恩度联合TP方案对食管癌细胞抑制作用的实验研究

目的:探讨重组人血管内皮抑素(恩度)联合紫杉醇+顺铂(TP)对食管癌细胞的抑制是否具有协同作用.方法:复苏Eca-109食管癌细胞株,传代培养,建立Eca-109食管癌细胞裸鼠移植瘤模型.3d测量1次肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;测量瘤体的终末体积、重量,计算肿瘤抑瘤率;应用流式细胞仪测定肿瘤细胞凋亡率;应用免疫组化测定促凋亡蛋白Bax、抗凋亡蛋白Bcl-2的表达.结果:恩度联合TP组能明显抑制食管癌移植瘤的生长,肿瘤体积、重量小于其他组,差异有统计学意义(P＜0.05);恩度联合TP组食管癌细胞凋亡率高于其他组,差异有统计学意义(P＜0.05);恩度联合TP组抗凋亡蛋白Bcl-2表达低于其他组,差异有统计学意义(P＜ 0.05);恩度联合TP组Bax表达量高于其他组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:恩度联合TP方案能明显抑制食管癌细胞及移植瘤的生长,优于单独应用TP组.     

曲妥珠单抗联合紫杉醇诱导过表达HER-2的乳腺癌裸鼠皮下移植瘤乳腺癌细胞凋亡的作用机制和效果研究

目的探讨曲妥珠单抗联合紫杉醇诱导过表达表皮生长因子受体-2(HER-2)的乳腺癌细胞凋亡的作用机制和治疗效果。方法通过建立HER2过表达乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,并将其分为对照组、曲妥珠单抗组、紫杉醇组和曲妥珠单抗联合紫杉醇组,分别给予相对应的药物治疗21 d。统计分析各组裸鼠的肿瘤体积、瘤重和抑瘤率,并使用Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡率。使用免疫组化检测Ki-67、微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)。结果曲妥珠单抗联合紫杉醇组的肿瘤体积增长最慢,在21 d时的体积远远小于其它各组(P0.05);曲妥珠单抗联合紫杉醇组的瘤重最小,抑瘤率远远高于其它组(P0.05);D组裸鼠的细胞凋亡率均高于A、B、C组,且差异有统计学意义(P0.05);D组裸鼠的Ki-67、MVD密度及VEGF水平均显著低于其他各组(P0.05)。结论曲妥珠单抗联合紫杉醇诱导过表达HER-2的乳腺癌细胞凋亡效果显著,可以有效抑制HER2过表达乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的生长及血管生成,值得临床推广应用。     

survivin基因RNA干涉对宫颈癌裸鼠移植瘤生长及凋亡和顺铂化疗敏感性的影响

目的观察survivin基因RNAi对宫颈癌裸鼠移植瘤生长、凋亡和化疗敏感性的影响。方法随机选择雌性BALB/C-nu/nu裸小鼠24只,细胞接种法建立4组人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,每天观察裸鼠一般状况及肿瘤生长情况,通过绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤生长抑制率,观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响;通过免疫组化SP法检测各组移植瘤组织中survivin蛋白表达情况,TUNEL染色观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤凋亡的影响;当肿瘤体积达0.2cm3时给予顺铂化疗以观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤化疗敏感性的影响。结果成功建立4组人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤体积在每个检测点均明显小于接种HeLa组;观察结束时,接种HeLa-s2组裸鼠瘤重明显小于接种HeLa组,分别为：（0.369±0.043）g和（1.150±0.136）g（P〈0.05）;接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤生长抑制率为67.9%。免疫组化结果显示：接种HeLa-s2组裸鼠survivin蛋白表达显著下降;TUNEL染色结果显示：接种HeLa-s2组裸鼠细胞凋亡明显增多,凋亡指数（AI）值达（22.73±1.37）%。顺铂化疗后不同检测点接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤体积明显小于接种HeLa组,肿瘤生长明显受抑;观察结束后,接种HeLa-s2组裸鼠瘤重明显小于接种HeLa组,分别为：（0.323±0.058）g和（1.347±0.173）g（P〈0.05）;接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤细胞凋亡明显增多,与接种HeLa组AI比较,接种HeLa-S2组AI明显升高,分别为：（37.38±1.01）%和（5.19±0.61）%（P〈0.05）。结论 survivin基因RNAi可通过下调移植瘤组织survivin蛋白表达抑制移植瘤生长并促进其凋亡,并通过增加顺铂化疗诱导的细胞凋亡,增强顺铂化疗对移植瘤的生长抑制,进而提高移植瘤对顺铂化疗的敏感性。     

丁酸钠对食管癌细胞裸鼠移植瘤生长及NDRG1表达的影响

目的 观察丁酸钠对食管癌EC 9706细胞裸鼠移植瘤生长及NDRG1蛋白表达的影响.方法 构建食管癌细胞裸鼠移植瘤模型,采用丁酸钠溶液按1 g/(kg·d)于肿瘤周围皮下注射,观察移植瘤生长情况;采用免疫组化染色检测裸鼠移植瘤NDRG1蛋白表达情况.对照组同等条件下注射生理盐水.结果 丁酸钠可抑制裸鼠移植瘤生长,其抑瘤率为35.3%,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);丁酸钠治疗组裸鼠移植瘤NDRG1蛋白表达较对照组显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 丁酸钠可能通过上调NDRG1蛋白的表达而抑制食管癌EC 9706细胞裸鼠移植瘤增殖.     

苦参素联合顺铂对实验性肝癌miR-21、miR-122表达的影响

目的观察苦参素联合顺铂对人肝癌裸鼠皮下移植肝癌miR-21、miR-122表达的影响,探讨其可能的分子机制。方法成功构建BALB/c裸鼠人肝癌细胞株HepG2细胞移植瘤模型后,随机分为对照组、苦参素组、顺铂组及苦参素和顺铂联合用药组(每组12只裸鼠,共48只)。分别给药,对照组(生理盐水10mg/kg)、苦参素组(苦参素100mg/kg)、顺铂组(顺铂2mg/kg)、联合组(苦参素100mg/kg+顺铂2mg/kg)。每天1次,均为腹腔注射给药。分别记录对照组、顺铂组、苦参素组和联合用药组在4、7、9、11以及14天裸鼠的体重和肿瘤体积,并计算抑瘤率。同时,应用实时荧光定量RT-PCR法检测皮下移植瘤miR-21和miR-122的表达。结果第14天联合用药组裸鼠体重明显大于顺铂组(P0.01),第14天裸鼠肿瘤体积在联合用药组明显小于顺铂组(P0.01)。与正常对照组比较,三组miR-21表达下调,miR-122表达下调。三组miR-21的表达分别为53.45±12.89、6.92±3.12和0.66±0.02,差异具有统计学意义(P0.01)。三组miR-122表达分别为43.6±12.41,20.4±6.31以及0.22±0.09,差异具有统计学意义(P0.01)。结论苦参素和顺铂联合用药对裸鼠皮下肿瘤有明显抑癌作用,其机制可能是调节miR-21和miR-122的表达抑制肝癌细胞过度增殖,从而发挥抗肿瘤作用。     

抑制MDC1基因蛋白表达对裸鼠食管癌细胞移植瘤大小及放疗敏感程度的影响

目的分析抑制MDC1基因蛋白表达对裸鼠食管癌细胞移植瘤大小及放疗敏感程度的影响。方法取54只SPF级BALB/C雄性裸鼠,构建食管癌动物模型。通过MDC1 mRNA序列,对有效的干扰序列与阴性对照序列进行设计并合成,且与载体p SIH1-H1-cop GFP生成重组质粒。裸鼠随机分为6组,分别为空白对照组(Eca109细胞未进行任何处理)、阴性转染组(转染阴性Eca109细胞)、单一照射组(Eca109细胞仅进行放射线照射)、阳性转染组(转染阳性ECA09细胞)、阴性转染+照射组(转染阴性Eca109细胞联合放射线照射)、阳性转染+照射组(转染阳性ECA09细胞联合放射线照射),每组各9只。采用蛋白印迹法与实时荧光定量PCR法对MDC1蛋白及mRNA表达量进行检测,取MDC1阳性转染Eca109细胞、阴性转染的Eca109细胞,分别将其接种于裸鼠。记录各组裸鼠移植瘤照射后1周、2周、3周、4周的体积变化情况,并用流式细胞仪对裸鼠移植瘤组织中细胞周期分布及细胞凋亡情况进行检测,且根据蛋白印迹法对各组裸鼠移植瘤组织中CHK2、CHK2-T68、CHK1表达情况进行检测,并将所得数据纳入统计学分析。结果p MDC1-shRNA质粒成功构建,且Eca109细胞得以转染,取得MDC1稳定转染的Eca109细胞。接种的裸鼠均成活,且于接种后7 d左右裸鼠爪下移植瘤形成。经15 Gy照射后,单一照射组、阴性转染+照射组裸鼠移植瘤生长速度较空白对照组明显减缓(P 0. 05),阳性转染+照射组裸鼠移植瘤生长速度较其它各组均明显减缓(P 0. 05),生长抑制率明显增高(P 0. 05)。照射前,各组裸鼠移植瘤体积的比较,并无显著差异(P 0. 05);照射后1周、2周、3周、4周,空白对照组裸鼠移植瘤增长较明显,阳性转染+照射组裸鼠移植瘤增长较缓慢,与单一照射组、阴性转染+照射组裸鼠移植瘤体积明显缩小(P 0. 05)。各组裸鼠移植瘤组织中细胞周期分布及细胞凋亡率的比较,并无显著差异(P 0. 05)。与对照组、单一照射组比较,阳性转染+照射组裸鼠移植瘤组织中CHK2-T68磷酸化水平显著下降(P 0. 05),而CHK2与CHK1蛋白表达水平较接近(P 0. 05)。结论 RNA干扰下调MDC1基因蛋白表达具有提高裸鼠食管癌细胞放疗敏感程度的作用,主要体现在阻滞放射线照射后裸鼠移植瘤的肿瘤体积增长方面。     

姜黄素对荷瘤裸鼠皮下移植瘤的影响

目的观察姜黄素在体内对人肝癌细胞株SMMC-7721的抗肿瘤作用。方法用姜黄素在SMMC-7721肝癌细胞荷瘤裸鼠的瘤体内进行注射治疗,12 d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重,观察肿瘤生长变化,并通过免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3等与细胞凋亡相关因子的表达。结果姜黄素可抑制SMMC-7721细胞对裸鼠的致瘤能力,肿瘤体积较对照组显著减小(P0.01),质量也明显小于对照组(P0.01),肿瘤生长抑制率达47.7%,免疫组化结果显示阿的平能明显上调与细胞凋亡相关因子Bax和Caspase-3的表达和下调Bcl-2和Survivin的表达。结论姜黄素能抑制SMMC-7721细胞的体内致瘤能力。     

温下方联合顺铂对A549/DDP裸鼠移植瘤的抑制作用及对药物转运蛋白表达的影响

目的探讨温下方与顺铂(DDP)合用对肺癌多药耐药裸鼠模型皮下移植瘤生长的抑制作用及其相关机制。方法建立耐药特性稳定的肺腺癌移植瘤裸小鼠动物模型。温下方0.2ml(含生药0.4g)/10g体质量灌胃给药干预。观察温下方与顺铂合用对裸鼠移植瘤生长的影响;RT-PCR法检测多药耐药基因(mdr1)和多药耐药相关蛋白基因(mrp)mRNA表达;免疫组化法检测上述基因相应蛋白P-gp、mrp的表达。结果与顺铂干预组(DDP组)相比,温下方与顺铂联合应用组(WCF+DDP组)荷瘤裸鼠体重下降较慢(P<0.05),移植瘤体积和瘤重量明显下降,肿瘤生长速度较缓(P<0.05),移植瘤中mdr1、mrpmRNA及P-gp、mrp蛋白的相对表达量均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温下方与化疗药合用对肺癌多药耐药裸鼠皮下移植瘤生长具有抑制作用,其机制可能通过降低药物转运蛋白mdr1和mrp基因及蛋白表达,增强A549/DDP对化疗药物的敏感性有关。     

构建食管癌移植瘤模型及不同剂量六神丸干预后的微血管密度变化

背景：六神丸是传统中药复方,具有清热解毒,散结消肿止痛之功效。现代药理证明六神丸具有抗炎、镇痛、强心、抗病毒、抗肿瘤等作用,临床上常用于各类感染性疾病、恶性肿瘤的治疗。
　　目的：探讨六神丸对食管癌移植瘤的抑瘤作用及对微血管密度、血管内皮生长因子表达的影响。
　　方法：通过复制人食管癌裸鼠移植瘤模型,将48只裸鼠随机分为六神丸高剂量组、六神丸中剂量组、六神丸低剂量组、顺铂组、模型组、空白组,按照给药方案用药。用药20 d后处死动物,称量瘤体质量,计算抑瘤率;免疫组化检测瘤组织微血管密度、血管内皮生长因子的表达。
　　结果与结论：六神丸高、中、低剂量组、顺铂组的移植瘤质量明显低于模型组,差异有显著性意义(P<0.05)。六神丸高、中、低剂量各组移植瘤内微血管密度、血管内皮生长因子的表达明显低于模型组,但没有顺铂组明显。结果表明六神丸对食管癌移植瘤生长有明显抑制作用,通过下调肿瘤组织血管内皮生长因子表达活性、降低微血管密度,可能是六神丸抑瘤作用机制之一。     

卡铂与顺铂对宫颈癌移植瘤胸苷磷酸化酶的调节作用

目的：探讨卡铂与顺铂对宫颈癌细胞株裸鼠移植瘤中胸苷磷酸化酶（thymi-dine phosphorylase，TP）的调节作用。方法：36只裸鼠均予皮下接种人宫颈鳞状细胞癌Siha细胞株，生成直径约为6～7mm的移植瘤。随机分为3组，每组12只，分别予腹腔内注射等量的卡铂、顺铂和生理氯化钠，给药10d后处死裸鼠，测量移植瘤体积及重量，计算抑瘤率，并以ELISA法测定移植瘤组织中TP的含量。结果：给药后顺铂组和卡铂组人宫颈癌细胞株裸鼠移植瘤体积均比给药前缩小，且均小于对照组（均为P〈0．05），3组的移植瘤重量由低到高依次为顺铂组、卡铂组、对照组（均为P〈0．05）。卡铂组和顺铂组的抑瘤率分别为1．6％和5．5％，2组的抑瘤率比较差异有统计学意义（P〈0．05）。3组移植瘤组织中TP含量由低至高依次为对照组、卡铂组和顺铂组（P〈0．05-0．01）。结论：卡铂和顺铂对宫颈癌细胞株裸鼠移植瘤中TP的表达具有上调作用，其中以顺铂对TP的上调作用较强。     

两种方法建立人胃癌裸鼠移植瘤模型的比较

目的采用两种不同方法建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法人胃癌细胞悬液直接注射法:将处于对数生长期的人胃癌细胞悬液接种于裸鼠皮下;胃癌裸鼠瘤转瘤法:将胃癌细胞悬液接种入裸鼠,待肿瘤生长直径在8 mm左右时,处死裸鼠并取其肿瘤组织边缘新鲜的组织,接种于裸鼠皮下,形成皮下移植瘤。观察并比较两种方法所建立的模型肿瘤移植成功率及瘤体生长速度,实验结束后MSP法检测移植瘤组织中Reprimo基因的甲基化水平并采用免疫组织化学法检测移植瘤的Ki-67和CD31分子表达。结果细胞悬液直接注射组的瘤体成瘤速度较瘤转瘤组慢(P<0.05);瘤转瘤组的Reprimo基因甲基化水平及Ki-67和CD31的表达均高于细胞悬液直接注射组(P<0.05)。结论胃癌裸鼠皮下瘤转瘤法的瘤体生长状况优于胃癌细胞悬液直接注射法。     

长期低浓度3，3’二吲哚甲烷处理鼻咽癌细胞后对裸鼠移植瘤增殖及转移的抑制作用

目的低浓度3,3I_二吲哚甲烷（3,3＇-Diindolylmethane,DIM）处理鼻咽癌细胞5．8F和CNE-2后,鼻咽癌细胞的增殖及转移能力的抑制作用及其机制。方法浓度为20ImaoVLDIM处理鼻咽癌细胞株5．8F和CNE-2一个月,48只BALB／C裸小鼠随机分为CNE-2／DIM（实验组）及5-8F／DIM（实验组）、CNE-2（对照组）及5-8F（对照组）4组,实验组于裸鼠背部靠腋窝皮下接种经过DIM处理的人鼻咽癌细胞CNE-2／DIM和5-8F／DIM,对照组接种未经DIM处理的鼻咽癌细胞,给予常规裸鼠饲料,每周记录移植瘤的体积,于接种第8周处死动物,并留取裸鼠移植瘤及腋窝和腹股沟的淋巴结组织,检验其PCNA、Ki-67及E．Cadherin、Vimentin的表达。结果接种鼻咽癌细胞8周后,实验组移植瘤体积明显小于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。对照组移植瘤成功率及转移率明显大于实验组中PCNA、Ki-67及Vimentin的相对表达强度低于对照组（P〈0．01）,而E-cadh丽n的相对表达强度明显高于对照组（P〈0．01）。结论低浓度DIM长期处理鼻咽癌细胞后具有抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤增殖和转移的作用,其机制可能与PCNA、Ki-67、Vimentin及E．Cadherin相关。     

反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对裸鼠膀胱癌生物学行为的影响

目的探讨反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对裸鼠膀胱癌生长及转移的影响。方法通过构建裸鼠原位膀胱癌移植瘤模型并灌注携带基因的腺病毒载体,观察肿瘤生长及盆腔淋巴结转移情况,同时采用免疫组化法检测肿瘤细胞增殖和凋亡指数。结果肿瘤大小:治疗组为(14.60±5.31)mm2,对照组为(58.92±7.16)mm2,两组比较P<0.01;肿瘤细胞增殖率:治疗组为41.30%,对照组94.70%,两组相比P<0.05;凋亡指数治疗组和对照组分别是30.18和9.53,两者比较P<0.05;治疗组5只中无一只发生盆腔淋巴结转移,而对照组3只出现转移(60.0%),两组比较P<0.01。上述各项组间差异均有统计学意义。结论反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对人膀胱癌裸鼠原位移植瘤具有良好的靶向性,能够通过抑制肿瘤细胞增殖和加速肿瘤细胞凋亡,遏制实验性裸鼠膀胱移植癌模型的生长转移,从而为该载体用于人类膀胱癌的治疗提供了一定的实验依据。     

小干扰RNA抑制卵巢癌模型裸鼠移植瘤葡萄糖调节蛋白94的表达及意义

背景：一些实验在模型鼠移植瘤中葡萄糖调节蛋白94被敲除后,细胞黏附中断,刺激肝起源细胞增殖,进而促进肝肿瘤的发生,推测葡萄糖调节蛋白94在肝癌中起到保护作用。 目的：应用小干扰RNA技术抑制裸鼠卵巢癌模型皮下移植瘤内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白94的基因表达,探讨移植瘤中葡萄糖调节蛋白94基因及蛋白表达的变化对移植瘤生长的影响。 方法：从GeneBank中选取人类葡萄糖调节蛋白94基因序列,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体psiSTRIKETM/葡萄糖调节蛋白94。建立人卵巢癌HO-8910细胞株裸鼠皮下接种模型,并将真核表达载体转染入裸鼠移植瘤体内,观察肿瘤生长情况。卵巢癌裸鼠模型经过不同给药方案干预后分为特异性小干扰RNA组,非特异性小干扰RNA组和生理盐水对照组, RT-PCR和免疫组化SP法检测葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白在肿瘤内的表达情况,并观察模型裸鼠的移植瘤生长情况。 结果与结论：成功构建RNA干扰质粒载体,所有裸鼠模型均接种成功,5 d后即可见皮下肿瘤形成,14 d左右肿瘤直径达7-10 mm。转染质粒完毕后抑瘤率为65.1%,与非特异性小干扰RNA组和生理盐水对照组比较,差异有显著性意义（P＜0.01）。psiSTRIKETM/GRP94治疗后瘤体内葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白显著下调（P ＜0.01）。说明靶向葡萄糖调节蛋白94 mRNA的小干扰RNA可显著抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能是诱导葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白表达下调所致。     

LMWH对裸鼠胃癌原位模型生长、转移及趋化因子SDF-1表达的影响

【目的】探讨低分子肝素（LMWH）对裸鼠胃癌原位模型生长、转移及趋化因子SDF-1表达的影响。【方法】应用原位移植方法建立裸鼠胃癌原位模型,术后7d将裸鼠随机分为3组：对照组（生理盐水）、化疗组（5-氟尿嘧啶）、LMWH组（低分子肝素钙）,分别每周注药2次,共5周,第6周处死动物,观察裸鼠胃癌原住模型肿瘤转移及生长情况。采用RT—PCR技术检测胃肿瘤组织SDF-1mRNA表达水平。【结果】化疗组、LMWH组肿瘤体积较对照组明显缩小,差异有统计学意义（P〈0．05）;LMWH组胃癌原位模型肿瘤转移率（20％）低于对照组（70％）,差异有统计学意义（P〈0．05）,而与化疗组之间差异无统计学意义（P〉o．05）;LMWH组SDF-1mRNA表达均较对照组和化疗组低,差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】LM—wH可抑制裸鼠胃癌原位模型的肿瘤生长及远处转移,其部分机制可能与降低肿瘤sDF_1的表达有关。     

紫杉醇联合奈达铂治疗中晚期卵巢上皮性癌的疗效分析

目的观察紫杉醇分别联合奈达铂（NDP）及顺铂（DDP）方案对中晚期卵巢癌治疗的近期疗效及不良反应。方法将42例中晚期卵巢癌患者随机分为治疗组和对照组。治疗组：紫杉醇＋奈达铂;对照组：紫杉醇＋顺铂。分析两组的近期疗效及不良反应。结果治疗组与对照组的近期有效率分别为54．55％和49．00％,差异无统计学意义（P〉0．05）;治疗组白细胞减少的发生率（55．00％）和对照组（63．00％）,差异无统计学意义（P〉0．05）;治疗组血小板减少发生率（36．40％）高于对照组（25．00％）,但无显著性差异（P〉0．05）;治疗组胃肠道反应发生率（18．20％）低于对照组（85．00％）,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论奈达铂＋紫杉醇为中晚期卵巢癌的有效化疗方案。     

靶向骨桥蛋白基因的RNA干扰对裸鼠肝癌影响的实验研究

目的检测骨桥蛋白（OPN）的核糖核酸（RNA）干扰技术对裸鼠肝癌的影响作用，探讨RNA干扰对肝癌基因治疗中的有效性和相关机制。方法体外化学合成骨桥蛋白序列特异性的短发夹RNA（shRNA）质粒载体，并导入肝癌细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤，尾静脉注射OPN shRNA表达载体，观察其对肝癌生长的影响作用；酶联免疫吸附（ELISA）方法检测OPN在肿瘤组织中的蛋白浓度。结果全身系统性给予OPN shRNA后，空载体组、阴性shRNA组及OPN shRNA转染组肿瘤体积分别为235±5mm^3、222±24mm^3（P=0．2）、98±24mm^3（P〈0．05）；瘤组织中OPN浓度在空载体组、阴性shRNA组及OPN shRNA转染组分别为498±8pg／mg、382±98pg／mg和122±56pg／mg（P〈0．05）。结论OPN的RNA干扰明显抑制了肿瘤的生长，有望通过RNA干扰技术实现肝癌的基因治疗。     

小剂量甲地孕酮联合TP方案治疗晚期食管癌疗效观察

目的观察小剂量甲地孕酮联合TP方案（紫杉醇＋顺铂）治疗晚期食管癌的效果。方法晚期食管癌患者40例,随机分为治疗组21例和对照组19例,对照组给予TP方案（紫杉醇＋顺铂）化疗,21d为1个周期;治疗组化疗药物用法、用量同对照组,并于每周期化疗前给予甲地孕酮160mg/次,1次/d,口服,连用7d。化疗2个周期后评价2组疗效,比较2组化疗前、后体质量、KPS评分、血浆白蛋白及血红蛋白水平变化,记录不良反应发生情况。结果化疗2个周期后,治疗组总有效率（38.1%）与对照组（26.3%）比较差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗组化疗2个周期后体质量、KPS评分、血浆白蛋白及血红蛋白水平（（68.0±9.5）kg、85.0±8.5、（49.0±5.0）g/L、（130.0±11.5）g/L）高于治疗前（（66.0±9.0）kg、80.0±8.0、（45.0±6.1）g/L、（120.0±10.5）g/L）（P〈0.05）,且高于对照组化疗后（（64.0±7.8）kg、79.0±7.4、（45.0±6.7）g/L、（120.4±9.3）g/L）（P〈0.05）,对照组化疗前、后各指标比较差异无统计学意义（P〉0.05）;2组腹泻、恶心呕吐、白细胞下降、血小板下降发生率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论小剂量甲地孕酮联合TP方案化疗可改善晚期食管癌患者的生活质量。     

5-氮杂-2’-脱氧胞苷联合紫杉醇与氟尿嘧啶对人胃癌细胞系MKN-45裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza)联合临床化疗药物紫杉醇与氟尿嘧啶对于胃癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用和抑癌基因RUNX3 mRNA以及肿瘤转移相关蛋白E-cadherin与Vimentin表达的影响。方法建立胃癌细胞株MKN-45的裸鼠移植瘤模型,分为0.9%氯化钠注射溶液对照、5-Aza(2 mg/kg,每天1次)、化疗药物(1 mg/kg紫杉醇与5 mg/kg氟尿嘧啶,分别于治疗周期第1、8天用)以及5-Aza与紫杉醇及氟尿嘧啶联合用药,采用腹腔注射方法给药3周。观察各组裸鼠移植瘤的生长速度变化,并用RT-PCR方法检测肿瘤RUNX3基因的mRNA表达水平,免疫组织化学方法检测E-cadherin与Vimentin表达情况。结果胃癌细胞MKN-45裸鼠移植瘤模型经药物治疗3周后,与空白对照组相比,5-Aza组或T+F组的移植瘤生长速度明显减慢(P<0.05),而且5-Aza与T+F联合治疗组比单独处理组的肿瘤生长速度下降更为显著(P<0.05)。通过作用机制分析发现,与对照组相比,化疗药物T+F组RUNX3 mRNA及E-cadherin与Vimentin蛋白表达水平无明显变化;5-Aza处理组RUNX3 mRNA与E-cadherin蛋白表达水平有明显升高,Vimentin表达水平有明显下降;药物联合组RUNX3 mRNA与E-cadherin蛋白表达水平升高明显,而Vimentin表达水平下降更为显著。结论 5-Aza具有抑制胃癌裸鼠移植瘤生长与转移的能力,联合化疗药物紫杉醇与氟尿嘧啶处理效果更显著。5-Aza发挥肿瘤抑制功能可能是通过提高抑癌基因RUNX3基因表达实现的。