IGF-1促进大鼠上皮根鞘HERS细胞成牙骨质分化的研究

目的:研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)对赫特维希上皮根鞘(HERS)细胞增殖和分化的影响。方法:取出生后8 d的SD大鼠,分离纯化HERS上皮细胞,分为对照组和IGF-1干预组;CCK8检测细胞生长曲线;免疫荧光染色检测上皮细胞标记物细胞角蛋白14(CK14)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和间充质细胞标记物波形蛋白(Vimentin)的表达;实时定量RTPCR检测上皮细胞标记物E-cadherin,间充质细胞标记物Vimentin、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、Ⅰ型胶原蛋白(Col1),成牙骨质分化相关基因骨涎蛋白(Bsp)、Runt相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(Alp)等基因表达水平;茜素红染色检测细胞矿化情况。结果:HERS细胞能够同时表达上皮及间充质细胞标记物;IGF-1干预后,免疫荧光染色及实时定量RT-PCR结果显示HERS细胞上皮细胞标记物表达显著下降,间充质细胞标记物表达显著上调,并且明显促进细胞增殖(P<0.05)。矿化诱导环境下,IGF-1干预组7、14 d均显示成牙骨质分化相关基因表达显著上调,促进矿化结节形成(P<0.05)。结论:IGF-1诱导促进HERS细胞增殖、上皮-间充质转化和成牙骨质细胞向分化。     

上皮根鞘细胞在牙骨质发育中的作用

目的：观察牙根发育中上皮根鞘细胞（Hertwig＇s epithelial root sheath,HERS）断裂后结局和增殖凋亡相关基因的表达,探讨上皮根鞘在牙根发育特别是牙骨质形成中的可能作用.方法：用TUNEL（ TdT- mediated - dUTP nick end labeling , TUNEL） 法原位细胞凋亡检测牙根发育中上皮根鞘细胞凋亡的情况.以细胞角蛋白14（cytokeratin 14）标记上皮根鞘细胞,追踪其断裂后结局.SP免疫组化法检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA ）和凋亡抑制基因Bcl-2在上皮根鞘细胞的表达.结果：牙冠形成后,内外釉上皮结合增殖形成HERS,此时呈PCNA表达阳性;牙根发育开始后,HERS呈Bcl-2阴性表达,在少量牙本质基质形成处,上皮根鞘细胞开始呈TUNEL阳性表达,之后HERS断裂,在其外侧可见成牙骨质细胞的形成,断裂的HERS细胞部分转入牙周膜形成上皮剩余（the epithelial rest of Malassez）,而细胞牙骨质形成中可见部分埋入细胞呈CK14阳性表达.结论： HERS细胞的凋亡可能会为成牙骨质细胞分化提供信号,部分HERS细胞可能参与牙骨质的形成.     

YAP 1-FOS促进人口腔鳞状上皮癌细胞增殖、迁移及上皮间质转换的机制研究

目的探讨YAP1-FOS在促进口腔鳞状上皮细胞癌(OSCC)细胞的增殖、迁移及上皮间质转换(EMT)过程中发挥的功能。方法通过组织免疫荧光实验检测OSCC癌组织及周围正常组织中YAP1的表达及亚细胞定位,细胞克隆形成实验检测YAP1对OSCC细胞增殖情况的影响,细胞划痕实验检测YAP1对OSCC细胞迁移的影响,Western Blot检测YAP1对EMT相关分子标记基因蛋白表达的影响,RT-PCR检测YAP1对EMT相关分子标记基因转录水平变化的影响,CoIP及免疫印迹实验检测YAP1与FOS互作,共同调控下游基因表达以控制EMT过程。结果组织免疫荧光实验结果显示,OSCC癌组织细胞中YAP1表达增加,且由细胞质转移至细胞核;细胞克隆形成实验结果显示,YAP1上调后克隆形成数目显著增加(P<0.01);细胞划痕实验结果显示,过表达YAP1后,细胞划痕间距显著减小(P<0.01);Western Blot及RT-PCR结果显示,上皮细胞关键基因E-cadherin表达水平在YAP1上调后被显著抑制(P<0.01),而间质细胞关键基因β-catenin,Vimentin及N-cadherin表达水平则显著上调(P<0.01)。CoIP及免疫印迹结果显示,YAP1与核转录因子FOS互作,抑制FOS表达后YAP1的促细胞增殖能力显著减弱(P<0.01),同时EMT相关分子标记表达显著下调(P<0.01)。结论 YAP1结合FOS基因促进人口腔鳞状上皮细胞癌(OSCC)细胞的增殖、迁移及EMT过程,这一结果可为人口腔鳞状上皮细胞癌的发生发展提供理论基础,YAP1-FOS或可成为新的人口腔癌药物靶点。     

转化生长因子β1诱导人舌鳞状细胞癌细胞上皮-间质转化及其顺铂耐药性研究

目的 利用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人舌鳞状细胞癌(TSCC)细胞CAL27、顺铂耐药细胞CAL27-res发生上皮-间质转化(EMT),建立TSCC细胞发生EMT的实验研究模型.研究EMT对TSCC细胞顺铂耐药性及细胞增殖、凋亡的影响.方法 10 ng/ml的TGF-β1处理CAL27、CAL27-res细胞8 d,观察细胞形态学变化,Western blot 和细胞免疫荧光验证EMT相关上皮标记蛋白及间质标记蛋白表达的变化,划痕试验检测细胞迁移能力的变化,MTT法检测细胞半抑制率(It50),免疫荧光检测MDR、MRP、Topo Ⅱβ的表达,流式细胞仪分析细胞周期及凋亡.结果 TGF-β1 可诱导CAL27、CAL27-res向间质细胞形态转化,并且下调上皮相关标记蛋白E-cadherin的表达,上调间质相关标记蛋白Vimentin的表达,细胞的迁移能力明显增强.IE50分别提高2.31倍(CAL27)和1.72倍(CAL27-res),MDR和MRP表达升高,Topo Ⅱβ表达降低.细胞增殖指数(PI)均明显降低(CAL27:χ2=16.799,P<0.001;CAL27-res:χ2=25.375,P<0.001),细胞凋亡指数(AI)均明显升高(CAL27:χ2=165.0797,P<0.001;CAL27-res:χ2=196.5640,P<0.001).结论 TGF-β1能够成功诱导CAL27、CAL27-res发生EMT并且明显增强细胞对顺铂的耐药性,同时抑制细胞增殖,促进凋亡.     

成釉细胞瘤、颌骨囊肿中E-cadherin、vimentin的表达及意义

目的通过免疫组化双染技术检测成釉细胞瘤(ameloblastomas,AM)、颌骨囊肿中E-cadherin、vimentin的表达情况,探索AM中是否存在上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)现象。方法选择37例不同分型的AM、5例颌骨囊肿为研究对象,用免疫组化双染技术检测E-cadherin、vimentin的表达情况,通过计数分析二者共同表达细胞的分布情况。单因素方差分析AM与颌骨囊肿、实性型与单囊型AM的EMT。结果 AM中存在EMT现象,EMT发生特点在实性型与单囊型AM之间、AM与颌骨囊肿之间均无统计学差异。结论 EMT与成釉细胞瘤的侵袭性生物学行为无相关性,EMT存在于AM中可能为肿瘤组织中间质细胞的来源之一。     

口腔鳞状细胞癌组织中Periostin的表达及其在上皮间质转化中的作用

目的:观察Periostin在口腔鳞状细胞癌组织中的表达情况,及其在上皮间质转化(EMT)中的作用。方法:用免疫组化法检测59例口腔鳞状细胞癌组织(实验组)和15例正常口腔黏膜组织(对照组)中Periostin、E-cadherin、Vimentin表达情况,分析Periostin与E-cadherin、Vimentin间相关关系。结果:59例口腔鳞状细胞癌组织中Periostin、E-cadherin、Vimentin阳性表达率分别为71.2%、52.5%、39.0%, Periostin表达与肿瘤TNM分期、分化程度、淋巴结转移密切相关(P＜0.05);且Periostin与E-cadherin表达降低和Vimentin表达上调间均存在相关性(P＜0.01)。结论:Periostin可能通过调控上皮间质转化促进口腔鳞状细胞癌侵袭转移。     

舌鳞癌中“瘤芽”的病理学特征及其与上皮-间质转化之间的关系

目的:探讨"瘤芽"(tumor budding)在舌鳞癌中的病理学特征及其与上皮-间质转化(EMT)的关系。方法:HE染色评估230例舌鳞癌组织标本中肿瘤侵袭前沿和"瘤芽"的分布情况;免疫组织化学染色检测E-cadherin和Vimentin在舌癌中的表达及分布;应用SPSS13.0软件包进行Sperman相关分析,探讨"瘤芽"与临床、病理参数之间的关系,Kaplan-Meier法和Logrank分析生存率。结果:在舌鳞癌组织切片中,可见"瘤芽"位于肿瘤侵袭前缘,为单个或小于5个成簇的癌细胞。在230例病例中,111例标本呈现出高"瘤芽"状态(≥5个"瘤芽"/HPF),119例标本表现出低"瘤芽"状态(<5个"瘤芽"/HPF);"瘤芽"与肿瘤大小(P<0.05)、分化程度(P<0.05)、临床分期(P<0.05)以及淋巴结转移(P<0.001)呈正相关;与患者预后呈负相关,可作为舌鳞癌患者的独立预后判断指标(P=0.0014);构成"瘤芽"的癌细胞形态可由多边形、鱼鳞状转变成长梭形、成纤维细胞样;"瘤芽"与E-cadherin的表达呈负相关(P<0.01),与Vimentin的表达呈正相关(P<0.01),提示"瘤芽"与EMT相关,是EMT在组织形态学上的一种表现。结论:"瘤芽"与EMT密切相关,代表恶性程度更高的癌细胞亚群,可作为舌鳞癌患者独立的预后判断指标。     

Par3在成牙本质细胞胞间连接及其生物学功能中的作用研究

目的:通过下调分离缺陷基因3(partitioning defective-3,Par3)的表达探究其对小鼠成牙本质细胞系细胞(odontoblast lineage cells,OLCs)胞间连接的调控作用及相关生物学影响.方法:通过免疫荧光实验分别观察Par3在大鼠牙髓组织及小鼠成牙本质细胞中的表达及分布;利用We...     

Vps4b基因敲除鼠上皮根鞘中细胞角蛋白14和增殖细胞核抗原的表达

研究Vps4b基因突变对上皮根鞘（HERS）中细胞角蛋白14（CK14）和增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。     

B类Ⅱ型清道夫受体在牙龈卟啉单胞菌影响泡沫细胞形成中的作用

目的:观察牙龈卟啉单胞菌(P.g)诱导泡沫细胞形成过程中B类Ⅱ型清道夫受体(SR-BⅡ)的表达变化,并初步探讨其相关的作用机制.方法:用P.g和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)共同刺激小鼠腹腔巨噬细胞,观察泡沫细胞的形成.采用Western blot和RT-PCR法检测泡沫细胞形成过程中SR-BⅡ表达含量的变化.用siRNA沉默SR-BⅡ的表达后检测泡沫细胞的形成情况.结果:P.g以及ox-LDL刺激小鼠腹腔巨噬细胞后,油红O染色观察到泡沫细胞的形成明显增多.在泡沫细胞形成过程中,P.g可以诱导SR-BⅡ表达增加,采用siRNA干扰SR-BⅡ表达后,P.g对泡沫细胞形成的促进作用减弱.结论:P.g可以促进SR-BⅡ的表达,调控SR-BⅡ表达可以改变泡沫细胞的形成.     

Evidence of the validity of a model of determinants of quality of restorative dental care

A model describing the relationship between self-reported quality of restorative dentistry and dentist characteristics for 119 Montana general dentists is presented. The best predictors formed a significant model explaining 22% of the variance of the quality measure. Results are contrasted with a previous estimation of the model for 102 Washington general practitioners. Evidence for the external validity of the model is presented.     

口底癌34例临床分析

目的探讨口底癌的临床特性、治疗方法及预后。方法对我院自1992—2002年住院治疗的34例口底癌患者进行回顾性分析。结果34例口底癌患者中,男28例(82.4%),女6例(17.6%),男女比为4.7∶1,平均发病年龄58岁。发病部位:前口底22例(64.7%),后口底12例(35.3%)。淋巴结转移率41.2%。单纯手术组、化疗加手术组、放疗加手术组、化疗加手术加放疗组的5年生存率分别为45.5%、60.0%、50.0%、62.5%。结论口底癌以中老年患者好发,男性居多。易发生淋巴结转移,综合疗法疗效较好。     

平阳霉素对血管内皮细胞急性损伤后酶活性变化的实验研究

目的：探讨平阳霉素损伤血管内皮细胞的机制,为临床应用提供组织学依据。方法：选用成年Wistar大白鼠42只（其中6只为正常对照）,经肠系膜静脉分别注入平骒霉素（24只）或鱼肝油酸钠（12只）后,分别于注药后0．5,1,2,4,8,24h,切取肝脏组织,通过酶组化染色法测定肝窦内皮细胞的5’－核苷酸酶,肝细胞的琥珀酸脱氢酶（SDH）及乳酸脱氢酶（LDH）活性,结果：注入药液后,肝窦内皮细胞的5’－核苷酸酶,肝细胞的SDH和LDH活性随时间逐渐下降,其中平阳霉素组下降较轻微,结论：平阳霉素和鱼肝油酸钠都可对血管内皮细胞产生损伤,损伤的性质一样,均为非特异性,但平阳霉素损伤程度轻微,而鱼肝油酸钠严重。     

Results of treatment of cancer of the lip

A study was carried out in Sancti Spiritus Province in the 1984-1986 period about the results of the treatment of lip cancer. Male patients were the most affected by lip cancer (CIE 8-140) in our series. The place of the tumor was predominantly the lower lip (p less than or equal to 0.001). Surgical treatment was used in 96.8% of the cases and the cuneiform (wedge-shaped) exeresis was the most commonly used method in the early stages of the disease (T1 y T2). Casta?ón keloplasty was the reconstructive procedure used in 18.7% of the patients. Local sepsis was present in 31.2% of the patients undergoing surgery, occurring most frequently in upper lip tumors.     

不同剂型玻璃离子水门汀溶解性比较研究

目的:研究、比较不同剂型玻璃离子水门汀的溶解性和表面微观形态改变,为临床使用提供依据.方法:将3M树脂加强型玻璃离子水门汀(水粉剂型)、GC玻璃离子水门汀(水粉剂型)及GC玻璃离子水门汀(双糊剂型)分别在人工唾液中浸泡30 d,冷热循环15000次,烘干测重,比较前后质量变化,计算溶解率,并用扫描电镜观察表面微观改变.结果:不同剂型的玻璃离子水门汀溶解率由高到低分别为3M树脂加强型玻璃离子水门汀(水粉剂型)、GC玻璃离子水门汀(水粉剂型)、GC玻璃离子水门汀(双糊剂型).3种玻璃离子水门汀经浸泡溶解后,SEM扫描表面微观形态可观察到GE玻璃离子水门汀(双糊剂型)表面形态改变较少,其他2组玻璃离子水门汀表面微观改变较多.结论:双糊剂型玻璃离子水门汀理化性能及溶解率均低于传统水粉剂型,是未来临床修复治疗的的良好选择.