肿瘤坏死因子-α对肝星状细胞形态及表达结缔组织生长因子的影响

目的 通过观察肿瘤坏死因子（TNF）-α对肝星状细胞（HSC）形态和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响，探讨TNF—α在肝纤维化中的作用机制。方法 采用体外培养大鼠肝星状细胞，加入TNF-α和TGF-β1，透射电镜观察肝星状细胞的形态学改变并应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测不同处理组HSC中CTGF的表达。结果 TNF-α、TGF—β1均诱导HSC中CT-GF表达；10μg／L浓度的TNF-α作用6、24和48h后，检测到CTGFmRNA表达，而TGF-β1在1μg/L浓度作用4h后，即可诱导HSC中CTGFmRNA表达。结论 TNF-α诱导HSC中CTGF的表达可能参与早期肝纤维化的形成。     

维甲酸诱导肝癌细胞株凋亡及其与midkine基因表达关系的研究

探讨在肝癌细胞凋亡过程中维甲酸 (retinoicacid ,RA )与midkine基因 (MK )的关系。笔者采用肝癌细胞株HepG2 ,用含不同浓度的全反式维甲酸 (ATRA )的培养基处理。以Annexin V FITC双标记流式细胞仪 (FCM )法测定凋亡率 ,逆转录 -多聚酶链反应 (RT PCR)法检测MKmRNA的表达变化。结果示经ATRA作用的肝癌细胞凋亡率较对照组升高 ,MKmRNA表达增加 ,且随培养基中外源性RA的浓度递升而增加 ,肿瘤细胞凋亡率及MKmRNA的表达也逐渐增高。提示ATRA可诱导肝癌细胞凋亡并促进肝癌细胞中MK的表达     

胚胎肝细胞移植治疗小鼠肝纤维化

目的 观察移植胚胎肝细胞减轻小鼠肝纤维化的作用.方法 孕14 d的BALB/C小鼠胚胎肝细胞移植到雌性BALB/C小鼠肝脏,二乙基亚硝胺诱导肝纤维化.60只雌性小鼠随机分为对照组,模型组及治疗组.3个月后测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸酶(HA)、层粘连蛋白(LN)浓度及肝脏羟基脯氨酸(Hyp)含量.免疫组织化学检测肝脏α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达及Y染色体性别决定区域蛋白(SRY)表达来确定移植的胚胎肝细胞在肝内的增殖分化.结果 移植胚胎肝细胞能显著降低血清ALT、AST、HA和LN的水平(P＜0.01).胚胎肝细胞移植组肝脏Hyp含量也明显低于模型组(P＜0.01).移植组肝脏α-SMA的表达明显低于模型组.胚胎肝细胞移植及诱导肝纤维化3个月后,胚胎肝细胞能增殖分化为肝细胞和胆管细胞,占肝脏的30%～50%.结论 在诱导肝纤维化过程中,移植胚胎肝细胞有向肝细胞和胆管细胞高增殖分化的能力,并有效地减轻肝损害和肝纤维化.     

Rho/ROCK信号通路调控肝星状细胞活化的研究进展

肝纤维化是大多数慢性肝病进展为肝硬化的共同病理改变,是肝脏的一种损伤修复反应。目前与纤维化有关的慢性肝病严重影响着人类身体健康。肝损伤修复反应导致肝星状细胞（hepatic stellatecells,HSCs）活化,从而引起细胞外基质（extracellular matrix,ECM）的过度沉积,是形成肝纤维化的主要驱动因素。Rho三磷酸鸟苷酶（Rho GTPases）是一类调控真核细胞内信号转导通路的重要分子开关,通过激活下游Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶（Rho associated coiled coil forming protein kinase,ROCK）参与调控细胞的收缩、黏附迁移、生长分裂、脂质代谢、转录调控、凋亡等多种生物学行为与功能。Rho/ROCK信号通路与HSCs的各种反应密切相关,其激活可以促进HSCs活化。本文就Rho/ROCK信号通路对HSCs活化的影响作一综述,揭示该信号通路在HSCs活化中的重要作用,为抗纤维化的治疗提供一些新思路。     

联合应用维甲酸和干扰素对膀胱癌细胞生长抑制及诱导凋亡作用的实验研究

目的　探讨联合应用维甲酸和干扰素对人膀胱癌细胞生长抑制和诱导凋亡的作用机理。　方法　应用全反式维甲酸 (ATRA)、9 顺式维甲酸 (9cRA)、联合干扰素α 2a(IFNα 2a)作用于 4组膀胱癌细胞 ,应用TUNEL、FCM、RT PCR及Western等技术观察维甲酸、干扰素单独或联合应用时对不同膀胱癌细胞株的生长抑制、诱导凋亡作用以及核维甲酸类受体、Stat1蛋白等方面的改变。　结果　ATRA和 9cRA对所有膀胱癌细胞的抑制生长和诱导凋亡作用均不明显 ,而IFNα 2a能增强ATRA和9cRA对膀胱癌的这种作用 ,联合应用ATRA和IFNα 2a能诱导膀胱癌细胞RARβ受体和Statl的表达。　结论　IFNα 2a能协同ATRA和 9cRA对膀胱癌细胞生长抑制和凋亡诱导效应 ,上调Stat1基因表达可能是其主要分子学作用机理。     

过氧化物酶增殖物激活受体γ对大鼠肝星状细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨过氧化物酶增殖物激活受体γ（PPARγ）对大鼠肝星状细胞（HSC）增殖与凋亡的影响。方法 常规培养大鼠HSC，经系列浓度的PPARγ天然配体（15-d-PGJ2）或合成配体（GW7845）作用后，通过噻唑蓝（MTT）比色法及流式细胞仪观察细胞的增殖和凋亡状态，应用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Western blot探讨PPARy配体诱导凋亡的分子机制，透射电镜观察HSC形态学变化。结果15-d-PGJ2和GW7845可通过抑制细胞增殖同时诱导凋亡而抑制HSC生长，且呈剂量依赖效应（各实验组与对照组比较，P＜0．01）；PPARy活化可显著抑制HSC中bcl-2基因表达（同时在转录和转录后水平），且此抑制作用可被PPARγ特异性拮抗剂GW9662部分或完全逆转，说明此种抑制效应确由PPARγ所介导；电镜观察亦显示明显的细胞凋亡发生。结论PPARγ活化可显著抑制HSC增殖，并通过下调bcl-2基因表达而诱导凋亡，提示PPARγ可作为逆转肝纤维化治疗的新的有效靶点。     

奥曲肽抑制转化生长因子α诱导肝癌细胞增殖的实验研究

目的探讨奥曲肽对转化生长因子α（TGF-α）诱导肝癌细胞增殖的抑制作用及其机制。方法用免疫组化法观察奥曲肽对TGF-α诱导肝癌细胞增殖的影响，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测奥曲肽对肝癌细胞TGF-α分泌和表皮生长因子受体（EGFR）表达的影响，用Western-blot法、免疫组化法检测奥曲肽对细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）的影响。结果奥曲肽明显抑制细胞核内TGF-α诱导的增殖细胞核抗原（PCNA）表达，使肝癌细胞TGF-αmRNA指数较对照组降低（P〈0．05），对TGF-α诱导的EGFR mRNA指数的增加具有明显抑制作用。Western-blot显示，奥曲肽明显抑制TGF-α诱导的ERK蛋白表达；免疫组化显示，TGF-α作用后，胞核染色明显加深，奥曲肽与TGF-α同时作用后胞核染色明显减弱。结论奥曲肽可能通过抑制肝癌细胞分泌TGF-α，抑制EGFR表达和阻断EGFR信号传导，从而抑制TGF-α诱导的肝癌细胞增殖。     

细胞凋亡与肝病的研究进展

自从 1972年病理学家Ｋｅｒｒ首先对细胞凋亡进行描述以来 ,经过 2 0余年的研究 ,人们认识到细胞凋亡在组织的自动平衡中起着重要作用。细胞凋亡是通过正常的方式在多细胞生物中消除不想要的、衰老的和受损的细胞 ,使机体细胞有丝分裂的速度与凋亡的速度相平衡。任何情况的异常凋亡对机体都是有害的 ,都会产生不良后果。肝脏也不例外 ,目前人们认识到异常凋亡在肝病的发生、发展中起着重要作用。一方面 ,肝细胞过度凋亡可以导致严重的肝脏损伤。另一方面 ,诱导凋亡机制的丧失可以导致肝癌。因此 ,对肝病病人抑制肝细胞的凋亡 ,对肝癌病人选…     

联合应用SSH和cDNA表达谱芯片筛选肝星状细胞早期活化的相关基因

目的 利用抑制消减杂交（suppression subtractive hybridization，SSH）和cDNA表达谱芯片筛选早期活化的肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）和大鼠正常肝脏组织、轻度肝纤维化组织、重度肝纤维化组织中差异表达的基因。方法 从SSH构建的大鼠轻度肝纤维化、重度肝纤维化2个差异cDNA文库中挑选1000条上调显著的基因，与正常大鼠4136条基因克隆制作成一张芯片，筛选早期活化的肝星状细胞相关基因。结果 获得与HSC早期活化相关的上调基因有202条，下调基因有80条，其中血清和糖皮质激素调节蛋白激酶（serum and glucocorticoid sensitive kinase，SGK）在正常大鼠基因克隆和2周及8周SSH上调差异基因中均呈上调信号。结论 联合应用SSH和cDNA表达谱芯片是筛选和鉴定不同样本中差异表达基因的快速、经济和有效的方法；SGK可能作为多种细胞信号传导通路和细胞磷酸化级联反应的一个功能性交汇点，参与了肝星状细胞的早期活化和信号传导。     

一次性大剂量注射二甲基亚硝胺导致大白鼠肝坏死后肝纤维化的形成机制

目的肝星形细胞（HSC）在肝纤维化过程中起重要作用。本实验利用二甲基亚硝胺（DMN）的大白鼠肝纤维化动物模型，探讨其纤维化的形成机制及HSC在此过程中的作用机制。方法大白鼠腹腔内一次性大剂量注射DMN（50mg／kg）后，分别在6、12、24、36h和第1、2、3、5、7、10、14天，取肝组织进行HE、特殊染色、免疫组化及透射电镜观察。结果注射DMN后36h肝坏死最严重，在坏死区未见廿平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和结蛋白（Desmin）阳性的HSC；第5天，位于坏死周围肝实质区的HSC对α-SMA和Desrnin表达强阳性，这些细胞依靠残存的网状纤维移动到坏死区；第14天，坏死区被再生的肝细胞和纤维组织来代替。结论本实验结果证明，在一次性大剂量注射DMN而引起的大片状肝坏死中，包括HSC也发生坏死、脱落，而残存实质区内的HSC活化、增生并移动到坏死区内，参与肝细胞的再生和纤维化的形成。     

How to estimate the size of the donor liver

Abstract  Of readily available methods to estimate the donor liver size, measurement of the body circumference at the xiphoid level (xiphoid measure) appeared to be the most accurate in the present prospective study of 60 donors and 57 recipients ( r = 0.64, P = 0.0001). The estimated liver volume could be calculated using the equation: bloodless liver volume (1) = 1.44 x xiphoid measure (m). The difference between donor and recipient xiphoid measures was significantly higher in slowly recovering patients than in those recovering uneventfully (7 ± 7 cm vs. - 5 ± 8 cm, P < 0.001). The bloodless donor liver volume measured by water displacement averaged 1249 k 230 ml and had increased by 3 weeks post-transplant by 64 ± 28 % as determined using computed tomography. The volume of the liver graft seemed to adapt to the recipient as it correlated positively with body weight ( r = 0.64, P < 0.01) and negatively with the age of the recipient (r = - 0.42, P < 0.01). The liver graft volume seemed to increase less markedly in patients with a slow recovery than in those with an uncomplicated recovery (37 %±15 % vs. 68 %± 24 %, P< 0.001). We conclude that a simple measurement of the body circumference at the xiphoid level can be used to estimate the donor liver volume. A gross mismatch of this parameter between the donor and the recipient seems to increase the risk of graft dysfunction. We also found that the change in the liver graft volume is influenced by the recipient's age and body weight.     

第五届国际暨全国肝衰竭与人工肝学术会议纪要

2009年1月20-22日,由中华医学会感染病学分会肝衰竭与人工肝学组、中国生物医学工程学会人工器官分会和中华临床感染病杂志主办的第五届国际暨全国肝衰竭与人工肝学术会议于在历史悠久的榕城福州顺利召开。本次大会为期3天,共收到论文149篇,其中专题报告25篇,有来自我国及美国、俄罗斯、澳大利亚、日本和印度尼西亚等国家的600余名相关专家和学者到会作了专题报告并进行了学术交流。     

Nomenclature of hepatic anatomy and resections: a review of the Brisbane 2000 system

The Brisbane 2000 system of nomenclature of hepatic anatomy and resections was introduced to provide a universal terminology in an area that was plagued by confusing and inappropriate terminology. The article describes historical developments central to the emergence of the new terminology and describes the terminology, its attributes, and rules of application.     

肝脏体积变化与病肝储备功能的关系研究

目的建立国人正常肝脏体积计算公式 ,探讨肝脏体积变化在评价病肝储备功能方面的临床意义。方法本研究采用螺旋CT对 2 80名正常人、85例肝硬化患者进行了腹部扫描并求出其肝脏体积。使用直线相关和回归的方法研究正常人群肝脏体积与体表面积的关系 ,得出相应的回归方程。求出肝硬化患者肝脏体积的变化率 ,分析其与Child肝功能分级和术后并发症之间的相互关系。结果正常成年人肝脏的平均体积为 (12 5 0± 141)cm3,其与体表面积呈正相关关系 ,相关系数为 0 96 ,回归方程为LV(cm3) =6 13×BSA(m2 ) +16 2 8。对于肝硬化患者 ,在ChildA级肝脏平均体积为 (10 92± 2 76 )cm3,ChildB级为 (86 8± 16 3)cm3,ChildC级为 (6 5 2± 76 )cm3,三者之间差异均存在着显著意义 (P <0 0 0 1)。ChildB级和ChildC级与正常组比较 ,肝脏平均体积明显减小 (P <0 0 0 1)。当病肝体积缩小 40 %以上时 ,术后并发症发生率明显增高。肝脏体积变化率与Child肝功能分级间存在着交错现象。结论　CT测量方法结合成人正常肝脏体积公式运算 ,能定量评价病肝体积变化 ,从而有助于客观评价病肝储备功能状况。     

冷保存再灌注损伤对肝移植大鼠肝脏再生功能的影响及其调节机制

目的 探讨冷保存再灌注损伤对肝移植大鼠肝脏再生功能的影响及其调节机制.方法 雄性SD大鼠分为假手术组(6只)、UW 1 h肝移植组(48只)、UW 12 h肝移植组(48只).HE染色及透射电镜观察肝组织形态学变化;大鼠内皮细胞抗原和5-溴-2脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)双染法检测肝实质细胞及肝窦内皮细胞(SECs)的增殖状况;免疫组织化学法检测VEGF及其受体flt-1、flk-1的表达;RT-PCR法检测flt-1 mRNA的表达.计量资料采用单因素方差分析或t检验.结果 UW 12 h组肝实质细胞和SECs的BrdU标记指数均显著高于UW 1 h组(F=61.45,41.4,P<0.05).UW 1 h组和UW 12 h组大鼠肝实质细胞BrdU标记指数于48 h达高峰,而SECs的BrdU标记指数分别于术后72、96 h达高峰.UW 1 h组和UW12 h组大鼠肝移植术后VEGF表达较假手术组明显增强.UW 1 h组flt-1及flk-1表达较假手术组明显增强,阳性表达主要位于SECs,其表达高峰与SECs增殖高峰一致.UW 12 h组flt-1 mRNA表达较假手术组明显减弱(F=141.67,P<0.05).结论 flt-1表达下调是导致冷保存肝移植大鼠SECs再生高峰延迟,从而减缓移植肝脏功能恢复的重要原因.     

人工肝支持系统联合肝移植治疗晚期重型肝炎的临床经验

目的总结人工肝支持系统 (artificialliversupportsystem ,ALSS)联合肝移植治疗晚期重型肝炎患者的临床经验。方法我院 1993年 4月至 2 0 0 3年 12月共实施 2 2 3例原位肝移植 ,其中 2 3例晚期重型肝炎患者在移植前共进行了 5 8例次的ALSS治疗 ,现就其临床诊治资料进行回顾性分析 ,并与常规内科治疗组、未施行肝移植的单纯ALSS治疗组疗效进行比较。结果ALSS治疗后患者临床症状好转 ,肝功能、内毒素等各项实验室指标显著改善 ,能维持的中位时间为 12d( 2～ 2 2 6d) ;2 3例患者实施肝移植 ,移植术前血清总胆红素 (TB)水平显著低于患者首次ALSS治疗前水平 (P <0 0 0 1) ;自首次ALSS治疗日计算 ,该组患者等待供肝的中位时间为 12d( 2～ 2 2 6d) ,本组晚期重型肝炎患者半年存活率达 73 9% ,显著高于常规内科治疗组和未施行肝移植的ALSS治疗组 (P <0 0 0 1)。结论ALSS能显著改善晚期重型肝炎病情 ,发挥顺利过渡到肝移植的桥梁作用     

Aminopyrine breath test compared to the MELD and Child-Pugh scores for predicting mortality among cirrhotic patients awaiting liver transplantation

Better tools for predicting the risk of death while awaiting transplantation are urgently needed because organ shortage is increasing the numbers on transplantation waiting lists. The aminopyrine breath test (ABT), model for end-stage liver disease (MELD), and Child-Pugh (C-P) score were compared as predictors of this risk in 137 cirrhotic candidates for liver transplantation. Eighty-three were transplanted within 3 months of registration, 35 others survived, 13 died before transplantation, and 6 were removed from the list. By univariate analysis, the continuous variables significantly associated with death while awaiting transplantation were: history of infected ascites, C-P score, ABT, and international normalized ratio or prothrombin time. Receiver operating characteristic curves for quantitative variables showed that the area under the curve was greatest for ABT (0.858±0.067). By Youden curve analysis, the best cut-off points for identifying cirrhotic patients at high risk of death while on the waiting list were: >10, >16, and <0.7% for the C-P score, MELD score, and ABT, respectively. These results show that ABT is as good as the MELD and C-P scores, or better, as a predictor of death among cirrhotic patients awaiting liver transplantation.     

从雷帕霉素与肝癌的关系浅谈转化医学的研究思路

Translational medicine is a new concept in China.It sets up a bridge between basic research and clinical work,and aims to transfer the basic study results to clinical practice as soon as possible.It is...