外泌体提取方法及鉴定分析研究进展

外泌体是活细胞分泌的纳米级胞外囊泡,广泛存在于生物体体液中。外泌体携带蛋白质、脂质、核酸等,可反映来源细胞的生理、病理情况,在细胞间物质交换和信息传递中发挥重要作用。外泌体作为肿瘤标志物,可用于肿瘤的诊断,进展及预后评估,还可作为纳米载体装载基因或药物到达靶器官,在临床治疗中有较好的应用前景。因此,外泌体分离提取、鉴定分析成为目前研究的热点。本研究就外泌体提取方法及鉴定分析的研究进展作一综述。     

血浆外泌体样小体免疫调节作用的初步研究

目的 鉴定血浆中外泌体(exosomes)样小体,研究其生物学特性及免疫调节作用.方法 利用多次超速离心结合膜超滤的方法,从健康供者血浆中分离纯化外泌体样小囊泡.采用透射电镜从形态学方面鉴定此囊泡为外泌体,用流式细胞术检测其生物学特性.通过磁珠分选从健康供者外周血单个核细胞中分选CD4+T细胞及CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(Treg),外泌体样小体与CD4+T细胞或Treg细胞共孵育,通过增殖和凋亡实验分析其免疫调节作用.采用流式细胞术检测外泌体样小体与Treg细胞共孵育后,Treg细胞中Wnt经典信号转导通路中磷酸化β-catenin的变化.结果 人血浆中的外泌体样小体与外泌体在形状和大小方面均相似,表达外泌体的标志性蛋白CD63和CD81,还表达MHC-Ⅱ类分子和共刺激分子CD86等.血浆外泌体样小体与CD4+T细胞孵育后能抑制CD4+T细胞的增殖,且呈剂量依赖性.血浆外泌体样小体与Treg细胞孵育后,Treg细胞的生存时间延长,培养14 d后与血浆外泌体样小体共孵育的Treg细胞存活率为57.07%,而对照Treg细胞存活率为30.91%.RT-PCR检测出Treg细胞有Frizzled受体FRZ2、3、4及LRP6 mRNA表达(相对灰度值分别为48.50、34.84、23.85、49.73),而血浆中外泌体样小体携带Wnt分子.与血浆外泌体孵育后,Treg细胞磷酸化β-catenin平均荧光强度降低(由20.06±2.99降低到12.41±2.08),抗凋亡基因bcl-2明显上调(相对灰度值由0.45上调到84.97).结论 血浆中存在外泌体样小体,表达免疫调节分子,并且体外能够抑制活化的CD4+T细胞增殖,通过Wnt信号转导途径延长Treg细胞生存时间.     

外泌体蛋白质组学分析在心血管疾病中应用的研究进展

外泌体是由各种类型细胞从晚期内质体分泌的大小为30～100 nm的细胞外囊泡结构。多项研究显示外泌体在多种人类疾病尤其是心血管疾病中发挥着重要的作用。近来的研究显示外泌体蛋白质组学分析的方法能够成功鉴定多种外泌体相关的蛋白质,并且有助于揭示其作用效应的新机制。该文将从分析评估不同蛋白质组学技术在鉴定外泌体蛋白中的应用并讨论蛋白组学分析外泌体在心血管疾病研究中的最新进展进行综述。     

人胚胎干细胞源性间充质干细胞来源的外泌体生物学特性的研究

目的探讨人胚胎干细胞源性间充质干细胞(human embryonic stem cell derived mesenchymal stem cells,hESCMSCs)来源的外泌体的生物学特性。方法将已注册的未分化、人类ESC H9细胞系诱导成间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),通过旋转超滤法从培养基中提取外泌体(exosomes)。流式细胞分析技术鉴定hESC-MSCs表面标志物,对间充质干细胞进行三系分化诱导,利用透射电镜、Izon qNano纳米粒子分析系统观察外泌体的形态和大小,Western blotting鉴定外泌体表面特异性标志物,观察hESC-MSCs-Exo对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cells,HMEC-1)增殖和迁移的影响。结果成功诱导形成hESC-MSCs,并收集纯化外泌体。诱导后的MSCs CD29、CD73、CD90、CD105、CD146、CD44表达阳性,CD34、CD133、CD45、HLA-DR-PE表达阴性;hESC-MSCs通过诱导完成成骨、成脂和成软骨分化;hESCMSCs-Exo为粒径在40~100nm的囊泡,表达特异性的表面标志物CD9、CD63和CD81;体外促进HMEC-1的增殖和迁移。结论 hESC-MSCs-Exo作为一种生物活性囊泡,能够促进血管内皮细胞的增殖和迁移;hESC-MSCs-Exo来源无限,可为临床组织损伤的修复治疗提供丰富的干细胞外泌体来源。     

外泌体分离和纯化方法研究进展

外泌体是由活细胞主动分泌的一种纳米级囊泡,内含蛋白质、核酸等生物活性物质,参与细胞间通讯,在肿瘤微环境调节、免疫识别、炎症反应等众多生理病理过程中发挥重要作用。作为一种运输载体,外泌体广泛存在于生物流体中,但由于其粒径小、内含物丰度低,能否获得高质量的外泌体成为后续研究成败的关键。虽然外泌体分离、纯化和鉴定方法日趋发展,但仍未达到成熟水平。本文就外泌体分离和纯化方法的研究进行综述,并比较不同方法的优缺点、适用范围及应用前景,以期为外泌体研究提供参考。     

骨髓间充质干细胞来源外泌体的微小RNA-22-3p参与抑制环磷酰胺诱导卵巢颗粒细胞损伤的机制研究

目的 分析骨髓间充质干细胞来源的外泌体微小RNA-22-3p(miR-22-3p)对卵巢早衰的影响。方法 选取接受体外受精或者第二代试管婴儿治疗的卵巢早衰患者以及接受同样治疗的因男性因素不孕的正常志愿者提供卵泡液;通过差速离心法分离骨髓间充质干细胞来源外泌体;分离外泌体的形态学、粒子大小以及标志蛋白通过透射电子显微镜、NanoSight LM10分析仪以及蛋白免疫印迹方法进行分析。将颗粒细胞经环磷酰胺(CTX)、外泌体、miR-22-3p模拟物以及相应对照处理,分为CTX组、Control组、外泌体孵育组、PBS处理组、CTX+miR-22-3p组、CTX+miR-NC组、CTX+Exosomes组以及CTX+PBS组;采用蛋白免疫印迹法和定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测基因表达水平;利用二苯基四氮唑溴盐(MTT)试剂以及流式分析仪检测细胞活力和凋亡。结果 提取的外泌体具有典型的杯状囊泡,外泌体标志蛋白簇状分化抗原63(CD63)和簇状分化抗原9(CD9)表达在所提取的细胞上清外泌体中,外泌体粒子大小为80～150 nm; miR-22-3p在卵巢早衰患者和CTX诱导的卵巢颗...     

人脐带间充质干细胞来源外泌体对Treg和TH17细胞的调节作用

目的:探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体对Treg和TH17细胞的影响。方法:应用超高速离心法获取脐带间充质干细胞培养上清来源的外泌体,通过电子显微镜检、Nanosight和Western blot方法对外泌体形态、粒径和所含蛋白进行鉴定。在外周血单个核细胞(PBMC)的培养体系中,以外泌体共培养为实验组,PBS组为对照组,应用流式细胞术检测实验组与对照组Treg及TH17细胞比例。结果:人脐带间充质干细胞来源的外泌体在电子显微镜下呈杯状圆盘形,平均粒径142 nm,表达外泌体标志性蛋白CD9及CD63。流式细胞术结果显示,外泌体组Treg(CD4~+CD25~+Foxp3~+)细胞比例明显高于无外泌体组(5.30±0.13%vs 3.38±0.09%)(P0.001),而外泌体组TH17(CD4~+IL17A~+)细胞比例明显低于无外泌体组(7.78±0.31%vs 11.33±0.24%)(P0.001)。结论:人脐带间充质干细胞来源的外泌体能通过上调Treg和下调TH17参与免疫调节,提示有望成为新的"非细胞"免疫调节制剂。     

胃癌患者胃液中外体的分离和鉴定

目的探讨胃癌患者胃液中是否存在外体(exosomes)。方法用离心超滤和蔗糖密度梯度超速离心法从患者胃液中分离并纯化exosomes。透射电镜检测其大小和形态,并用Nanosight纳米微粒分析系统进行验证;western blot检测exosomes标志性蛋白CD9、CD63的表达。结果透射电镜下观察分离的胃液exosomes呈椭圆形或碟状的囊泡结构,直径在40~100 nm,Nanosight纳米微粒分析系统证实其纯度为92.9%;western blot结果表明,胃液来源exosomes表达标志性蛋白CD9、CD63。结论胃癌患者的胃液中存在exosomes。     

一种新的纳米级细胞来源囊泡外泌体的特征

目的:外泌体(exosome)是由晚期内涵体产生的,直径为30～100nm的小囊泡。目前的研究热点是树突细胞和肿瘤细胞来源的外泌体在肿瘤免疫治疗方面的应用,已经有众多的研究证实外泌体具有良好抗肿瘤效果。因此,探讨外泌体在肿瘤免疫治疗方面的应用及进展对于发展新的肿瘤治疗策略具有重要意义。资料来源:应用计算机检索Pubmed数据库1987-01/2006-02有关外泌体肿瘤治疗的文章,检索词“exosomes,tumor”。资料选择:纳入标准:①有关外泌体生物来源、制备、生物功能的研究。②有关外泌体在肿瘤免疫治疗应用的研究。对资料进行初审,选取符合研究要求的有关文章找全文。资料提炼:共收集到92篇有关外泌体肿瘤免疫治疗的文章,选其中与树突状细胞及肿瘤细胞来源的外泌体相关研究28篇进行归纳总结。资料综合:①外泌体的生物来源:外泌体的前体是细胞内的多囊泡体,一般认为,具有多泡体的细胞均有分泌外泌体的潜能,而且对于外泌体表面特征性蛋白质的研究也证明了他们的多囊泡体来源。②外泌体的制备:通过对多种外泌体体制备方法的综合分析,将外泌体的制备方法分为3种:经典的制备方法,有抗体包被的磁珠分离方法,超滤及超速离心方法。③外泌体的成分:主要成分包括蛋白质和脂质。目前对于蛋白质的研究比较充分,并按照功能将其分为3类。④外泌体的功能:外泌体最早被发现的功能是在红细胞成熟过程中清除蛋白质,随着对外泌体研究的深入,其他免疫相关的功能也逐渐被发现,包括介导细胞间信号传递和介导免疫耐受等。结论:外泌体是近年来发现的一种纳米级细胞来源的囊泡,由于具备介导免疫信号传递的功能,外泌体在肿瘤免疫治疗中的应用研究也越来越多。因此,对外泌体进行全面深入的了解和研究,对于肿瘤的治疗具有重要意义。     

外泌体与胶质瘤关系的研究进展

外泌体是细胞分泌的纳米级胞外囊泡,胶质瘤相关外泌体参与胶质瘤发生发展,在胶质瘤的诊断、治疗中起重要作用,有望成为有效的胶质瘤诊断、治疗手段。     

Exosomal-like vesicles with immune-modulatory features are present in human plasma and can induce CD4+ T-cell apoptosis in vitro

BACKGROUND: Exosomes are small membrane vesicles that are secreted from many cell types into various body fluids. These vesicles are thought to play a role in cell–cell interactions. STUDY DESIGN AND METHODS: Vesicles were isolated from human plasma of healthy donors by differential ultracentrifugation and ultrafiltration. The vesicles were identified by transmission electron microscopy, and their biochemical characteristics were analyzed by Western blot and flow cytometry. The immune‐modulatory ability of exosomal‐like vesicles was examined by incubating them with CD4+ T cells for CD4+ T‐cell proliferation and apoptosis assays in vitro. RESULTS: Vesicles purified from human plasma displayed shapes and sizes similar to those of previously described exosomes and contained exosomes marker proteins CD63 and CD81. They also expressed molecules such as MHC Class II molecules, CD80, CD86, and the cell signal transduction molecules Wnt3a, Wnt5a, and FasL. Furthermore, functional analysis showed that allogeneic plasma exosomes restrained the survival of CD4+ T cells. Plasma exosomes can induce dose‐dependent suppression of proliferation of activated CD4+ T cells, with the strongest responses induced by 500 µg/mL exosomes in vitro. Antibodies against exosomes FasL can block the activity of exosomes on CD4+ T‐cell apoptosis. Moreover, three different concentrations of CD4+ T cells were inhibited by plasma exosomes and the suppressive function was not dependent on interleukin‐2. CONCLUSION: Exosomes present in human plasma contain immunity‐associated molecules and can induce CD4+ T‐cell apoptosis in vitro. Plasma exosomes have the capacity to influence immune responses.     

iPSC-MSC来源的外泌体对LPS刺激肺泡巨噬细胞产生炎性因子的影响

目的探讨i PSC-MSC来源的外泌体(exosome,Exo)对LPS刺激的肺泡巨噬细胞释放炎性因子的作用。方法采用旋转超滤法提纯i PSC-MSC外泌体,以无外泌体培养基培养肺泡巨噬细胞NR8383,分别给予Exo(50μg/ml)、LPS(50ng/ml)、LPS(50ng/ml)+Exo(50μg/ml)培养24h,以不含Exo和LPS培养为对照组,利用酶联免疫标记法(ELISA)检测各组上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白浓度。结果提取物经透射电镜观察为圆形或半圆形囊泡,直径40~100nm,表达Exo标志物CD9和CD63;LPS组上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度(435.38±36.31pg/ml、319.76±39.14pg/ml和408.33±43.44pg/ml)与空白对照组(37.48±8.75pg/ml、33.51±7.88pg/ml和37.73±8.46pg/ml)和Exo组(38.71±9.14pg/ml、32.05±6.81pg/ml和42.84±6.54pg/ml)比较显著上调(P0.01);LPS+Exo组TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度(369.30±32.74pg/ml、249.23±36.77pg/ml和328.91±46.45pg/ml)与LPS组相比,明显减少(P0.05);空白对照组与Exo组的TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度无显著性差异。结论成功富集Exo;i PSC-MSC来源的Exo可抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞表达炎性因子。     

肿瘤细胞RNA转染UBDC来源的exosomes抗肿瘤作用的研究

目的:探讨肿瘤细胞RNA转染人脐血树突状细胞分泌的exosomes对细胞毒T细胞特异性抗肿瘤作用的影响。方法:以人脐血单个核细胞为来源,应用干细胞因子、粒细胞集落刺激因子、白细胞介素4诱导和BGC823RNA转染形成成熟树突状细胞;收集树突状细胞培养上清,超速离心法分离exosomes,并用透射电镜进行鉴定;利用MTT比色分析法观察exosomes诱导T细胞增殖和细胞毒T细胞的杀瘤活性。结果:exosomes激活的细胞毒T细胞对BGC-823细胞的杀伤率分别为(38.13±9.67)%和(50.72±11.23)%,与未经exosomes激活的细胞毒T细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:经肿瘤RNA转染后的人脐血诱导的树突状细胞分泌的exosomes在体外能激活细胞毒T细胞对肿瘤细胞的杀伤活性,exosomes在非细胞性疫苗生物治疗方面有广阔前景。     

树突细胞分泌的exosomes生物学特性及功能的初步研究

目的建立树突细胞（DC）分泌的exosomes的制备方法，分析其生物学特性及其在抗肿瘤免疫中的功能。方法从正常人外周血单个核细胞中诱导未成熟DC（imDC），并使其负载K562细胞的抗原，然后用脂多糖（LPS）诱导DC成熟（mDC），通过超速离心结合膜超滤的方法分别提取imDC和mDC分泌的exosomes。检测exosomes的粒径并通过电子显微镜分析exosomes的形态，Western blot法检测exosomes的表面分子。比较mDC和imDC分泌的exosome8引起的针对K562抗原特异性T细胞的增殖、CD69的上调、细胞因子IFN．1的分泌及对肿瘤细胞的杀伤能力。结果制备的exosomes为碟状小囊泡，平均直径为72．3nm，表达CD80、CD86、HLA．DR、FasL、CD54和乳脂肪球-表皮生长因子-因子Ⅷ（MFG-E8）。与imDC相比，mDC分泌的exosomes CD80表达较高而MFG-E8的表达较低，并且在体外mDC分泌的exosomes能够更显著地引起特异性T细胞的增殖和免疫应答：在exosomes最适浓度下，T细胞增殖的吸光度值为O．50±0．01，激活T细胞的CD69上调，并且有（13．4±5．8）％T细胞扩增，（22．8±2．4）％的T细胞产生细胞因子IFN-1，对肿瘤细胞的杀伤率为（21．3±8．6）％。结论建立了简便、快速的exosomes分离纯化方法，所分离的exosomes具有引起抗肿瘤免疫应答的功能     

白血病细胞K562来源的外体对人脐带间充质干细胞作用的研究

目的探讨白血病细胞株(K562)来源的外体(exosomes)对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stemcells,hucMSCs)的影响。方法用离心超滤和蔗糖密度梯度超速离心法从K562细胞的培养上清液中分离并纯化exosomes。透射电子显微镜观察其形态;将exosomes与hucMSCs共育,细胞计数板法检测exosomes对hucMSCs增殖的影响;实时荧光定量PCR检测肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)相关基因FAP、α-SMA和IL-6的表达;western blot检测exosomes标志性蛋白CD9、CD81及CAFs相关蛋白FAP,α-SMA的表达。结果透射电镜下观察分离的exosomes呈椭圆或碟状的囊泡结构,直径在30～100 nm;细胞计数板法检测结果表明,不同浓度的exosomes均能抑制hucMSCs细胞增殖且呈剂量依赖性(P均<0.05);荧光定量PCR结果表明,不同浓度的exosomes作用于hucMSCs,其FAP、α-SMA和IL-6表达量明显增加(P均<0.05);western blot结果表明,exosomes可表达标志性蛋白CD9、CD81,且exosomes作用hucMSCs后FAP、α-SMA蛋白表达量增加。结论 K562细胞来源的exosomes能抑制hucMSCs增殖,且能诱导hucMSCs向CAFs的分化。     

人骨髓来源间充质干细胞分泌外泌体特性研究

本研究旨在探讨正常人骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells,BMMSC）分泌的外泌体（exosome）免疫调节功能及支持血管形成能力。收集第4—6代BMMSC上清液提取外泌体,应用透射电镜观察其形态,蛋白印迹法检测其表面特异标志CD9,bicinchoninicacid（BCA）方法定量检测外泌体分泌量;与正常人外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcells,PBMNC）作用72h后用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测PBMNC分泌的γ-干扰素（IFN-γ）;实时定量PCR检测外泌体内免疫相关microRNA表达;共聚焦显微镜观察外泌体与人脐带静脉内皮细胞（humanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC）的作用方式,与HUVEC共培养后观察其网状结构形成;应用裸鼠体内试验检测外泌体对血管形成能力的作用。结果表明,正常人骨髓间充质干细胞分泌的外泌体近似圆形,直径在40—160nm之间,表达表面标志CD9,其分泌量与接种细胞数呈线性关系,可抑制PBMNC分泌IFN-γ（P〈0．01）,内含有免疫相关microRNA如miR301、miR22和miR-let-7a等,能促进HUVEC网状结构形成和血管形成（P〈0．01）。结论：BMMSC分泌外泌体具有免疫调节功能与支持血管形成作用。     

Antileukaemia immunity: effect of exosomes against NB4 acute promyelocytic leukaemia cells

Exosomes are a family of bioactive vesicles and play important roles in antigen presentation. A recent phase I clinical trial with an exosome vaccine derived from colorectal cancer has shown minor clinical benefit. Exosomes derived from leukaemia cell lines have been little studied so, in the present study, the immunoprotective effect of exosomes secreted by NB4 cells, a human acute promyelocytic leukaemia cell line, was investigated. NB4-derived exosomes expressed the proteins retinoic acid receptor α and interstitial cell adhesion molecule 1 and contained heat shock protein 70, as demonstrated by transmission electron microscopy and Western blotting. Cytotoxicity assay demonstrated that cytotoxic T lymphocytes (CTLs) induced by dendritic cells (DCs) pulsed with exosomes were significantly more effective in killing target NB4 cells than CTLs induced by DCs alone. Exosome-based vaccines may be a promising means of prolonging disease-free survival in acute promyelocytic leukaemia patients after induction therapy.     

黄芪多糖对白血病患者树突状细胞来源的外泌体促成熟作用的研究

目的在黄芪多糖（APS）作用于骨髓单个核细胞（BMNc）来源的树突状细胞（DC）成熟过程中,研究其是否可以增加树突状细胞来源的外泌体（Dex）表面功能分子的表达水平。方法分离急性髓细胞白血病完全缓解期（AML—CR）患者BMNC,采用含有重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rHuGM-CSF）和重组人白细胞介素4（rhuIL-4）的RPMI1640完全培养基培养在37℃5％CO2细胞培养箱中培养至第7天。阳性对照组加常规量的脂多糖（LPS）,实验组用APS50、100、200g／L刺激DC,阴性对照组加相同体积的培养基,培养36小时后,分级分离法提取DC培养上清液中Dex,在透射电镜下观察Dex的形态,流式细胞仪检测Dex表面分子人白细胞抗原DR、CD80、CD86的表达水平。并对DC进行形态学和表面分子鉴定。结果APS组与对照组所诱生的Dex的形态学差异无统计学意义。中剂量APS组中Dex表面分子（CD80、CD86、HLA-DR）表达量较其他各组显著增高（P〈0．05）。结论APS可以增加急性髓细胞白血病患者BMNC来源的DC诱生的Dex表面分子的表达量。     

Astrocytes‐derived exosomes induce neuronal recovery after traumatic brain injury via delivering gap junction alpha 1‐20 k

Astrocytes are more resistant to ischemia and hypoxia in the acute phase of brain injury after traumatic brain injury (TBI). Previous study showed that gap junction alpha 1 (GJA1) phosphorylation can increase the survival of damaged astrocytes. The GJA1‐20 k expression in neurons co‐culture with astrocytes was positively correlated with exosomes uptake. This study aims to explore the effect of exogenous GJA1‐20 k carried by astrocyte‐derived exosomes on neurons apoptosis and mitochondrial function after TBI. Astrocytes were co‐cultured with the neuron with/without damage from air pressure. Exosomes were isolated, extracted from the culture medium by differential ultra‐centrifugation, and verified by electron microscopy. Immunofluorescence staining, tunnel, western blot were employed to detect exosomes marker CD60, apoptosis, and mitochondrial function related protein expression and GJA1‐20 k in cell culture. A rat model of hydraulic injury TBI was built, and exosomes was transferred. 2,3,5‐Triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining and immunohistochemistry staining of Nissl and microtubule associated protein 2 were used to detect the brain damage. A transwell stereo culture model of astrocytes and TBI‐like injured neuron was constructed. The exosomes derived from astrocytes promoted the recovery of damaged neuron by in vitro exosome treatment. Compared with GJA1‐20 k knockout exosome control group, GJA1‐20 k exosomes were uptaken by neuron and downregulated the apoptosis rate and upregulated mitochondrial function to promote neuronal recovery. Finally, the results were validated by TTC staining and damaged tissue sections of rat TBI model. This study contributes to a better understanding of the astrocyte‐neuron protection mechanism in TBI and provides a potential new target for the treatment of TBI.     

调节性DC分泌exosomes对急性GVHD抑制作用的初步研究

目的探讨调节性树突状细胞（rDC）分泌exosomes在移植物抗宿主病（GVHD）模型中的免疫抑制作用。方法用TGF-β1和IL-10诱导从C57BL／6小鼠骨髓来源产生rDC,负载DBA／2小鼠来源的抗原,应用流式检测rDC表型。采用超速离心结合膜超滤的方法分离纯化rDC分泌的exosomes,电镜检测exosomes形态。在以DBA／2小鼠为受鼠,C57BL／6小鼠为供鼠的急性GVHD模型中,尾静脉注射rDC分泌的exosomes,观察受鼠急性GVHD症状的改变。结果rDC的I—A／I—E（MHC一Ⅱ类分子）,共刺激分子CD80、CD86表达量均比未成熟树突状细胞（imDC）低,其分泌的exosomes为直径小于100nm的小囊泡。在小鼠急性GVHD模型中,同种异基因骨髓移植0、7、14d静脉注射rDex（15μg／只）治疗的小鼠,GVHD表现较对照组症状轻,生存期较长,两组相比差异有统计学意义（P〈0．05）;且较静脉注射rDex30pg／只的治疗效果好。结论rDC分泌的exosomes能够提高GVHD小鼠生存率,可应用于治疗急性GVHD。