大鼠颅底软骨联合细胞凋亡信号传导途径的研究

目的研究大鼠生长发育过程中颅底细胞的凋亡活动,探讨软骨联合细胞凋亡途径相关信号因子iNOS、Fas的表达及分布规律。方法选用出生后4、8、16、32、48、64、128 d的SD大鼠的颅底软骨联合组织。通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL),iNOS及Fas的免疫组化法来检测颅底软骨联合细胞凋亡途径的时空特征,和各途径之间的相关性。结果各期标本均可见黄色荧光TUNEL凋亡软骨细胞,出生后4、8 d大鼠软骨联合的肥大区、交界区发现少量细胞凋亡现象;随时间推移细胞凋亡主要出现在肥大区、交界区和两侧的骨小梁,且细胞数逐渐增多。iNOS主要在出生后4、8、16 d的大鼠颅底软骨联合中间静止区、增殖区表达。Fas则存在于几乎各个时期的软骨联合各层,以肥大区、交界区表达为多。结论颅底软骨联合的生长发育与软骨细胞凋亡密切相关并存在Fas和NO两种凋亡途径。Fas途径发挥主要作用,NO途径对静止区和增殖区的生长意义更大。     

咀嚼力降低对发育期大鼠髁突软骨中细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究咀嚼力降低对发育期大鼠下颌髁突软骨细胞增殖和细胞凋亡活性的影响。方法：40只18d雄性大鼠随机分为两组。一组喂以标准的硬食,另一组以粉末状软食喂养。于大鼠4周、5周、6周、7周龄时取其髁突软骨,分别采用免疫组织化学染色和TUNEL染色,观察髁突软骨中增殖细胞核抗原阳性细胞数和凋亡细胞数。结果：在4～7周,PCNA阳性细胞数在软、硬食组都逐步上升。但在各相同时间点,软、硬食组的PCNA阳性细胞数不存在统计学差异。在4～7周,硬食组大鼠髁突软骨中凋亡细胞数基本保持一致,而软食组凋亡细胞数随时间推移而降低,但在4周、5周、6周时,软食组的凋亡细胞数均明显多于同期硬食组（P〈0.05）。结论：咀嚼力降低对发育期大鼠髁突软骨中的细胞增殖活性影响不大,但却使细胞凋亡的数量增加,提示咀嚼力降低可能加速了髁突软骨中细胞的分化、成熟、凋亡,进而影响髁突的正常发育。     

下颌骨髁状突软骨发育中的细胞凋亡及增殖

目的：研究胎儿下颌骨髁状突软骨细胞凋亡及增殖情况。方法：32例胎儿下颌骨髁状软骨标本按胎龄分为两组：A组（13－22周）；B组（23－33周）。采用原位末端标记法（TUNEL）及免疫组织化学法观察胎儿髁状突软骨发育不同时中的细胞凋亡及PCNA的表达，并对表达结果作定量分析。结果：两胎龄组中均有PCNA及TUNEL阳性表。PCNA、TUNEL染色以增殖层阳性细胞率最大，其次为成软骨细胞层，肥大软骨细胞层最小，B组PCNA染色强于A组，A组TUNEL染色强于B超。A组TUNEL／PCNA大于B组，TUNEL／PCNA在肥大软骨细胞层大于成软骨细胞层，增殖层最大小。结论：细胞凋亡与细胞增殖在胎儿颗状突软发育中具有一定意义。     

软骨细胞增殖与凋亡在人重组白细胞介素-1β介导的颞下颌关节炎症损伤中的意义

目的:探讨细胞增殖与凋亡在人重组白细胞介素-1B介导的颞颌关节炎症损伤中的作用。方法:选用SD大鼠颞下颌关节腔内反复多次注射rhIL-1B,造成炎症损伤,利用免疫组织化学染色及原位末端标记法,观察炎症损伤过程中髁突软骨细胞增殖及凋亡的变化。结果:注射后1~30 d,实验侧髁突软骨增殖层PCNA阳性指数均较对照侧低,以1~7 d最明显;实验侧髁突软骨细胞凋亡数较对照侧多,主要分布于软骨增殖层及前肥厚层中,以1~7 d 最明显,15 d后凋亡细胞数明显减少,仅见个别凋亡细胞散在分布于软骨浅层。结论:rhIL-1B关节内注射不仅使髁突软骨细胞增殖受抑制,而且细胞凋亡也可能是rhIL-1B致关节损伤的途径之一,细胞增殖与凋亡协同参与了颞下颌关节炎症损伤的病理过程。     

PCNA及cyclin D1蛋白在羊下颌骨牵张成骨过程中的检测

目的 观察在下颌骨牵张成骨过程中牵引区内细胞在增殖及细胞周期方面的变化特点。方法 用自制的牙支抗下颌骨牵引装置,对山羊下颌骨进行牵引,0.25mm/12h,共牵引16天,分别于开始牵引的8、16、32、48天取材,标本进行常规增殖细胞核抗原（PCNA）及 cyclin D1免疫组化染色,并对阳性细胞进行计数。结果 PCNA及cyclin D1阳性细胞主要见于骨膜下疏松结缔组织内的间充质细胞和成纤维样细胞,以及牵引区内的胶原纤维周围的间充质细胞和成纤维样细胞,随着时间延长,阳性细胞数逐渐减少。结论 牵张成骨过程中细胞的增殖分化具有一定的时间分布特点,cyclin D1可能在此过程中的细胞增殖周期中起一定的调节作用。?     

细胞增殖与程序性细胞死亡在颞下颌关节发育中的意义

目的：探讨细胞增殖与程序性细胞死亡在颞下颌关节发育中的作用。方法：利用免疫组织化学技术及原位末端标记法,对胚胎及生后一周ＳＤ大鼠颞下颌关节不同发育时期髁状突软骨中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及程序性细胞死亡（ＰＣＤ）进行了观察。结果：胎鼠颞下颌关节髁状突软骨增殖层ＰＣＮＡ阳性细胞率最高,进入浅层肥厚层ＰＣＮＡ阳性细胞数减少,深层肥厚层中则未见ＰＣＮＡ阳性细胞。出生后髁状突软骨ＰＣＮＡ阳性细胞率均较出生前低。ＰＣＤ阳性细胞主要分布于软骨增殖层及邻近深层肥厚层的浅层肥厚层中,在关节腔开始形成时髁状突软骨表面ＰＣＤ明显。结论：细胞增殖与程序性细胞死亡密切相关,协同参与调控颞下颌关节的生长发育与塑形。     

升高咬合对青春期大鼠髁突软骨中增殖细胞核抗原表达变化的影响

目的：探讨升高咬合后髁突软骨中增殖细胞核抗原（PCNA）的变化情况及意义。方法：40只5周龄雄性SD大鼠,随机分为对照组和实验组（双侧后牙板升高咬合）。分别于术后7、14、21及28d,取其右侧髁突,应用免疫组织化学SABC法检测大鼠髁突软骨中PCNA的表达变化,并作图像分析和统计学处理。结果：与对照组相比,实验组髁突软骨PCNA阳性细胞表达在实验第7、14d明显减少,第28d明显增多（P〈0.05）。结论：咬合升高可以引起大鼠髁突软骨的适应性改建。     

机械应力作用于颅底软骨联合的研究进展

颅底软骨联合在颌面部的生长发育中起了重要作用。除了基因的先天因素外,后天环境因素对于颅底软骨联合生长的影响也不可忽视。机械应力是可以影响颅底软骨生长的最常见环境因素,并且机械应力可应用于治疗部分颅面发育异常相关性疾病,如前牵引常用于治疗面中份发育不足的Ⅲ类错畸形。机械应力作用可引起颅底软骨一系列的改变,并且这些因素之间可能存在相互依赖的关系。本文主要对机械应力作用下,颅底软骨联合中与软骨细胞增殖分化、细胞外基质合成、血管生成等相关改变进行综述。     

rhIL—1β及TGF—β对髁状突软骨细胞增殖影响的研究

目的：探讨rhIL-1β及TGF－β对髁状突软骨细胞增殖的影响。方法：以酶消化法获得兔髁状突软骨细胞。用MTT法及PCNA免疫组化染色检测不同浓度rhIL-1β及TGF－β对体外培养的兔髁状突软骨细胞增殖的影响。结果：MTT检测，rhIL-1β（10，20ng/ml）处理软骨细胞48h后，可明显抑制软骨细胞增殖，经统计学检验，处理3－6d有显著性差异（P＜0．01,t检验）；加入TGF－β（10，20ng/ml)可明显拮抗rhIL-1β对软骨细胞增殖的抑制作用，并且浓度愈高对rhIL-1β的抑制作用愈强。PCNA检测，rhIL-1β处理软骨细胞后PCNA阳性细胞率降低，随rhIL-1β的刺激浓度增加，阳性率明显降低；加入外源性TGF－β可以使PCNA的阳性率提高。结论：rhIL-1β对髁状突软骨细胞增殖具有报制作用，外源性TGF－β对该作用具有明显的拮抗效应。     

机械损伤大鼠结合上皮后的组织修复观察

目的：观察两种机械方式破坏大鼠结合上皮（JE）后的组织修复过程。方法：12只健康sD大鼠分别用探针、龈下刮治器损伤左、右下前牙JE,于2、7、14、21d处死大鼠,HE、PCNA染色,镜下观察计数。结果：第2天大量炎细胞浸润,上皮PCNA阳性细胞散在分布;第7天炎症减轻,上皮PCNA阳性率开始增加,增殖并部分和牙面贴附;14d纤维组织增殖明显,上皮增厚;21dJE基本修复。结论：龈下刮治对牙周损伤比探损伤重;结缔组织的快速增殖可能会阻止UE形成。     

口腔粘膜上皮癌前及癌变中PCNA和P53的表达

目的：检测口腔粘膜上皮癌前及癌变组织中ＰＣＮＡ和ｐ５３的表达，探讨口腔癌变的机理。方法：采用免疫组化的方法检测８０例口腔粘膜病变组织中ＰＣＮＡ和ｐ５３的表达。结果：正常口腔粘膜基底层有少数ＰＣＮＡ阳性细胞，随着粘膜异常增生程度的加重到鳞癌，ＰＣＡＮ表达的阳性分级升高，ＰＣＮＡ的相对含量也升高。Ｐ５３的阳性表达仅见于重度异常增生及鳞癌组织中。结论：对ＰＣＮＡ和ｐ５３的研究有助于探讨口腔粘膜癌变多阶段发生过程的机理，并可为监测癌变提供生物学指标。     

细胞增殖与凋亡在牙齿发育中的作用

目的 阐明细胞增殖与凋亡在牙齿发生,发育过程中的机制,探讨牙齿发生,发育过程中的机制,探讨牙齿发育的机理,方法 选用纯系ＳＤ大鼠建立牙齿发育模型,采用原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ法）及免疫组织化学增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）染色技术,观察分析纯系ＳＤ大鼠牙胚发育不同阶段细胞增殖及凋亡情况,结果 在牙齿发育的蕾状期,帽状期,钟状期增殖及凋亡的阳性细胞均出现在细胞增殖生长中心处,钟状晚期及牙体组织形成后,     

人成釉细胞瘤中端粒酶活性与细胞周期素A的表达

目的　研究端粒酶hTERT基因在人成釉细胞瘤 (ameloblastoma,AB)中的表达及其与细胞周期素A (cyclinA)和相关因子 p53蛋白、增殖细胞核抗原 (proliferationcellnuclearantigen ,PCNA)的关系 ,探讨其临床生物学意义。方法　用免疫组化 (SP法 )和原位杂交技术分别检测了AB中细胞周期素A、p53蛋白和PCNA ,hTERTmRNA的表达 ,同时以正常口腔粘膜和牙源性角化囊肿(odontogenickeratocyst,OKC)为对照。 结果　在正常口腔粘膜中只有 1例hTERT阳性 (1 / 7) ,cyclinA、p53蛋白、PCNA三者之间表达有着相似共性。OKC中表达在基底或副基底层细胞核中 ,有1 4例hTERT阳性 (1 4 / 1 6) ,4例cyclinA阳性 (4/ 32 )、1 1例p53蛋白阳性 (1 1 / 2 5) ,5例PCNA阳性(5/ 9)。hTERTmRNA在AB中表达率为 94 4% (51 / 54) ,cyclinA为 66 7% (40 / 60 ) ,p53蛋白为85 7% (42 / 4 9) ,PCNA为 78 1 % (2 5/ 32 ) ,hTERT与cyclinA、p53蛋白、PCNA之间经Kendall相关分析 ,rs 分别为 0 91 4、0 848、0 80 4 ,P <0 0 5。结论　随着组织学分级增高 ,hTERTmRNA与cyclinA、p53蛋白、PCNA阳性率及信号强度均增高。在AB中端粒酶的活性表达与p53蛋白的蓄积有关 ,与细胞的增殖、分化有关 ,并受cyclinA调节 ,在S期中有较高表达     

Proliferation,migration and apoptosis of periodontal ligament cells after tooth replantation

Oral Diseases (2010) 16 , 263–268 Objective: The aim of this study was to investigate the proliferation, migration and death of periodontal ligament (PDL) cells after tooth replantation. Materials and methods: Maxillary first molars were extracted from 4‐week‐old male (n = 28) Sprague–Dawley rats and immediately replanted, after which, proliferation, migration and death of PDL cells were investigated. Results: At 3 days after tooth replantation, many proliferative cell nuclear antigen (PCNA)‐positive PDL cells were observed on the alveolar bone side, but fewer on the root side. However, while a gradual decrease was observed in number of PCNA‐positive PDL cells on the alveolar bone side until 7 days, an increase was seen on the root side. At 3 weeks, cells labeled with PKH26 (fluorescent dye into plasma membrane) were located in the middle of the PDL space. However, these PKH26‐labeled cells did not spread to the surface of the cementum or the alveolar bone. TUNEL‐positive cells were observed on both the bone and root sides at 3 days. Number of apoptotic cells increased until 7 days on the bone sides, but decreased on root sides. Conclusion: These results suggest that both cell proliferation and apoptosis occur in different patterns and at different times to maintain regular spacing of the PDL after tooth replantation.     

牵张力对大鼠髁突软骨细胞增殖及相关因子表达的影响

目的:观察牵张力对大鼠髁突软骨细胞增殖、炎性因子及Hedgehog通路基因的表达影响,探讨牵张力对软骨细胞的调控。方法:体外培养软骨细胞并鉴定。用Flexcell 4000TM加力板对细胞施加0.5 Hz,0%、3%和15%的牵张应变,作用4 h后检测细胞增殖情况,对比PCNA、Caspase-3、COL II、IL-1β、TNF-α及Hedgehog通路基因Ihh、Ptc和Smo的表达变化。结果:与对照组相比,3%组细胞增殖速度增加,PCNA、COLII、Ihh、Ptc和Smo的mRNA表达增加,15%组Caspase-3、IL-1β和TNF-α表达增加,而PCNA、Smo表达降低。与3%组相比,15%组细胞增殖速度降低,PCNA、COL II、Ihh和Smo表达降低,而Caspase-3、IL-1β表达增高。结论:不同强度牵张力对大鼠髁突软骨细胞增殖活性及炎性因子表达作用不同。Hedgehog通路对牵张力敏感,可能参与了力学刺激对软骨细胞的调控。     

Characteristics of the craniofacial complex in Turner syndrome

Objective

To identify characteristics of the craniofacial complex in Turner syndrome (TS) patients from Croatian population, to investigate the interrelationship among craniofacial variables and to assess their correlation with age.

Design

Cephalometric analysis was carried out on lateral cephalograms of 36 TS patients, aged 10-33 years. Cephalograms of 72 age-matched healthy females with class I occlusion served as control.

Results

Logistic regression analysis sorted out two variables as predictors of TS: shorter posterior cranial base length (sella-basion) and reduced mandibular prognathism angle (sella-nasion-supramentale). Sixty-four percent of TS patients and 92% of the controls were classified correctly. After exclusion of the variable sella-nasion-supramentale, three variables were significant predictors of TS: shorter sella-basion, larger cranial base angle (nasion-sella-basion) and shorter subspinale-basion distance. Retrognathic position of the jaws in TS subjects was not correlated with the shape of the cranial base. Correlations with age revealed lack of maxillary longitudinal growth with persistent retrognathism and posterior rotation along with reduced mandibular growth.

Conclusion

Shorter posterior length and increased cranial base angle along with bimaxillary retrognathism were characteristics of TS patients. Results indicated that deficiency of the X chromosome genes had a direct influence on all three anatomic parts - cranial base, maxilla and mandible - causing irregular growth.     

静张应力对大鼠髁突软骨细胞增殖效应调节研究

目的　探讨静张应力环境对髁突软骨细胞增殖效应的影响。方法　将第4代大鼠下颌髁突软骨细胞在细胞膜式张应力施加装置上培养,检测不同血清浓度及持续不同的静张应力(5 kPa、10 kPa)在0~12 h内对髁突软骨细胞增殖活性的影响。结果　低血清培养基中,随培养时间的延长,硅胶膜上髁突软骨细胞的增殖活性受到抑制;短期(2h)的静张应力(5 kPa、10 kPa)对髁突软骨细胞细胞周期的调控影响不大;0~10 h内5 kPa静张应力组软骨细胞增殖指数随着张应力作用时间的延长不断上升,增殖指数峰值位于10 h处;0~8 h内10 kPa静张应力组软骨细胞增殖指数随着张应力作用时间的延长不断上升,增殖指数峰值位于8 h处;5 kPa静张应力组较10 kPa静张应力组对髁突软骨细胞具有更大的促增殖作用。结论　静张应力可以调节髁突软骨细胞的增殖活性。     

Immunohistochemical localization and distribution of proliferating cell nuclear antigen in the rabbit mandibular condyle following experimental induction of anterior disk displacement

The purpose of the present study was to identify proliferating cells in control versus experimental condyles two weeks following experimental induction of anterior disk displacement (ADD) in the rabbit craniomandibular joint (CMJ). The right joint of 15 rabbits was exposed surgically and all diskal attachments were severed except for the posterior attachment. The disk was then repositioned anteriorly and sutured to the zygomatic arch. The left joint served as a sham-operated control. Ten additional joints were used as nonoperated controls. Mandibular condyles were excised two weeks following surgery and processed for proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunostaining. In control and sham operated condyles, PCNA was localized in the nuclei of chondroblasts of the reserve cell layer, chondrocytes of the upper hypertrophic layer and bone marrow cells of the subchondral bone. In contrast to control joints, the PCNA positive cells of the experimental joints were located throughout the osteoarthritic condylar cartilage. In addition, the percentage of PCNA positive cells of the osteoarthritic condylar cartilage was statistically significantly higher when compared to the control group, p < 0.05. It was concluded that surgical induction of ADD in the rabbit CMJ leads to an increase in mitosis of chondrocytes, which lead to cell proliferation and subsequent hyperplasia of the condylar cartilage.