体外循环对血小板功能的影响

目的探讨体外循环(CPB)对血小板计数、血小板膜糖蛋白及血小板聚集功能的影响。方法随机选取15例择期CPB下行心脏手术的病人,在全身肝素化前、肝素化后10min、转流30min、转流结束肝素中和后10min及术后24h分别检测血小板数(PLT)、血小板聚集率(PAGM)及血小板膜糖蛋白(CD41a、CD42a、CD61、CD62p)阳性表达率和平均荧光强度(meanfluorescenceintension,MFI)的变化。结果肝素化后10minPLT及PAGM明显下降,转流结束肝素中和后10min为最低,术后24h渐趋恢复;CD41a、CD42a、CD61的阳性表达率各时段间无明显差异(P>0.05),但CD41a、CD61的MFI明显增强,CD42a的MFI明显减弱,与转流前相比有明显差异(P<0.05、P<0.01);CD62p的阳性表达率及MFI在各时段间均有显著差异(P<0.05、P<0.01)。结论CPB过程中,血小板数量急剧下降,聚集功能受损;血小板膜糖蛋白的表达受明显影响。     

血液紫外线照射充氧对血小板的影响

目的　探讨血液紫外线照射充氧对血小板的影响。方法　对 2 3份血液标本行紫外线照射充氧处理前、后分别采用显微镜目视计数法、血小板聚集仪及流式细胞仪进行血小板计数 (PLT)、血小板聚集率(PAGT)及血小板膜糖蛋白 (CD42a、CD61、CD62p)测定 ,并作配对比较。结果　血液紫外线照射充氧后 ,PLT、血小板最大聚率 (PAGM )及CD42a平均荧光强度 (MFI)明显低于紫外线照射充氧前 (P值分别 <0 .0 0 1、<0 .0 0 5、<0 .0 0 1) ;血小板 1min聚集率 (PAG1)、CD61和CD62p的平均荧光强度及CD62 p的阳性表达量明显高于紫外线照射充氧前 (P值分别 <0 .0 5、<0 .0 0 5、<0 .0 0 1、<0 .0 0 1) ;而CD42a、CD61的阳性表达量差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　本实验条件下紫外线照射充氧对血液中的血小板有激活和功能抑制作用。     

川崎病患儿血小板膜糖蛋白变化的动态观察

目的：通过观察血小板膜糖蛋白的动态变化了解川崎病患儿血小板活化及其活化程度。方法：用流式细胞术结合多种抗血小板膜糖蛋白克隆抗体（单抗），测定20例川崎病患儿发病1周（治疗前），2周、3周、4周时血小板膜CD41、CD42a、CD61、CD62p、CD63的表达及阿司匹林，大剂量静脉注射丙种球蛋白（IVIG，1－2g/kg)对其表达的影响，观察活化血小板膜CD62p与冠状动态损伤形成之间的关系。结果：川崎病患儿发病4周血小板膜糖蛋白CD41、CD42a、CD61、CD62p、CD63的表达量高于正常对照组（P＜0．05），阿司匹林，大剂量IVIG不能抑制川崎病患儿血小板膜上活化糖蛋白的高表达，有冠状动脉损伤的川崎病患儿活化血小板膜糖蛋白CD62p的表达量明显高于无冠状动脉损伤的川崎病患儿。结论：川崎病患儿血小板高度活化，血液呈高凝状态，血小板活化是川崎病病理生理的重要表现；活化血小板膜糖蛋白CD62p的明显增高可以作为川崎病患儿冠状动脉损伤的指标之一。     

单采血小板不同保存条件膜糖蛋白的变化

目的探讨单采血小板经不同方法保存后膜糖蛋白(glycoproteins,GP)的变化.方法采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)对17例机采血小板经2种方法保存后测定血小板膜GP CD41a、CD41b、CD42a、CD62p和纤维蛋白原受体(fibrinogen receptor,PAC-1).结果 22 °C保存后CD62p的表达率和平均荧光强度(mean fluorescence intension,MFI)均随时间的延长而逐渐增高,由采集时的10.96%±5.54%和31.98±16.33至保存后的第6天增高到91.31%±7.79%和79.80±19.68;与当日比较P<0.001.-80 ℃保存3个月后的CD62p的表达率除与22 ℃保存1 d 时相同外(P>0.05),均低于22 ℃保存2～6 d(P<0.001);PAC-1的表达率于保存后1 d 开始增高,到保存第3天又逐渐下降.CD41a无论是表达率还是MFI保存后均高于采集当天(P<0.001).CD41b和CD42a保存后变化范围不大.结论 (1) 血小板膜GP的表达率和MFI随保存时间的延长而增高,PAC-1保存到第3天后又逐渐下降,以CD62p、PAC-1及CD41a变化为大;(2) 血小板加保护剂于-80 ℃保存稳定性较好.     

单采血小板不同保存条件膜糖蛋白的变化

目的　探讨单采血小板经不同方法保存后膜糖蛋白 (glycoproteins ,GP)的变化。 方法　采用流式细胞术 (flowcytometry ,FCM)对 17例机采血小板经 2种方法保存后测定血小板膜GPCD4 1a、CD4 1b、CD4 2a、CD6 2p和纤维蛋白原受体 (fibrinogenreceptor,PAC 1)。 结果　 2 2°C保存后CD6 2 p的表达率和平均荧光强度 (meanflu orescenceintension ,MFI)均随时间的延长而逐渐增高 ,由采集时的 10 .96 %± 5 .5 4 %和 31.98± 16 .33至保存后的第 6天增高到 91.31%± 7.79%和 79.80± 19.6 8;与当日比较P <0 .0 0 1。 - 80℃保存 3个月后的CD6 2p的表达率除与 2 2℃保存 1d时相同外 (P >0 .0 5 ) ,均低于 2 2℃保存 2～ 6d(P <0 .0 0 1) ;PAC 1的表达率于保存后1d开始增高 ,到保存第 3天又逐渐下降。CD4 1a无论是表达率还是MFI保存后均高于采集当天 (P <0 .0 0 1)。CD4 1b和CD4 2a保存后变化范围不大。结论　 (1)血小板膜GP的表达率和MFI随保存时间的延长而增高 ,PAC 1保存到第 3天后又逐渐下降 ,以CD6 2 p、PAC 1及CD4 1a变化为大 ;(2 )血小板加保护剂于 - 80℃保存稳定性较好     

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa测定在诊断血小板无力症中的应用

目的:探讨流式细胞术测定血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(CD41/CD61)及其在血小板无力症(GT)诊断中的初步应用。方法:以流式细胞术结合免疫荧光标记法检测血小板CD41和CD61的阳性百分率,观察30例正常人、1例血小板无力症疑似患者及其父母的血浆CD41和CD61的阳性表达率。结果:正常人血浆阳性表达率CD41和CD61的均值分别为93·10%和93·87%;患者、患者父亲和母亲CD41、CD61阳性表达率分别为0·02%、0·06%;97·4%、96·6%和98·1%、96·8%。结论:用流式细胞仪测定CD41和CD61的阳性表达率是检测GPⅡb/Ⅲa的可靠方法,可用于临床血小板无力症的诊断。     

2型糖尿病下肢动脉硬化病变部位和程度与血小板膜糖蛋白表达的相关性研究

目的:探讨血小板膜糖蛋白在2型糖尿病下肢动脉硬化闭塞症(ASO)患者不同部位和不同严重程度的表达及其相关性。方法:80例2型糖尿病合并下肢动脉硬化闭塞症患者,分别检测血小板膜糖蛋白CD62p、CD63、CD61、CD41a、CD42b、纤维蛋白原及血小板黏附、聚集试验,根据影像学资料和临床踝肱指数(ABI)检查区分不同部位和严重程度,并比较其差异。结果:2型糖尿病ASO患者髂股动脉端狭窄闭塞患者的血小板膜糖蛋白CD62p、CD63较腘动脉以下闭塞患者明显升高,CD62p、CD63与ABI无相关性。结论:检测血小板膜糖蛋白对于判断2型糖尿病病变部位有一定临床意义。     

血细胞分离机制备的浓缩血小板与洗涤血小板的体外实验对照

目的　对比研究体外采集洗涤对血小板功能与形态的影响。方法　采用血细胞分析仪、经典玻球法、经典比浊法及流式细胞技术检测CS 30 0 0 plus血细胞分离机制备的单个供者浓缩血小板和洗涤血小板 ,采集前后及相互间血小板的有关形态学指标、粘附聚集性、血小板活化依赖性颗粒外膜蛋白 (GMP 14 0 )及血小板膜GPⅡb/Ⅲa复合物的表达。结果　两组制品的血小板PDW、PCT、MPV均比采集前显著降低 ,但组间比较差异无显著性意义 ;两组血小板的粘附聚集率、CD62p+ 及CD41a+ CD62p+ 阳性表达率采集前后及组间比较 ,差异均无显著性意义。两组制品的血小板CD41a+ 阳性表达率显著高于采集前 ,但组间比较差异无显著性意义。结论　血小板在体外的采集过程中可能受到轻微激活损伤 ;采用CS 30 0 0 plus血细胞分离机制备的浓缩血小板和洗涤血小板质量可靠、临床适用性强 ;用流式细胞技术检测血小板CD41a+ 、CD62p+ ,评价体外血小板功能有较好的参考价值     

血小板抗体及标志物检测在特发性血小板减少性紫癜患者诊断中的价值

目的　探讨血小板相关抗体 (PAIgG )和血小板活化标志物GPⅡb/Ⅲa及CD62P表达在特发性血小板减少性紫癜 (ITP)患者中诊断价值。方法　采用流式细胞术分别对ITP患者及各对照组的PAIgG、GPⅡb/Ⅲa及CD62P的表达情况进行分析测定。 结果　ITP患者组GPⅡb/Ⅲa血小板阳性表达率明显高于其他各组 (P <0 0 1) ,CD62P血小板阳性表达率 4组间差异无显著意义 (P >0 0 5) ;在 53例ITP患者中 ,3 4例表现为PAIgG阳性血小板百分率增高 (64 2 % ) ,3 8例表现为平均荧光强度 (MFI)增高 (71 7% ) ,将PAIgG与MFI综合统计 ,对ITP患者阳性诊断率为 84 9% (45/53 ) ;无临床症状ITP患者的GPⅡb/Ⅲa活性表达明显高于有临床症状ITP患者 (P <0 0 1)。结论　PAIgG对ITP诊断具有较高的阳性率 ,同时结合GPⅡb/Ⅲa ,可提高ITP的诊断正确率 ;GPⅡb/Ⅲa可作为ITP患者疗效监测及判断预后的指标 ;CD62P并非监测ITP患者血小板活化的理想标志物。     

流式细胞术在血小板膜糖蛋白Ⅱb/IIIa位点定量检测中的应用及临床意义

目的评价流式细胞术（FCM）定量检测血小板膜糖蛋白（GP）Ⅱb／Ⅲa位点的性能，探讨正常人与白血病患者GPⅡb／Ⅲa位点数及CD41／CD61阳性表达率的关系。方法用FCM检测GPⅡh／Ⅲa位点，以国际标准评价其检测性能；并检测13例正常人和16例急性白血病患者血小板GPⅡb／Ⅲa的位点数及CD41／CD61表达率。结果FCM检测GPⅡb／Ⅲa位点的批内CV〈1％、批间CV〈3％及总重复性的CV〈2％；检测线性良好，标本量（血小板数1000～7000）对GPⅡh／Ⅲa位点检测无影响，CV〈2％；GPⅡb／Ⅲa位点检测标准曲线的平均荧光强度（MFI）与位点数间相关性很好（r=0．9998）。同时，正常人GPⅡb／Ⅲa的游离位点数平均为76944，总位点数平均为74432，CD41／CD61平均表达率为98．0％，急性淋巴细胞白血病患者GPⅡb／Ⅲa游离位点数平均为64180，总位点数平均为61079，CD41／CD61平均表达率为68．5％，急性非淋巴细胞白血病患者GPⅡb／Ⅲa游离位点数平均为63634，总位点数平均为58667，CD41／CD61平均表达率为61．6％。经t检验，急性白血病患者的GPⅡb／Ⅲa位点数及CD41／CD61表达率明显低于正常者（P均〈0．02）。结论流式细胞术可直接、快速、特异地检测血小板GPⅡb／Ⅲa位点数，可为急性白血病患者的出血机制研究及治疗提供依据。