抑制MDC1基因蛋白表达对裸鼠食管癌细胞移植瘤大小及放疗敏感程度的影响

目的分析抑制MDC1基因蛋白表达对裸鼠食管癌细胞移植瘤大小及放疗敏感程度的影响。方法取54只SPF级BALB/C雄性裸鼠,构建食管癌动物模型。通过MDC1 mRNA序列,对有效的干扰序列与阴性对照序列进行设计并合成,且与载体p SIH1-H1-cop GFP生成重组质粒。裸鼠随机分为6组,分别为空白对照组(Eca109细胞未进行任何处理)、阴性转染组(转染阴性Eca109细胞)、单一照射组(Eca109细胞仅进行放射线照射)、阳性转染组(转染阳性ECA09细胞)、阴性转染+照射组(转染阴性Eca109细胞联合放射线照射)、阳性转染+照射组(转染阳性ECA09细胞联合放射线照射),每组各9只。采用蛋白印迹法与实时荧光定量PCR法对MDC1蛋白及mRNA表达量进行检测,取MDC1阳性转染Eca109细胞、阴性转染的Eca109细胞,分别将其接种于裸鼠。记录各组裸鼠移植瘤照射后1周、2周、3周、4周的体积变化情况,并用流式细胞仪对裸鼠移植瘤组织中细胞周期分布及细胞凋亡情况进行检测,且根据蛋白印迹法对各组裸鼠移植瘤组织中CHK2、CHK2-T68、CHK1表达情况进行检测,并将所得数据纳入统计学分析。结果p MDC1-shRNA质粒成功构建,且Eca109细胞得以转染,取得MDC1稳定转染的Eca109细胞。接种的裸鼠均成活,且于接种后7 d左右裸鼠爪下移植瘤形成。经15 Gy照射后,单一照射组、阴性转染+照射组裸鼠移植瘤生长速度较空白对照组明显减缓(P 0. 05),阳性转染+照射组裸鼠移植瘤生长速度较其它各组均明显减缓(P 0. 05),生长抑制率明显增高(P 0. 05)。照射前,各组裸鼠移植瘤体积的比较,并无显著差异(P 0. 05);照射后1周、2周、3周、4周,空白对照组裸鼠移植瘤增长较明显,阳性转染+照射组裸鼠移植瘤增长较缓慢,与单一照射组、阴性转染+照射组裸鼠移植瘤体积明显缩小(P 0. 05)。各组裸鼠移植瘤组织中细胞周期分布及细胞凋亡率的比较,并无显著差异(P 0. 05)。与对照组、单一照射组比较,阳性转染+照射组裸鼠移植瘤组织中CHK2-T68磷酸化水平显著下降(P 0. 05),而CHK2与CHK1蛋白表达水平较接近(P 0. 05)。结论 RNA干扰下调MDC1基因蛋白表达具有提高裸鼠食管癌细胞放疗敏感程度的作用,主要体现在阻滞放射线照射后裸鼠移植瘤的肿瘤体积增长方面。     

多西他赛联合奥沙利铂治疗晚期胃癌的临床观察

目的进一步探讨多西他赛联合奥沙利铂治疗晚期胃癌的临床效果。方法选取我院2010年1月~2011年12月间入院治疗的52例晚期胃癌患者为研究对象,实施以下治疗方法:多酉他赛75mg/m2,d1,ivgtt、奥沙利铂130mg/m2,d2,ivgtt,并对治疗之后的效果进行了比较分析。结果 52例晚期胃癌患者实施多西他赛联合奥沙利铂治疗后,其中完全缓解的患者有0例、部分缓解的患者有17例、病情稳定的患者有24例、病情发生进展的患者有11例。总有效率为32.69%、疾病控制率为78.85%。结论多西他赛联合奥沙利铂治疗晚期胃癌效果较好,是一种治疗晚期胃癌安全有效的方法。     

全身放疗对U14荷瘤小鼠肿瘤微环境免疫细胞及RGS5、CXCR4的影响

目的探究全身放疗对U14荷瘤小鼠肿瘤微环境免疫细胞及G蛋白调节信号蛋白5(RGS5)、趋化因子受体4(CXCR4)的影响。方法 60只BALB/c小鼠随机分为3组,即对照组、模型组和放疗组。模型组和放疗组通过皮下注射U14细胞建立荷瘤裸鼠模型,对照组注射等量的生理盐水。放疗组在建模后第5天接受全身放疗。分别在建模后第4天,6天,8天,10天和12天检测肿瘤体积和脾脏调节性T细胞(Treg)细胞含量。使用Western blot和qRTPCR检测基质金属蛋白酶、G蛋白调节信号蛋白5(RGS5)、趋化因子受体4(CXCR4)蛋白和mRNA的水平。结果模型组小鼠的肿瘤体积随着时间显著升高(P 0. 001),在放疗第6天、8天、10天和12天,放疗组的肿瘤体积显著低于模型组(P 0. 001)。模型组的基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9水平显著高于对照组(P 0. 001),放疗组的MMP2和MMP9蛋白和mRNA的水平显著低于放疗组(P 0. 001)。放疗前模型组和放疗组的Treg细胞比率显著高于对照组(P 0. 001),放疗后放疗组的Treg细胞比率显著低于模型组(P 0. 001),并且在放疗后第8天和第10天与模型组无显著差异(P 0. 05)。模型组的RGS5和CXCR4水平显著高于对照组(P 0. 001),放疗组的RGS5和CXCR4蛋白和mRNA的水平显著低于放疗组(P 0. 001)。结论全身放疗可有效抑制U14荷瘤裸鼠肿瘤组织的生长,同时下调MMP2和MMP9的水平抑制转移。可能的机制是全身放疗可通过抑制RGS5和CXCR4的水平抑制血管生成并抑制肿瘤的转移。     

基于cSMART技术检测ctDNA驱动基因突变指导非小细胞肺癌精准治疗的疗效研究

目的  探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）基于环化单分子扩增和重测序技术（cSMART）检测循环肿瘤DNA（ctDNA）驱动基因突变，并指导其治疗的疗效。方法 选取2016年7月至2018年12月于辽宁省肿瘤医院治疗的NSCLC患者107例，采用cSMART技术检测患者血清中EGFR，ALK，KRAS，BRAF，PIK3CA，ERBB2，ROS1，RET和MET  共9种ctDNA驱动基因的突变情况。每2~4个治疗疗程后评估9种ctDNA驱动基因突变分布，并基于NCCN指南和9种基因检测结果指导患者用药。将生存信息完整且完成后续治疗的57例NSCLC患者，按照是否遵循指导方案治疗，分为规范治疗组（n=39）和非规范治疗组（n=18），比较其疗效。 结果 基于cSMART技术检测ctDNA 9种驱动基因突变78例，无突变28例。驱动基因突变的78例患者中，单基因突变27例，双基因突变24例，3基因突变11例，4基因突变5例，5基因突变5例。106例NSCLC患者无突变26人次，累计突变160人次，其中EGFR突变61人次，ALK突变11人次（包括ALK融合和点突变），TP53和KRAS突变分别为54人次和26人次，罕见突变PIK3CA发生基因突变5人次， BRAF、MET和ERBB2发生基因突变各1人次。规范治疗组患者的中位无进展生存期较非规范治疗组患者长（10.0个月vs 5.5个月，χ2=6.420，P=0.011）。结论 基于cSMART技术测定ctDNA识别NSCLC驱动基因突变简便、无创，其中EGFR及ALK为NSCLC常见驱动突变，针对其进行靶向治疗疗效较好。     

新辅助化疗对乳腺癌的疗效及影响因素分析

目的探讨及分析新辅助化疗对乳腺癌的疗效及影响因素。方法选择2008年12月～2011年l2月在辽宁省肿瘤医院就诊的80例局部晚期乳腺癌患者作为研究对象,比较不同肿瘤大小、不同肿瘤分级及肿瘤分期、不同化疗方案以及不同淋巴结个数的有效率（RR）。结果 80例乳腺癌患者根据国际抗癌联盟（UICC）实体瘤疗效标准评价,结果显示,完全缓解（CR）24例,部分缓解（PR）40例,病情稳定（SD）16例,疾病进展（PD）0例,RR为80.0%（64/80）。不同肿瘤大小、不同肿瘤分期、以及不同淋巴结个数的RR比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论新辅助化疗对乳腺癌具有较好的疗效,但其疗效受肿瘤大小、不同肿瘤分期、以及不同淋巴结个数相关因素的影响。     

苦参碱联合顺铂对人肝癌细胞株HepG2裸鼠移植瘤模型瘤体生长及caspase-3和Survivin表达的影响

目的分析苦参碱联合顺铂对人肝癌细胞株Hep G2裸鼠移植瘤模型瘤体生长及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和存活素(Survivin)表达的影响。方法于BALB/c裸鼠腋部皮下注入人肝癌细胞株Hep G2以此构建移植瘤模型。在成瘤后,将28只裸鼠随机分为对照组(等量生理盐水)、顺铂组(顺铂2 mg/kg)、苦参碱组(苦参碱100 mg/kg)、联用组(苦参碱100 mg/kg+顺铂2 mg/kg)各7只,各组均通过腹腔注射给药。观察各组瘤体生长状况,对各组抑瘤率进行计算。通过免疫组化法对各组瘤组织中caspase-3、Survivin表达水平进行检测,计算和比较各组阳性细胞率。结果联用组裸鼠抑瘤率为80. 00%,较顺铂组(64. 00%)、苦参碱组(36. 00%)明显升高(P 0. 05)。联用组裸鼠caspase-3阳性细胞率为(77. 89±7. 35)%,较对照组(19. 89±4. 14)%、顺铂组(64. 86±9. 34)%、苦参碱组(36. 97±9. 35)%均显著上升(P 0. 05)。联用组裸鼠Survivin阳性细胞率为(20. 04±4. 37)%,较对照组(84. 85±14. 75)%、顺铂组(39. 05±7. 69)%、苦参碱组(64. 06±9. 14)%均显著降低(P 0. 05)。结论单用顺铂或苦参碱对人肝癌细胞株Hep G2裸鼠移植瘤均具有一定的抑瘤作用,但二者联用的抑瘤作用更为明显。其作用机制可能与苦参碱联合顺铂处理可对caspase-3、Survivin表达水平造成影响,进而促使肿瘤细胞凋亡存在密切关系。     

Nrf2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨核转录因子E2相关因子2(Nrf2)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床意义。方法回顾性选取2013年7月至2016年12月在辽宁省肿瘤医院治疗的NSCLC患者组织标本72例,同时选取癌旁组织(距癌组织 5 cm)标本作为对照。采用免疫组化染色和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Nrf2蛋白表达和mRNA表达,观察其与临床病理特征及预后的关系。结果 NSCLC组织Nrf2阳性表达率和Nrf2 mRNA表达分别为62. 50%和(1. 392±0. 223),明显高于癌旁组织(P 0. 05);肿瘤直径 5 cm、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移患者Nrf2蛋白阳性表达率分别为87. 88%、86. 36%和76. 19%,明显高于肿瘤直径≤5 cm、Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移患者(P 0. 05); Nrf2mRNA表达与患者临床病理特征无关(P 0. 05); Nrf2蛋白表达和Nrf2 mRNA表达呈正相关(r_s=0. 366,P 0. 05);Nrf2蛋白阳性表达患者中位无进展生存时间和总生存时间分别为12个月(95%CI:9. 92～14. 08)和21个月(95%CI:19. 76～22. 25),明显低于Nrf2蛋白阴性表达者(P 0. 05)。结论 Nrf2在NSCLC患者中的表达明显升高,其与临床病理特征及预后有一定关系,值得进一步研究。     

乳腺癌患者抑郁相关因素及氟西汀干预处理研究

目的 乳腺癌患者常伴有不同程度的抑郁症,影响患者的生存和生活质量.本研究旨在分析晚期乳腺癌患者抑郁的发生率以及相关因素,探讨抗抑郁药物氟西汀治疗晚期乳腺癌患者抑郁的临床效果.方法 选取辽宁省肿瘤医院收治的晚期乳腺癌患者161例作为研究对象,采用抑郁患者自评量表(PHQ-9)进行基线抑郁水平调研,结合临床病理因素分析抑郁相关因素.将基线调研中的重度抑郁患者随机分为氟西汀组(n=21)和空白对照组(n=20),氟西汀组给予氟西汀20 mg/d,连用6个月;对照组仅给予安慰剂.测定治疗后2、6和12个月的PHQ-9值.结果 晚期乳腺癌患者在基线PHQ-9评估中抑郁的发生率为59.6%(96/161),重度抑郁患者发生率为25.5%,占总抑郁患者的42.7%(41/96).重度抑郁患者与非抑郁患者相比,在月经状态、ER、PR和HER2表达以及DFS方面差异均有统计学意义,均P值<0.05.氟西汀组PHQ-9评分在治疗后2、6和12个月均显著低于对照组,差异均有统计学意义,均P值<0.05.结论 月经状态、ER、PR和HER2表达以及DFS是晚期乳腺癌伴发抑郁的影响因素,氟西汀可显著改善乳腺癌患者伴发的抑郁状况.