佛手柑内酯抑制肺癌细胞分泌可溶性白细胞介素2受体

目的研究佛手柑内酯是否能抑制肺癌细胞分泌可溶性白细胞介素2受体(s IL-2R)及探讨其可能机制。方法将浓度梯度(1μmol/L、10μmol/L和100μmol/L)的佛手柑内酯处理肺癌细胞(Calu-3和NCI-H292)后,利用酶联免疫吸附反应检测肺癌细胞上清s IL-2R的含量,利用实时定量聚合酶链反应检测肺癌细胞s IL-2R编码基因IL2RA的表达。利用生物信息学分析IL2RA是否受转录因子STAT3的调控,并预测IL2RA启动子区域内STAT3的结合位点。利用染色体免疫共沉淀和双荧光素酶报告基因技术,观察佛手柑内酯处理后,STAT3对IL2RA启动子结合及转录激活能力的变化。每次实验设3个复孔,每个实验重复3次以上,两组间数据比较采用t检验,多组间数据比较采用单因素方差分析,检验水平α=0.05。结果在排除细胞活性的影响后,佛手柑内酯能呈浓度梯度抑制肺癌细胞分泌s IL-2R,并抑制其编码基因IL2RA的表达。公共数据库分析显示,IL2RA受转录因子STAT3的调控,其启动子区域内有两个STAT3的结合位点。佛手柑内酯处理肺癌细胞后,能呈浓度梯度抑制STAT3对IL2RA启动子区域的结合,并能降低STAT3对IL2RA的转录激活。结论佛手柑内酯能在体外模型中,通过抑制STAT3对IL2RA启动子区域的结合及转录激活,阻抑肺癌细胞分泌s IL-2R。     

STAT5在造血调控及相关血液疾病发生中的作用

信号转导与转录活化因子5(STAT5)是一种广泛存在于多种组织细胞胞浆内的转录因子,在被激活后能够进入细胞核与特异性DNA序列结合,从而发挥转录调控作用。STAT5有STAT5A和STAT5B两种异构体,二者具有96%的同源性,但其生理功能并不完全相同。研究显示,STAT5能够调节造血细胞的生存、增殖、分化和凋亡,它的过度激活与多种血液系统恶性疾病的病理发生过程密切相关,所以STAT5在临床上可能成为一个新的治疗靶点。本文就该分子在造血调控及相关血液疾病中发挥的作用加以阐述。     

缺氧对自然调节性T细胞的影响

目的:探讨体外缺氧环境对自然调节T细胞的影响。方法:用1%氧浓度培养箱模拟缺氧环境,分别进行0分钟、15分钟、30分钟、1小时、3小时、6小时和12小时的缺氧处理后,使用流式细胞术和蛋白质免疫印迹检测自然调节性T细胞的表面抗原和胞内关键转录因子的表达。将经过不同时间缺氧处理的自然调节性T细胞与辅助性T细胞共培养,观察缺氧条件对自然调节性T细胞免疫调节作用的影响。结果:体外缺氧后,自然调节性T细胞中的关键转录因子FoxP3表达下调;转录因子STAT3被激活并且RORγt表达上调;此外,与基线组相比,体外缺氧15分钟后自然调节性T细胞抑制辅助性T细胞增殖的免疫调节作用减弱。结论:体外缺氧条件影响自然调节性T细胞的免疫调节功能,同时下调FoxP3的表达,激活STAT3并且诱导RORγt的表达。     

诱骗寡核苷酸靶向阻断信号转导和转录活化蛋白5抑制K562细胞生长增殖

目的观察信号转导和转录活化蛋白 5 (STAT5 )诱骗寡核苷酸 (DecoyODN)靶向阻断STAT5的信号传递对白血病细胞株K5 6 2生长增殖的影响 ,并初步探讨其分子机制。方法　将体外设计合成的STAT5DecoyODN经阳离子脂质体介导转染K5 6 2细胞 ,通过细胞生长曲线及集落形成实验观察K5 6 2细胞生长增殖能力 ,并用RT PCR方法检测STAT5下游靶基因的表达。结果　激光共聚焦显微镜观察显示 ,STAT5DecoyODN能高效转染K5 6 2细胞 ,阳性率 95 .2 % ;细胞生长曲线显示STAT5De coyODN可显著抑制K5 6 2细胞生长 ,抑制率 77.7% ;集落形成实验显示STAT5DecoyODN能显著抑制K5 6 2细胞集落形成能力 (DecoyODN处理组集落形成率为 8.3% ,空白对照组为 35 .7% ,P <0 .0 5 ) ;RT PCR检测发现STAT5DecoyODN处理后K5 6 2细胞c myc、bcl XL、CyclinD1基因较对照组分别下调15 .4 % ,30 .8% ,2 9.1%。结论　DecoyODN可能通过阻止STAT5对靶基因的转录激活 ,使靶基因表达下调 ,进而抑制K5 6 2细胞生长增殖。     

全反式维甲酸诱导Rig-g基因表达的调控机制研究

为了揭示全反式维甲酸(ATRA)诱导急性早幼粒白血病(APL)细胞株NB4细胞分化过程中rig-g基因表达的分子机制,进一步阐明ATRA在APL细胞分化中的信号转导网络,采用荧光素酶报告基因试验、蛋白质免疫共沉淀试验以及染色质免疫共沉淀试验等对直接启动rig-g基因表达的转录因子及其作用机制进行研究。结果显示:在NB4细胞中,STAT2、IRF-9和IRF-1均能够被ATRA诱导表达,但表达时相有所不同。STAT2和IRF-9可以发生相互作用,形成复合物,并与rig-g基因启动子上的序列结合,激活rig-g基因的表达。IRF-1单独也能激活含rig-g基因启动子的报告基因,但是C/EBPα能强烈抑制IRF-1的这种转录激活作用。结论:在维甲酸诱导APL细胞分化过程中,ATRA首先诱导IRF-1的表达;随着C/EBPα的逐渐下调,IRF1-继而又进一步使细胞内的IRF-9和STAT2的蛋白水平上升。IRF-9和STAT2相互作用形成的复合物是直接诱导rig-g基因表达最基本的转录因子。本研究对于深入理解ATRA诱导APL细胞分化的信号转导网络具有一定的意义。     

P38 MAPK信号通路:炎性肠病治疗的新靶

细胞外刺激可通过细胞内信号传导途径介导细胞功能，包括细胞的基因表达、细胞增殖和死亡或凋亡、炎症反应和免疫反应等。细胞外刺激可主要通过两种细胞内信号传导途径调节细胞的基因转录，一是通过一系列磷酸化酶磷酸化激活下游分子的级联反应，激活胞核中的核转录因子，调节细胞的基因转录；二是通过受体-配体途径激活胞浆内的核转录因子，激活后的核转录因子通过转位进入核内调节细胞的基因表达。^1MAPK信号传导途径可通过前一途径调节细胞的基因表达。在免疫介导的炎症反应中发挥重要作用，本文就P38MAPK信号传导通路与IBD的关系及P38MAPK抑制剂在IBD中的应用研究进行综述。     

脑缺血-再灌注诱导大鼠皮层和纹状体组织信号转导与转录激活子-3的激活变化

目的研究局灶脑缺血诱导大鼠皮层和纹状体信号转导与转录激活子-3(STAT3)的激活变化。方法采用SD雄性大鼠线栓法制作右大脑中动脉缺血(MCAO)局灶脑缺血模型。运用抗STAT3和抗磷酸化STAT3抗体做免疫印迹(IB)检测皮层和纹状体STAT3的表达及激活变化。结果缺血-再灌注不同时间并不能引起皮层及纹状体STAT3蛋白表达变化,但可诱导其磷酸化水平显著增加。缺血-再灌注24h达到峰值,与假手术组相比分别增加约5.5倍和8.4倍。结论局灶脑缺血-再灌注能引起缺血同侧皮层和纹状体STAT3磷酸化水平的显著增加,提示缺血性脑损伤诱导STAT3的激活可能参与缺血皮层区和纹状体神经元细胞的病理生理过程。     

STAT3与肿瘤免疫逃逸的研究进展

信号转导子与转录激活子3（STAT3）是一种存在于细胞质内的双功能蛋白,可以被多种酪氨酸激酶激活,激活后发生磷酸化,形成二聚体转入细胞核内,调节细胞生长、分化、凋亡相关基因的表达,是多条致癌通路的汇集点,在大多数肿瘤细胞内呈持续性激活,在肿瘤的发生、发展、转移中起了重要作用。近几年的研究表明,STAT3能在很多环节参与调节肿瘤的免疫逃逸,可能是肿瘤免疫治疗的一个重要靶点。     

脑缺血-再灌注诱导大鼠皮层和纹状体组织信号转导与转录激活子-3的激活变化

目的研究局灶脑缺血诱导大鼠皮层和纹状体信号转导与转录激活子-3（STAT3）的激活变化。方法采用SD雄性大鼠线栓法制作右大脑中动脉缺血（MCAO）局灶脑缺血模型。运用抗STAT3和抗磷酸化STAT3抗体做免疫印迹（IB）检测皮层和纹状体STAT3的表达及激活变化。结果缺血-再灌注不同时间并不能引起皮层及纹状体STAT3蛋白表达变化．但可诱导其磷酸化水平显著增加。缺血-再灌注24h达到峰值，与假手术组相比分别增加约5．5倍和8．4倍。结论局灶脑缺血-再灌注能引起缺血同侧皮层和纹状体STAT3磷酸化水平的显著增加，提示缺血性脑损伤诱导STAT3的激活可能参与缺血皮层区和纹状体神经元细胞的病理生理过程。     

肿瘤组织中核转录因子PPARγ的研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs)是一类由配体激活的转录因子家族,属Ⅱ型核受体超家族成员.过氧化物增殖反应是指细胞对各种化合物,包括贝特类降脂药、抗寄生虫药、除草剂、脂肪酸和白三烯拮抗剂等,以及对细胞形态和酶活性等病理生理改变的修饰反应.     

血细胞生成中的信号传递通路及其调控

造血生长因子通过与其受体的相互作用调节血细胞的增殖与分化。造血生长因子与受体结合后激活JAK,JAK发生自我磷酸化的同时也使受体磷酸化,继而通过SH2 蛋白激活ras通路。JAK还可以使STAT磷酸化。STAT磷酸化后移到细胞核内,启动有关基因的转录。     

过氧化物酶体增殖物激活受体与动脉粥样硬化研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator activated receptors，PPARs）属于核受体超家族配体激活的转录因子。经转录激活靶基因，可影响脂质代谢、糖稳态、细胞增殖、分化和凋亡，以及炎症反应。目前，动脉粥样硬化被认为是一种慢性炎症反应。因此，PPARs激活通过调节新陈代谢及抗炎的双重作用影响动脉粥样硬化的发展。本文综述PPARs的结构和分布、PPARs配体、PPARs与动脉粥样硬化的关系。     

甲状腺癌组织中STAT3激活及VEGF、Cyclin D1的表达

转录因子类癌基因STAT3的异常表达和激活在恶性黑素瘤、乳腺癌、前列腺癌、胃癌等多种肿瘤组织与细胞系中已证实存在。笔者率先报道了STAT3在甲状腺癌组织中的表达,但其作用机制尚待进一步阐释。本实验研究甲状腺癌组织中活化STAT3（pSTAT3）蛋白表达以及STAT3信号传导通路成员（VEGF、CyclinD1）的表达,以期了解STAT3基因在人甲状腺癌发生、发展过程中的意义。