应用RNA干扰下调多药耐药蛋白4表达对结直肠癌细胞照射敏感性的影响

目的探讨多药耐药蛋白4（MRP4）表达对结直肠癌细胞照射敏感性的影响。方法应用慢病毒感染RNA干扰技术（RNAi）稳定下调人结直肠癌细胞株HCT116中MRP4的表达。将HCT116细胞分为未感染任何病毒的细胞株（CON）、加阴性对照病毒感染的细胞株（NC）和加RNAi靶点病毒感染的细胞株（KD）3组,应用实时定量RT-PCR和Western blot分别从RNA和蛋白水平检测MRP4表达变化,以验证RNAi的有效性。4Gy剂量照射后24h,流式细胞术检测细胞凋亡,MTT检测细胞增殖,比较RNAi后HCT116细胞株照射敏感性的差异。结果成功构建并转染慢病毒质粒,获得稳定沉默MRP4表达的HCT116-KD细胞株,HCT116-KD细胞株MRP4mRNA和蛋白表达水平较对照均明显下调（P〈0．05）。照射后24h,KD细胞株凋亡率为（71．7±0．8）％,明显高于CON组[（56．1±0．9）％]和NC组[（59．8±0．8）％]（P〈0．05）。照射后48h和72h,KD细胞增殖能力较对照组明显下降（火0．05）。结论MRP4在结直肠癌细胞中的表达水平与照射耐受显著相关,应用慢病毒感染RNA干扰下调MRP4表达可以增强结直肠癌细胞照射敏感性。MRP4有可能成为预测放疗敏感性的分子标志物。     

重组腺病毒介导的野生型p53基因对结直肠癌细胞的放射治疗增敏作用

目的探讨野生型p53基因通过重组腺病毒转染至结直肠癌细胞后对放射治疗（放疗）的增敏作用。方法将含野生型p53基因的重组腺病毒转染SW480结直肠癌细胞后,采用4、6Gy对其进行放疗。并通过噻唑蓝比色法检测生长抑制率、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记检测细胞凋亡水平、免疫组化检测增殖细胞核抗原的表达。结果经4、6Gy放疗后,转染野生型p53基因的SW480细胞生长受到了明显的抑制（P〈0．05）,凋亡率增加,增殖细胞核抗原比率下降。结论野生型p53基因可增加p53突变的结直肠癌细胞对放射治疗的敏感性。     

K-ras基因突变与结直肠癌肝转移及其预后关系的研究

目的探讨结直肠癌肿瘤原发灶中K-ras基因突变情况与肝转移及其预后的关系。方法回顾性选取2003年1月至2008年12月间经复旦大学附属中山医院普通外科手术治疗的结直肠癌病例,根据术时诊断和术后随访肝转移情况分为同时性肝转移、异时性肝脏转移和未发生肝脏转移的患者3组,每组各100例。运用PCR及Pyrosequencing法检测石蜡标本中肿瘤原发灶K-ras第2外显子突变情况．分析其与结直肠癌肝转移的发生及其预后的关系。结果300例样本中肿瘤原发灶K-1-as突变者120例（40．0％）,其中K-ras第2外显子G13D突变32例,而异时性肝转移组中K-ras的第2外显子G13D突变较同时性肝转移组多（17．0％比8．0％,P=0．041）。多因素回归模型提示,K-ras第2外显子的G13D突变是结直肠癌异时性肝转移的独立危险因素（P=0．048,HR=1．108．95％CI：1．032-5．062）。结直肠癌无肝转移组中K-ras基因突变者较无突变者总体生存期短（中位生存时间65比72个月,P=0．039）,而在结直肠癌肝转移切除的患者中,K-ras基因突变者无复发生存期短（中位时间18比24个月,P=0．048）,多因素分析提示,K-ras基因突变（HR=1．561,95％CI：1．022-6．422,P=0．045）是影响结直肠癌无肝转移组总体生存的独立危险因素。结论检测结直肠癌原发灶中的K-ras基因状态可以为预测肝脏的转移和预后情况提供参考。     

与放疗抵抗相关的长链非编码RNA在不同放疗敏感性结直肠癌细胞株中的表达

目的 筛选与结直肠癌细胞放疗敏感性相关的长链非编码RNA（lncRNA）.方法 将HT29、SW480、RKO、Lovo和HCT116等5株结直肠癌细胞梯度照光后行克隆形成实验,通过细胞存活率（SF2值）来检测5株细胞的放疗敏感性差异;利用高通量lncRNA芯片筛选在SW480、RKO和Lovo细胞株中两两比较表达差异均大于2倍的lncRNA,并通过实时定量PCR进一步检测所选lncRNA在5株结直肠癌细胞中的表达差异.结果 5株结直肠癌细胞放疗敏感性由低至高（即SF2值由高至低）依次为HT29 （0.83±0.03）、SW480 （0.69±0.02）、RKO （0.53±0.02）、Lovo （0.47±0.05）和HCT116（0.32±0.03）（P＜0.01）.lncRNA芯片筛选得到5种与结直肠癌细胞放疗敏感性相关的lncRNA基因,其中R05532、NR_015441和NR_033374基因表达水平与细胞放疗抵抗呈正相关（均P＜0.01）,而NR_073156和AA745020基因表达水平与细胞放疗抵抗无明显相关性（均P＞0.05）.结论 R05532、NR_015441和NR_033374三种lncRNA可能成为结直肠癌细胞放疗敏感性的预测分子,其高表达提示放疗抵抗。     

重组人生长激素减少人结肠癌细胞株放疗诱导的细胞凋亡

目的：探讨重组人生长激素（rhGH）对结肠直肠癌细胞株放疗敏感性的影响,并研究其与细胞凋亡的关系。方法：应用流式细胞术及免疫荧光法检测9个人结肠直肠癌细胞株表面生长激素受体（GHR）的表达水平;应用克隆形成实验检测结肠直肠癌细胞经照射后的增殖能力,从而评估其放疗敏感性;应用流式细胞术（Annexin V-FITC染色）检测放疗诱导的细胞凋亡;应用Western blot方法检测rhGH干预后Akt磷酸化水平的变化。结果：从9个细胞株中选择HCT-8为GHR阳性表达细胞,LoVo细胞为阴性表达对照。rhGH显著提高了GHR阳性表达的HCT-8细胞经放疗后的克隆形成率[在高剂量8Gy照射下尤为明显,（52.1±2.9）%比（21.0±2.7）%,P〈0.001],同时减少了细胞凋亡（P〈0.05）;而对GHR阴性表达的LoVo细胞作用不明显（P〉0.05）。rhGH能诱导HCT-8细胞Akt快速磷酸化,呈PI-3K依赖（P〈0.001）。结论：rhGH使GHR阳性表达的结肠直肠癌细胞对放疗有抵抗作用,这种作用可能与其减少细胞凋亡有关。     

长链非编码RNA调节细胞周期素D1表达对结直肠癌细胞辐射敏感性的影响

目的筛选影响结直肠癌细胞辐射敏感性的长链非编码RNA（1ncRNA）并探讨其作用机制。方法选取RKO和Lovo结直肠癌细胞株梯度照光后行克隆形成实验。应用单击多靶数学模型计算存活分数SF2值并绘制剂量存活曲线：高通量IncRNA／mRNA芯片筛选在RKO与Lovo、以及2Gv照光前后RKO细胞中表达差异2倍以上的lncRNA基因和蛋白编码基因：采用GeneOntology联合Pathway综合分析阳性表达基因主要作用通路：实时PCR进一步检测验证RKO细胞株照光前后P53、P21、细胞周期素（cyclin）D1表达变化。结果克隆形成实验显示,Lovo细胞株SF2=0．47．RKO细胞株SF2=0．53,Lovo辐射敏感性显著高于RKO（P〈O．05）。高通量lncRNA／mRNA芯片筛选得到阳性表达长链非编码RNA基因268条,蛋白编码基因270条;GeneOntologv联合Pathway综合分析显示：细胞周期相关基因所占比重最大（38．6％）,并有多条lncRNA表达水平与cvclinD1编码基因CCNDl组间表达差异显著相关。RKO与Lovo两株细胞P53和P21相对表达量的差异均无统计学意义（P〉0．05）,RKO细胞cyclinD1相对表达量明显高于Lovo细胞（P〈0．05）;RKO细胞株经2Gy剂量照射前后,P53和P21相对表达量的差异无统计学意义（P〉0．05）,而cvclinD1表达明显下调（P〈0．05）。结论incRNA可能通过形成转录复合物与CCNDl基因结合,调节cvclinD1蛋白表达进而影响结直肠癌细胞辐射敏感性：且lncRNA对cvclinD1表达的调节不依赖于P53-P21-cyclinD1通路。     

针对K-ras基因点突变的反义寡核苷酸对人胰腺癌Patu 8988细胞的抑制作用

目的 检测人胰腺癌Patu8988细胞K-ras基因点突变形式，并观察针对该点突变的硫代反义寡核苷酸在体内外对Patu8988细胞增殖和凋亡的影响。方法顺序特异引物聚合酶链反应（PCR-SSP）法和基因测序检测Patu8988细胞K-ras点突变形式，根据点突变形式设计并合成硫代反义寡核苷酸（K-ras mutation ASODN）作用Patu 8988，通过噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞生长情况；流式细胞术（FCM）检测K-ras蛋白表达和细胞凋亡；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测K-ras mRNA表达水平；以Patu8988细胞建立裸鼠胰腺癌模型观察K-ras mutation ASODN在体内的抗肿瘤效果。结果 PCR-SSP法和基因测序检测表明Patu 8988细胞存在K-ras基因第12密码子点突变，其突变方式为GGT→GTT.体外实验表明K-rasmutation ASODN组较正义寡核苷酸（SODN）组、随机寡核苷酸（RODN）组和空白对照组可明显抑制Patu8988细胞生长（P〈0．01），并呈时间．剂量效应关系；转染48h后，K—ras mutation ASODN组的K-ras蛋白和mRNA表达程度较SODN组、RODN组和对照组均明显降低（P〈0．01），而细胞凋亡明显增多（P〈0．05）。体内实验表明K-ras mutation ASODN较SODN组、RODN组和对照组能有效抑制BALB／C裸鼠人胰腺癌的生长（P〈0．01）。结论 针对K-ras基因第12密码子点突变的反义寡核苷酸可明显抑制人胰腺癌Patu 8988细胞生长，促进细胞凋亡，其机制可能是通过下调K-ras蛋白和K—ras mRNA表达而起作用。     

结直肠癌细胞Kiss-1基因表达在X线照射后的变化及其与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系

目的研究X线照射后人结直肠癌SW480细胞中肿瘤转移抑制基因Kiss-1表达水平变化及其对细胞增殖和凋亡能力的影响。方法SW480细胞分为对照组（0Gy）和不同照射剂量（2、4、6和8Gy）的实验组。实验组经6-MVX线照射后48h,应用细胞免疫组织化学、实时定量PCR法检测细胞中Kiss．1蛋白及mRNA水平．通过软琼脂集落形成实验和流式细胞法检测细胞增殖和凋亡情况。结果与对照组相比,2、4Gy剂量组细胞Kiss-1蛋白表达无明显改变（P〉0．05）．6、8Gv剂量组表达明显上调（P〈0．05）;在2、4、6Gy剂量组细胞瞄SS-1基因mRNA水平上调（P〈0．05）,8Gy剂量组则无明显改变（P〉0．05）;与对照组相比,各剂量组细胞克隆形成数均明显减少（P〈0．05）：4、6、8Gy剂量组细胞凋亡率增加（P〈0．05）。2Gv剂量组细胞凋亡率无明显改变（P〉0．05）。结论X线照射有可能上调SW480细胞Kiss-1基因的表达．同时残存癌细胞凋亡率增高、增殖力下降。     

当归挥发油对人脐静脉内皮细胞增殖、凋亡及Ⅲ型胶原合成的影响

目的探讨当归挥发油对人脐静脉内皮细胞增殖、凋亡和胶原合成的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞，用噻唑蓝比色法检测细胞增殖活性，用流式细胞术分析细胞周期及凋亡，用放射免疫法测定胶原合成。结果低浓度（≤4mg／L）当归挥发油促进细胞增殖（P〈0．05），降低G0/G1期细胞且增加S期细胞（P〈0．05），降低凋亡率（P〈0．05），而高浓度（≥16mg／L）时抑制增殖（P〈0．05），增加G0/G1期细胞且减少S期细胞（P〈0．05），增加凋亡率（P〈0．05）。当归挥发油呈剂量和时问依赖性抑制细胞合成胶原（P〈0．05或0．01）。结论当归挥发油对人脐静脉内皮细胞的增殖呈低浓度刺激高浓度抑制的双向调节作用，但对胶原合成呈抑制效应。     

选择性诱生型一氧化氮合酶抑制剂对人结直肠癌Lovo细胞生长的影响

目的研究选择性诱生型一氧化氮合酶（iNOS）抑制剂氨基胍（AG）对人结直肠癌细胞株Lovo增殖与凋亡的影响，并对其作用机制进行初步探讨。方法应用四唑盐（MTT）比色法检测AG对Lovo细胞增殖的抑制作用，流式细胞术检测分析不同浓度AG作用后Lovo细胞的凋亡率和细胞周期分布变化，并用丫啶橙结合溴化乙锭染色荧光显微镜观察凋亡细胞形态学改变。结果AG 0．5 mmol／L组和AG 1．0 mmol／L组的A值与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；各组在不同浓度AG作用24、48和72h后A值比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。Lovo细胞生长抑制率曲线显示，AG对Lovo细胞生长的抑制率呈明显的时间和浓度依赖性。流式细胞分析显示，随AG浓度的增高，Lovo细胞G0／G1期比率增高，S期与G2/M期则相应降低（P〈0．05）；SPF值和增殖指数（PI）降低，凋亡率增加（P〈0．05）。AG作用于Lovo细胞24h后细胞体积缩小、核固缩、荧光染色增强及凋亡小体形成。结论AG可抑制Lovo细胞的增殖。促进细胞凋亡；其作用的可能机制为氨基胍阻止Lovo细胞周期的进展。     

趋化因子受体CXCR4在结肠直肠癌中的表达及意义

目的：研究趋化因子受体CXCR4在结肠直肠癌中的表达及其临床意义。方法：采用RT-PCR法检测8种结肠直肠癌细胞株中CXCR4mRNA表达,应用蛋白印迹法检测细胞株中CXCR4蛋白表达。应用免疫组化染色法、结合组织芯片检测正常结肠直肠黏膜组织54例、结肠直肠癌组织49例中之CXCR4蛋白表达情况,并探讨其与结肠直肠癌临床病理特征的关系。结果：在8种结肠直肠癌细胞株中,CXCR4基因在HT29中表达水平最高。COL0205及SW480次之,HCTll6最低。CXCR4蛋白在结肠直肠癌组织中的表达高于结肠直肠正常黏膜组织,差异具有统计学意义（P=0．000）;在伴发转移的结肠直肠癌组织中,其表达比未发生转移者增强,差异具有统计学意义（P=0．024）。结论：CXCR4表达与结肠直肠癌转移存在密切关系,可能成为结肠直肠癌转移潜在治疗靶点。     

PIK3CA mutation status in Japanese esophageal squamous cell carcinoma

BACKGROUND: A somatic mutation of the PIK3CA (phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit) gene has been found in human cancer patients. However, this mutation has not yet been extensively studied in esophageal squamous cell carcinomas. MATERIALS AND METHODS: We analyzed a mutation of the PIK3CA gene in 88 Japanese cases of esophageal squamous cell carcinomas that had all undergone surgery at the Department of Surgery II, Nagoya City University Medical School, between 1996 and 2003. The TE and KYSE series of cell lines are human esophageal cancer cell lines. Two PIK3CA mutation hot spots (exon 9 and exon 20) were analyzed by a real time polymerase chain reaction (PCR)-based assay and the data were confirmed by direct sequencing. We performed a cell proliferation assay to determine the effects of a PI3K inhibitor LY294002. RESULT: In exon 9, a somatic mutation was found in two patients (2.2%) and in two cell lines. The mutations included three E545K (G1633A) mutations and one E545Q (G1633C) mutation. However, in exon 20, no mutation was observed in our esophageal cancer patients. PI3K inhibitor (LY294002) inhibited the growth of an esophageal cancer cell line with a PIK3CA mutation (E545K) in vitro. CONCLUSIONS: We found LY294002 to reduce the proliferation of the esophageal cancer cell line in vitro. Importantly, a cell line with a PIK3CA gene mutation was more susceptible to a PI3K inhibition than those without any such mutation. Further functional analyses of the PIK3CA mutations are warranted to determine whether or not they may be potentially useful targets of therapy for esophageal cancer.     

结肠癌K-ras突变与对西妥昔单抗耐药的实验研究

目的：研究结肠癌K-ras基因突变导致对西妥昔单抗耐药的可能机制。方法：通过基因测序及免疫细胞化学染色,筛选表皮生长因子受体（EGFR）表达阳性,同时K-ras基因呈突变型及野生型的结肠癌细胞各1株,应用细胞增殖实验（CCK8方法）、流式细胞技术（Annexin V标记）,检测西妥昔单抗（C225）在体外对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响。同时用K-ras呈野生型和突变型的结肠癌细胞株,分别建立裸鼠皮下移植瘤模型,分成HT29-C225、HT29-NS、SW620-C225及SW620-NS组,给予西妥昔单抗（每3天注射1次,每次0.5mL,共4周）。治疗后,绘制肿瘤生长曲线,用TDT介导的缺口末端标记技术（TUNEL）检测细胞凋亡,用定量PCR、免疫组织化学染色（IHC）及蛋白印迹（Western-blot）等技术检测移植瘤标本中EGFR信号转导通路中AKT及其磷酸化蛋白的表达。结果：体外增殖及凋亡实验显示,西妥昔单抗对不同K-ras基因型的结肠癌细胞均未能显示细胞毒作用。而体内研究发现,西妥昔单抗能明显抑制K-ras野生型结肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长,但对K-ras突变型者抑制作用较差。对K-ras突变型结肠癌裸鼠皮下移植瘤的定量PCR检测结果显示,西妥昔单抗治疗组裸鼠的AKT基因表达率高于对照组。IHC及Western-blot显示,西妥昔单抗治疗组与对照组间AKT蛋白的表达率无明显差异,但西妥昔单抗治疗组裸鼠的p-AKT表达率高于对照组。结论：K-ras突变状态与西妥昔单抗的疗效相关,K-ras突变型者EGFR信号通路中的衔接蛋白AKT呈自主激活状态,该基因突变可能是导致对西妥昔单抗耐药的机制之一。     

K-ras突变导致肺癌细胞对表皮生长因子受体抑制剂耐药的机制

目的 比较不同细胞株引入K-ras突变质粒前后对表皮生长因子受体(EGFR)信号传导通路活性的变化,探讨K-ras突变对于EGFR抑制剂耐药的机制.方法 通过噻唑蓝(MTF)比色法检测HCC827及H292细胞在转染K-ras基因前后的EGFR下游AKT及STAT通路抑制剂敏感性变化,免疫印迹法(Western blot)检测EGFR下游通路激活状态变化.结果 转染后HCC827细胞对于AKT和STAT通路抑制剂敏感性仅下降1.9和5.3倍,H292细胞对于AKT和STAT通路抑制剂敏感性仅下降3.0和2.5倍,远低于吉非替尼敏感性下降程度,转染K-ras的HCC827细胞AKT通路和STAT3通路持续激活,而转染K-ras的H292细胞AKT通路和STAT3通路的活性降低.结论 K-ras导致EGFR抑制剂耐药的原因可能还存在其他耐药机制,携带EGFR基因突变或野生型的肺癌细胞中,K-ras突变对于AKT和STAT通路的影响可能存在不同.

Abstract：

Objective By comparing the activity of signaling pathway in different cell lines affected by K-ras mutation, to investigate the resisitance to epidermal growth factor receptor (EGFR) inhibitors due to K-ras mutation. Methods Methyl thiazol tetrazolium (MTF) method was used to mensure the sensitivity and half maximal inhibitory concentration ( IC50 ) of AKT and STAT inhibitors after transfection of K-ras or blank plasmid into HCC827 and H292 cells. Western blotting was used to compare the activity of downstream signaling pathway in different cell lines. Results After transfection of mutant K-ras, the IC50 of AKT and STAT inhibitors in HCC827 cells was reduced by 1.9 and 5.3 times respectively, and that in H292 cells was reduced by 3.0 and 2. 0 times respectively. The activity of AKT and STAT pathways in HCC827 cells transfected with mutant K-ras was continuously activated, while that in H292 cells was suppressed. Conclusion K-ras-induced resistance to EGFR inhibitors may be related to other mechanisms. In the tumor cells bearing mutant or wild-type EGFR gene, there may exist different influences of K-ras mutations on AKT and STAT pathways.     

Tau基因表达与紫杉醇治疗胃癌敏感性的研究

目的:探讨胃癌细胞的Tau基因表达丰度与紫杉醇治疗敏感性间的关系,并分析其可能的耐药机制。方法:通过实时定量PCR筛选出Tau基因高表达和低表达的胃癌细胞株各一,然后观察两细胞株对紫杉醇的反应;并应用细胞增殖实验(CCK8方法)、流式细胞技术(AnnexinⅤ标记)检测紫杉醇在体外对胃癌细胞增殖、凋亡和周期的影响。对于Tau基因高表达的胃癌细胞,通过小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)等技术,观察其敲低Tau基因表达后,对紫杉醇的敏感性有无变化。结果:体外增殖实验显示,紫杉醇对Tau表达低的胃癌细胞的增殖生长抑制作用更为明显(P0.05)。而体外凋亡实验显示,紫杉醇更能促进Tau基因低表达胃癌细胞的凋亡(P0.05),在整个细胞周期中以G2/M期为主。而应用siRNA技术将Tau基因高表达的胃癌细胞降为低基因表达后,紫杉醇对其增殖的抑制作用明显增高(P0.05),更能促进转染后细胞的凋亡(P0.05);且对整个细胞周期,以作用于G2/M期为主。结论:紫杉醇对Tau基因表达低的胃癌细胞具有更强的增殖抑制作用,且更能促进其凋亡。而对干扰后的胃癌细胞,紫杉醇具有更强的抑制增殖作用,且更能促进其凋亡。     

Molecular response of human glioblastoma multiforme cells to ionizing radiation: cell cycle arrest,modulation of the expression of cyclin-dependent kinase inhibitors,and autophagy

OBJECT: Ionizing radiation is the gold-standard adjuvant treatment for glioblastoma multiforme (GBM), the most aggressive primary brain tumor. The mechanisms underlying neoplastic glial cell growth inhibition after administration of ionizing radiation, however, remain largely unknown. In this report, the authors characterize the response of GBM cells to ionizing radiation and elucidate factors that correlate with the radiosensitivity of these tumors. METHODS: Six human GBM cell lines were subjected to increasing doses of radiation. Each demonstrated a dose-dependent suppression of cell proliferation. In the most radiosensitive cell line, the authors demonstrated a transient increase in the expression of the cyclin-dependent kinase inhibitors (CDKIs) p21 and p27, which corresponded with a G1 cell-cycle arrest. In contrast, the most radioresistant cell line demonstrated a decrease in p21 and p27 expression levels, which correlated with a failure to arrest. Apoptosis did not occur in any cell line following irradiation. Instead, autophagic cell changes were observed following administration of radiation, regardless of the relative radiosensitivity of the cell line. CONCLUSIONS: These findings elucidate some of the molecular responses of GBMs to irradiation and suggest novel targets for future therapy.     

血浆K—ras基因突变与结直肠癌相关性研究

为探讨血浆K—ras基因突变在结直肠癌诊断中的价值,对42例结直肠癌患者血浆、肿瘤组织及20名健康体检者血浆中K—ras基因水平进行检测,并分析结直肠癌患者血浆及肿瘤组织中K—ras基因突变与临床病理参数之间的关系。结果显示,42例结直肠癌患者血浆K—ras基因突变17例（40．48％）,肿瘤组织Kras基因突变19例（45．24％）;对照组血浆无K—ras基因突变。血浆与肿瘤组织中Kras基因突变率有较高的一致性,一致率为95．2％。结直肠癌患者与健康体检者血浆K—ras基因突变率比较差异有统计学意义,x2=34．57,Pd0．001。结直肠癌患者K—ras基因突变率与肿瘤发生部位、分化程度、Dukes分期、淋巴结转移情况无关,P〉0．05。结果表明,K—ras基因突变属于结直肠癌发生的早期基因改变,检测血浆K—ras基因突变在结直肠癌早期诊断方面具有一定价值。