基因进行分析。结果与对照组比川崎病患儿中的miR-155表达水平明显升高(P=0.018),且miR-155表达水平与冠脉损害程度成一定程度的正相关。miR-208和miR-499在川崎病中的表达有一定程度升高,但均无显著性差异。结论 miR-155的高表达与儿童川崎病有关,提示其可以作为诊断川崎病的潜在标志物。     

外周血T淋巴细胞CD69在狼疮性肾炎患者中的变化及意义

目的：探讨狼疮性肾炎（LN）患者外周血中T淋巴细胞CD69的变化及意义。方法：收集LN患者活动组35例、稳定组25例和健康对照组30例,采用流式细胞仪测定外周血中T淋巴细胞CD4.CD69、CD8.CD69浓度变化;利用酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清可溶性细胞间黏附分子-1表达,并分析其与系统性红斑狼疮活动性指标的关系。结果：（1）活动组LN患者淋巴细胞表达CD4.CD69、CD8.CD69、sICAM-1均明显升高,与狼疮性肾炎稳定组比较,差异有统计学意义P均〈0.01;（2）LN患者血浆CD4.CD69与SLEDAI评分、sICAM-1、24 h尿蛋白呈正相关（P均〈0.01）,与补体C3、C4呈负相关（P均〈0.01）;（3）LN患者血浆CD8.CD69与SLEDAI评分、24 h尿蛋白呈正相关（P均〈0.01）,与补体C3呈负相关（P均〈0.01）、与C4亦呈负相关（P〈0.05）;（4）LN患者SLEDAI评分与补体C3、C4负相关（P均〈0.01）,与24 h尿蛋白定量呈正相关（P〈0.01）;（5）LN患者血清sICAM-1与SLEDAI评分正相关（P〈0.05）、与CD4.CD69、CD8.CD69、24 h尿蛋白定量正相关（P均〈0.01）、与24 h尿蛋白定量呈正相关（P〈0.05）与补体C3、C4负相关（P均〈0.01）。结论：LN患者体内存在T细胞CD69表达可早期反映LN的活动,sICAM-1可能参与CD69引起肾脏的内皮细胞损伤,测定外周血CD69、sICAM-1有助于判断LN的活动性,有可能成为判断LN早期活动指标之一。     

系统性红斑狼疮患者血清抗核小体抗体与抗C1q抗体的检测及临床意义

目的：探讨抗核小体抗体与抗C1q抗体与系统性红斑狼疮（system lupus erythematosus，SLE）活动性的关系以及在狼疮肾（lupus ephritis，LN）患者血清的表达及临床意义。方法：采用酶联免疫吸附试验对33例LN患者血清进行检测，以43例无肾炎临床表现的SLE患者做为对照组。同时将76例SLE患者按SLEDAI评分分为SLEDAI≥10分组与SLEDAI〈10分组两组，进行抗核小体抗体，抗C1q抗体与SLE活动度相关性的分析。结果：LN患者血清中抗核小体抗体与C1q抗体浓度及阳性率显著高于SLE对照组（P〈0．01），抗dsDNA抗体，抗Sm抗体，抗nRNP抗体有较高的阳性率，与对照组比较有统计学意义（P〈0.05）。同时SLEDAI≥10分组，抗核小体抗体与抗C1q抗体浓度及阳性率显著高于SLEDAI〈10分组（P〈0、01），抗dsDNA抗体，抗Sm抗体，抗nRNP抗体在SLEDAI≥10分组中有较高的阳性率，与SLEDAI〈10分组比较有统计学意义（P〈0.05）。相关性分析表明血清中抗核小体抗体，抗C1q抗体与SLEDAI评分呈正相关。分别以LN和SLEDAI作为因变量将抗核小体抗体，抗C1q抗体，抗dsDNA抗体，抗Sm抗体，抗nRNP抗体进行Logistic回归统计分析。结果显示以LN作为因变量入选的自变量有，抗C1q抗体，抗Sm抗体（P〈0．05y，以SLEDAI作为因变量入选的自变量有抗核小体抗体．抗C1q抗体（P〈0．05）。结论：在LN患者中，存在抗核小体抗体和抗C1q抗体的高表达，抗核小体抗体及抗C1q抗体在LN疾病中起较为重要作用。抗核小体抗体，抗C1q抗体，是反映SLE患者并发肾脏损伤的重要指标，在LN诊断和判定其活动性方面有重要作用，与SLE的发生发展密切相关，能较好的反映SLE病情的活动性。     

直肠癌组织中miR-155和miR-200c的表达差异及意义

目的 分析人直肠癌组织miR-155和miR-200c的表达差异及其与直肠癌临床病理特征的关系.方法 选取手术切除的卣肠癌标本71例,以正常黏膜为对照,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)对miR-155和miR-200c作定量分析.结果 相对于正常黏膜组织,miR-155和miR-200c在直肠癌组织中表达上调,差异有统计学意义(P<0.05).miR-155的表达与患者年龄有关(P<0.05);miR-200c的表达与患者血清癌胚抗原(CEA)水平有关(P<0.05).不同的直肠癌性别、临床分期、浸润深度、淋巴结转移、远处转移和分化程度间miR-155、miR-200c表达的差异无统计学意义(P>0.05).结论 miR-155和miR-200c在直肠癌组织中显著表达,可能参与直肠癌的发生过程.miR-200c对于直肠癌町能具有潜在的辅助诊断、疗效判断及预后评估意义.     

系统性红斑狼疮患者贫血和疾病活动及肾脏损害的关系

目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者贫血和疾病活动及肾脏损害的关系。方法选取2016年9月至2019年10月乐山市人民医院收治的187例SLE患者作为SLE组,另选取187名体检健康者作为健康对照组,比较其贫血发生率。根据血红蛋白(hemoglobin,Hb)水平及贫血严重程度,将SLE患者分为轻度贫血组、中重度贫血组和无贫血组,再根据SLE贫血患者的肾功能状态,分为SLE肾功能不全并贫血亚组、SLE肾功能正常并贫血亚组,收集所有SLE患者Hb、补体C3、补体C4、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、血尿素氮、血肌酐、血尿酸、24 h尿蛋白定量、SLE疾病活动度评分(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)等临床指标,分别比较以上各组临床指标的差异,利用Spearman秩相关分析评估Hb和临床指标的相关性,运用多因素Logistic回归分析SLE疾病活动、肾脏损害的危险因素,采用受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线评估Hb对SLE疾病活动及肾脏损害的预测价值。结果(1)SLE患者的贫血发生率为52.41%,显著高于健康对照组的3.74%(P<0.05)。(2)和SLE无贫血组相比,中重度贫血组补体C3显著降低,CRP、SLEDAI、24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐、血尿酸、肾脏损害发生率均显著升高(均P<0.05);轻度贫血组SLEDAI、血尿酸均显著升高(均P<0.05)。(3)和SLE轻度贫血组相比,中重度贫血组SLEDAI、24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐、肾脏损害发生率均显著升高(均P<0.05)。(4)和SLE肾功能正常并贫血亚组相比,肾功能不全并贫血亚组Hb显著降低,SLEDAI、24 h尿蛋白定量、血尿酸均显著升高(均P<0.05)。(5)SLE患者的Hb和补体C3、补体C4呈正相关(均P<0.05),和CRP、24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐、血尿酸、SLEDAI呈负相关(均P<0.05)。(6)多因素Logistic回归显示贫血是疾病活动、肾脏损害的独立危险因素。(7)根据ROC曲线,Hb用于预测疾病活动、肾脏损害的曲线下面积分别为0.768、0.716,最佳临界值分别为106.5 g/L、102.5 g/L,敏感度分别为72.62%、74.75%,特异性分别为71.85%、64.77%。结论Hb可能是评估SLE患者疾病活动、肾脏损害的潜在炎症标志物,不同程度的贫血可能反映了不同程度的疾病活动和肾脏损害。     

乳腺癌组织中miR-34a与VEGF的关系及临床意义

目的:探讨乳腺癌组织中miR-34a与VEGF的关系及临床意义。方法:检测40对乳腺癌及其癌旁组织组织中miR-34a与VEGF的表达,分析乳腺癌中miR-34a表达与临床病理因素及VEGF表达的关系;用双荧光素酶报告系统检测miR-34a对乳腺癌细胞MCF-7中VEGF转录活性的影响;用miR-34a模拟物转染MCF-7细胞后,检测细胞增殖情况与VEGF及下游Akt蛋白表达的变化。结果:与癌旁组织比较,乳腺癌组织中miR-34a表达明显降低,而VEGF表达明显升高(均P0.05);乳腺癌中miR-34a的表达与TNM分期有关(P0.05),且与VEGF的表达呈负相关(r~2=0.4469,P=0.0033)。miR-34a模拟物转染后,MCF-7细胞中VEGF的转录活性明显抑制;增殖率明显降低,VEGF的表达以及Akt的磷酸化水平明显下调(均P0.05)。结论:miR-34a在乳腺癌组织中表达降低,削弱了对VEGF及其下游Akt磷酸化的抑制,从而促进了乳腺癌的生长。     

微小RNA在糖尿病肾病患者血清中的表达及临床意义

目的 探讨糖尿病肾病发生、进展过程中血清微小RNA (microRNA,miRNA)表达谱及其临床意义.方法 应用miRNA基因芯片检测10例糖尿病肾病患者、10例糖尿病尿蛋白正常患者及10例健康对照者血清miRNA表达谱.实时荧光定量PCR法对66例糖尿病肾病(微量蛋白尿者36例,大量蛋白尿者30例)、40例糖尿病尿蛋白正常者及40例健康对照者进行血清miRNA表达谱验证,分析血清差异表达的miRNA与糖尿病肾病临床参数的关系.结果 实时荧光定量PCR法验证得到miR-150-5p、miR-155-5p、miR-30e-5p及miR-3196在糖尿病微量蛋白尿患者组(n=36)、糖尿病尿蛋白正常者组(n=40)及健康对照组(n=40)血清样本中表达差异有统计学意义(P＜0.05).miR-150-5p (P=0.005)和miR-155-5p (P=0.006)在糖尿病微量蛋白尿组(n=36)及糖尿病大量蛋白尿组(n=30)血清中表达差异有统计学意义.大量蛋白尿组血清miR-150-5p和miR-155-5p表达水平分别是微量蛋白尿组的2.3倍、1.5倍.同时发现,miR-150-5p和miR-155-5p与糖尿病肾病患者的估算肾小球滤过率和尿蛋白排泄率具有明显相关性.结论 miR-150-5p和miR-155-5p可能参与糖尿病肾病发生及发展的病理过程;血清miR-150-5p和miR-155-5p有望成为DN早期诊断及判断预后的潜在分子标志物.     

胃癌组织中miR-155的表达及其临床意义

目的:分析胃癌组织中miR-155的表达差异及其临床意义.方法:收集手术切除的52例胃癌标本及其癌旁组织,采用实时荧光定量-聚合酶链反应( RT-PCR)检测癌组织及癌旁组织标本miR-155的表达水平,并分析miR-155的表达与临床病理的关系.结果:RT-PCR结果显示,miR-155在胃癌组织中表达值(0.84±2.27)明显高于其配对癌旁组织中的表达值( 0.28±0.56) (P＜0.05);miR-155的表达水平与淋巴结转移有关,有淋巴结转移组明显高于无转移组(P＜0.05);miR-155的表达与性别、年龄、肿瘤大小、侵犯层次、TNM分期及脉管侵犯无关,各参数的分组间差异无统计学意义(均P＞0.05).结论:miR-155在胃癌组织中呈高表达,且可能与胃癌的淋巴结转移有关.     

血浆miR-20a和miR-20b对Ⅱ型糖尿病肾病的诊断价值

目的:探讨血浆miR-20a和miR-20b对Ⅱ型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的诊断价值。方法:选取2017年01月~2019年06月在我院就诊的327名Ⅱ型糖尿病(typeⅡdiabetes mellitus,T2DM)患者,根据Mogenson分期标准,327例T2DM患者中,213例被分到T2DM组,114例被分为Ⅱ型DN组。同时选取同时期在我院体检中心参加体检的健康人120例作为正常对照组(normal control,NC)。应用定量实时聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法测定miR-20a和miR-20b的相对表达量。采用Pearson相关分析比较miRNA和临床指标的相关性。采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析miR-20a和miR-20b对Ⅱ型DN的诊断价值。采用Logistic回归分析影响Ⅱ型DN的因素。结果:miR-20a和miR-20b在DN患者中的表达量显著高于T2DM组和NC组患者(P均<0.05)。Pearson相关分析显示,miR-20a和miR-20b均与UAER呈正相关,与e GFR呈负相关(P均<0.05)。ROC分析显示miR-20a和miR-20b诊断Ⅱ型DN的ROC曲线下面积(areas under the ROC curve,AUC)分别为0.823和0.870。多因素Logistic回归分析显示较高水平的BMI、TG、TC、FPG、Hb A1C以及miR-20a和miR-20b高表达均是Ⅱ型DN的独立危险因素(P <0.05)。结论:血浆miR-20a和miR-20b在Ⅱ型DN中高表达,是诊断Ⅱ型DN潜在的生物标志物。