红细胞血型血清学试验中溶血现象的消除

目的 研究红细胞血型血清学试验中溶血的原因及排除方法。方法 检测被抗－A和抗B－致敏的红细胞出现溶血的影响因素,并观察用自制SAN型保养液配制的试剂红细胞应用和保存效果。结果 在常规血清学试验时,孵育时间愈长、温度愈高,则溶血发生频率也增加。该文SAN型保养液配制的试剂红细胞在试验中不出现溶血和弱凝集现象。结论 在ABO反定型和交叉配血试验前,应采用适当的保养液悬浮红细胞,防止出现溶血和弱凝集现象。     

用血细胞分析仪稀释液配制ABO反定型试剂红细胞

目的 研制用于常规ABO血型反定型的简便试剂红细胞.方法 利用Coulter STKS,CD1700和Bayer2120三种血细胞分析仪的稀释液制备5 ml/dl的试剂红细胞,4±2℃冰箱保存,每三天对红细胞的抗原、红细胞数量和质量、上清液游离血红蛋白以及细菌生长情况等进行观察,观察用三种稀释液制备5 ml/dl的试剂红细胞的有效期限.结果 用coulter STKS稀释液配制的试剂红细胞有效期可达20 d,用CD1700稀释液配制的试剂红细胞有效期可达18 d,用Bayer2120稀释液配制的试剂红细胞有效期可达15 d.在＜2 w有效期内,试剂红细胞在ABO反定型试验中敏感度高、抗原特异度强,细菌污染程度最低,可保证常规ABO血型反定型的准确度.结论 用血细胞分析仪稀释液可制备简便的ABO反定型试剂红细胞,有效期可达2 w.     

ABO反定型试剂红细胞配制方法的探讨

目的摸索ABO反定型试剂红细胞的配制方法。方法配制20%的洗涤红细胞悬液后放置4±2℃冰箱保存,每周混匀后取样进行红细胞抗原性及特异性测定和反定型试验(微板法)检测凝集能力实验,观察细胞凝集状态,并记录结果。结果自配反定型试剂保存期为35d。在配制后第35天,自配红细胞与相应的抗血清的特异性凝集反应仍有>2+S的凝集强度,具有良好抗原稳定性;与不对应的抗血清均无凝集反应,具有良好的特异性;用自配红细胞做反定型试验,特异性凝集能被酶标仪测出,符合实验要求。结论运用自配反定型试剂,操作简便,原料易得,成本低廉,制成的红细胞具有良好的免疫特异性、抗原稳定性和凝集效能,符合实验要求。     

3种常用溶液配制ABO反定型红细胞的探讨

目的对3种常用溶液配制ABO反定型红细胞悬液进行比较。方法利用生理盐水、低离子溶液、Sysmex血液分析仪用稀释液3种溶液制备2%的红细胞悬液,(4±2)℃冰箱保存,每天对红细胞的凝集强度、红细胞数量和质量、上清液游离血红蛋白进行观察,每3天监测一次细菌生长情况等。观察用3种溶液制备的反定型红细胞的有效期限。结果用Sysmex血液分析仪专用稀释液配制的反定型红细胞有效期仅6 d,用生理盐水配制的反定型红细胞有效期不到24 h,低离子溶液配制的反定型红细胞当天溶血。结论用Sysmex血液分析仪专用稀释液可制备简便的ABO反定型红细胞,有效期6 d;低离子溶液不适用于配制的反定型红细胞;生理盐水配备的反定型红细胞应每天配制。     

保存试剂红细胞在ABO反定型微凝自动扫描上的应用

为便于ABO血型反定微凝自动扫描检测,本室用保存试剂红细胞代替新鲜生理盐水红细胞完成ABO反定型全自动微凝扫描,通过保存试剂红细胞对2418份血样作ABO反定型微凝自动扫描,一次性扫描判读准确率达99.88%,与对照的生理盐水红细胞扫描结果无明显差异,笔者着重就该保存试剂红细胞在ABO反定微凝扫描上的准确度,稳定性及保存有效期作探讨. 1 材料与方法 1.1 血样来源本站的献血者血样2418份. 1.2 实验仪器 Genesis Rsp 100型全自动加样仪,RoTINA35型平板离心机,spectra.THERMO酶标仪(瑞士TECAN公司);96孔"u"型微量板(上海血液中心); 应用软件TECAN Grenesis RSP控制软件logic及Spectra thermo 酶标仪控制软件Soft-2000(TECAN公司)     

长效反定型红细胞试剂的研究

目的：通过研究实验探索最佳的醛化剂浓度及醛化时间对红细胞进行醛化处理,以获得保存效期长、凝集效果佳的反定型红细胞试剂。方法：分别以0.5%、0.1%、0.05%的戊二醛对洗涤后的红细胞进行1分钟、3分钟、5分钟、10分钟的醛化,配制成5-10%的醛化反定型红细胞试剂,分别与购买的商品化反定型红细胞试剂,单克隆抗A、抗B正定型试剂进行对比试验,同时在2-8℃冰箱放置进行稳定性试验。结果：用0.1%的戊二醛醛化红细胞可以获得最佳的稳定性与凝集效果的平衡,在12个月的保存试验期内试剂稳定,与商品化的反定型红细胞试剂及正定型的对比实验中,二者的结果完全相符。结论：0.1%的戊二醛醛化反定型红细胞试剂具有良好的稳定性及凝集效果,可以用于ABO血型的反定型,同时用醛化的方法制备稳定而又凝集效果佳红细胞试剂也是一条值得探索的途径。     

微量板系统检测ABO和Rh_0(D)血型

本文研究手工微量板方法测定ABO和D血型的自动阅读系统。该系统主要由阅读仪(即酶标比色仪)、信息处理机、计算机、打印机等组成,简称Kemble系统。 材料和方法:分离CPDA-1或EDTA抗凝血标本中的血浆和红细胞,Technicon BG15自动分析仪用于正定型,手工凝集试验用于ABO反定型和复查所有血型异常结果,并进一步复核D阴性标本。每次试验,均取12块由8个U型底孔组成的聚苯乙烯微量滴定板,可测定96份标本。微量板(96孔)纵行1～3和9～11孔是用于ABO正反定型,二种     

固相免疫吸附法在ABO血型反定型中的应用

正为了保障输血安全,《输血技术规范》中明确规定要进行ABO血型反定型检测,但由于目前ABO血型反定型试剂为新鲜红细胞,易溶血,保存期短等原因,试剂质量难以保证。为此,最近我们开发出可以用于ABO血型反定型检测的新方法—固相免疫吸附法,应用的抗原为分子化抗原及处理的红细胞进行反定型检测,分子化抗原及处理的红细胞     

微量板一步法D~u定型

作者采用自动微量板血型鉴定系统的一步法D定型试验,用0.6%的中分子右旋糖酐稀释抗D以增强反应。其方法为:标本红细胞用含0.1%菠萝酶和0.02%吐温20的生理盐水配成2%悬液。试验在96孔U型板进行,每孔加等量的25μl 2%红细胞和25μlD~u定型试剂,室温孵育10分钟后离心,当离心力达200×g时停机,取出微量板置振荡器上振至细胞扣完全悬浮止(约45秒),在30秒钟内由自动ABO/Rh定型系统判读反应结果,随后由血库专家肉眼判定评分。全部试验红细胞血型均经试管法和玻片法抗人球试验验证,计有26份D(十)、61份D(-)和21份D~u型红细胞用于试验条件(主要是D~u定型试剂)的评     

ABO反定型试剂红细胞的质量控制

已知血型的试剂红细胞是ABO血型的血清学鉴定中检测抗体必不可少的试剂。为了提高ABO血型检定结果的准确性，解决自制试剂红细胞无标准和无质控的问题，本研究组建立了ABO反定型试剂红细胞的质控方法，进行了试剂红细胞的特异性和亲和性检测、振荡检测、流式细胞术和原子显微镜观察。通过筛选建立了质控参考品，并在此基础上确定质量检定标准及质控方法，同时对制备的3批次试剂红细胞进行了评价。研究结果表明：制备的反定型试剂红细胞既能保证质量和性能的稳定，又能最大限度地降低批次间的差异。结论：制备的AB0反定型试剂红细胞解决了自制红细胞的质控问题，并能提高血型检定结果的准确性。