化橘红对糖尿病心肌病心肌细胞TGF-β1/Smad信号通路的干预作用

目的 观察化橘红对糖尿病心肌病（DCM）大鼠心肌细胞TGF-β1/Smad信号通路的干预作用。 方法 （1）构建DCM大鼠模型,将40只大鼠用链脉佐菌素处理后,15只血糖浓度<16.7 mmol/L的大鼠纳入空白对照组,剩余的25只血糖浓度>16.7 mmol/L的大鼠随机分为DCM组（n=11）与化橘红组（n=14）。化橘红组大鼠给予化橘红400 mg/(kg·d)灌胃,DCM组和对照组给予等量生理盐水灌胃。测量各组大鼠不同时间点血糖（1、8、16、22周）;测量心功能相关指标;光镜下观察心肌形态学改变,电镜下心肌纤维化定量分析;测定心肌胶原总量;免疫组化测定心肌胶原;Western印迹检测心肌细胞TGF-β1、Smad、MMP-9、MMP-2、TIMP-1等蛋白含量;RT-PCR检测TGF-β1、MMP-9、MMP-2、TIMP-1等蛋白的mRNA表达。（2）构建心肌成纤维细胞增殖模型,随机分为两组,化橘红预处理组为血清培养基加0.5 mmol/L化橘红,而对照组为等量血清培养基。检测两组一氧化氮变化、TGF-β1蛋白、c-fos蛋白、p27蛋白,iNOS蛋白、Cyclin D蛋白表达情况。 结果 化橘红组的大鼠各时间点血糖、心肌纤维化、心肌胶原总量及各型胶原较DCM组显著下降,心收缩、舒张功能明显改善（P<0.05）,TGF-β1、Smad、MMP-9、MMP-2、TIMP-1蛋白的表达明显下调（P<0.05）,相关蛋白的mRNA表达也明显抑制（P<0.05）。化橘红预处理组一氧化氮、TGF-β1蛋白、c-fos蛋白、p27蛋白,iNOS蛋白、Cyclin D蛋白表达情况较对照组相比明显下降（P<0.05）。 结论 化橘红对DCM中TGF-β1/Smad通路起到了抑制作用,从而调控其下游的MMPs/TIMPs等通路,改善DCM的心肌纤维化进程,抑制心肌肥厚,减少心肌的损伤。       

心肌肥厚大鼠细胞外基质重塑中基质金属蛋白酶的作用及氯沙坦干预的效果

背景细胞外基质中的纤维性胶原过度沉积是心肌肥厚发展过程中的重要特征.基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及其生理性抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)是调节细胞外基质的重要酶类,转化生长因子β1(transforming growthfactor-β, TGF-β1)能促进组织纤维化.目的探讨MMP-9及其生理性抑制剂TIMP-1和TGF-β1在心肌肥厚大鼠细胞外基质重塑中的作用及氯沙坦干预的效果.设计随机对照实验研究.地点、材料和干预南京医科大学动物实验中心雄性SD大鼠随机用随机数字表法分为3组对照组、去甲肾上腺素组[1.06 mg/(kg·d)×15 d]、去甲肾上腺素+氯沙坦组[10 mg/(kg.d)×15 d].去甲肾上腺素腹腔注射,2次/d,连续15d,建立心肌肥厚的模型.氯沙坦灌胃给药.主要观察指标腹腔注射生理盐水、去甲肾上腺素、氯沙坦灌胃给药大鼠超声心动图检查,病理检查,心肌胶原蛋白表达,MMP-9,TIMP-1和TGF-β1mRNA和蛋白表达情况的对比结果.结果大鼠腹腔注射去甲肾上腺素后发生左心室肥厚及纤维化,胶原的含量及MMP-9(82.9±18.3),TIMP-1(43.8±7.3)和TGF-β1(49.4±7.9),mRNA的表达显著高于健康对照组.氯沙坦能降低室间隔的厚度,减少左室心肌中总体胶原、Ⅰ型、Ⅲ型胶原的合成及MMP-9,TGF-β1的表达.结论MMP-9,TIMP-1和TGF-β1与去甲肾上腺素诱导的心肌细胞外基质重塑有关.氯沙坦能有效的防治心肌肥厚及细胞外基质重塑,这一效应与其降低心肌中高表达的MMP-9和TGF-β1有关.     

普伐他汀对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质积聚的影响

摘要 目的：探讨普伐他汀对高糖培养的肾小球系膜细胞(MC)增殖和细胞外基质（ECM）积聚的影响。方法：大鼠MC分别培养在低糖组, 高糖组及普伐他汀组。CCK-8测定MC增殖，ELISA法检测细胞培养上清液Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 (TIMP-1)的分泌情况；明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的活性，RT-PCR 法检测结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达。结果：与低糖组相比，高糖能促进Col-Ⅳ、FN合成，抑制MMP-2 、MMP-9活性，增加TIMP-1、TGF-β1、CTGF的分泌，而普伐他汀能一定程度上逆转上述现象。结论：普伐他汀能抑制高糖环境下的MC增殖，并通过抑制 ECM 的合成、促进ECM的降解减少ECM积聚，机制可能与抑制TGF-β1、CTGF有关。     

中等强度有氧运动对去卵巢大鼠心肌纤维化的影响

目的 观察中等强度有氧运动对去卵巢大鼠心肌纤维化以及心功能的影响,并探讨其可能作用机制。 方法 采用随机数字表法将30只雌性SD大鼠分为假手术组（简称对照组）、去卵巢组及去卵巢运动组（简称运动组）。对照组大鼠仅切除双侧卵巢附近脂肪组织,去卵巢组及运动组大鼠均行双侧卵巢切除术。制模后对照组及去卵巢组大鼠置于笼内安静饲养,运动组大鼠则进行10周中等强度跑台运动（跑台速度为16~24 m/min）。于末次运动结束后48 h采用超声心动术检测各组大鼠心脏结构及功能,采用Masson染色进行心肌组织病理学观察并获取心肌胶原容积分数（CVF）,采用比色法检测心肌I型胶原（Col-I）和III型胶原（Col-III）含量,采用Western blot法检测心肌基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和组织金属蛋白酶抑制物-2（TIMP-2）蛋白表达量。 结果 与对照组比较,去卵巢组大鼠心肌CVF、Col-I和Col-III含量均明显升高（P<0.05）,左心室射血分数（LVEF）、64 kDa MMP-2和TIMP-2蛋白表达量以及64 kDa MMP-2/TIMP-2比值均明显降低（P<0.05）;与去卵巢组比较,运动组大鼠心肌CVF、Col-I和Col-III含量均明显降低（P<0.05）,LVEF、64 kDa MMP-2和TIMP-2蛋白表达量以及64 kDa MMP-2/TIMP-2比值均明显升高（P<0.05）;3组大鼠72 kDa MMP-2蛋白表达量组间差异均无统计学意义（P>0.05）。 结论 中等强度有氧运动能改善去卵巢大鼠心肌纤维化并提高心功能,其治疗机制可能与维持MMP-2/TIMP-2系统稳态平衡有关。     

TGF-β1对hUC-MSC增殖、细胞外基质表达和基因表达的影响

本研究探索转化生长因子-β1(TGF-β1)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)增殖、细胞外基质(ECM)表达和基因表达的影响。采用植块法从人脐带中分离、培养hUC-MSC并进行表型鉴定,用WST法检测不同浓度的TGF-β1对hUC-MSC增殖的影响,利用qRT-PCR和免疫组织化学方法检测不同浓度的TGF-β1对hUC-MSC细胞外基质表达的影响,利用表达基因芯片技术检测hUC-MSC在TGF-β1作用下基因表达谱的变化。结果表明,细胞增殖实验中0.1-20.0 ng/ml TGF-β1浓度条件下培养24、48和72小时,hUC-MSC增殖能力变化均不显著,但在0.1 ng/ml组均会出现相对峰值。0.5 ng/ml的TGF-β1促进Col-Ⅰ、MMP-2、MMP-9和TIMP-2的mRNA表达达到峰值;而0.1 ng/ml的TGF-β1促进其它成分:Col-Ⅳ、FN、LN、Integrin、Tenascin-C、MMP-1和TIMP-1的mRNA表达达到峰值。0.5和0.1 ng/ml的TGF-β1分别促进Col-Ⅰ和Col-Ⅳ少量表达,均促进FN强烈表达,但均不能使LN明显表达。基因芯片结果显示,在上调基因中有9个基因与细胞运动、迁移相关;Pathway和Go的统计分析显示,差异基因涉及转录、翻译、生物合成、代谢、信号转导、细胞迁移、细胞间连接等多方面。结论:0.1 ng/ml的TGF-β1能较好地促进hUC-MSC的生长。不同浓度的TGF-β1能分别促进ECM不同成分表达,TGF-β1对hUC-MSC的转录、翻译、生物合成、代谢、信号转导、细胞迁移、细胞间连接等多方面在基因水平上具有调节作用。     

普伐他汀对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质积聚的影响

目的:探讨普伐他汀对高糖培养的肾小球系膜细胞(MC)增殖和细胞外基质(ECM)积聚的影响。方法:大鼠MC分别培养在低糖组、高糖组及普伐他汀组。CCK-8测定MC增殖,ELISA法检测细胞培养上清液Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的分泌情况,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性,RT-PCR法检测结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达。结果:与低糖组相比,高糖能促进Col-Ⅳ、FN合成,抑制MMP-2、MMP-9活性,增加TIMP-1、TGF-β1、CTGF的分泌,而普伐他汀能一定程度上逆转上述现象。结论:普伐他汀能抑制高糖环境下的MC增殖,并通过抑制ECM的合成、促进ECM的降解减少ECM积聚,机制可能与抑制TGF-β1、CTGF有关。     

心肌肥厚大鼠细胞外基质重塑中基质金属蛋白酶的作用及氯沙坦干预的效果

背景：细胞外基质中的纤维性胶原过度沉积是心肌肥厚发展过程中的重要特征。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)及其生理性抑制剂(tissue inhibitor of meralloproteinases,TIMPs)是调节细胞外基质的重要酶类，转化生长因子β1(transforming growth factor-β1)能促进组织纤维化。目的：探讨MMP-9及其生理性抑制剂TIMP-l和TGF-β1在心肌肥厚大鼠细胞外基质重塑中的作用及氯沙坦干预的效果。设计：随机对照实验研究。地点、材料和干预：南京医科大学动物实验中心雄性SD大鼠随机用随机数字表法分为3组：对照组、去甲肾上腺素组[1．06mg／(kg&;#183;d)&;#215;15d]、去甲肾上腺素+氯沙坦组[10mg／(kg．d)&;#215;15d]。去甲肾上腺素腹腔注射，2次／d。连续15d，建立心肌肥厚的模型。氯沙坦灌胃给药。主要观察指标：腹腔注射生理盐水、去甲肾上腺素、氯沙坦灌胃给药大鼠超声心动图检查，病理检查，心肌胶原蛋白表达，MMP-9，TIMP-1和TGF-β1mRNA和蛋白表达情况的对比结果。结果：大鼠腹腔注射去甲肾上腺素后发生左心室肥厚及纤维化，胶原的含量及MMP-9(82．9&;#177;18．3)，TIMP-1(43．8&;#177;7．3)和TGF-β1(49．4&;#177;7．9)，mRNA的表达显著高于健康对照组。氯沙坦能降低室间隔的厚度，减少左室心肌中总体胶原、I型、Ⅲ型胶原的合成及MMP-9，TGF-β1的表达。结论：MMP-9，TIMP-1和TGF-β1与去甲肾上腺素诱导的心肌细胞外基质重塑有关。氯沙坦能有效的防治心肌肥厚及细胞外基质重塑，这一效应与其降低心肌中高表达的MMP-9和TGF-β1有关。     

转化生长因子β1和基质金属蛋白酶在心室重构中的作用及卡维地洛的干预效果

目的：探讨转化生长因子β1（TGF-β1）和基质金属蛋白酶（MMPs）在兔心肌梗死（MI）后心室重构中的作用及卡维地洛的治疗效果。方法：采用结扎兔冠状动脉左室支建立MI模型，术后24h存活的兔随机分为MI组（8只）、MI＋卡维地洛组（9只），另以开胸后在相应部位挂线不结扎为假手术组（10只）。4周后行血流动力学检查，测量体重及左、右心室重量，苦味酸-酸性品红染色（VG）检测非梗死区的胶原容积分数（CVF），免疫组化检测TGF-β1的表达，酶谱法测定MMPs的活性。结果：MI后4周存活动物为假手术组10只，MI组8只，MI＋卡维地洛组9只。MI组较假手术组左、右心室重量／体重比值（LVW、RVW／BW）、左室舒张末压（LVEDP）、非梗死区CVF均显著升高，非梗死区TGF-β1的表达及MMPs的活性亦增强（均P〈0．01）；MI＋卡维地洛组与MI组比较，RVW／BW、LVEDP、CVF显著降低（P〈0．05-0．01），TGF-β1表达和MMPs的活性明显减弱（P〈0．01）。结论：TGF-β1、MMPs可能与MI后心室重构有关，卡雏地洛能缓解MI后非梗死区的重构，其机制可能与减低TGF-β1的表达和MMPs的活性有关。     

转化生长因子β1和基质金属蛋白酶在心室重构中的作用及卡维地洛的干预效果

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和基质金属蛋白酶(MMPs)在兔心肌梗死(MI)后心室重构中的作用及卡维地洛的治疗效果.方法采用结扎兔冠状动脉左室支建立MI模型,术后24h存活的兔随机分为MI组(8只)、MI+卡维地洛组(9只),另以开胸后在相应部位挂线不结扎为假手术组(10只).4周后行血流动力学检查,测量体重及左、右心室重量,苦味酸-酸性品红染色(VG)检测非梗死区的胶原容积分数(CVF),免疫组化检测TGF-β1的表达,酶谱法测定MMPs的活性.结果MI后4周存活动物为假手术组10只,MI组8只,MI+卡维地洛组9只.MI组较假手术组左、右心室重量/体重比值(LVW、RVW/BW)、左室舒张末压(LVEDP)、非梗死区CVF均显著升高,非梗死区TGF-β1的表达及MMPs的活性亦增强(均P＜0.01);MI+卡维地洛组与MI组比较,RVW/BW、LVEDP、CVF显著降低(P＜0.05～0.01),TGF-β1表达和MMPs的活性明显减弱(P＜0.01).结论TGF-β1、MMPs可能与MI后心室重构有关,卡维地洛能缓解MI后非梗死区的重构,其机制可能与减低TGF-β1的表达和MMPs的活性有关.     

醛固酮与转化生长因子-β1在心肌纤维化中的作用机制

目的探讨醛固酮与转化生长因子-β1（TGF-β1）在心肌纤维化的作用机制。方法将体外培养的心肌成纤维细胞（CFs）分为对照组、醛固酮组、醛固酮＋依普利酮组、依普利酮组及SB431542预处理组。给予相应处理后,ELISA检测TGF-β1水平,RT-PCR检测Smad2、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达。结果与对照组比较,醛固酮处理后,能显著促进TGF-β1分泌,促进Smad2、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达（P〈0.01）;与醛固酮组比较,醛固酮＋依普利酮组TGF-β1分泌、Smad2、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达均明显下降（P〈0.01）;与醛固酮组比较,SB43l542预处理组抑制Smad2、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的差异有统计学意义（P〈0.01）。结论醛固酮通过激活MR促进CFs细胞TGF-β1分泌,激活Smad2,使Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达增加,诱导心肌纤维化。     

MMP-1、TIMP-1在先天性心脏病室间隔缺损并发肺动脉高压患者肺组织中的表达

目的:探讨基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制因子-1(TIMP-1)在先天性心脏病室间隔缺损(CHD-VSD)并发肺动脉高压(PH)发病机制中的可能作用。方法:选择29例CHD-VSD病例,按照Heath-EdwardsPH分级法分组(PH0、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组),采用免疫组化和RT-PCR法分别测定肺组织MMP-1、TIMP-1蛋白及mRNA的表达。结果:MMP-1蛋白和mRNA PHⅠ、Ⅱ、Ⅲ组明显高于PH0组,PHⅢ组明显高于PHⅠ、Ⅱ组(P<0.05或P<0.01);TIMP-1蛋白和mRNA PHⅡ、Ⅲ组高于PH0组(P<0.05或P<0.01);TIMP-1/MMP-1PHⅠ、Ⅱ、Ⅲ组均明显高于PH0组(均P<0.05);MMP-1与TIMP-1蛋白明显正相关(r=0.572,P<0.01),MMP-1mRNA与TIMP-1mRNA明显正相关(r=0.892,P<0.01),MMP-1、TIMP-1、MMP-1mRNA、TIMP-1mRNA、TIMP-1/MMP-1与Heath-Edwards病理分级明显正相关(r=0.835,P<0.01;r=0.562,P<0.01;r=0.872,P<0.01;r=0.843,P<0.01;r=0.424,P<0.05)。结论:MMP-1、TIMP-1表达增高和MMP-1、TIMP-1比例失衡与CHD-VSD并发PH的形成与发展有关,可能是PH患者肺血管重构的发病机制之一。     

苦参总生物碱对哮喘大鼠气道重建的防治作用

目的探讨苦参总生物碱对哮喘大鼠气道重建的防治作用及其潜在机制。方法随机将40只健康的雄性SD大鼠分为四组,每组10只,分别为:空白组、模型组、给药组(苦参总生物碱组)和阳性对照组(地塞米松组)。采用卵蛋白-氢氧化铝混悬液处理大鼠构建哮喘大鼠模型,空白组以生理盐水替代;给药组在激发后1 h灌胃10 mg/kg苦参总生物碱水溶液,1次/d,共灌胃28 d;地塞米松组在激发后1 h灌胃0. 5 mg/kg地塞米松溶液,1次/d,共灌胃28 d;空白组和模型组灌胃等量生理盐水。药物干预结束后处死大鼠。通过HE染色观察大鼠肺组织的形态变化,采用免疫组化法检测大鼠肺组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9),酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清中MMP-9、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量,用蛋白印记法检测大鼠肺组织中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1蛋白的表达。结果与空白组相比,模型组大鼠气道周围炎症细胞浸润并伴有平滑肌增生,血清和肺组织中的MMP-9、TIMP-1和TGF-β1水平显著上升(P 0. 05);与模型组相比,对大鼠灌胃苦参总生物碱后,支气管增生细胞和周围炎症细胞的浸润均减少,血清和肺组织中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的表达显著下调(P 0. 05),与地塞米松组具相同变化趋势。结论苦参总生物碱可以有效地改善哮喘大鼠气道的重建,其分子机制可能是下调MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的表达。     

白细胞介素-1β和基质蛋白酶-2、基质蛋白酶-9/基质蛋白抑制因子-1在左室重构中的动态表达及内在联系

目的研究白细胞介素-1β(IL-1β)和基质蛋白酶-2(MMP-2)、基质蛋白酶-9/基质蛋白抑制因子-1(MMP-9/TIMP-1)mRNA在左室重构中的动态表达,探讨其内在联系和作用机制。方法将98只SD大鼠,随机分为对照组(14只)和实验组(84只),实验组通过开胸结扎左冠状动脉前降支,制作大鼠心肌梗死模型,于结扎后6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、7 d、14 d分别处死12只取材。对照组只开胸不结扎冠状动脉,分别在实验组各个时间点处死2只。进行HE染色、IHC和原位杂交检测IL-1β、MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达情况,并分析其在左室重构中的关系及作用机制。结果①HE染色示:实验组建立成功,各个时间点的呈现不同的病理学变化,从炎细胞浸润到纤维母细胞增生及瘢痕形成;对照组未出现心肌梗死表现。②在免疫组化和原位杂交结果中,实验组和对照组具有一致性。实验组中IL-1β、MMP-2、MMP-9、TIMP-1表达与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。经过统计学分析显示,IL-1β与MMP-2、MMP-9呈正相关,并且IL-1β与MMP-9呈高度正相关,IL-1β与TIMP-1呈负相关。结论IL-1β、MMP-2、MMP-9和TIMP-1表达异常与左室重构具有高度的相关性且相互之间存在一定的内在联系。     

卡维地洛对肾性高血压大鼠左室重构影响的实验研究

目的:观察第三代β受体阻滞剂卡维地洛防治肾性高血压大鼠左室重构的作用。方法:建立两肾一夹(2K1c)大鼠肾血管性高血压左室重构模型。术后8周随机分成3组:(1)假手术组(n=8);(2)2K1c组(n=8);(3)卡维地洛组(n=8)。治疗组直接灌胃给药。12周后行血流动力学分析,应用病理学方法评价整体心肌肥厚和组织胶原的表达,免疫组化方法检测MMP-2、TIMP-2的表达情况。结果:与假手术组相比,2K1c组大鼠术后发生明显左心室肥厚和纤维化,收缩压(SBP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室重量(LVM)、左室重量指数(LVMI)、胶原的含量及MMP-2、TIMP-2的表达显著高于健康的对照组(P<0.01),左室最大收缩和舒张速率(±dp/dtmax)均显著降低。卡维地洛能降低SBP、LVSP、LVEDP、LVM,而±dp/dtmax均显著升高;减少左室心肌中总体胶原中的合成及MMP-2、TIMP-2表达。结论:MMP-2、TIMP-2与左心室肥厚细胞外基质有关,卡维地洛能改善血流动力学和左室功能,有效地防止肾性高血压大鼠左室重构。     

雷帕霉素在脓毒症致肺纤维化大鼠中应用研究

目的 探讨雷帕霉素在脓毒症致肺纤维化大鼠中的应用效果及其可能作用机制.方法 选取90只SD大鼠,采用随机数字表法将其分为对照组、脓毒症组与雷帕霉素组,每组各30只.对照组大鼠给予生理盐水腹腔注射;脓毒症组大鼠给予脂多糖(LPS)腹腔注射;雷帕霉素组大鼠给予LPS、雷帕霉素腹腔注射.采用Ashcrof评分评估大鼠肺纤维化程度;分光光度法测定大鼠肺组织羟脯氨酸(HYP)含量;应用免疫印迹法检测α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达;实时定量聚合酶链式反应检测大鼠肺组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)的表达.结果 实验第7、14、21、28、35天,脓毒症组、雷帕霉素组大鼠肺组织Ashcrof评分,HYP含量,α-SMA、TGF-β1表达水平,MMP-2、TIMP-1的mRNA表达水平均明显高于对照组;雷帕霉素组大鼠肺组织Ashcrof评分,HYP含量,α-SMA、TGF-β1表达水平,MMP-2、TIMP-1的mRNA表达水平均明显低于脓毒症组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 雷帕霉素可能通过降低TGF-β1、α-SMA、MMP-2及TIMP-1的表达,减轻脓毒症致肺纤维化的进展程度,从而发挥对肺损伤的保护作用.     

血清前胶原和基质金属蛋白酶抑制物与原发性高血压病靶器官损害

目的:探讨血清Ⅰ、Ⅲ型前胶原(PCⅠ、PCⅢ)和Ⅰ型组织基质金属蛋白酶抑制物(TIMP-1)与原发性高血压病靶器官损害(TOD)的关系。方法:对118例原发性高血压病(EH)合并TOD患者、46例单纯高血压及32例正常对照者,分别采用放免法和酶联免疫法测定PCⅠ、PCⅢ和TIMP-1,观察胶原代谢与原发性高血压合并TOD者的变化关系。结果:(1)EH合并TOD组PCⅠ、PCⅢ和TIMP-1水平显著高于单纯EH组和正常对照组(P<0.01)。单纯EH组PCⅢ及TIMP-1浓度明显高于正常对照组(P<0.01),PCⅠ与对照组无显著差异。(2)EH合并TOD组PCⅠ和TIMP-1水平与左室重量指数(LVMI)、颈动脉内膜中层厚度(IMT)正相关,与心舒张早/晚最大流速(VE/VA)负相关(均P<0.05)。结论:原发性高血压病靶器官损害者存在胶原合成及降解抑制增强,测定血清PCⅠ、PCⅢ和TIMP-1水平有助于了解靶器官损害的发生及发展。     

DMN肝纤维化模型肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原和TIMP-1 mRNA表达及复方861的干预作用

目的研究二甲基亚硝胺(DMN)肝纤维化模型Ⅰ型胶原(CoL-1)、Ⅲ型胶原(CoL-Ⅲ)和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1) mRNA表达以及复方861的干预作用.材料和方法采用1%DMN 1ml/kg腹腔注射模型组大鼠,复制DMN诱导的大鼠肝纤维化模型,同时复方861灌胃3g/kg,共8周,以RT-PCR法观察肝纤维化模型肝组织CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA表达水平.结果DMN大鼠肝纤维化模型组CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA分别为0.827±0.094、0.953±0.033及0.924±0.110,明显高于正常对照组(P＜0.01);复方861治疗组CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA为0.497±0.057、0.851±0.065和0.648±0.107,明显低于模型对照组(P＜0.01或P＜0.05).结论DMN肝纤维化模型肝组织CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA表达水平增高,复方861能够抑制肝组织CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA的表达,从而发挥其抗肝纤维化的作用.     

IgA肾病患者尿液转化生长因子β1和细胞外基质的检测及意义

目的探讨尿液中转化生长因子β1（TGF-β1）和细胞外基质（ECM）在IgA肾病患者中的变化及其意义。方法将126例IgA肾病患者根据24 h尿蛋白定量和肾小球滤过率（GFR）分为A组（尿蛋白〈0.5 g/24 h,GFR〉60 mL/min）、B组（尿蛋白0.5~1.0 g/24 h,GFR〉60 mL/min）、C组（尿蛋白1.0~3.0 g/24 h,GFR〉60mL/min）、D组（尿蛋白〉3.0 g/24 h,GFR〈60 mL/min或每年下降15%）;同时根据病理诊断分为Ⅰ型（轻微损害）、Ⅱ型（微小病变伴少量节段性区域的增殖）、Ⅲ型（局灶性节段性肾小球肾炎,少于50%的肾小球呈现显著变化）、Ⅳ型（弥漫性系膜损害伴有增殖和硬化）、Ⅴ型（弥漫硬化性肾小球肾炎,累及80%以上肾小球）。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测各组患者尿液TGF-β1,采用放射免疫分析法（RIA）检测尿液中的各种ECM,所有检测值均用尿肌酐（Cr）浓度进行校正。结果在不同临床分组中,尿TGF-β1/Cr水平明显高于对照组（P〈0.05）;除A组外,其他各组患者尿层黏连蛋白（LN）/Cr、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）/Cr、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）/Cr水平明显高于对照组（P〈0.05）,尿透明质酸（HA）/Cr水平明显下降。而在不同的病理分组中,尿TGF-β1/Cr水平高于对照组（P〈0.05）,尿LN/Cr、PCⅢ/Cr、Ⅳ-C/Cr、HA/Cr自Ⅲ型开始与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。相关性分析尿TGF-β1/Cr与LN/Cr、PCⅢ/Cr、Ⅳ-C/Cr呈正相关,与HA/Cr无相关性。结论通过尿TGF-β1和ECM在IgA肾病患者中的联合检测,为评价IgA肾病的临床进展和病理改变提供重要的临床依据。     

中药861合剂对脓毒症大鼠心肌纤维化的干预

目的观察脓毒症状态下大鼠心肌纤维化的改变及其与心脏功能的关系,并探讨中药861合剂对心肌纤维化的影响。方法采用经阴茎静脉注射脂多糖的方法制作大鼠脓毒症模型。50只雄性Wistar大鼠随机分为模型组(20只)、中药861合剂干预组(20只)及对照组(10只)。模型组和中药861合剂干预组各分为低剂量组、高剂量组。各组动物处死前均行经右颈总动脉左心室内插管,监测血流动力学及左室功能变化。测定大鼠血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(PICP)、转化生长因子β1(TGF-β1);心肌组织匀浆上清羟脯氨酸(HC)含量;及心脏组织Masson染色,光镜、电镜观察心肌病理改变,计算机图像分析系统测定心肌胶原容积分数(CVF)和心肌内血管周围胶原面积(PVCA)。结果 1各组大鼠血流动力学指标无显著差异(P0.05);2各组大鼠左心功能指标比较无显著差异(P0.05);3模型组大鼠的PICP、TGF-β1、HC浓度均有不同程度升高(P0.05或P0.01);且脓毒症越重,升高越显著。中药861合剂干预组大鼠的PICP、TGF-β1、HC升高程度和病理的损害均轻于模型组大鼠,差异有显著性(P0.05或P0.01);4模型组大鼠的CVF和PVCA有不同程度升高(P0.05),中药861合剂干预组大鼠的CVF、PVCA较对照组大鼠无显著差异(P0.05)。结论 1脓毒症早期存在心肌间质改变即心肌间质纤维化,脓毒症越严重,心肌纤维化改变越明显;2中药861合剂能抑制脓毒症心肌纤维化进展,其机制和抑制成纤维细胞的活化,减少TGF-β1的表达有关。     

肝硬化患者血清MMP-3、TIMP-1水平与肝硬化进程探讨

目的探讨肝硬化患者血清中基质金属蛋白酶-3（MMP-3）和基质金属蛋白组织抑制因子-1（TIMP-1）水平对肝硬化进程的影响。方法分析2011年1月至2012年6月收治的30例乙型肝炎后肝硬化代偿期患者及30例失代偿期患者的临床资料,同期选择健康体检患者30例。分别检测血清MMP-3、TIMP-1水平并计算TIMP-1/MMP-3比值。结果代偿期组和失代偿期组患者血清MMP-3水平分别为（20.32±3.1）、（22.73±5.2）ng/ml,均高于健康组的（17.45±2.3）ng/ml（P均〈0.05）;血清TIMP-1水平分别为（1.72±0.4）、（2.24±0.3）ng/ml,均高于健康组的（1.49±0.3）ng/ml（P均〈0.05）。失代偿期组患者血清MMP-3、TIMP-1水平均比代偿期组升高,差异有统计学意义（P均〈0.05）。代偿期组患者的TIMP-1/MMP-3比值与健康组比较差异无统计学意义（0.088 vs0.086,P〉0.05）;失代偿期组比健康组和代偿期组比值增高（0.103 vs 0.088,0.086）,差异均有统计学意义（P均〈0.05）。结论血清MMP-3和TIMP-1水平及TIMP-1/MMP-3比值在一定程度上与肝硬化进程相关,可作为肝硬化的一种临床检测指标。