首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 328 毫秒
1.
目的:细胞免疫治疗的着眼点不仅是杀伤局部异常生长的肿瘤细胞,还要应对潜在转化细胞的影响,为此观察3种不同遗传背景NK细胞对转化细胞杀伤效应的差异.方法:实验于2007-03/09在南方医科大学珠江医院血液科完成.①材料:SPF级8~10周龄的C57BL/6(H-2b)小鼠10只、Balb/C(H-2d)d,鼠10只、Balb/C(H-2d)×C57BL/6(H-2b)杂交F1代(H-2d/b)小鼠10只,均购于南方医科大学实验动物中心,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.YAC-1细胞株由本室冻存;C57BL/6鼠源性红白血病细胞株FBL-3由周健博士惠赠.②实验方法:脱臼处死3种不同遗传背景小鼠,无菌取脾,密度梯度离心法常规分离脾单个核细胞,免疫磁珠细胞阳性分选得到3种不同遗传背景小鼠的NK细胞,即全相合C57BL/6组、不相合Balb/C组、半相合F1代组,以其作为效应细胞.将培养至对数生长期的YAC-1、FBL-3细胞株以及ConA刺激的C57BL/6小鼠脾细胞作为靶细胞.相对于靶细胞,不相合Balb/C组与半相合F1代组为同种异体反应性NK细胞,全相合C57BL/6组为自体NK细胞.③实验评估:通过流式细胞术检测CD49b 的表达鉴定NK细胞纯度.调整靶细胞YAC-1密度为2×108 L-1,按效靶比5:1,10:1,20:1,40:1以乳酸脱氧酶释放法测定NK细胞的杀伤活性.调整靶细胞FBL-3和ConA刺激的C57BL/6小鼠脾细胞密度均为2×108 L-1,按效靶比20:1,40:1同法测定NK细胞的杀伤活性.结果:①NK细胞的纯度鉴定:CIM9b 细胞率全相合C57BL/6组为(90.93±2.46)%,不相合Balb/C组为(89.50 1.04)%,半相合F1代组为(91.93±2.01)%,分选所得NK细胞的纯度满足实验要求.②NK细胞对YAC-1细胞的杀伤活性:3组NK细胞的杀伤活性均随效靶比5:1,10:1,20:1.40:1的升高而增强:同一效靶比时3组NK细胞对YAC-1的杀伤活性差异无显著性意义(F=0.557.P=0.600.F=0.550,P=0.604:F=0.503,P=0.628.F=0.946,P=0.439)③NK细胞对FBL-3和ConA刺激的C57BL/6小鼠脾细胞的杀伤效应:效靶比为20:1,40:1时,半相合F1代组与不相合Balb/C组对FBIL-3和ConA刺激的C57BL/6小鼠脾细胞的杀伤效应均明显高于全相合C57BL/6组(P均=0.000).结论:NK细胞的遗传背景能够影响其对靶细胞的杀伤活性,同种异体反应性NK细胞的杀伤效应强于自体NK细胞,为NK细胞介导的细胞免疫治疗提供实验依据.  相似文献   

2.
背景:中药3'-甲异靛玉红及,靛玉红衍生物在抗肿瘤的同时对机体正常免疫细胞影响的报道查及较少.目的:观察3'-甲异靛玉红对C57BL/6小鼠胸腺、脾淋巴细胞增殖的影响.设计、时间及地点:随机分组细胞病理学观察实验,于2007-08/2008-01在南方医科大学珠江医院完成.材料:实验动物为C57BL/6小鼠,雄性,6~8周龄,体质量(20±2)g.方法:取C57BL/6小鼠胸腺、脾组织研磨过滤为单细胞悬液,应用5,10,15,20,25 μmol/L甲异靛玉红处理C57BL/6小鼠胸腺和脾细胞.以未经仟何药物处理的C57BL/6小鼠作为空白对照,以给予刀豆蛋白A处理的C57BL/6小鼠为阳性对照.主要观察指标:①MTT法测定C57BL/6小鼠脾和胸腺淋巴细胞的增殖.②ELISA法测定培养上清『{I白细胞介素12活性.⑨流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及死亡率,细胞内活性氧浓度.④RT.PCR法检测细胞bcl-2和cdk2 mRNA水平.⑤荧光显微镜检测细胞Bcl.2、Bax和CDK2蛋白表达率.结果:15,20,25 μmol/L甲异靛玉红作用24h均町明显抑制C57BL/6小鼠胸腺、脾淋巴细胞增殖(P<0.05),J{:呈量效、时效依赖性.各浓度的甲异靛玉红对C57BI.J6小鼠胸腺和脾细胞各时间点分泌[J细胞介素12的功能较对照组明显减低(P<0.05).15 la mol/L的3'一甲异靛玉红可导致C57BL拍小鼠胸腺、脾淋巴细胞凋亡相关蛋白bcl-2和细胞周期蛋白cdk2 mRNA表达水平均减低,Bcl-2的蛋白表达水平降低,CDK蛋白表达减低,Bax表达水平升高,Bcl-2/Bax比例明显下降,肩动细胞凋亡.15 μmol/L的3'-甲异靛玉红将C57BL/6小鼠胸腺、脾淋巴细胞阻遏于G2/M期,细胞内活性氧水平呈量效、时效依赖性升高.结论:一定浓度范围甲异靛玉红可逆性抑制C57BL/6小鼠体外培养的脾及胸腺淋巴细胞增殖,同时抑制白细胞介素12的分泌,并启动细胞凋亡.  相似文献   

3.
本研究旨在探讨同种反应性自然杀伤(alloNK)细胞对小鼠单倍体相合骨髓移植(BMT)后免疫重建的影响。以(C57BL/6×BALB/c)BCF1(H-2d/b)为供鼠,BALB/c(H-2d)为受鼠,建立小鼠单倍体相合BMT模型,根据回输物不同将实验分为单纯BMT组、非同种反应性NK(non-alloNK)细胞组、alloNK细胞组。移植后2个月以胸腺组织病理、脾脏NK细胞比例、脾细胞增殖反应及脾细胞培养上清中细胞因子浓度等指标评价alloNK细胞对免疫重建的影响。结果显示,光学显微镜下各组小鼠胸腺组织病理学表现无明显差别;移植后2个月non-alloNK组小鼠脾脏NK细胞比例显著低于单纯BMT组(P<0.05);各组小鼠脾细胞体外增殖反应无明显差别;alloNK组小鼠脾细胞培养24和48 h时培养上清中干扰素-γ的浓度均显著低于其他2组(P<0.05),而各组之间白介素4水平无明显差别。结论:alloNK细胞用于单倍体BMT小鼠不损伤胸腺的结构,可能诱导Th2免疫反应的偏移。  相似文献   

4.
背景:中药3’-甲异靛玉红及,靛玉红衍生物在抗肿瘤的同时对机体正常免疫细胞影响的报道查及较少。 目的:观察3’-甲异靛玉红对C57BL/6小鼠胸腺、脾淋巴细胞增殖的影响。 设计、时间及地点:随机分组细胞病理学观察实验,于2007-08/2008-01在南方医科大学珠江医院完成。 材料:实验动物为C57BL/6小鼠,雄性,6-8周龄,体质量(204-2)g。 方法:取C57BL/6小鼠胸腺、脾组织研磨过滤为单细胞悬液,应用5,10,15,20,25μmol/L甲异靛玉红处理C57BL托小鼠胸腺和脾细胞。以未经任何药物处理的C57BL/6小鼠作为空白对照,以给予刀豆蛋白A处理的C57BL/6小鼠为阳性对照。 主要观察指标:①MTT法测定C57BL/6小鼠脾和胸腺淋巴细胞的增殖。②ELISA法测定培养上清中自细胞介素12活性。③流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及死亡率,细胞内活性氧浓度。④RT-PCR法检测细胞bcl-2和cdk2 mRNA水平。⑤荧光显微镜检测细胞Bcl.2、Bax和CDK2蛋白表达率。结果:15,20,25μmol/L甲异靛玉红作用24h均可明显抑制C57BL/6小鼠胸腺、脾淋巴细胞增殖(P〈0.05),并呈量效、时效依赖性。各浓度的甲异靛玉红对C57BL/6小鼠胸腺和脾细胞各时间点分泌白细胞介素12的功能较对照组明显减低(P〈0.05)。15μmol/L的3’-甲异靛玉红可导致C57BL/6小鼠胸腺、脾淋巴细胞凋亡相关蛋白bcl-2和细胞周期蛋白cdk2 mRNA表达水平均减低,Bcl-2的蛋白表达水平降低,CDK蛋白表达减低,Bax表达水平升高,Bcl-2/Bax比例明显下降,启动细胞凋亡。15μmol/L的3’-甲异靛玉红将C57BL/6小鼠胸腺、脾淋巴细胞阻遏于G2/M期,细胞内活性氧水平呈量效、时效依赖性升高。 结论:一定浓度范围甲异靛玉红可逆性抑制C57BL/6小鼠体外培养的脾及胸腺淋巴细胞增殖,同时抑制白细胞介素12的分泌,并启动细胞凋亡。  相似文献   

5.
目的 探讨过继免疫高强度聚焦超声(HIFU)治疗H22移植性肝癌后活化的T淋巴细胞在荷瘤鼠肿瘤局部的功能变化.方法 32只C57BL/6J近交系正常小鼠在H22肝癌移植后7天分别接受HIFU治疗(HIFU组,n=16)和HIFU假照治疗(假照组,n=16).治疗后14天,分离两组荷瘤鼠和正常C57BL/6J鼠(对照组,n=16)的脾淋巴细胞.以乳酸脱氢酶释放法测定各组小鼠脾淋巴细胞对H22细胞体外杀伤活性;另选30只C57BL/6J H22荷瘤鼠随机分为过继免疫HIFU组、过继免疫HIFU假照组和过继免疫对照组,分别静脉注射之前提取的淋巴细胞.输注7天后处死小鼠,手术取出肿瘤组织块,制成单细胞悬液,酶联免疫斑点法检测肿瘤局部T淋巴细胞的功能变化.结果 与假照组和对照组比较,HIFU组对H22细胞杀伤活性明显增强,差异有统计学意义(P均<0.01);淋巴细胞过继免疫治疗后7天,与过继免疫假照组和过继免疫对照组比较,过继免疫HIFU组能分泌INF-γ淋巴细胞数量明显增加,差异有统计学意义(P均<0.01).结论 HIFU治疗H22移植性肝癌后,活化的T淋巴细胞在肿瘤局部发挥特异性抗肿瘤效应.  相似文献   

6.
目的 探讨经K562细胞-树突细胞(DC)融合瘤苗刺激的脐血源性细胞因子诱导的杀伤(CIK)/自然杀伤(NK)细胞在荷瘤NOD/SCID小鼠体内的杀伤效能及其安全性.方法 通过不同细胞因子的组合分别诱导脐血单个核细胞(MNC)成为DC和CIK/NK细胞,通过聚乙二醇(PEG)将灭活K562细胞与DC融合形成K562-DC融合瘤苗.以10:1比例在CIK/NK细胞培养体系中加入K562-DC融合瘤苗,制备K562-DC融合瘤苗刺激的CIK/NK细胞.小鼠均经尾静脉接种K562细胞1×106诱导荷瘤鼠;于接种肿瘤细胞后24 h按不同分组分别经尾静脉输注K562-DC融合瘤苗刺激的CIK/NK细胞1×107、CIK/NK细胞1×107,同时设相应的非荷瘤鼠对照.比较各组小鼠的生存率、存活时间;用流式细胞术检测小鼠外周血、肝、肺组织中人CD13+细胞和外周血人CD56+细胞.结果 在接种1×106K562细胞后未经处理的小鼠39 d内全部死亡,8只鼠中肉眼可见瘤块的小鼠5只,其中位于肝脏的4只、脾脏的1只.接种K562细胞后接受K562-DC瘤苗刺激的CIK/NK细胞治疗的8只小鼠第65天时死亡1只,抗瘤有效率为87.5%;接受CIK/NK细胞治疗小鼠死亡2只,时间分别为接种K562细胞后第56天及第62天,抗瘤有效率为75.0%,均未发现肉眼可见瘤块.该两组小鼠存活时间分别为(69.4±1.8)d、(67.2±5.3)d,两组间差异无统计学意义(P>0.05),均高于未予治疗的荷瘤对照组[(30.4±4.6)d](P<0.01),荷瘤后接受K562-DC瘤苗刺激的和未经瘤苗刺激的CIK/NK细胞治疗的两组其余小鼠存活均超过70 d.经CIK/NK细胞治疗的两组存活小鼠外周血,肝、肺组织中人CD13+细胞率差异无统计学意义,均显著低于荷瘤未治疗组(P<0.01),而治疗的两组存活小鼠外周血人CD56+细胞率与输注不同CIK/NK细胞的非荷瘤对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论 经过灭活肿瘤细胞预孵育的脐血源性CIK/NK细胞接种在动物体内具有抗瘤活性,无致瘤性.  相似文献   

7.
荧光染色技术检测细胞杀伤能力   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酶(CFSE)及碘化丙锭(propidium iodide,PI)两种荧光染料标记方法检测小鼠脾细胞杀伤能力,并探讨其应用价值。方法:采用CFSE标记靶细胞,PI标记被杀伤细胞,并通过直接杀伤实验和双向杀伤实验验证方法可行性。分离各组C57BL/6小鼠脾细胞作为攻击细胞,Balb/c小鼠脾细胞经5μmol/LCFSE染色后作为靶细胞。将攻击细胞与靶细胞按20∶1的比例混合,培养6h后用PI染色10min,经流式细胞术分析。比较Balb/c小鼠脾细胞致敏C57BL/6小鼠组(免疫组)和地塞米松处理组的脾细胞杀伤能力。结果:CFSE及PI两种荧光染色细胞可以在流式细胞仪上明显区分。CFSE和PI双阳性细胞是被杀伤的靶细胞。免疫组与地塞米松处理组的杀伤能力差异存在显著性(P<0.05)。结论:CFSE与PI两种荧光染料染色的杀伤实验方法操作简单、方便,有良好的应用价值。  相似文献   

8.
目的 探讨高强度超声治疗对患宫颈癌 U14小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞毒性影响。方法 采用四唑盐比色法 (MTT法 )及双色流式细胞技术检测了高强度超声 (HIU)治疗组 ,手术治疗组 ,患瘤对照组及正常对照组小鼠脾淋巴细胞的增殖功能及细胞毒性。结果 HIU治疗组小鼠脾淋巴细胞增殖活性较手术组、患瘤对照组及正常对照组增高 (P<0 .0 5 ) ,手术组及正常对照组较患瘤对照组小鼠脾淋巴细胞增殖活性增强 (P<0 .0 5 ) ,HIU治疗组脾淋巴细胞对同源宫颈癌 U14细胞有较强的杀伤活性 ,与手术、患瘤及正常对照组比较差异明显 (P<0 .0 5 )。结论 HIU治疗患宫颈癌 U14小鼠后 ,原位埋植的固化肿瘤细胞具有同源肿瘤的抗原性 ,能够激活小鼠脾淋巴细胞 ,发挥抗肿瘤免疫功能 ,起到“HIU原位固化瘤疫苗”的作用  相似文献   

9.
目的 探讨IL-2和IL-15激活的供者自然杀伤(NK)细胞在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)中减轻移植物抗宿主病(GVHD)发挥移植物抗白血病效应方面的作用.方法 采用免疫磁珠分选小鼠脾NK细胞,采用添加IL-2和IL-15的培养基扩增NK细胞并测定NK细胞杀伤活力.C57BL/6小鼠作为供鼠,BALB/c小鼠作为受鼠,部分小鼠移植前8天静脉接种EL9611白血病细胞.异基因移植小鼠输注骨髓细胞5×106 和脾细胞5 × 106.NK细胞治疗组输注骨髓细胞和脾细胞各5×106 以及激活的NK细胞1 × 107,并且给予腹腔注射IL-2和IL-15.移植后观察GVHD发生、生存期、嵌合度、免疫重建.结果 分选NK细胞纯度为95.7%~97.1%.培养后NK细胞杀伤活力较静息时增加3倍.单纯异基因骨髓细胞输注组小鼠未见GVHD发生,异基因骨髓及脾细胞移植对照组移植后1周起开始出现GVHD表现.实验组小鼠发生GVHD的严重程度明显低于脾细胞输注小鼠(P<0.05).单纯全身照射预处理小鼠生存期9.5~14.0 d.白血病模型中对照组移植后100 d生存率10%,其余死于白血病;实验组80%生存期超过100 d,实验组生存期明显长于对照组(P<0.01).实验组小鼠移植后2周外周血NK细胞占4.8%,对照组外周血NK细胞占2.8%,实验组NK细胞恢复早于对照组(P<0.05).实验组TRBV基因重建比对照组快,而且TRBV家族基因表达数比对照组多,对照组小鼠多见单克隆及寡克隆表达.结论 IL-2和IL-15在体外可以有效促进NK细胞增殖与激活.allo-HSCT时给予激活的供者NK细胞输注以及相关细胞因子处理可以促进免疫重建、减轻GVHD发生、降低白血病复发.  相似文献   

10.
目的探讨中药龙葵的有效提取物龙葵80%乙醇浸膏对Lewis肺癌小鼠瘤体及自发性肺转移灶的作用和机制,为临床运用龙葵治疗肺癌,尤其是为防止中晚期肺癌转移提供科学的实验依据。方法选取C57BL/6J小鼠60只,分别接种Lewis肺癌细胞株制成局灶性肿瘤模型。造模后随机分成6组,每组10只,分别为荷瘤模型空白对照组、化疗组、龙葵高浓度组、龙葵中浓度组、龙葵低浓度组、化疗加龙葵中浓度组。观察比较各组荷瘤小鼠的一般状况,造模第15天,脱颈椎处死小鼠,称取胸腺重、脾重、瘤重,计算胸腺指数、脾脏指数、抑瘤率,计数肺转移结节数目并计算肺转移抑制率。结果龙葵80%乙醇浸膏能够改善Lewis肺癌小鼠的一般情况,增强小鼠的免疫功能,改善化疗药物化疗对小鼠免疫功能的抑制作用,其中龙葵高、中浓度剂量组效果更为显著;龙葵高、中浓度组对Lewis肺癌小鼠的移植瘤及自发性肺转移灶均有抑制作用(与对照组相比较,P0.05),并能提高顺铂对两者的抑制率(与化疗组比较,P0.05)。结论龙葵80%乙醇浸膏能够改善Lewis肺癌小鼠的免疫功能,对Lewis肺癌小鼠的移植瘤具有明显抑制作用,同时具有抑制Lewis肺癌自发性肺转移的作用。  相似文献   

11.
Splenectomy for symptomatic splenic cyst is curative. The uncertainty regarding the incidence of post-splenectomy overwhelming sepsis has made surgeons re-evaluate the indications for splenectomy. We describe a minimal invasive approach for the treatment of symptomatic splenic cyst with the added benetit of splenic preservation.  相似文献   

12.
本文应用超声对210例脾脏外伤进行诊断研究。并将其声像图特征分为Ⅳ型:Ⅰ:脾包膜下血肿。呈无回声暗区型;Ⅱ:真性脾破裂。呈混合型(强回声与低回声或无回声与强回声等);Ⅲ:中央型破裂。呈强回声光团或无回声区型;Ⅳ;脾蒂撕裂伤型。脾内回声均匀,脾周呈无回声暗区或血肿回声。其超声诊断符合率为97.6%。同时,对脾外伤保守治疗以及修补术后的声像图演变过程进行了研究和总结.提出B超应作为脾脏外伤及随访观察的首选检查手段。  相似文献   

13.
目的研究运动对糖尿病患者视网膜病变的改善作用。方法对50例糖尿病视网膜病变患者给予正规运动、药物加饮食干预,分别在入组时、入组后3个月、6个月和1年时检测生化指标的变化,评价视网膜病变的改善情况。结果运动治疗3个月后糖尿病视网膜病变患者FFA、FBG、PBG、TG和HbA1c开始下降,和入组时比较有统计学意义(P〈0.01)。运动治疗3个月后,糖尿病视网膜病变患者HDL显著增高,和入组时比较有统计学意义(P〈0.01)。结论正规运动、药物和饮食治疗可以明显改善糖尿病患者视网膜病变。  相似文献   

14.
While the chronic effects of certain styles of yoga on cardiometabolic factors have been investigated, little is known about the acute effects of a single yoga session on these outcomes. Moreover, vinyasa yoga’s potential to modulate cardiometabolic outcomes has not been established. The purpose of this study is to determine the acute effects of a vinyasa yoga session on arterial stiffness, wave reflection, lipid and glucose concentrations, and mood in adults with prior yoga experience. Thirty yoga practitioners with a minimum of 3 months of practice experience were enrolled into the study. Carotid-femoral pulse wave velocity (cf-PWV), augmentation index (AIx), lipid profile, glucose concentrations, and mood (Positive and Negative Affect Scale) were assessed at baseline and immediately following a 1 -h vinyasa yoga session. After the yoga session, participants had significantly lower AIx (p < 0.001), non-HDL cholesterol (p < 0.05), and negative affect (p < 0.01) compared to baseline. These results highlight the efficacy of a single bout of yoga in altering wave reflection while improving mood and lipid concentrations in healthy adults with a history of yoga practice.  相似文献   

15.
16.
17.
Sclerosing angiomatoid nodular transformation (SANT) of spleen is a very rare benign entity with unknown etiology. Here, we report this unusual case in a fit middle‐aged gentleman and discuss various diagnostic modalities along with the management of this condition.  相似文献   

18.
目的探讨Barthel指数(Barthel index BI)量表评估操应用于肿瘤科实施分级护理的效果。方法便利抽样法选取2015年1-5月在同济大学附属肺科医院肿瘤科住院的肺部肿瘤患者50例为研究对象,分别行BI指数量表评分和BI评估操评分,记录两种评估方法的评估时间,根据分值结合患者病情确定护理分级。结果 50例患者的BI指数量表评分评估时间为(3.5±2.31)min,BI评估操评分时间为(2.1±1.50)min,差异有统计学意义(P0.05);BI指数量、BI评估操评分结合患者病情分级而确定的护理分级分别为:Ⅰ级护理6例,Ⅱ级护理44例;Ⅰ级护理10例,Ⅱ级护理40例,差异无统计学意义(P0.05)。患者对于BI评估操评分的护理满意度得分为(98.45±1.21)分,显著高于BI指数量表评分的(91.23±2.13)分(P0.05)。结论 BI评估操作为BI指数量表测评实施的工具,可完成对患者生活自理能力的客观评定,有助于临床护士客观、合理地进行护理分级决策,是对护理分级标准的有益补充。  相似文献   

19.
目的探讨脾动脉头端真性动脉瘤的切除方法以及血管重建方法,总结临床治疗经验。方法回顾性总结2000年1月—2013年6月作者收治的11例资料,均经彩色超声、CT和血管造影检查证实脾动脉头端真性动脉瘤。肝动脉脾脏动脉远端自体静脉移植1例;肾下主动脉—脾动脉人工血管转流7例;动脉瘤、脾脏切除2例,多发动脉瘤切除、脾动脉结扎、脾切除1例。结果手术后10~14天治愈出院,随访1~14年,9例存活,2例死亡,其中1例主脾转流后2年死于急性心肌梗死,1例动脉瘤切除、脾切除后5年死于急性脑出血。7例主脾转流中,1例术后2年吻合口逐渐狭窄,术后6年完全闭塞,但一直无脾脏梗死,脾脏供血由胃短血管及其侧枝提供;余6例主脾转流和1例自体血管移植者未见吻合口狭窄或假性动脉瘤。结论脾动脉头端真性动脉瘤切除、脾动脉血管重建是一种较好的治疗方案。  相似文献   

20.
目的:总结血吸虫病并发急性脾破裂的临床诊断与治疗。方法:回顾我院1996年8月2007年8月的血吸虫痫斤发胛破裂118例患者的诊断治疗的临床资料。结果:非手术治愈6例.手术治愈112例。其中脾切除术106例,脾修补3例.脾切除脾片大网膜移植术3例,无死亡病例。结论:对血吸虫病并发脾破裂要及时诊断.选择适当的治疗方法,遵循抢救生命第一,保留脾脏第二的原则,病理性脾脏须行脾切除手术。  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号