鼻咽癌组织中PTTG和cyclinD1蛋白的表达及临床意义

目的探讨鼻咽癌组织中垂体肿瘤转化基因(PTTG)和细胞周期素D1(cyclinD1)蛋白的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学检测PTTG和cyclinD1蛋白在68例鼻咽癌、22例癌前病变及25例鼻咽黏膜慢性炎组织中的表达情况。结果 PTTG和cyclinD1蛋白在鼻咽黏膜慢性炎组织中的阳性表达率分别为4.0%和8.0%,癌前病变为40.9%和63.6%,鼻咽癌组织为80.9%和72.1%,PTTG蛋白的表达在鼻咽癌与癌前病变和鼻咽黏膜慢性炎组织中比较,差异均有统计学意义(P0.05);鼻咽癌与癌前病变组织比较,差异有统计学意义(P0.05);PTTG蛋白的高表达与鼻咽癌的临床分期和淋巴结转移有关(P0.05)。cyclinD1蛋白的表达在鼻咽癌与鼻咽黏膜慢性炎组织中比较,差异有统计学意义(P0.05),而在鼻咽癌与癌前病变中比较,差异无统计学意义(P0.05),cyclinD1蛋白的高表达与临床分期和淋巴结转移无关;PTTG与cyclinD1表达两者无相关性(P0.05)。结论 PTTG和cyclinD1蛋白的高表达参与了鼻咽癌的发生、发展过程,PTTG基因的突变或激活可能还与鼻咽癌的预后有关。     

鼻咽癌组织中SYK基因启动子区的甲基化分析

目的 检测鼻咽癌组织中脾酪氨酸激酶(SYK)基因启动子区的甲基化状态,探讨SYK基因启动子区的甲基化与鼻咽癌发生的关系。方法 收集2012年2月～2014年8月间在深圳市宝安区人民医院和北京大学深圳医院就诊的鼻咽癌患者52例,慢性鼻咽黏膜炎症患者26例,鼻咽癌和慢性鼻咽黏膜炎症患者均经病理学诊断证实。应用甲基化特异性PCR技术检测鼻咽癌和慢性鼻咽黏膜炎症组织的SYK基因启动子区的甲基化状态,比较鼻咽癌和慢性鼻咽黏膜炎症组织的SYK基因启动子区的甲基化率。结果 在52例鼻咽癌组织中有11例SYK基因启动子区存在甲基化,甲基化率为21.2%,而在26例慢性鼻咽黏膜炎症组织中未检测到SYK基因启动子区的甲基化。结论 鼻咽癌组织中SYK基因启动子区存在较低程度的甲基化,这提示SYK基因启动子区出现的甲基化或许与鼻咽癌的发生相关。     

Kiss-1蛋白在鼻咽癌组织中的表达与意义

目的:本实验通过检测Kiss-1蛋白在鼻咽癌组织中的表达以探讨其临床意义.方法:收集2006年1月1日至2007年10月30日蚌埠医学院第一附属医院病理科鼻咽癌存档蜡块67例及非肿瘤性鼻咽部组织存档蜡块30例.应用免疫组织化学方法(IHC)检测Kiss-1蛋白在肿瘤细胞和正常鼻咽黏膜细胞中的表达情况.结果:鼻咽癌组和正常鼻咽部组织中Kiss-1蛋白阳性率分别为59.7%(40/67)和83.3%(25/30),二者差异有统计学意义(P＜0.05).Kiss-1蛋白表达的高低与淋巴结转移(N分期)显著相关(P＜0.05).结论:Kiss-1在鼻咽癌组织中的表达率显著低于非肿瘤性鼻咽上皮组织;Kiss-1的表达率降低与鼻咽癌的淋巴结转移有关.     

鼻咽癌中TRPC1的表达及其临床意义

目的:研究TRPC1蛋白在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)中的表达及意义。方法:收集鼻咽癌组织213例,鼻咽慢性炎症组织24例。应用免疫组化技术(Envision二步法)检测鼻咽癌和鼻咽慢性炎症组织中TRPC1蛋白的表达,采用SPSS13.0软件对实验数据进行分析。结果:TRPC1蛋白在鼻咽癌组和对照组织表达率分别为78.87%、40.74%,两者差异具有统计学意义(P<0.001);NPC组织中,TRPC1蛋白的表达与患者的年龄、性别、病理类型、EBV-IgG状态、颅底侵犯、远处转移无关,而与T分期、N分期、临床分期相关(P<0.05)。结论:TRPC1蛋白在鼻咽癌的发生、发展过程中起重要作用,TRPC1高表达可能参与和促进鼻咽癌的增殖和迁移     

鼻咽癌CT表现与Annexin A7蛋白表达关系的研究

目的：研究Annexin A7蛋白表达与鼻咽癌CT表现的关系。方法：经病理证实鼻咽癌58例,全部病例做鼻咽轴位平扫,部分病例同时做冠状位扫描及增强扫描。应用免疫组化SP法检测58例鼻咽癌患者、20例淋巴结转移性鼻咽癌和24例慢性鼻咽炎患者中的Annexin A7蛋白的表达。结果：鼻咽癌患者中Annexin A7阳性率为87.9%（51/58）;淋巴结转移鼻咽癌中阳性率分别为95.0%（19/20）;对照组鼻咽上皮中阳性率为41.7%（10/24）;Annexin A7表达在转移癌中高于鼻咽癌,鼻咽癌中高于对照组,差异有显著性意义（P＜0.05）;Annexin A7表达与组织分化程度、局部转移、淋巴结转移、远处转移和临床分期有关（P＜0.05）,而与年龄、性别无关;Annexin A7表达与CT征象中的侵及后鼻孔、侵及口咽部、颅底骨质破坏及颈部淋巴结转移相关（P＜0.05）。结论：Annexin A7蛋白表达与鼻咽癌分化程度、浸润深度、颅底侵犯有一定相关性,可作为评价鼻咽癌CT表现恶性度及预后的指标。     

nm23和p53蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其意义

目的:探讨肿瘤抑制基因nm23、p53蛋白产物在鼻咽癌组织中异常表达与肿瘤临床分期、病理分级和淋巴结转移等肿瘤的生物学特征的关系。方法:应用免疫组织化学ABC方法检测42例鼻咽癌活检标本中nm23、p53蛋白的表达水平。结果:鼻咽癌组织中nm23和p53蛋白表达的阳性率分别为50.0%和45.2%,nm23蛋白表达与临床分期和病理分级呈正相关,而与鼻咽癌的淋巴结转移呈负相关(P<0.05)。p53蛋白表达与鼻咽癌的临床分期和分化程度呈正相关,而与肿瘤的淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:nm23、p53蛋白的表达在鼻咽癌的侵润转移中起重要作用,p53表达与鼻咽癌组织临床分期、分化程度有关,鼻咽癌的淋巴结转移可能与多基因异常改变有关。     

五聚素3基因甲基化在食管鳞癌中的作用

目的研究食管鳞癌组织中五聚素3(PTX3)基因的表达,以及基因启动子区甲基化状态对其表达的影响。方法应用半定量逆转录PCR(RT-PCR)、甲基化特异性PCR(MSP)、免疫组织化学的方法对癌旁食管黏膜组织和食管鳞癌组织进行检测,分析PTX3基因mRNA的表达、基因启动子区甲基化状态和PTX3蛋白阳性表达与食管癌临床病理特征的关系。结果 25%(5/20)食管鳞癌组织和90%(18/20)正常食管黏膜组织存在PTX3基因表达,PTX3mRNA在食管癌与癌旁组织之间的表达差异有统计学意义(χ2=17.289,P<0.001)。80%(16/20)食管鳞癌组织和25%(5/20)正常食管黏膜组织存在PTX3基因CpG岛超甲基化,提示PTX3基因超甲基化与食管癌发生之间有关联(χ2=12.13,P<0.001)。PTX3蛋白在食管癌组织中表达的阳性率为30.38%(24/79),癌旁食管组织PTX3蛋白阳性表达率为84.81%(67/79)(P<0.001)。随着食管癌临床分期增加,PTX3蛋白阳性表达率逐渐降低。结论 PTX3基因启动子高甲基化是PTX3表达失活的主要原因,在食管鳞癌的发生发展中起重要作用,PTX3基因启动子甲基化可作为食管鳞癌预后评估的潜在肿瘤标志物。     

肝细胞癌中p14ARF基因启动子甲基化及蛋白表达的研究

目的 通过检测肝细胞癌中p14ARF基因启动子甲基化状态与蛋白表达的关系,探讨p14ARF基因启动子甲基化与肝细胞癌的关系.方法 通过甲基化特异性PCR(MSP)方法及免疫组化(IHC)法分别检测50例肝细胞癌组织和癌旁组织中p14ARF基因启动子甲基化状态和蛋白表达水平.结果 癌组织及癌旁组织中p14ARF基因启动子甲基化阳性率分别为28%(14150)和4%(2/50)(P<0.01).癌与癌旁组织p14ARF蛋白表达差异极显著(P<0.01).p14ARF基因启动子甲基化和蛋白表达与临床分期、门脉癌栓、术后复发、肝外转移、肿瘤大小、肿瘤个数及血清AFP值无关,而在肿瘤分化程度上p14ARF盯蛋白表达有显著差异,p14ARF基因启动子甲基化则无差异.p14ARF基因启动子甲基化与蛋白表达呈负相关.结论 启动子区甲基化是p14ARF基因失活的重要机制.p14ARF启动子区异常甲基化可能参与了肝癌的发生、发展,在肝癌的进展中起重要作用.     

四会市地区鼻咽癌患者微肿瘤组织的病理特征与基因特征联合研究

目的观察四会市地区鼻咽癌(NPC)患者微肿瘤组织的病理特征与基因特征。方法回顾分析2006年1月至2012年12月广东省四会市人民医院收治的174例NPC肿瘤患者资料及50例非肿瘤性鼻咽部组织患者。结果 174例NPC患者中,颈部有淋巴结转移患者124例,无淋巴结转移患者50例。非肿瘤性鼻咽部组织KAI1/CD82蛋白的阳性表达率明显高于NPC组织[78.0%(39/50)比52.4%(65/124),P0.05]。患者NPC组织中KAI1/CD82蛋白的表达与其性别、年龄、病理类型、原发部位(T分期)等临床指标均无相关性(均P0.05),但与淋巴结转移(N分期)相关,且随着N分期的进展,KAI1/CD82蛋白阳性表达率进一步降低。结论 NPC患者淋巴微肿瘤的病理特征和基因特征具有一些地域分布特征应联合诊断分析。     

鼻咽癌端粒酶催化亚单位的表达及其临床意义

[目的]研究人端粒酶催化亚单位（端粒酶逆转录酶hTERT）在鼻咽和鼻咽癌组织中的表达,探讨端粒酶催化亚单位的表达与鼻咽癌恶性生物特性的相关性.[方法] 应用免疫组化技术检测端粒酶催化亚单位在38例鼻咽慢性炎性黏膜组织和56例鼻咽癌组织中的表达,结合临床鼻咽癌TNM分期、淋巴结转移以及患者生存期等指标进行分析.[结果]①鼻咽癌组织hTERT的阳性率为78.6%,与鼻咽慢性炎性黏膜组织hTERT的阳性率15.8%比较差异具有显著性（P〈0.01）;②端粒酶催化亚单位的表达与鼻咽癌临床分期、颈部淋巴结转移以及患者的存活期之间无显著性差异（P〉0.05）.[结论]端粒酶催化亚单位与鼻咽癌密切相关,端粒酶催化亚单位的表达改变可能在鼻咽组织癌变早期起重要作用.     

死亡相关蛋白激酶1基因启动子甲基化在宫颈癌中的临床意义

目的研究死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)基因启动子甲基化在宫颈癌中的临床意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)检测宫颈癌癌组织和癌旁正常组织中DAPK1基因启动子甲基化,比较在二者间的差异及其与临床病理因素之间的关系。结果宫颈癌组织中DAPK1基因启动子甲基化率为62.5%,癌旁组织中甲基化率为5.0%,宫颈癌组织中DAPK1基因启动子甲基化率显著高于宫颈癌癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌癌组织DAPK1基因启动子甲基化率在组织学分级、肿瘤最大径、淋巴结转移、器官转移、FIGO分期中的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DAPK1基因启动子在宫颈癌中呈高甲基化状态,可作为宫颈癌的病情和预后评估的生物学标志物。     

肾癌组织中TβRⅡ基因甲基化状态的检测及其临床意义

目的探讨转化生长因子B受体Ⅱ（TβR Ⅱ）在肾透明细胞癌（RCA2C）中的甲基化状态及其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR（MSP）技术检测43例肾透明细胞癌组织,43例正常组织中T13RⅡ基因的甲基化状况;应用免疫组织化学P-V法检测40例肾透明细胞癌组织,28例正常组织中TβRⅡ基因的蛋白表达情况。结果RCCC组织中TβRⅡ基因的甲基化率为58．1％（25／43）,显著高于正常组织34．9％（15／43）,差异有统计学意义（P〈0．05）;肾透明细胞癌中耶RII基因的甲基化率与患者年龄、性别、肿瘤的大小和肿瘤分化程度无显著相关性（P〉0．05）。TβRⅡ在RCCC组织中的免疫组化结果显示,基因蛋白表达在RCCC组显著低于正常组（P〈0．05）,且其蛋白表达与肿瘤的大小和肿瘤分化程度相关（P〈0.05）。结论耶RⅡ基因启动子甲基化可能与RCCC的发生有关。     

宫颈脱落细胞RASSF1A基因甲基化在宫颈癌中的临床意义

目的研究宫颈脱落细胞RAS相关区域家族1A(RASSF1A)基因启动子甲基化在宫颈癌中的临床意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应检测宫颈癌患者和健康女性宫颈脱落细胞RASSF1A基因启动子甲基化,分析与病理因素间的关系。结果宫颈癌患者宫颈脱落细胞RASSF1A基因启动子甲基化率为64.0%,高于健康女性的1.3%(P<0.05)。宫颈脱落细胞RASSF1A基因启动子甲基化率在宫颈癌不同组织学分级、肿瘤最大径、淋巴结转移、器官转移、Figo分期患者间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈脱落细胞RASSF1A基因启动子甲基化与宫颈癌病理因素密切相关,可作为宫颈癌病情判断和预后评估的标志物。     

维甲酸受体-β基因和死亡相关蛋白激酶基因启动子区甲基化与食管鳞状细胞癌关系研究

目的观察维甲酸受体-β（retinoic acid receptor β,RARp）基因、死亡相关蛋白激酶（death—associated protein kinase,DAPK）基因在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）中启动子异常甲基化状况,探讨其在ESCC发生中的可能作用及早期诊断价值。方法95例ESCC患者的癌组织（ESCC组）、癌旁组织（癌旁组）及正常组织（对照组）,3组采用实时荧光定量甲基化特异性PCR法检测RAR—β及DAPK的甲基化状态。结果ESCC组、癌旁组、对照组RAR—β基因启动子区CpG岛甲基化发生率分别为46．3％、26．3％和11．6％,DAPK基因启动子区CpG岛甲基化发生率分别为47．3％、22．1％和12．6％,ESCC组RAR—β基因和DAPK甲基化发生率高于癌旁组与对照组（P〈0．05）;ESCC组RAR—β基因甲基化在年龄上差异有统计学意义（P〈0．05）,RAR—β基因和DAPK基因甲基化在肿瘤位置、分化程度、转移及浸润深度上差异无统计学意义（P〉0．05）。结论RAR—β和DAPK基因高度甲基化是ESCC组织的遗传学改变之一,可能参与了ESCC的发生、发展过程。     

子宫内膜癌组织Syk基因的表达及其甲基化分析

目的探讨脾酪氨酸激酶（Syk）基因在子宫内膜癌组织表达及该基因启动子甲基化与子宫内膜癌发生、发展的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应检测52例子宫内膜癌组织及其癌周正常组织中Syk基因的表达,同时采用巢式双重甲基化特异性PCR（MSP）方法检测该基因启动子甲基化情况。结果Syk基因在子宫内膜癌中的表达显著低于相应的癌周正常组织（P-0．000）;子宫内膜癌有淋巴结转移组Syk基因表达率显著低于无淋巴结转移组（x^2=8．32,P〈0．01）。Syk基因启动子甲基化发生率在子宫内膜癌组织中明显高于相应的癌周正常组织（P=0．000）;子宫内膜癌有淋巴结转移组Syk基因启动子甲基化发生率显著高于无淋巴结转移组（x^2=8．15,P〈0．01）;发生甲基化的肿瘤组织中,均无SykmRNA的表达。结论Syk基因启动子甲基化可能是导致Syk基因失活的原因之一,Syk基因启动子甲基化可能与子宫内膜癌发生发展有关。     

DNA修复相关基因甲基化与肺癌A549细胞顺铂化疗耐药的相关性研究

目的探讨5-氮杂-2’脱氧胞苷（5-Aza-2’deoxycytidine,5-Aza—Cde）对顺铂耐药株肺癌A549／DDP细胞DNA修复相关基因hMLH1、MGMT基因启动子区DNA甲基化状态及其表达的影响。方法A549细胞（A549细胞组）、A549／DDP细胞（A549／DDP组）、A549／DDP细胞5、10、20μmol／L5-Aza—Cde组,分别采用甲基化特异性PCR检测细胞hMLHl、MGMT基因甲基化状态,反转录一PCR法检测用药前、后细胞hMLHlmRNA、MGMTmRNA表达情况。结果A549细胞组hMLHl基因呈非甲基化状态且高表达,MGMT呈部分甲基化状态且高表达,A549一DDP细胞组hMLHl、MGMT基因均呈高甲基化状态,mRNA表达下调,10、20μmol／L5-Aza—Cde组hMLHl和MGMT均呈非甲基化状态;A549／DDP细胞组、5μmol／L5-Aza—Cde组hMLHlmRNA与MGMTmRNA表达量均低于A549细胞组（P〈0．05）,20μmol／L5-Aza—Cde组与A549细胞组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;10μmol／L5-Aza—Cde组MGMTmRNA表达量低于A549细胞组（P〈0．05）,hMLH1mRNA表达量与A549细胞组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论hMLHl、MGMT基因甲基化修饰程度与mRNA表达有一定相关性,hMLH1、MGMT基因甲基化可能是肺癌A549细胞对顺铂耐药的因素之一。     

鼻咽癌患者HIF-1α、VEGF-C、COX-2和IL-10表达研究

目的探讨鼻咽癌患者缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、环氧合酶-2(COX-2)和白细胞介素-10(IL-10)的表达、相互关系及临床意义。方法选取鼻咽癌病变组织72例,鼻咽炎对照组25例,健康对照组25例。采用免疫组化法检测组织中HIF-1α、VEGF-C和COX-2;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-10的表达。结果鼻咽癌组织内存在HIF-1α、VEGF-C、COX-2和IL-10的表达,差异有统计学意义(P0.05);与预后呈负相关;而与年龄、性别、肿块类型无关。HIF-1α、VEGF-C、COX-2和IL-10与临床分期有关,随着临床分期的增高表达增强(P0.05)。HIF-1α、VEGF-C和COX-2的表达与淋巴结转移有关,有淋巴结转移组阳性率明显高于无淋巴结转移组(P0.05)。肿瘤中央区HIF-1α、VEGF的表达水平较周边区高,肿瘤表达水平与微血管密度(MVD)密切相关(P0.05)。IL-10与淋巴转移无关。HIF-1α与VEGF、COX-2与VEGF呈正相关,其余无直接相关性。结论 HIF-1α、VEGF-C、COX-2和IL-10的异常表达参与了鼻咽癌的发生发展,联合检测上述指标可能为鼻咽癌的早期诊断、治疗、预后的判断提供有力的临床指导。     

胃癌中钙黏附分子启动子甲基化与幽门螺杆菌感染及肿瘤生物学特性的关系

目的建立甲基化特异性聚合酶链式反应方法检测组织中钙黏附分子（CDH1）的甲基化程度;探索CDH1启动子的甲基化与幽门螺杆菌（HP）感染及与肿瘤分化、浸润、淋巴及远处转移之间的关系。方法采用热转化甲基化特异性聚合酶链式反应法检测2008年1月-2009年12月共40例胃癌手术标本中CDH1的启动子甲基化情况,并回顾性地分析CDH1的启动子甲基化与HP感染、肿瘤分化、浸润、淋巴及远处转移等肿瘤生物学特性的统计学关联。结果胃癌组CDH1基因甲基化阳性率高于对照组（67．5％、12．5％,P〈0．05）。胃癌组中低一未分化肿瘤组CDH1基因甲基化阳性率高于高．中分化肿瘤组（80．6％、22．2％,P〈0．05）;胃癌组中HP阳性患者的CDH1基因甲基化率高于HP阴性患者（78．1％、25．0％,P〈0．05）;而胃癌组中CDH1基因甲基化阳性率与患者性别、肿瘤浸润程度、淋巴转移及远处转移无明显关系（P〉0．05）。结论CDH1基因甲基化可能参与了胃癌的发展过程,并且CDH1基因甲基化可能导致了肿瘤分化程度的降低。CDH1基因甲基化与胃癌患者的HP感染之间可能存在密切关系,提示HP感染可能参与了抑癌基因甲基化失活及肿瘤演变的发展过程。     

干细胞标记物CD133及CK19在鼻咽癌的表达及其临床意义

【目的】探讨CD133、CK19在鼻咽癌组织中的表达情况及临床病理意义。【方法】采用免疫组化法检测112例鼻咽癌及20例正常对照组中CD133、CK19的表达,并分析其临床意义。【结果】CD133在鼻咽癌组织中表达高于正常组织,在原发癌与转移癌之间有显著性差异（P＜0．01）;其表达与患者年龄、性别、病理分型及是否伴有颈部淋巴结转移等临床病理特征均无统计学差异。CK19在鼻咽癌组织中表达与正常组织无明显差异,但在原发癌组与转移癌组之间、伴和不伴颈部淋巴结转移组之间表达均有显著性差异（P＜0．01）。【结论】CD133可能在诱导鼻咽癌转移方面起重要作用,可作为鼻咽癌干细胞较特异的表面标记物;CK19表达与肿瘤转移有关,但不宜作为鼻咽癌干细胞特异标记物。     

甲基化在肺癌中的意义

目的探讨基因T-钙黏蛋白(CDH13)在40例癌组织,40例的癌旁组织标本和非肺癌良性肺切除组织标本15例作为对照的表达的临床意义,进一步研究其基因异常甲基化与肺癌的相关性。方法采用特异性甲基化PCR(MSP)检测该基因在肺癌组织中异常甲基化的水平。结果 1.在肺癌组织中CDH13基因甲基化率明显高于癌旁组织和非肺癌良性肺切除组织,甲基化率分别为32.5%、7.5%、6.7%,有统计学意义(P<0.05)。2.CDH13基因异常甲基化和CDH13的表达水平呈负相关性(r=-0.520).3.CDH13基因启动子区5’CpG岛甲基化阳性率在肺癌组织中显著高于癌旁组织和非肺癌良性肺切除组织,CDH13基因启动子区5’CpG岛甲基化导致了CDH13的表达下调。结论在肺癌组织中CDH13基因异常甲基化率明显升高且有临床诊断意义,CDH13基因在癌组织中的异常甲基化水平将有望成为肺癌新的治疗靶点。