神经干细胞移植联合脑源性神经营养因子局部注射对老年性痴呆鼠海马线粒体膜电位及行为学的影响

背景：移植神经干细胞的分化受移植部位微环境、各种生长及细胞因子的影响。目的：实验拟观察神经干细胞移植与脑源性神经营养因子联合应用列老年性痴呆鼠行为学恢复及海马线粒体膜的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2006-09／2007-09在重庆医科大学动物实验室及细胞实验室完成。材料：神经干细胞来源于新生1d龄SD大鼠。Y迷宫筛选对电击敏感并逃避迅速的三四月龄健康雄性SD大鼠，随机分成4组：正常对照组、神经干细胞组、脑源性神经营养因子组、联合组移植，每组10只。方法：分离培养大鼠神经干细胞。参照包新民等的大鼠脑立体定位图谱制备老年性痴呆大鼠模型。造模后，神经干细胞组双侧海马区注射神经千细胞，脑源性神经营养因子组双侧海马区注射脑源性神经营养因子，联合移植组注射神经干细胞同时持续恻脑室注射脑源性神经营养因子。主要观察指标：用分子生物学检测老年性痴呆大鼠海马线粒体膜电位的变化，行Y迷宫试验观察大鼠行为学中学习记忆能力。结果：联合移植组老年性痴呆大鼠海马线粒体膜电位明显升高，并高于神经干细胞组、脑源性神经营养因子（P〈0．05），与正常对照组比较无明显差异。脑源性神经营养因子组、神经干细胞组学习记忆能力虽有明显恢复，但与联合移植组和正常对照组比较还有定的距离（P〈0．05）。结论：神经干细胞与脑源性神经营养因子联合应用能能稳定海马线粒体功能，从而抑制神经细胞凋亡，能改善老年性痴呆箭的学习记忆功能障碍。     

脑康灵口服液对小鼠脑缺氧及记忆障碍的影响

目的：研究脑康灵口服液对小鼠学习记忆功能的影响及其脑和全血胆碱酯酶活性的影响。方法：采用一次性被动回避式条件反射的方法(跳板法)考察脑康灵口服液对小鼠学习记忆功能的影响。结果：脑康灵口服液能显著对抗东莨菪碱所致的记忆获得障碍及亚硝酸钠所致的记忆巩固障碍；显著抑制脑和全血胆碱酯酶的活性。结论：脑康灵口服液改善学习记忆障碍的作用可能与其增强中枢胆碱能神经系统功能作用有关。     

米帮塔仙人掌多糖对小鼠慢性应激认知功能损伤的改善作用及机制探讨

目的:探讨米帮塔仙人掌多糖(MAPs)对小鼠慢性应激所致认知功能损伤的改善作用及作用机制。方法:雄性昆明小鼠50只,随机分为5组(各组10只):正常对照组,慢性应激模型组,应激加MAPs低、中、高剂量组(100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg)处理,持续给药20 d。末次给药后采用新事物认知实验评价小鼠认知功能。行为学实验结束后,处死小鼠取脑,取5只用于测定海马CA1区长时程增强(LTP),另取5只采用western blot检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达变化。结果:与正常对照组比较,慢性应激模型组小鼠学习记忆能力显著减退,海马CA1区LTP幅度降低,BDNF蛋白表达减少(均P0.05);MAPs中、高剂量组小鼠认知功能明显改善,LTP幅度值增加,海马BDNF蛋白表达上调,与模型组差异有统计学意义(P0.05)。结论:MAPs对慢性应激所致的小鼠认知功能损伤有一定的改善作用,其机制可能与上调海马BDNF蛋白的表达有关。     

运动训练对亚硝酸钠致记忆障碍模型小鼠学习记忆能力的影响

目的:考察运动训练对亚硝酸钠致记忆障碍模型小鼠学习记忆能力的影响,并探讨其作用机制。方法：昆明种小鼠采用被动跑轮法进行运动训练。训练6周后,采用小鼠Morris水迷宫法测试小鼠学习记忆能力;比色法检测大脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量,HE染色观察海马组织形态学改变。结果：与空白对照组比较,模型对照组小鼠定向游泳实验潜伏期显著延长（P<0.05）,SOD活力显著降低（P<0.05）,MDA含量显著升高（P<0.05）,海马神经元变性、脱落;与模型对照组比较,运动组小鼠游泳潜伏期显著缩短（P<0.05）,SOD活力显著增强（P<0.05）,MDA含量显著降低（P<0.05）,海马神经元的变性及脱落显著改善。结论：运动训练能显著改善亚硝酸钠所致小鼠学习记忆障碍,其作用机制可能与提高小鼠自由基清除能力有关。     

吗啡依赖及戒断对大鼠脑源性神经营养因子表达的影响

背景：阿片类药物多次用药可引起脑内有关神经部位出现形态及功能的适应性变化，这些适应性变化是导致药物渴求和戒断后复吸的重要神经生物学基础，但其确切的分子机制目前尚不清楚。目的：研究吗啡依赖形成及戒断对大鼠脑源性神经营养因子表达的影响，以期为脑源性神经营养因子参与阿片类药物依赖及戒断反应提供实验学依据。设计：以实验动物为观察对象的随机设计，对照研究。单位：一所医科大学医院的心理卫生中心。材料：实验于2004-03／2004-07在重庆医科大学药学系药理实验室完成。选择近交清洁级Sprague-Dawley)，大鼠30只，均为雄性，体质量200～250g，购自解放军第三军医大学实验动物中心。按随机数字法将其分为空白对照组、吗啡依赖组、盐酸纳洛酮处理戒断组，每组10只。方法：采用剂量递增法皮下注射吗啡建立大鼠吗啡依赖模型，然后对戒断组大鼠皮下注射2mg／kg的盐酸纳络酮激发戒断症状空白对照组大鼠按同等剂量给予生理盐水。分别对建立模型的各组大鼠进行生物学和行为学的观察。应用免疫组化和地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交技术检测3组大鼠不同脑区脑源性神经营养因子的表达水平。主要观察指标：①各组大鼠脑内脑源性神经营养因子蛋白、脑源性神经营养因子mRNA平均光密度的比较；②各组大鼠戒断症状评定比较。结果：吗啡依赖组大鼠前额叶皮层、蓝斑、海马脑源性神经营养因子蛋白的相对含量高于对照组(P&;lt;0．05)；吗啡依赖组大鼠前额叶皮层脑源性神经营养因子mRNA的相对含量高于对照组(P&;lt;0．05)。吗啡戒断组大鼠前额叶皮层、蓝斑、海马腑源性神经营养因子蛋白及其mRNA的相对含量均高于依赖组及对照组(P&;lt;0．05)．结论：慢性给予吗啡可影响大鼠相关脑区BDNF、蛋白及其mRNA的表达，提示脑源性神经营养因子表达的改变参与吗啡依赖及戒断反应。     

神经干细胞和脑源性神经营养因子联用对老年痴呆鼠学习记忆能力和基底前脑小白蛋白的影响

目的:观察神经干细胞和脑源性神经营养因子联合应用对老年痴呆大鼠学习记忆能力及其基底前脑小白蛋白神经元的作用。方法:实验于2003-12/2005-10在广州医学院解剖教研室神经生物学实验室完成。取健康雄性SD大鼠40只,随机分为4组:正常对照组、损伤组、移植组和联合组,每组10只。①利用无血清培养技术获得新生SD鼠的海马神经干细胞。②除正常组外,其他3组切断SD大鼠左侧穹隆海马伞建立老年痴呆大鼠模型;移植组和联合组,基底前脑注射神经干细胞;联合组同时侧脑室注射脑源性神经营养因子。③4周后行Y迷宫测试大鼠学习、记忆能力(学习次数分值高表示差,记忆能力分值低表示差),免疫组织化学结合图象分析技术观察各组大鼠基底前脑小白蛋白阳性神经元数目受影响的情况。结果:①损伤组大鼠比正常对照组大鼠学习、记忆能力明显下降(98.2±5.6比59.8±4.1,3.5±0.5比8.4±0.4,P<0.01)。②移植组学习、记忆能力均有改善(74.1±5.4,6.7±0.5,P<0.05),但与正常组比较差异有显著性意义(P<0.05)。③联合组学习记忆能力(56.7±0.9,8.3±0.3)与正常组比较无显著性差异(P>0.05)。④大鼠的学习记忆能力与基底前脑小白蛋白阳性细胞数呈正相关。结论:神经干细胞和脑源性神经营养因子联用较单独使用神经干细胞或脑源性神经营养因子更好地改善老年痴呆大鼠的学习记忆能力。     

吗啡依赖及戒断对大鼠脑源性神经营养因子表达的影响

背景阿片类药物多次用药可引起脑内有关神经部位出现形态及功能的适应性变化,这些适应性变化是导致药物渴求和戒断后复吸的重要神经生物学基础,但其确切的分子机制目前尚不清楚.目的研究吗啡依赖形成及戒断对大鼠脑源性神经营养因子表达的影响,以期为脑源性神经营养因子参与阿片类药物依赖及戒断反应提供实验学依据.设计以实验动物为观察对象的随机设计,对照研究.单位一所医科大学医院的心理卫生中心.材料实验于2004-03/2004-07在重庆医科大学药学系药理实验室完成.选择近交清洁级Sprague-Dawley大鼠30只,均为雄性,体质量200～250 g,购自解放军第三军医大学实验动物中心.按随机数字法将其分为空白对照组、吗啡依赖组、盐酸纳洛酮处理戒断组,每组10只.方法采用剂量递增法皮下注射吗啡建立大鼠吗啡依赖模型,然后对戒断组大鼠皮下注射2 mg/kg的盐酸纳络酮激发戒断症状.空白对照组大鼠按同等剂量给予生理盐水.分别对建立模型的各组大鼠进行生物学和行为学的观察.应用免疫组化和地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交技术检测3组大鼠不同脑区脑源性神经营养因子的表达水平.主要观察指标①各组大鼠脑内脑源性神经营养因子蛋白、脑源性神经营养因子mRNA平均光密度的比较;②各组大鼠戒断症状评定比较.结果吗啡依赖组大鼠前额叶皮层、蓝斑、海马脑源性神经营养因子蛋白的相对含量高于对照组(P＜0.05);吗啡依赖组大鼠前额叶皮层脑源性神经营养因子mRNA的相对含量高于对照组(P＜0.05).吗啡戒断组大鼠前额叶皮层、蓝斑、海马脑源性神经营养因子蛋白及其mRNA的相对含量均高于依赖组及对照组(P＜0.05).结论慢性给予吗啡可影响大鼠相关脑区BDNF蛋白及其mRNA的表达,提示脑源性神经营养因子表达的改变参与吗啡依赖及戒断反应.     

益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆获得障碍大鼠的干预效应

目的:观察益智仁水提取物对东莨菪碱所致大鼠记忆获得障碍的改善效果。方法:实验于2005-03/04在大连大学医学院动物室和神经科学实验室完成。选择健康成年Sprague-Dawley纯种大鼠50只,在温度为(22±3)℃的环境中适应两天后,随机数字表法分成对照组、模型组、益智仁低剂量组(120mg/kg)、益智仁中剂量组(240mg/kg)、益智仁高剂量组(480mg/kg),每组10只,雌雄各半。益智仁低、中、高剂量组,每天分别灌胃120mg/kg、240mg/kg、480mg/kg益智仁水提取物,对照组和模型组灌胃等量的生理盐水,连续给药21d。末次给药后1h采用Y迷宫进行学习记忆行为训练,训练前15min模型组及益智仁低、中、高剂量组腹腔注射东莨菪碱1mg/kg,对照组腹腔注射等体积生理盐水,每只动物每天训练20次,连续训练7d,以正确反应率达到90%作为学会的标准,并记录各组的训练次数(达到学会标准所需的次数)。行为实验结束后,立即麻醉后断头处死大鼠,在冰块上快速分离双侧海马,准确称重,按重量体积比加9倍生理盐水制成10%脑组织匀浆,2000r/min离心10min,采用乙酰胆碱酯酶测定试剂盒测定乙酰胆碱酯酶活性,采用双缩脲蛋白测定试剂盒测定海马脑蛋白含量,主要观察Y迷宫行为实验各组大鼠达标所需的训练次数、海马乙酰胆碱酯酶活力及海马脑蛋白含量。数据以x±s表示,组间比较采用t检验。结果:各实验组大鼠全部进入结果分析。①益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠学习记忆能力的影响:益智仁低、中、高剂量组达标所需训练次数显著低于模型组(58.6±15.0,55.0±13.8,67.6±8.7)次,(136.3±16.8)次,(P<0.01),模型组大鼠达标所需训练次数显著高于对照组(P<0.01)。②益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠海马乙酰胆碱酯酶活力的影响:益智仁低剂量组和中剂量组海马乙酰胆碱酯酶活力显著低于模型组(28.5±9.3,22.2±7.2)μkat/g,(47.2±18.8)μkat/g,(P<0.05);模型组海马乙酰胆碱酯酶活力显著高于对照组(P<0.05)。③益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠海马脑蛋白含量的影响:与模型组相比,益智仁低剂量组、中剂量组脑蛋白含量显著增高(P<0.05);与对照组相比,模型组大鼠海马脑蛋白含量显著降低(P<0.05)。结论:益智仁水提取物抑制乙酰胆碱酯酶活性,减少乙酰胆碱分解,提高海马脑蛋白含量,对东莨菪碱所致记忆获得障碍具有显著的改善作用。     

急性应激大鼠脑源性神经营养因子水平与表达

目的探讨急性应激抑郁模型大鼠血浆脑源性神经营养因子的水平及外周粒细胞与脑组织中脑源性神经营养因子的表达。方法将16只成年雄性大鼠随机分为实验组与对照组,每组8只,实验组大鼠连续接受电击诱导3d,采用旷场试验评价两组大鼠行为,安乐处死,取两组血样与脑组织（海马、前额叶、中缝核及纹状体）,采用双抗体夹心ABC—ELISA法和实时荧光定量PCR（Real-TimePCR）检测法检测血浆脑源性神经营养因子水平及外周粒细胞与各脑区脑源性神经营养因子的表达。结果实验组大鼠连续接受电击诱导3d后,行为明显减少,越线次数、头动总距离显著低于对照组（P〈0．05或0．01）;血浆脑源性神经营养因子水平及脑组织中脑源性神经营养因子表达与对照组比较差异均无显著性（P〉0．05）,外周粒细胞脑源性神经营养因子的表达显著低于对照组（P〈0．01）。结论急性应激不引起大鼠血浆脑源性神经营养因子水平及脑组织中脑源性神经营养因子表达的改变,但大鼠外周粒细胞脑源性神经营养因子的表达降低。     

益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆获得障碍大鼠的干预效应

目的：观察益智仁水提取物对东莨菪碱所致大鼠记忆获得障碍的改善效果。方法：实验于2005—03／04在大连大学医学院动物室和神经科学实验室完成。选择健康成年Sprague—Dawley纯种大鼠50只，在温度为（22&;#177;3）℃的环境中适应两天后，随机数字表法分成对照组、模型组、益智仁低剂量组（120mg／kg）、益智仁中剂量组（240mg／kg）、益智仁高剂量组（480mg／kg）．每组10只，雌雄各半。益智仁低、中、高剂量组，每天分别灌胃120mg／kg、240mg／kg、480mg／kg益智仁水提取物，对照组和模型组灌胃等量的生理盐水，连续给药21d。末次给药后1h采用Y迷宫进行学习记忆行为训练，训练前15min模型组及益智仁低、中、高剂量组腹腔注射东莨菪碱1mg／kg，对照组腹腔注射等体积生理盐水，每只动物每天训练20次，连续训练7d，以正确反应率达到90％作为学会的标准，并记录各组的训练次数（达到学会标准所需的次数）。行为实验结束后，立即麻醉后断头处死大鼠，在冰块上快速分离双侧海马，准确称重，按重量体积比加9倍生理盐水制成10％脑组织匀浆，2000r／min离心10min，采用乙酰胆碱酯酶测定试剂盒测定乙酰胆碱酯酶活性，采用双缩脲蛋白测定试剂盒测定海马脑蛋白含量，主要观察Y迷宫行为实验各组大鼠达标所需的训练次数、海马乙酰胆碱酯酶活力及海马脑蛋白含量。数据以x^-&;#177;s表示，组间比较采用t检验。结果：各实验组大鼠全部进入结果分析。①益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠学习记忆能力的影响：益智仁低、中、高剂量组达标所需训练次数显著低于模型组[（58．6&;#177;15．0，55．0&;#177;13．8，67．6&;#177;8．7）次，（136．3&;#177;16．8）次，（P〈0．01）]，模型组大鼠达标所需训练次数显著高于对照组（P〈0．01）。②益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠海马乙酰胆碱酯酶活力的影响：益智仁低剂量组和中剂量组海马乙酰胆碱酯酶活力显著低于模型组[（28．5&;#177;9.3，22．2&;#177;7．2）μkat／g，（47．2&;#177;18．8）μkat／g，（P〈0．05）]；模型组海马乙酰胆碱酯酶活力显著高于对照组（P〈0．05）。③益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠海马脑蛋白含量的影响：与模型组相比，益智仁低剂量组、中剂量组脑蛋白含量显著增高（P〈0．05）；与对照组相比，模型组大鼠海马脑蛋白含量显著降低（P〈0．05）。结论：益智仁水提取物抑制乙酰胆碱酯酶活性，减少乙酰胆碱分解，提高海马脑蛋白含量，对东莨菪碱所致记忆获得障碍具有显著的改善作用。     

银杏叶提取物上调海马脑源性营养因子和神经肽2受体表达、增强突触重建而改善发育期癫痫大鼠认知功能的研究

目的 观察银杏叶提取物(EGb)对发育期点燃癫痫大鼠治疗前后学习记忆及脑组织海马中脑源性营养因子(BDNF)、神经肽2受体(NPY2R)、突触素P38、突触后致密蛋白95(PSD95)表达及突触超微结构的影响,探讨EGb改善认知功能的可能作用机制.方法 戊四氮(PTZ)诱导大鼠慢性点燃模型,Morris水迷宫观察干预治疗前后大鼠学习记忆变化,Western blot和免疫组化分别检测海马中BDNF、NPY2R、P38、PSD95蛋白的含量分布情况,电镜观察突触超微结构.结果 (1)Morris水迷宫测试结果显示PTZ点燃大鼠的潜伏期长于NS组(P<0.05),经EGb治疗后的大鼠潜伏期较点燃组明显下降(P<0.05).相应地点燃大鼠的跨越平台次数明显少于NS组(P<0.05),经EGb治疗后大鼠的跨越平台次数则多于相应的未治疗组(P<0.05).(2)点燃大鼠海马中BDNF蛋白含量明显高于NS组(P<0.05),EGb的治疗进一步提高了大鼠BDNF蛋白含量(P<0.05),BDNF免疫阳性细胞分布以皮质区最高,其次分别为海马CA3区、CA2区和DG.相应地点燃大鼠海马内NPY2R蛋白含量也显著高于NS组(P<0.05),但是,EGb的治疗可以降低大鼠的NPY2R蛋白含量(P<0.05),NPY2R免疫阳性细胞主要分布于海马DG区,皮质区次之.(3)点燃大鼠脑内P38和PSD95蛋白含量均低于NS组(P<0.05),EGb的治疗使得P38和PSD95表达量明显高于点燃组、甚至超过NS组(P<0.05).(4)在透射电镜下点燃大鼠海马神经元胞体固缩浓染,细胞水肿,突起膜发生断裂,突触前后膜结构模糊,突触小泡减少,突触后致密物变薄,而EGb的治疗可以减轻细胞水肿、致密物稍增厚.结论 EGb治疗后发育期癫痫大鼠海马BDNF、NPY2R、P38和PSD95表达增强,受损的突触结构得到改善,可能参与了EGb改善点燃大鼠的学习记忆过程.     

加味温胆汤对抑郁模型大鼠学习记忆能力及海马cAMP-PKA途径的影响

目的:探讨加味温胆汤对抑郁模型大鼠学习记忆能力及海马信号转导cAMP-PKA途径的影响。方法:32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸氟西汀组及加味温胆汤组,每组8只,应用孤养加慢性轻度不可预见性应激方法造模,采用Morris水迷宫实验测试大鼠空间学习记忆能力、放射免疫法测定海马cAMP含量,以及免疫组化SABC法测定海马区PKA蛋白表达水平。结果:模型组大鼠学习记忆能力显著下降(P<0.01),海马cAMP含量增加(P<0.05)、PKA表达显著减少(P<0.01)。中、西药组与模型组比较,学习记忆能力增强(P<0.05),cAMP含量下降(P<0.05),PKA蛋白表达显著上升(P<0.05)。结论:加味温胆汤可增强抑郁症大鼠学习与记忆能力,其影响机制可能与海马信号传导cAMP-PKA途径有关。     

Exenatide enhances cognitive performance and upregulates neurotrophic factor gene expression levels in diabetic mice

Exenatide is a potent and selective agonist for the GLP‐1 (glucagon‐like peptide‐1) receptor. Recent studies are focused on the effects of GLP‐1 analogues on hippocampal neurogenesis, cognition, learning and memory functions. The aim of this study was to assess the effects of chronic exenatide treatment (0.1 μg/kg, s.c, twice daily for 2 weeks) on spatial memory functions by using the modified elevated plus maze (mEPM) test and emotional memory functions by using the passive avoidance (PA) test in streptozotocin/nicotinamide (STZ‐NA)‐induced diabetic mice. As the genes involved in neurite remodelling are among the primary targets of regulation, the effects of diabetes and chronic administration of exenatide on brain‐derived neurotrophic factor (BDNF) and cyclic adenosine monophosphate (cAMP) response element binding protein (CREB) messenger ribonucleic acid (mRNA) levels in the hippocampus of mice were also determined using quantitative real‐time polymerase chain reaction (RT‐PCR). This study revealed that in the mEPM and PA tests, type‐2 diabetes‐induced mice exhibited significant impairment of learning and memory which were ameliorated by GLP‐1 receptor agonist exenatide. Quantitative RT‐PCR revealed that CREB and BDNF gene expression levels were downregulated in diabetic mice, and these alterations were increased by exenatide treatment. Since, exenatide improves cognitive ability in STZ/NA‐induced diabetic mice and activates molecular mechanisms of memory storage in response to a learning experience, it may be a candidate for alleviation of mood and cognitive disorder.     

轻型脑外伤对大鼠空间学习记忆的影响及机制研究

目的:探讨轻型脑外伤对大鼠空间学习记忆功能的影响及可能的机制。方法:成年SD大鼠120只,雌雄各半,随机分为雌性对照组、雌性实验组、雄性对照组及雄性实验组,各30只;实验组建立侧位液压冲击轻型颅脑外伤模型;术后8d,水迷宫测试大鼠学习记忆能力;水迷宫测试结束后,放射免疫法检测血清皮质醇(COR)水平;免疫组化法检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)及酪氨酸激酶受体(TrkB)的表达。结果:水迷宫定位航行实验第4天,同性别大鼠实验组逃逸潜伏期较对照组显著延长(P<0.01);空间探索实验中,同性别大鼠实验组寻找平台潜伏期长于对照组(P<0.05),穿越平台次数少于对照组(P<0.05);同性别大鼠实验组血清COR水平显著高于对照组(P<0.01),海马BDNF及TrkB平均灰度值均低于对照组(P<0.05)。结论:轻型脑外伤导致大鼠认知功能缺损,可能与海马BDNF及TtkB表达减少,BDNF-TrkB通路受损有关。     

“形神共养”对MCAO大鼠学习记忆能力及BDNF表达的影响

目的:探讨"形神共养"的丰富生存环境对大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠学习记忆能力以及抗大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法:将50只SD雄性大鼠随机分为缺血"形养"组(IE1)、缺血"神养"组(IE2)、缺血"形神共养"组(IE3)、缺血标准环境组(IS)、假手术标准环境组(SS),每组10只。缺血组进行右侧大脑中动脉阻断及再灌注手术。术后进行为期4周的"形神共养"干预,干预后进行水迷宫实验,实验结束后用免疫组织化学染色观察脑梗死周边皮质及海马齿状回区BDNF的表达。结果:在水迷宫空间探索实验中,大鼠的逃避潜伏期逐渐缩短,训练第5天时,IE1、IE3组逃避潜伏期均比IS组短(均P0.05),且IE1、IE3组与SS组之间无显著性差异;IE1、IE2、IE3组大鼠对原平台的记忆均比IS好。IE1、IE3组梗死灶周围皮质BDNF蛋白的表达比IS组高;在缺血侧海马DG部位,IE1、IE2、IE3组BDNF蛋白的表达均比IS、SS组高(均P0.05)。结论:"形神共养"的丰富生存环境有利于促进局灶性脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力的恢复;有利于促进局灶性脑缺血再灌注大鼠梗死周边皮质和海马齿状回区BDNF的表达,从而促进脑缺血大鼠功能的恢复。     

Proteolysis of proBDNF Is a Key Regulator in the Formation of Memory

It is essential to understand the molecular processes underlying long-term memory to provide therapeutic targets of aberrant memory that produce pathological behaviour in humans. Under conditions of recall, fully-consolidated memories can undergo reconsolidation or extinction. These retrieval-mediated memory processes may rely on distinct molecular processes. The cellular mechanisms initiating the signature molecular events are not known. Using infusions of protein synthesis inhibitors, antisense oligonucleotide targeting brain-derived neurotrophic factor (BDNF) mRNA or tPA-STOP (an inhibitor of the proteolysis of BDNF protein) into the hippocampus of the awake rat, we show that acquisition and extinction of contextual fear memory depended on the increased and decreased proteolysis of proBDNF (precursor BDNF) in the hippocampus, respectively. Conditions of retrieval that are known to initiate the reconsolidation of contextual fear memory, a BDNF-independent memory process, were not correlated with altered proBDNF cleavage. Thus, the processing of BDNF was associated with the acquisition of new information and the updating of information about a salient stimulus. Furthermore, the differential requirement for the processing of proBDNF by tPA in distinct memory processes suggest that the molecular events actively engaged to support the storage and/or the successful retrieval of memory depends on the integration of ongoing experience with past learning.     

康复训练对脑梗死大鼠学习记忆与健侧海马突触体胞浆游离Ca2+浓度的影响

目的　探讨康复训练影响脑梗死大鼠学习记忆能力与健侧海马突触体胞浆游离钙离子浓度SCF〔Ca2 〕i的关系。方法　 2 4只Wistar大鼠分为正常组、康复组和模型组 ,每组 8只 ,应用Fura 2荧光探针测定健侧海马神经元SCF〔Ca2 〕i的变化。结果　康复组、模型组和正常组在静息状态下SCF〔Ca2 〕i比较 ,差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;在KCl去极化状态下 ,康复组SCF〔Ca2 〕i明显高于模型组和正常组 (P <0 .0 5 )。相应的Y迷宫分辨学习的习得和反映记忆能力的一次性被动回避反应测试能力均优于模型组 (P <0 .0 5 )。结论　康复训练改善脑梗死大鼠学习记忆与海马神经元SCF〔Ca2 〕i的变化密切相关。     

氯胺酮对子鼠学习记忆能力的影响及其机制研究

目的 探究氯胺酮对子鼠学习记忆能力的影响及其机制。方法 选取60只子鼠,使用跳台实验将子鼠分为智力及记忆能力相近的4组,每组各15只,分别为:空白组、低剂量氯胺酮组(25 mg/kg)、中剂量氯胺酮组(50 mg/kg)和高剂量氯胺酮组(100 mg/kg),氯胺酮各组腹腔注射对应剂量的氯胺酮,空白组腹腔注射等量生理盐水,每日1次,连续7 d。使用跳台法和Morris水迷宫法测定子鼠的学习记忆能力;采用HE染色观察子鼠海马体内神经细胞的变化;采用比色法测定子鼠脑组织中乙酰胆碱(Ach)、5-HT含量和乙酰胆碱酯酶(TCh E)活力;使用Western blot检测子鼠海马体内环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-CREB)及脑源性神经营养因子(BDNF)的表达情况。结果 相比空白组,使用氯胺酮组处理各组子鼠逃避潜伏时间、出现逃避错误次数、每个象限内停留时间、TCh E活力均显著升高(P <0. 05),120 s内穿台次数、Ach水平、CREB、p-CREB及BDNF表达水平、pCREB/CREB值显著降低(P <0. 05);相比低剂量氯胺酮组,中剂量氯胺酮组和高剂量氯胺酮组子鼠逃避潜伏时间、出现逃避错误次数、每个象限内停留时间、TCh E活力均显著升高(P <0. 05),120 s内穿台次数、Ach水平、CREB、pCREB及BDNF表达水平、p-CREB/CREB值显著降低(P <0. 05);HE染色结果显示,使用氯胺酮处理后子鼠海马区细胞间隙明显增宽,结构组织松散,细胞水肿,以条索状为主,并存在大量的细胞坏死。结论 氯胺酮会损害子鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与调控神经递质、减少BDNF表达并抑制CREB信号传导通路相关,并呈剂量依赖性。     

低氧预处理诱导促红细胞生成素对脑缺血后损伤及认知功能的保护作用

目的 观察低氧预处理(HPC)对全脑缺血/再灌注(I/R)5 d后大鼠认知功能(学习、记忆)障碍的改善作用及对促红细胞生成素(EPO)表达的调节作用,探讨HPC对I/R致海马区损伤的保护作用机制.方法 成年健康雄性SD大鼠120只被随机分为假手术组、I/R组、HPC 24 h组(脑缺血前24 h低氧)、HPC 48 h组(脑缺血前48 h低氧)4组.于术后5 d进行运动功能实验、被动躲避实验和水迷宫实验,测定大鼠的认知功能;用苏木素-伊红(HE)染色,检测脑海马区组织病理学变化;再灌注后1 h和4 h用免疫组化测定海马CA1和CA3区EPO蛋白含量.结果 运动功能实验、被动躲避实验和水迷宫实验测定显示,I/R能损害大鼠的认知功能;HPC组大鼠的认知功能均得到显著改善,且HPC 48 h组较HPC 24 h组改善更显著(P<0.05).HPC组神经细胞的坏死程度减轻,且在HPC 48 h组更显著.HPC组在全脑I/R后1 h和4 h海马CA1和CA3区的EPO蛋白表达均明显增加.HPC 48 h组作用更明显(P均<0.05);并且EPO蛋白含量与认知功能呈正相关(CA1区相关系数(r)=0.744,CA3区r=0.822,P均<0.013.结论 全脑I/R可导致神经细胞坏死并引发I/R后短期内(5 d)的认知功能障碍;HPC能减轻I/R损伤、改善缺血引起的认知功能障碍,且缺血前48 h的HPC保护作用更强.HPC可促进EPO在海马CA1和CA3区的表达,这也可能是HPC脑保护和改善认知功能障碍的机制之一.     

中枢组胺能神经介导异氟烷麻醉后认知功能障碍

目的:探讨组胺能神经元是否参与异氟烷麻醉引起的认知功能障碍。方法:采用抑制性回避记忆模型研究成年雄性SD大鼠异氟烷麻醉后记忆功能变化,通过下丘脑结节乳头核(TMN)微量注射GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱(BMI)研究组胺能核团参与异氟烷麻醉后记忆受损的神经环路机制,免疫印迹法观察组胺能神经通路对海马BDNF表达的调节作用。结果:异氟烷麻醉导致大鼠抑制性回避测试期的步入潜伏期缩短、海马BNDF表达降低;抑制性回避训练期前给予BMI,可增加麻醉大鼠在测试期的步入潜伏期及海马BNDF的表达。结论:中枢组胺能神经环路以及受该环路支配的BDNF信号通路可能为吸入麻醉后记忆受损的机制之一。