改良简化的酸化血清溶血试验及其应用

目的　考察简化酸化血清溶血试验 (Ham试验 )用于筛查阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)的效果。方法　对 2 0例正常人、16例PNH患者及 4 2例其它贫血患者进行用自身血清或AB血清或同型血清或混合血清的Ham试验 ,及蔗糖溶血 (糖水试验 )尿含铁血黄素检查 (Rous试验 )。结果　对已知PNH患者进行自身血清、AB血清、同型血清、混合血清的Ham试验检验 ,前三种血清阳性率均为 94 % ;而混合血清为 4 4 %。糖水试验、Rous试验阳性率分别为94 %、81%。结论　在PNH患者筛选中 ,Ham试验可以用自身血清替代AB血清或与患者同型的他人血清 ,而不用混合血清 ;Ham试验、糖水试验和Rous结果一致更有利于PNH的诊断。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者血细胞表面CD55和CD59的检测及临床意义

目的探讨红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)诊断中的应用。方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法检测25例PNH、20例再生障碍性贫血(AA)、20例健康对照者外周血红细胞和粒细胞膜CD55和CD59抗原的表达,并同时做酸化血清溶血试验(Ham试验)、蔗糖溶血试验和尿含铁血黄素试验(尿Rous试验)。结果与AA组和健康对照组相比,PNH患者外周血红细胞、粒细胞膜CD55、CD59表达缺失率均明显增高(P<0.05);而AA组和健康对照组缺失率均小于5%,且两者之间差异没有统计学意义(P>0.05)。25例PNH患者中,9例Ham试验阴性,6例蔗糖溶血试验阴性,7例尿Rous试验阴性,这些患者的红细胞、粒细胞的CD55、CD59表达缺失率均大于5%。结论利用流式细胞术同时检测患者红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原对PNH的诊断与鉴别诊断具有重要价值。     

对尿中含铁血黄素试验阳性检出率偏低分析

当临床上考虑某病人贫血是否由于血管内溶血造成,分析其贫血原因的同时大都会做尿含铁血黄素测定以助诊断,其检测结果往往都是阴性,甚至典型病人也难以检出.我科室自1991年至1999年共进行此项试验约70多次,仅检出一例阳性标本,其阳性检出率仅为1.4%.     

81例阵发性睡眠性血红蛋白尿症实验室资料分析

目的评价阵发性睡眠性血红蛋白尿症的实验室特点。方法对1997年7月~2003年7月我院PNH病例进行回顾性分析。结果81例PNH患者中,常用的酸化血清溶血(H am's)试验阳性率97.4%,蛇毒因子溶血(COF)试验阳性率为85.1%,蔗糖溶血试验阳性率为100%,微量补体溶血敏感试验(M CLST)阳性率为94.6%。结论多种溶血试验联合应用有助于PNH的诊断。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿的诊断及疗效标准

鉴于阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)的临床表现、血液学改变、病情轻重的多样性,以及实验室检查在诊断中的作用,考虑如下。 甲、诊断条件 一、临床表现符合PNH。 二、实验室检查:酸化血清(Ham)试验 糖水试验 蛇毒因子溶血试验 尿潜血(或尿含铁血黄素) 符合下述任何一种,即可诊断: 1.二项以上阳性; 2.一项阳性,但须(1)二次以上阳性,或—次阳性,但即时重复,操作正规,有阴性对照,结果可靠。(2)有溶血的其他直接或间接证据,或有肯定的血红蛋白尿发作。(3)能除外其他溶血,特别是HS、AIHA、G6PD缺乏,冷性血红蛋白尿等。     

两种放散试验联合检测对新生儿ABO溶血病诊断的意义

目的探讨热放散和酸放散两种方法联合检测对新生儿ABO溶血病的诊断意义,为临床提供诊断依据。方法选择2017年4月至2018年8月该院住院的487例母婴血型不合且伴有高胆红素血症患儿作为研究对象,对487例患儿的血标本均进行新生儿ABO溶血病3项试验(直接抗人球蛋白试验、游离抗体试验和红细胞抗体释放试验),其中红细胞抗体释放试验同时采用热放散试验和酸放散试验检测。比较单一放散试验与两种放散试验联合检测新生儿ABO溶血病的结果。结果 487例疑似母婴血型不合且伴有高胆红素血症表现的新生儿中,确诊新生儿ABO溶血病有135例,阳性检出率为27.7%(135/487);其中热放散试验和酸放散试验均为阳性100例,阳性检出率为20.5%(100/487);热放散试验阳性而酸放散试验阴性6例,阳性检出率为1.2%(6/487);热放散试验阴性而酸放散试验阳性27例,阳性检出率为5.6%(27/487);直接抗人球蛋白试验+红细胞抗体释放试验阳性2例,阳性检出率为0.4%(2/487)。单一放散试验与两种放散试验联合检测新生儿ABO溶血病的阳性检出率比较,差异有统计学意义(P0.001),联合检测阳性检出率显著提高。结论热放散试验和酸放散试验两种方法联合检测可提高新生儿ABO溶血病阳性检出率,降低单一放散试验漏检的风险。     

酸与热2种放散方法联合检测新生儿ABO溶血病的临床价值

目的探讨酸放散和热两种放散方法联合检测新生儿ABO溶血病,为临床提供诊断依据。方法疑似新生儿ABO溶血病患儿890例进行溶血三项检测,其中释放试验应用酸放散和热放散两种方法联合检测。结果 722例释放试验阳性的血液标本中,酸放散和热放散均为阳性610例,符合率为84.49%;酸放散阴性而热放散阳性71例,占9.83%;酸放散阳性而热放散阴性41例,占5.68%。结论两种放散方法联合检测比单一的酸放散或热放散检测新生儿ABO溶血病阳性检出率更高。     

对尿中含铁血黄素试验阳性检出率偏低分析

当临床上考虑某病人贫血是否由于血管内溶血造成，分析其贫血原因的同时大都会做尿含铁血黄素测定以助诊断，其检测结果往往都是阴性，甚至典型病人也难以检出。我科室自１９９１年至１９９９年共进行此项试验约７０多次，仅检出一例阳性标本，其阳性检出率仅为１．４％。个人就此问题，进行了分析，认为既有主观原因，也有客观原因，原与同行们切磋。首先个人认为，医生泛开检验单，凡贫血病人都做，缺乏针对性，会给检验人员一种错觉，反正都是阴性，于是，操作起来敷衍了事，没有严格地按操作要求去做，这是造成阳性检出率低的原因之一。…     

嗜水气单胞菌毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症

本研究建立嗜水气单胞菌（HEC）毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）。方法为取正常人，贫血病人和PNH病人（各10例）外周血标本，用HEC毒素处理外周血红细胞并630nm测定吸光度，以定量溶血程度，所测结果与流式细胞术检测CD59^-细胞进行验证。结果表明，PNH病人的红细胞对HEC毒素溶血试验有抗性，而正常人和非PNH病人的红细胞几乎全部溶解，结论：HEC毒素溶血试验比色法对PNH是一种简便，快速，特异而又可靠的诊断方法。     

血细胞减少患者衰变加速因子和膜反应性溶血抑制物表达缺失检测的临床意义

目的检测血细胞减少患者外周血红细胞和中性粒细胞细胞膜糖基磷脂酰肌醇(GPI)连接的补体调节蛋白衰变加速因子(CD55)和膜反应性溶血抑制物(CD59)表达情况,并探讨其临床意义。方法 2006年7月-2011年3月,采用直接免疫荧光标记法流式细胞仪检测182例血细胞减少患者外周血CD55及CD59表达情况,其中阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)9例,再生障碍性贫血(AA)-PNH综合征8例,AA 83例,骨髓增生异常综合征51例,自身免疫性溶血性贫血11例,造血功能停滞6例,缺铁性贫血7例,巨幼细胞性贫血4例,脾功能亢进3例。结果 PNH及AA-PNH患者CD55、CD59抗原缺失率均较其他血细胞减少者明显增高。结论流式细胞仪检测外周血中红细胞和中性粒细胞膜CD55和CD59抗原表达缺失率是目前诊断PNH可靠和敏感的方法,也是对PNH、AA-PNH早期诊断敏感指标,并且PNH克隆检测还能为诊断疾病提供鉴别诊断依据。     

自身胎肝细胞治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿症一例

患者,女,26岁,住院号75964。1983年5月开始面黄,乏力,继则活动后心悸,头晕,求医诊断为“缺铁性贫血”,但治疗无效,以贫血待查住院.检查:贫血貌,周身皮肤、粘膜苍白.妇科检查:宫底脐下三指,宫体大小与闭经月份相符,妊娠约4个月.外周血化验:Hb 7.0g,BPC 8.4万,RBC 210万,WBC 4,000,RE1.0%。骨髓增生明显活跃,红系占63%,非造血细胞1%.住院后,间断地排血红蛋白尿(酱油色),尿蛋白++,尿潜血试验强阳性,查尿含铁血黄素(Rou(?)S 试验)及三项溶血试验,Ham(?)S,Glucosc 试验为阳性,Coob(?)S 试验为阴性,确诊为阵发性睡眠性血红蛋     

七例以难治性缺铁性贫血为首发表现的阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者临床特征分析

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种血管内溶血性疾病,以贫血及血红蛋白尿为主要临床表现.长期慢性血管内溶血,血红蛋白和(或)含铁血黄素随尿液排出,将引发缺铁性贫血(IDA).部分PNH所致IDA患者由于PNH病情隐匿,缺铁原因持续存在,补铁治疗多不易奏效,甚至由于补铁而加重PNH病情[1-2].我们分析7例以难治性IDA为首发表现的PNH患者临床资料,现报告如下.     

CD55、CD59检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症标准方法建立

目的建立流式细胞术(FCM)检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症(Paroxysmal nocturnal hemoglobinuriaP,NH)的标准方法。方法应用FCM对49例PNH病人,18例自身免疫性溶血性贫血(AIHA),10例缺铁性贫血(IDA),正常对照40例;采用活细胞直接免疫荧光标记法检测红细胞和粒细胞膜表面的CD55和CD59的表达。结果49例PNH病人除2例红细胞CD55-、CD59-的百分率小于5%,其余病例红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的百分率均大于5%(5.9%￣79.1%)。18例AIHA病人红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的百分率均小于5%。10例IDA病人有8例红细胞CD55-、CD59-的百分率均大于5%(5.0%￣9.1%),而粒细胞CD55-、CD59-的百分率均小于5%。40例正常对照红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的百分率均小于5%。49例PNH病人蛇毒因子试验5例阴性;糖水试验4例阴性、酸溶血试验5例阴性。而这其中仅2例病人蛇毒因子试验、糖水试验、溶血试验同时阴性。其余病人蛇毒因子试验、糖水试验、酸溶血试验均阳性。结论同时检测红细胞和粒细胞膜的CD55和CD59诊断PNH,该方法的灵敏度与特异性均高达100%。因此,针对国内其他单位在开展此项目时仅检测CD55或CD59,或者只检测红细胞或白细胞的CD55、CD59的情况,作者认为同时检测红细胞和粒细胞膜的CD55和CD59诊断PNH是值得在临床推广的标准方法。     

骨髓涂片与切片同步检查诊断再障和MDS的价值

为了提高再生障碍性贫血 (ＡＡ)的确诊率 ,作者对4 7例临床疑似ＡＡ患者的骨髓涂片与切片作了同步检查 ,其结果对比如下。1　临床资料1.1　一般资料　 4 7例患者均为本院住院初诊病人 ,男 2 6例 ,女 2 1例 ,年龄 14～ 75岁 (中位年龄 31岁 )。诊前平均病程 78个月 ( 2个月至 15年 )。临床以贫血感染、出血以及全血细胞或一系、二系血细胞减少等表现而就诊。 4 7例患者的酸溶血试验 (ｈａｍ试验 )、糖水试验及尿含铁血黄素试验 (Ｒｏｕｓ试验 )均为阴性。1.2　取材方法　取髂前或髂后上棘 ,在同期同部位以骨髓活检针一步法抽吸取材。活检的骨…     

宁夏回族地区2015年ABO/Rh新生儿溶血病检测结果分析

目的 了解2015年宁夏回族自治区ABO/Rh新生儿溶血病的发病情况.方法 对2015年银川市及周边地区医院送检的1 456例母婴血型不合新生儿溶血病血液样本采用微柱凝胶技术进行直接抗人球蛋白试验、血清抗体游离试验、抗体放散试验以及抗体鉴定试验检测分析.结果 1 456例样本中按照ABO新生儿溶血病送检有1 386例,按照Rh溶血病送检有70例.ABO新生儿溶血病样本中检出阳性838例,占60.5%,其中三项试验均阳性56例,占6.7%;游离试验阴性,直接抗人球蛋白试验和放散试验均阳性72例,占8.6%;直接抗人球蛋白试验阴性,游离试验和放散试验均阳性405例,占48.3%;直接抗人球蛋白试验和游离试验均阴性,放散试验阳性305例,占36.4%.Rh溶血病样本中检出阳性23例,占32.9%.其中患儿母亲大于1次妊娠或有输血史的36例样本中,不能证实为Rh溶血病的有13例,占 36.1%.结论 2015年该地区新生儿溶血病以ABO血型不合占多数有1 386例,阳性率60.5%;Rh血型不合有70例,阳性率32.9%;未见其他血型系统引起的溶血病如MNs、Kell等.母婴血型不合新生儿溶血病是一种免疫性溶血性疾病,临床在确定母婴血型不相合后应该及时送检,及早证实是否是新生儿溶血病,达到早发现早治疗的目的.     

低分子量肝素和地塞米松对PNH患者红细胞体外抑制溶血作用的研究

目的 研究低分子量肝素和地塞米松对阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者红细胞体外溶血的作用。方法 采集6例典型溶血发作的PNH患者外周血，采用Ham试验、微量补体溶血敏感试验（mCLST)检测单独或联合加入不同剂量的低分子量肝素和地塞米松后对溶血的影响；同时检测各种不同剂量的药物对活化部分凝血活酶时间（APTT）的影响。结果 （1）低分子量肝素、地塞米松体外对PNH患者的红细胞均有抑制溶血的作用，此种作用随剂量的增大而增大。当同时加入上述两种治疗量的药物时，对溶血的抑制作用明显加强。同时，在此种剂量下APTT的延长未超过2倍。（2）Ham试验检测时地塞米松有抑制溶血的作用，mCLST检测时地塞米松随加入方法的不同对溶血的作用不同。低分子量肝素在Ham和mCLST试验中均可发挥抑制溶血的作用。结论 低分子量肝素、地塞米松均有抑制PNH患者红细胞溶血的作用，其作用机制存在差异；二者具有协同作用，治疗剂量对出凝血的影响较小，在PNH患者红细胞溶血发作的治疗中有应用前景。     

33例获得性免疫性溶血性贫血的实验室结果分析

目的探讨实验室检测结果分析对获得性免疫性溶血性贫血诊断价值。方法33例获得性溶血性贫血,应用常规的实验方法。结果24例温抗体型自身免疫性溶贫(WAIHA),直接抗人球蛋白试验(Coombs试验)阳性。3例阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH),酸化血清溶血试验(Hams试验)阳性。1例冷凝集素综合征(CAS),冷凝集素滴度明显增高。结论应用最常规实验方法来诊断鉴别获得性免疫性溶血性贫血,是非常重要的,其特点快速,简便,成本低,便于实验室推广应用。     

低剂量联合化疗治疗复发难治的再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿综合征的疗效

目的:评价低剂量MP方案与HA方案治疗复发难治的再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿(AAPNH)综合征患者的治疗效果,探讨低剂量联合化疗在治疗AA-PNH综合征方面的优势。方法:回顾分析9例复发难治的AA-PNH综合征患者临床特征及采用低剂量联合化疗的疗效,其中5例予MP方案(马法兰2 MG/(M~2·D),泼尼松0. 5 MG/(KG·D),口服,D 1-7),4例予HA方案(高三尖杉酯碱2 MG/D,阿糖胞苷100 MG/D,静滴,D 1-5),比较不同患者治疗前后PNH克隆、激素用量及溶血指标的变化,同时比较疾病复发、输血依赖及不良反应等情况。每名患者均行1-2个疗程化疗。结果:9例患者中7例患者治疗有效,其激素用量较化疗前明显减少,胆红素水平显著低于化疗前,化疗后贫血有所缓解(P 0. 05)。7例有效患者中1年内复发1例,且有效者中3例PNH克隆负荷转阴,5例患者1年内均未再输血,所有病人均未发生严重骨髓抑制。结论:低剂量联合化疗方案对AA-PNH患者具有较好的疗效和安全性,且患者对其耐受性较好,可作为复发难治的AA-PNH综合征的治疗选择。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症转为急性白血病一例

患者,女,33岁.以阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)12年,乏力加重5个月余、发热1月余人院.患者于12年前因乏力、面色苍白、阵发性酱油色尿在当地医院就诊发现"贫血",血红蛋白60 g/L,溶血试验检查:酸溶血试验(+)、糖水溶血试验(++)、蛇毒因子溶血试验阳性率26%(正常＜5%).骨髓象:以红系增生为主,部分红细胞呈大小不均之双象性改变,粒系和巨核系未见明显形态异常,诊断为PNH,经叶酸、泼尼松治疗数周后好转停药.     

同卵挛生骨髓细胞治愈一例PNH骨髓衰竭

输外周血多能干细胞可治愈小鼠、狗的再生障碍性贫血。白细胞分离技术的改进已可能收集大量人外周血白细胞,因之用外周血白细胞治疗人的骨髓衰竭已有考虑的可能。PNH为一种多能干细胞疾病偶尔可引起骨髓衰竭。本文报告一例。24岁女性,因乏力、短气、全血细胞减少入院。查酸溶血试验(+)、糖水试验(+)、尿含铁血黄素试验(+)。曾有几次肉眼血红蛋白尿。骨髓增生不良。反复输血以维持血红蛋白8.0g/dll。在14天中给予同卵孪生妹外周血白细胞7.08×10~8个,相当于3.4×10~4CFU-C/kg受者体重,观察2个月未见效果。乃给予同一供体骨髓有核细胞1.28×10~(10)输入,相当于6.4×10~4CFU-C/kg体