微孔板速率法在丙氨酸氨基转移酶检测中的应用

目的研究微孔板速率法在丙氨酸氨基转移酶检测中的可行性和应用价值。方法取体检和筛查合格的8 327例无偿献血者血清标本和135例ALT异常献血者血清标本,用全自动生化分析仪法,微孔板速率法分别测定ALT活性。结果全自动生化分析仪法,微孔板速率法对8327例无偿献血者血清标本的检测,有显著相关性(r=0.945 1),结果无显著性差异(P>0.05)。两种方法检测135例阳性血样,微孔板速率法有漏检现象,但无统计学意义,结果差异无显著性,变异系数为6.32%,符合要求。结论微孔板速率法是一种理想的检测ALT活性的方法,与全自动生化分析仪法联合应用或除全自动生化分析仪外,首选微孔板速率法,可提高检测的准确性,减少输血传染病的风险。     

微板速率法检测ALT的探讨

速率法检测ALT已在血站系统使用[1],但全自动的生化分析仪尚未普及,一般多采用微板速率法检测ALT[2],但该法尚无统一的标准,各实验室的检测结果差异较大。尽管一些实验室采用带标准品的动力学法检测,但存在标准品不易获得或标准品检测的线性不能满足实验要求等缺陷,我们采用微板标准动力学法,并结合试剂和仪器的特点,探讨了微板速率法检测ALT的各项参数,现介绍如下。1对象和方法1.1对象郑州市无偿献血标本,卫生部临检中心ALT室间质控品。1.2试剂与仪器STAR全自动加样器,瑞士H am lton公司产;HT 3温控酶标仪,奥地利产。1.3方法参考试…     

胶乳免疫散射比浊法测定β2微球蛋白在全自动生化分析仪上的应用研究

目的探讨胶乳免疫散射比浊法检测血清及尿液中的β2微球蛋白在全自动生化分析仪上的应用。方法采用Hi-tachi7170S全自动生化分析仪,终点法测定,主波长540nm,副波长700nm,温度37℃,血清∶试剂1∶试剂2为:3μl∶270μl∶30μl,并与放射免疫方法进行对比。结果对比试验:取50份血清及30份尿液标本分别用全自动生化分析仪胶乳凝集比浊法和放免法进行测定,两法差异无显著性。精密度实验:血清批内CV值为2.3%,批间3.4%;尿液批内CV值2.5%,批间4.4%。回收实验:回收率在96%~103%之间,平均99.6%。线性测定:该法线性范围为0~18mg/L。结论应用胶乳免疫散射比浊法检测血清及尿液β2微球蛋白在全自动生化分析仪测定,其反应的线性、准确性、精密度良好,方法简便稳定,适用于临床应用。     

佛山市南海区无偿献血者ALT不合格结果分析

丙氨酸氨基转移酶（ALT）是临床评价肝功能的指标之一，同时也是我国血站基本标准中献血者健康检查标准之一。ALT的检测方法目前在血站系统常用的方法主要有赖氏方、连续监测法、改良的微板速率法和快速干式生化法等。本站采用全自动生化分析仪，应用连续监测法做ALT的检测。针对ALT不合格及HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和梅毒抗体（TP）相关检测指标情况进行统计分析。     

应用NCCLS EP5-A文件评价日立7600全自动生化分析仪的精密度性能

目的应用NCCLS EP5-A文件对日立7600全自动生化分析仪的精密度性能进行评价,以确定其是否满足临床的需要。方法在全自动生化分析仪上,根据NCCLS EP5-A文件,用稳定的实验样品分别对采用速率法、终点法和免疫散射比浊法检测的项目进行精密度试验,对其批内标准差（Swr）、批间标准差（Srr）、天间标准差（Sdd）和总不精密度（S1）进行评价。结果检测系统检测常规生化项目的批内标准差小于美国的临床实验室室间质量评估允许误差的1／4,天间标准差小于该允许误差的1／3。说明由实验评估的总不精密度均可接受。结论精密度既是临床检验的方法评价,也是检测系统性能评价的重要指标之一。NCCLS EP5-A精密度性能评价方法能够较为严密地反映出自动生化分析仪的长期使用性能是否能符合日常常规工作的质量要求。     

献血者采血前ALT初筛检测可行性探讨

目的　探讨干化学仪用于无偿献血者采血前ALT检测的实用性。方法　用Reflotron快速全自动生化分析仪、ALT干化学试剂条检测 5 91份全血标本 ,同时采用微量速率法、BACKMAN自动生化分析仪作平行血清实验。结果　 3种检测方法所得结果符合率达 95 .9%。结论　Reflotron快速全自动生化分析仪是目前较为先进的干化学测定仪 ,用于无偿献血采血前的ALT及临床门诊或急诊病人生化指标的检测 ,快速 ,简便     

两种方法检测ALT的比较

目前，随着全自动加样系统在血站的应用，ALT的测定多采用微板速率法。但其在实验温度、反应时间和读板条件等方面所规定的实验检测状态受到手工操作的限制，不能达到全自动生化仪所具备的良好反应环境．使实验结果的重复性、特异性差，影响了检测的准确性。为寻求一个稳定可靠的批量测定ALT的检测方法，笔者尝试应用微板赖     

应用CLSI EP5-A2文件评价生化检测系统的精密度性能

目的应用CLSIEP5-A2文件对生化检测系统检测的精密度性能进行评价,以确定其是否满足临床的需要。方法在全自动生化分析仪上,根据CLSIEP5-A2文件,用稳定的高低值实验样品对采用速率法和终点法检测的项目进行精密度试验,对其批内标准差(S批内)、批间标准差(S批间)、天间标准差(S天间)和总不精密度(S总)进行评价。结果检测系统检测常规生化项目的批内标准差为美国的临床实验室室间质量评估允许误差的1/4,天间标准差应为该允许误差的1/3,且小于厂商声明的精密度性能指标,两者差异无统计学意义(P0.05)。说明由实验估计的总不精密度均可接受。结论精密度既是临床检验的方法评价,也是检测系统性能评价的重要指标之一。CLSIEP5-A2精密度性能评价方法能够较为严密地反映出自动生化分析仪的长期使用性能是否能符合日常常规工作的质量要求。     

免疫透射比浊法检测血清铁蛋白的性能评价

目的对免疫透射比浊法定量测定血清铁蛋白(FER)进行方法学评价。方法参照美国临床和实验室标准化协会推荐的评价方法,对免疫透射比浊法测定血清FER的精密度、线性范围、比对试验、回收试验、干扰试验、参考范围验证等进行评价。结果免疫透射比浊法测定血清FER的批内、批间变异系数均5.0%,精密度良好;免疫透射比浊法测定血清FER水平在10～1 000ng/mL,检测线性良好;免疫透射比浊法测定血清FER与化学发光法比较,结果相关性良好(r2=0.998 1),检测结果差异无统计学意义(P0.05);回收率为96.02%～102.74%;当标本中BIL≤498.40μmol/L、TG≤9.90mmol/L、Hb≤500mg/dL时,对免疫透射比浊法无干扰,参考范围验证通过。结论免疫透射比浊法用于定量检测血清FER,精密度良好,线性范围广,结果准确,干扰因素小,操作简单,能直接在全自动生化分析仪上使用,满足临床检测需求。     

两种试剂单一试剂在7020型生化分析仪上的应用

目的评价丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）单试剂在7020型生化分析仪上的应用效果。方法应用单、双两种试剂同时检测30例同一批临床标本,并做线性回归分析;应用RANDOX定值质控血清做精密度检测。结果单试剂检测结果比双试剂检测结果略偏高,经统计学分析差别无统计学意义;其线性、稳定性、精密度与常规双试剂差别不大,单、双试剂检测结果在一定的线性范围内其相关性良好。结论ALT、AST单试剂经校准后,在7020型生化分析仪上可以常规应用,节约试剂位,可多开展检测项目。     

丙氨酸氨基转移酶检测方法确认

目的对献血者的丙氨酸氨基转移酶(ALT)采用速率法进行检测,并对这种方法进行性能验证,证明其满足ISO15189的要求。方法按照CNSA-CL02:2012《医学实验室质量和能力认可准则》及《血站技术操作规程》(2012版)的要求对检测系统的精密度、正确度、灵敏度、可报告范围、生物学参考区间以及测量不确定度进行验证。结果 ALT质控血清和两个浓度献血者标本检测20次和20d的批内不精密度5.0%,批间不精密度6.7%;正确度估计通过2014年的原卫生部室间质评结果分析和校准品结果分析,相对偏倚均小于1/2CLIA′88允许总误差;可报告范围用直线回归得到回归方程Y=0.995 1 X-5.618 4,r=0.999 7(R2=0.999 4),该检测范围内结果准确;生物学参考区间为0.0~32.7U/L;测量不确定度为(74.90±3.32)U/L。结论 ALT检测方法的性能指标均符合ISO15189的预期要求,该方法可以作为实验室的血液筛查检测方法。     

CentaurXP全自动化学发光系统检测胰岛素及C肽性能验证

目的对西门子公司生产的ADVIA Centaur XP全自动化学发光分析仪定量检测血清胰岛素(IRI)、C肽(CpS)进行性能验证。方法检测40份体检健康者血液标本,计算IRI、CpS的不精密度及偏倚;验证IRI的线性范围;验证IRI和CpS的参考范围。结果 IRI及CpS批内变异系数(CV)6.25%、批间CV8.33%;检测偏倚均小于12.5%;IRI的线性范围0.50~307.76mIU/L;40份血清检测结果显示IRI全部在厂家提供的参考范围内,CpS有2份不在厂家提供的参考范围内,符合相关要求。结论 ADVIA Centaur XP全自动化学发光系统检测IRI、CpS主要性能指标符合要求,可用于临床检测。     

Enzyme immunosorbent assay of prolactin with penicillinase as label

This competitive, rapid, and sensitive enzyme immunosorbent assay for measuring human prolactin in plasma involves penicillinase (EC 3.5.2.6) as label. Microtiter plate wells coated with goat anti-rabbit gamma globulin are filled with antibody to prolactin and plasma sample or reference prolactin and incubated with penicillinase-labeled prolactin for 1 h at 37 degrees C. The enzyme activity of the bound complex is then measured. The assay is as sensitive as radioimmunoassay, the detection limit being 2.5 ng of prolactin per milliliter of plasma. The plasma prolactin values obtained by enzyme immunoassay correlated well with those determined by radioimmunoassay: r = 0.98, slope = 1.00, intercept = 1.11 ng/mL (n = 53).     

UW2000全自动尿液分析工作站性能评价

目的评价重庆市天海公司生产的UW2000全自动尿液工作站性能。方法采用UW2000全自动尿液工作站对尿液有形成分[红细胞(RBC)、白细胞(WBC)]的批内、批间精密度,线性,携带污染率,准确度进行评价;同时对尿液干化学成分的批内、批间精密度,准确度进行评价。结果尿液有形成分高、中、低值新鲜标本批内精密度RBC为15.6%、6.8%、20.3%,WBC为16.4%、10.5%、24.6%,中、低值质控批间精密度RBC为12.8%、13.2%,WBC为15.3%、22.8%;RBC线性范围为88~19 513个/μL,相关系数为0.991,WBC线性范围为7~8 254个/μL,相关系数为0.997;RBC及WBC携带污染率分别为0.00%、0.06%;RBC、WBC仪器检测与手工检测相关系数分别为0.992、0.995。尿液干化学成分高、低质控品批内、批间精密度符合率,准确度基本均在仪器要求范围内。结论 UW2000全自动尿液分析仪工作站大大节约了人力,降低了检测成本,提高了检测速度,经验证的项目结果可靠,能满足一般医院的工作需求,具有较高的临床应用价值。     

TECAN RMP 150型全自动酶免仪应用评价

目的 评价TECAN RMP 150全自动酶免疫仪的性能及使用两年后加样系统的稳定性.方法 用称量法测定加样误差和洗板残液量;用甲基橙对比色系统进行零点飘移、通道差、精密度、线性等测定;用高浓度的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)了解仪器的交叉污染情况;35份临床标本经该仪器和Abbott AXSYM仪测定乙肝五项指标,测定结果进行比较.结果 经实验该仪器的各项指标均符合设计要求,两仪器对照试验乙肝五项的符合率为96.75%.结论 该仪器使用两年后性能仍稳定,能满足临床实验室工作需要.     

化学发光酶免疫分析法及ELISA检测抗-HCV的结果比较

目的对比化学发光酶免疫分析法及酶联免疫吸附试验(ELISA)用于丙型肝炎抗体检测的效果。方法选取丙型肝炎患者140例,抽取血液标本后分别进行丙型肝炎病毒(HCV)相关抗体的化学发光酶免疫分析法及ELISA法检测。结果化学发光酶免疫分析法检出抗-HCV阳性的检出率为98.6%,高于ELISA法的检出率(94.3%),差异有统计学意义(P0.05)。化学发光酶免疫分析法对于抗AMA-M2抗体、抗3E抗体、抗SP100抗体、抗PML抗体、抗GP210抗体的检测阳性率分别为80.0%、73.6%、37.9%、55.7%和47.9%,而ELISA法检测结果分别为12.9%、12.9%、13.6%、10.7%和6.4%,差异均有统计学意义(P0.05)。结论相对于ELISA法,化学发光酶免疫分析法在丙型肝炎中的应用有较高的检出阳性率,对于相关抗体检测有较高的敏感性,值得推广应用。     

3种酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒前S1及S2抗原的比较

目的比较酶联免疫吸附试验(ELISA)的3种不同检测方式,选择最佳检测方式,用于临床诊疗。方法用Addcare ELISA800全自动酶免仪、TECAN freedom evolyzer全自动酶免分析系统、手工ELISA法等3种方式对质控品标本和患者血清标本进行乙型肝炎病毒前S1抗原(Pre-S1Ag)和前S2抗原(Pre-S2Ag)检测,并采用统计学方法对其结果进行分析。结果 3种方式检测Pre-S1Ag的批内精密度分别为4.73%、5.38%、11.87%,检测Pre-S2Ag的批内精密度分别为4.91%、5.04%、11.75%;检测Pre-S1Ag的批间精密度分别为6.63%、7.90%、13.26%,检测Pre-S2Ag的批间精密度分别为6.74%、7.81%、12.59%。灵敏度均为100.00%。结论 3种方法有非常好的一致性,均能较好地检测Pre-S1Ag和Pre-S2Ag,Addcare ELISA800全自动酶免仪精密度最好,可进一步提升临床检验质量。     

ABO正反定血型检测系统的创建与应用

目的 建立适应血站实验室批量快速检测献血员血型的方法.方法 血站血液检测实验室利用现有的全自动加样机、酶标仪、离心机等设备,结合血站大批量标本血型检测特点,通过不断摸索,在U型微孔板上用普通血型正、反血型定型试剂创建检测系统.结果 实现了ABO正、反血型检测的标本加样自动化,标本处理批量化,结果判定标准化,数据传输网络化,结果文件的书面化,大大提高了血型检测的正确性和工作效率,最大限度的保障了临床用血者的生命安全.结论 利用目前实验室现有设备,经过反复试验探索所建立的ABO血型正反定检测方法简便快速,结果可靠.     

全自动血型分析仪与微板法应用于献血者不规则抗体筛查的比较分析

目的比较分析Beckman Coulter PK7300全自动血型分析仪与微板法应用于献血者不规则抗体筛查的效果。方法应用全自动血型分析仪法和STAR加样微板手工比色法检测献血者O细胞(Oc),Oc凝集者送血型室进一步鉴定。结果在12 337份献血者标本中,全自动血型分析仪法与STAR加样微板手工比色法对Oc检出率分别为0.19%和0.15%。微板法检出的1例冷自身抗体,全自动血型分析仪法结果为阴性。全自动血型分析仪法检出的1例抗-E、1例抗-Leb、2例抗-P1、1例冷自身抗体,微板法均未检出凝集。结论全自动血型分析仪用于不规则抗体筛查的灵敏度优于微板法,更易发现盐水介质凝集试验阳性的抗体,在保证临床用血安全方面较微板法具有更广阔的应用空间。     

A microtiter plate assay for measurement of serum alanine aminotransferase in blood donors

BACKGROUND: Alanine aminotransferase (ALT) testing in blood donors is required in many countries as a surrogate test for viral hepatitis. Current automated ALT assays do not fulfill some operational requirements of blood banks. STUDY DESIGN AND METHODS: The standard ALT measurement method of the International Federation of Clinical Chemistry was adapted to the 96-well microtiter plate to obtain optimal conditions. The method was compared with a reference biochemical method using an analyzer on 251 serum samples. RESULTS: The analytical variability was minimal (2.3% for an ALT level of 59 IU/L and 3.6% for an ALT level of 33 IU/L) after a total analysis time of 8 minutes and a time of 7 minutes before the first reading. With these measures, a linear standard curve was obtained in the range of 10 to 130 IU per L.A computerized validation procedure allowed rejection of samples with high ALT levels. Comparison with the analyzer gave a correlation coefficient, r = 0.935. The method proved to be efficient and time- saving in routine use over an 8-month period. CONCLUSION: The microtiter plate ALT assay is helpful in allowing the simultaneous distribution of ALT and immunoenzymatic assays. It provides accurate results and a minimal risk of false-negative results.