骨保护蛋白和骨保护蛋白配体在脊柱结核病灶骨中的表达

背景：脊柱结核病灶骨组织硬化的病理过程较为复杂,其发生机制尚不明确。目的：探讨脊柱结核病灶骨不同部位的骨保护蛋白和骨保护蛋白配体的表达。方法：取脊柱结核患者脊柱结核术中切除的骨质,按照部位分成硬化骨组,亚正常骨组和正常骨组。应用PV-6000二步法免疫组化检测技术测定各组标本中骨保护蛋白和骨保护蛋白配体的平均吸光度及阳性面积比,并进行统计学分析。结果与结论：脊柱结核硬化骨组骨保护蛋白平均吸光度,阳性面积比以及骨保护蛋白和骨保护蛋白配体表达的比值均显著高于亚正常骨组和正常骨组（P〈0.01或P〈0.05）。结果表明骨保护蛋白和骨保护蛋白配体的表达变化与脊柱结核病灶周围硬化骨的产生有关。     

自体髂骨植骨及加或不加钢板内固定治疗脊柱结核60例:置入后C-反应蛋白水平与植骨融合时间的相关性

背景:临床实践中观察到脊柱结核患者行结核病灶清除、植骨、加或不加钢板内固定术后患者的C-反应蛋白变化与植骨块骨性融合时间有一定的联系.目的:分析脊柱结核患者术后C-反应蛋白含量水平和植骨融合时间的相关性.方法;选择2007-01/2009-12脊柱结核患者60例,均行结核病灶清除、自体髂骨植骨、加或不加钢板内固定术,并经病理证实.术后1,7,14d检测C-反应蛋白水平,按C-反应蛋白平均值变化程度分4组:C-反应蛋白水平10-25 mg/L为轻度升高组,26～50 mg/L为中度升高组,51～100 mg/L为高度升高组,>101 mg/L为极度升高组.术后12,16,24周行X射线或CT检查及复查C-反应蛋白,记录植骨块骨性融合情况并记录融合时间.对4组脊柱结核患者术后C-反应蛋白水平和植骨块骨性融合时间进行差异性分析和相关性研究.结果与结论:轻度升高组18例,中度升高组21例,高度升高组13例,极度升高组8例;骨性愈合时间:≤12周8例,≤16周34例,≤24周18例.4组植骨块骨性融合时间差异性分析显示差异有非常显著性意义(x2=13.990,P=0.003),Spearman相关分析显示,术后C-反应蛋白水平多样性与脊柱结核术后植骨块骨性融合时间正相关(r=0.420,P=0.001).     

重组骨保护蛋白对糖皮质激素性骨质疏松的保护作用

背景:糖皮质激素性骨质疏松的发生机制与骨保护蛋白表达下调相关,在治疗雌激素缺乏性骨质疏松的动物实验和临床应用中,骨保护蛋白均表现出良好的抗骨吸收效能.目的:验证外源性重组骨保护蛋白对糖皮质激素所致骨质疏松的影响.设计、时间及地点:随机分组设计、对照动物实验,于2006-01/2008-06在解放军总医院骨科研究所完成.材料:选择清洁级健康成年雄性wistar大鼠60只;地塞米松磷酸钠注射液为天津金耀氨基酸有限公司产品,批准文号:国药准字H12020515.方法:大鼠随机分为3组,每组20只.对照组,生理盐水给药对照组;地塞米松组,单纯糖皮质激素给药组;骨保护蛋白组,糖皮质激素联合重组骨保护蛋白给药组.主要观察指标:12周各组大鼠分别取材,进行尿钙、磷、肌酐、骨密度、骨生物力学测定;大鼠骨骼局部免疫组织化学染色观察骨保护素表达.结果:纳入动物60只,均进入结果分析.①地塞米松组与对照组比较,尿钙上升(P<0.05);腰椎、股骨骨密度均明显下降(P<0.05),其中腰椎骨密度下降尤为显著(P<0.01);腰椎和股骨生物力学检测最大载荷、最人应力、弹性载荷、弹性应力、弹性模量显著下降(P<0.05);免疫组织化学显示骨髓内源性骨保护蛋白表达显著下降(P<0.01).②骨保护蛋白组与地塞米松组比较,尿钙下降(P<0.01);骨密度增加(P<0.05);腰椎和股骨生物力学检测指标均增强(P<0.05);骨髓内源性骨保护蛋白表达无明显变化.结论:糖皮质激素抑制骨骼局部骨保护蛋白表达,继发了渐进性骨质丢失,促进了骨质疏松的形成.重组骨保护蛋白可以部分抑制糖皮质激素引起的骨吸收,降低骨吸收指标、提高骨密度、增加骨强度,从而改善糖皮质激素性骨质疏松状况.     

环氧化酶2、骨形态形成蛋白2和血管内皮生长因子在异位骨化组织中的表达

背景:研究发现环氧化酶2抑制剂具有预防肘关节周围异位骨化的作用。目的:观察环氧化酶2、骨形态形成蛋白2和血管内皮生长因子在肘关节创伤后异位骨化组织中的表达,并分析其相关性。方法:采用免疫组化SP法检测18例肘关节创伤后异位骨化组织及10例正常骨组织中环氧化酶2、骨形态形成蛋白2和血管内皮生长因子的表达水平,利用HPIAS-1000图像分析系统测定异位骨化组织与正常骨组织中环氧化酶2、骨形态形成蛋白2和血管内皮生长因子的平均吸光度和阳性区域面积百分率,并分析3种蛋白阳性区域面积百分率之间的相关性。结果与结论:异位骨化组织中环氧化酶2、骨形态形成蛋白2和血管内皮生长因子呈高表达;正常骨组织中呈低表达或不表达。图像分析结果显示异位骨化组织中3种蛋白平均吸光度及阳性区域面积百分率显著高于正常骨组织(P<0.01)。异位骨化组织中环氧化酶2与骨形态形成蛋白2、血管内皮生长因子的阳性区域面积百分率呈正相关(P<0.01)。提示环氧化酶2、骨形态形成蛋白2和血管内皮生长因子在异位骨化的形成过程中起重要作用,环氧化酶2可能通过诱导骨形态形成蛋白2和血管内皮生长因子的表达从而促进异位骨化组织中的成骨和血管形成。     

脊柱结核内植物置入后基于C-反应蛋白及红细胞沉降率多样性与植骨融合时间的相关分析

背景:脊柱结核行结核病灶清除、植骨、加或不加钢板内固定后患者C-反应蛋白及红细胞沉降率变化与植骨块骨性融合时间有一定的联系.目的:分析脊柱结核内置物置入后C-反应蛋白及红细胞沉降率动态多样性和植骨融合时间的相关性.方法:60例脊柱结核患者均行结核病灶清除、自体髂骨植骨、加或不加钢板内固定治疗,其中内固定38例,无内固定22例.根据术后C-反应蛋白水平及红细胞沉降率分别分为轻度升高、中度升高、高度升高组和极度升高组.分析术后C-反应蛋白、红细胞沉降率和植骨块骨性融合时间差异性和相关性.结果与结论:①C-反应蛋白:轻度升高18例,中度升高21例,高度升高13例,极度升高8例.4组骨性愈合时间差异有非常显著性意义(P=0.003).Spearman相关分析显示相关系数为r=0.420,P=0.001,说明术后C-反应蛋白水平多样性与骨性融合时间长短呈正相关.②红细胞沉降率:轻度升高16例,中度升高20例,高度升高13例,极度升高11例.4组骨性愈合时间差异有非常显著性意义(P=0.003).Spearman相关分析显示相关系数为r=0.414,P=0.001,说明术后红细胞沉降率多样性与骨性融合时间长短呈正相关.③内固定组植骨融合时间快于无内固定组,说明即时坚强内固定有利于促进骨性愈合.     

绝经后妇女骨代谢过程中血清基质金属蛋白酶3和骨桥蛋白的变化

背景：骨桥蛋白和基质金属蛋白酶3具有高度的亲和力,此二者的表达可能与骨代谢有关。目的：观察绝经后妇女血清基质金属蛋白酶3和骨桥蛋白水平,并观察其与骨保护蛋白、骨保护蛋白配体及骨代谢指标的关系。方法：将120名绝经后妇女分为骨密度正常组、低骨量组和骨质疏松组3组,对其血清基质金属蛋白酶3、骨桥蛋白、骨保护蛋白、骨保护蛋白配体及骨碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型胶原交联C端肽和尿Ⅰ型胶原交联N端肽进行测定,计算骨桥蛋白/基质金属蛋白酶3比值。结果与结论：骨质疏松组中血清骨桥蛋白和基质金属蛋白酶3的水平高于正常组（P〈0.05）。绝经后妇女血清基质金属蛋白酶3、骨桥蛋白和骨桥蛋白/基质金属蛋白酶3比值与血清骨保护蛋白配体、骨碱性磷酸酶和骨钙素水平呈明显负相关（P〈0.05）,与骨保护蛋白、尿尿Ⅰ型胶原交联N端肽/肌酐比值呈明显正相关性（P〈0.05）。骨质疏松组中血清基质金属蛋白酶3、骨桥蛋白和骨桥蛋白/基质金属蛋白酶3比值与血清骨保护蛋白配体、骨碱性磷酸酶和骨钙素水平呈明显负相关（P〈0.05）,与骨保护蛋白、尿尿Ⅰ型胶原交联N端肽/肌酐水平比值存在明显正相关性（P〈0.05）。提示绝经后妇女血清骨桥蛋白水平和骨桥蛋白/基质金属蛋白酶3比值升高与绝经后骨质疏松症伴随骨代谢转换过程增快有关。     

金乌骨通胶囊含药血清对成骨细胞骨保护素/核因子κB受体活化因子配体分泌的影响

背景:金乌骨通胶囊对绝经后骨质疏松症具有明显的治疗作用,但其具体的作用机制尚不清楚。目的:观察金乌骨通胶囊含药血清对成骨细胞骨保护素、细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor activator nuclear factor kappa B ligand,RANKL)表达的影响。方法:切除雌性SD大鼠双侧卵巢制备去卵巢血清,灌胃给予去卵巢大鼠金乌骨通胶囊制备去卵巢含药血清。取第3代生长状况良好的出生24h内的SD大鼠成骨细胞,正常血清组、去卵巢血清组、去卵巢含药血清组分别加入正常雌性SD大鼠血清、去卵巢血清和去卵巢含药血清培养72h。采用酶联免疫吸附法检测成骨细胞骨保护素和RANKL的分泌水平。结果与结论:与正常血清组比较,去卵巢血清组成骨细胞骨保护素的表达明显降低(P<0.01),而RANKL的表达明显升高(P<0.05);与去卵巢血清组比较,去卵巢含药血清组成骨细胞骨保护素的表达明显升高(P<0.05),RANKL的表达明显降低(P<0.05)。说明金乌骨通胶囊可通过增加成骨细胞骨保护素的表达,抑制RANKL的表达来实现治防治骨质疏松症的目的。     

骨形态发生蛋白2和7共转染骨髓间充质干细胞的成骨分化

背景:骨形态发生蛋白最主要的作用是诱导骨形成,但因提取困难、代谢速度快、难以准确控制其使用浓度、价格昂贵等限制了其在体外和体内相关研究中的应用。目的:构建含特异细胞生长因子基因骨形态发生蛋白2,7的腺病毒载体,观察骨形态发生蛋白2和骨形态发生蛋白7基因共转染对兔骨髓间充质干细胞成骨分化的促进作用。方法:将全骨髓贴壁法分离得到兔骨髓间充质干细胞传至第3代,分为5组,空白组和常规诱导组分别以常规培养基和成骨诱导分化培养基培养;骨形态发生蛋白2,7腺病毒转染组:分别单独以骨形态发生蛋白2、骨形态发生蛋白7腺病毒进行转染;联合转染组:以2种骨形态发生蛋白腺病毒联合转染。结果与结论:转染第7天,联合转染组成骨相关基因Runx-2、Osx、Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶mRNA表达均较其他各组增高(P<0.05);骨形态发生蛋白2,7腺病毒转染组上述指标较空白组和常规诱导组增高(P<0.05)。转染第14天,联合转染组4个指标均较其他各组明显增高(P<0.05);同时,4个指标表达均高于第7天(P<0.05)。病毒转染后第7天,联合转染组Ⅰ型胶原和骨钙素蛋白表达均较其他组明显增高(P<0.05)。提示对骨髓间充质干细胞进行骨形态发生蛋白2腺病毒和骨形态发生蛋白7腺病毒共转染后,较单基因转染和成骨诱导液诱导更能促进成骨相关基因和蛋白的表达。     

胸腰椎脊柱结核骨融合技术研究进展

脊柱结核以腰椎及胸椎多见.如果不及时、有效的治疗,最终会出现椎体破坏加重、死骨形成增多、脊柱后突畸形、脊髓神经受压甚至导致截瘫.由于脊柱结核病灶是一个结核感染灶,在清除病灶后进行骨融合不是一个普通的植骨、内固定的问题,其病灶骨在结核发展晚期均已硬化或者部分硬化,病灶周围软组织的纤维疤痕化使局部缺血,病灶清除术后残留的结核杆菌等因素都会影响植骨融合.     

单核细胞趋化蛋白1和骨形成蛋白7在病理性瘢痕中的表达

背景:单核细胞趋化蛋白1是新近明确的对单核/巨噬细胞有趋化和激活双重作用的趋化因子,骨形成蛋白7作为一种新发现的纤维化负性调节因子逐渐成为抗组织纤维化治疗的研究热点,但两者对病理性瘢痕形成中组织纤维化作用的研究至今鲜有报道。目的:研究单核细胞趋化蛋白1,骨形成蛋白7在病理性瘢痕中的表达水平。方法:采用免疫组织化学方法检测单核细胞趋化蛋白1、骨形成蛋白7在25例瘢痕疙瘩、30例增生性瘢痕、24例非病理瘢痕和20例正常皮肤组织中的表达水平。所有标本均来自2008-07/2010-01郑州大学第一附属医院整形外科住院患者,且均无皮肤疾病、结缔组织病、传染病、恶性肿瘤和其他重要脏器疾病,术前无射线治疗、激光治疗及免疫治疗史,其中所取瘢痕组织来自于临床诊断明确的瘢痕患者。结果与结论:单核细胞趋化蛋白1在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕中的阳性表达率均高于非病理性瘢痕与正常皮肤组织(P<0.05),骨形成蛋白7阳性表达率均降低(P<0.05),两者阳性表达率在病理性瘢痕(瘢痕疙瘩和增生性瘢痕)中呈明显负相关(r=-0.639,P<0.01)。结果显示,在病理性瘢痕的形成过程中单核细胞趋化蛋白1表达上调,而骨形成蛋白7表达下调。     

Increased levels of osteoprotegerin in hemodialysis patients.

Recently identified soluble circulating osteoprotegerin (OPG), a member of tumor necrosis factor receptor family, is the osteoclastogenesis inhibitory factor (OCIF). It acts as a "decoy" receptor for receptor activator of NF-kappaB ligand (RANKL) and antagonises RANKL/RANK activity. This way OPG exerts the protective effect on bone, which is also important in hyperparathyroidism. The studies measuring OPG levels in secondary hyperparathyroidism have shown contradictory results and inconsistent conclusions. The aim of our work was to evaluate OPG levels in hemodialysis patients and their correlation with the intensity of bone turnover, bone formation and bone resorption. Serum OPG levels, bone alkaline phosphatase activity (bALP) and beta-CrossLaps (CTx) were measured in a control group (n = 20, age 30+/-6.7 years) and in two groups of dialysis patients: the first group with serum intact parathyroid hormone (iPTH) concentration below 200 pg/ml (n = 28, age 62.6+/-14.8 years) and the second group with iPTH concentration above 200 pg/ml (n = 16, age 63.7+/-14.8 years). Compared to controls, serum OPG levels were 6.4-fold higher in dialysis patients. OPG levels in patients with high PTH were approximately 1.2-fold higher than in the low-PTH group. OPG correlated weakly with bALP (r = 0.277, p = 0.153), as well as with CTx (r = 0.018, p = 0.929) in the low-PTH group, and there was an insignificant negative correlation in the high-PTH group (r = -0.145, p = 0.593 and r = -0.219, p = 0.416, respectively). In conclusion, 6.4-fold increase in OPG might protect bone against intensive bone loss in hemodialysis patients, but this increase is probably not mediated by the increased bone formation; rather, it seems to be the consequence of the imbalance of bone kinetics in renal disease. The precise role of OPG in the pathogenesis of renal osteodystrophy remains unknown and establishing it requires further studies.     

Role of osteoprotegerin (OPG) in cancer

OPG (osteoprotegerin), a secreted member of the TNF (tumour necrosis factor) receptor superfamily, has a variety of biological functions which include the regulation of bone turnover. OPG is a potent inhibitor of osteoclastic bone resorption and has been investigated as a potential therapeutic for the treatment of both osteoporosis and tumour-induced bone disease. Indeed, in murine models of cancer-induced bone disease, inhibition of osteoclastic activity by OPG was also associated with a reduction in tumour burden. The discovery that OPG can bind to and inhibit the activity of TRAIL (TNF-related apoptosis-inducing ligand) triggered extensive research into the potential role of OPG in the regulation of tumour cell survival. A number of reports from studies using in vitro models have shown that OPG protects tumour cells from the effects of TRAIL, thereby possibly providing tumour cells that produce OPG with a survival advantage. However, the ability of OPG to act as a tumour cell survival factor remains to be verified using appropriate in vivo systems. A third area of interest has been the use of OPG as a prognostic marker in various cancer types, including myeloma, breast and prostate cancer. This review provides an overview of the role of OPG in cancer, both in cancer-induced bone disease and in tumour growth and survival.     

Circasemidian rather than circadian variation of circulating osteoprotegerin in clinical health

Osteoprotegerin (OPG) serves as a soluble decoy receptor for RANKL to inhibit osteoclast formation and activity. Hormones such as PTH and glucocorticoids have been reported to decrease OPG concentrations, while estrogens, transforming growth factor b, related bone morphogenic factor and thrombopoietin reportedly enhance the OPG production in the osteoblastic and bone stromal cells. Since bone turnover shows a prominent circadian rhythm in laboratory animals and humans, with bone resorption increasing at night, we investigated the time structure of circulating OPG concentrations in a group of nine healthy subjects (six women and three men; in the age range of 26–49 years). Blood samples for OPG determination were collected every 4 h for 24 h on the same day, starting at 08:00 in the morning. Data were analyzed by inferential statistical procedures, including the single and population-mean cosinor. A 12-h component was found to characterize serum OPG concentrations (P = 0.038) with peak concentrations around noon and midnight. No statistically significant circadian rhythm of OPG concentrations could be found by cosinor in our study population. The mean 24-h OPG concentration was higher in women than in men (mean ± S.E.: 3.13 ± 0.44 vs. 1.94 ± 0.26 pmol/l, Student t = 2.325, P = 0.053). Since PTH concentrations also exhibit a bimodal pattern along the 24-h scale, PTH may be tested as a putative determinant of the observed changes in serum concentrations of osteoprotegerin.     

骨保护素对破骨细胞分化和骨吸收活性的抑制作用

背景骨保护素(osteoprotegerin,OPG)可抑制破骨细胞的分化,抑制成熟破骨细胞的骨吸收活性并诱导其凋亡,在骨质疏松、类风湿性关节炎、癌症骨转移的领域有潜在的应用价值.目的鉴定在CHO细胞中表达的人骨保护素生物学活性.设计随机对照的实验研究.地点和对象实验在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所完成,研究对象人骨肉瘤细胞株MG63、中国仓鼠CHO细胞株、克隆质粒pUC19及真核表达质粒pcDNA3为本室保存,12只6～8周龄BABL/c雄性小鼠由本校动物中心提供.干预RT-PCR法获得人OPG编码区cDNA并构建真核表达载体,在脂质体介导下转染CHO细胞,经Western blot鉴定筛选稳定表达OPG的细胞系.获取含有OPG蛋白的条件培养基浓缩液,实验组体外培养的鼠破骨细胞培养基中加入含有OPG蛋白的条件培养基浓缩液.对照组1只加入转染pcDNA3空载体的CHO细胞培养基的浓缩液.对照组2只加入完全培养基.主要观察指标观察人OPG对破骨细胞的分化和骨吸收的影响.结果转染人OPG编码区基因的CHO细胞能分泌表达OPG.小鼠骨髓细胞在1α,25(OH)2D3(1×10-8mol/L)的存在下可稳定分化出具有骨吸收功能的破骨细胞样细胞,在该培养体系中加入含有OPG的CHO细胞培养上清浓缩液,TRAP染色阳性细胞数明显减少(t=5.547,P＜0.01),骨吸收陷窝的数量显著减少(t=3.409,P＜0.01).结论人骨保护素可在CHO细胞中分泌表达,并对体外培养状态下的破骨细胞的分化和骨吸收功能有抑制作用.     

前列腺癌患者血清骨保护素测定的临床价值

目的 通过测定前列腺癌患者血清中骨保护素(OPG)的浓度判断前列腺癌是否存在骨转移等方面的临床价值.方法 采用双抗体夹心酶联免疫法测定40例前列腺癌患者血清OPG浓度,同时采集患者术前ECT骨扫描以及Gleason病理评分.分析血清OPG浓度与前列腺癌骨转移及Gleason病理评分之间有无相关性.结果 ECT骨转移阳性前列腺癌患者血清OPG浓度[(16237.19±5144.26)ng/L]明显高于骨转移阴性前列腺癌患者[(12123.32±4136.50)ng/L].Gleason评分的高低与血清OPG浓度无相关性(P均＞0.05).结论 血清OPG浓度对预测前列腺癌患者是否有骨转移有重要临床价值,血清OPG浓度与前列腺癌Gleason病理评分无明显相关性.     

Circulating levels of osteoprotegerin and receptor activator of NF-kappaB ligand in patients with chronic renal failure.

BACKGROUND: Osteoprotegerin (OPG) is a recently identified cytokine that acts as a decoy receptor for the receptor activator of nuclear factor-kappaB ligand (RANKL). OPG and RANKL have been shown to be important regulators of osteoclastogenesis. The aim of this study was to investigate the relationship between the OPG-RANKL system and bone mineral metabolism in patients with chronic renal failure (CRF). METHODS: Serum OPG, RANKL, osteocalcin, cross-linked c-telopeptide of type I collagen (ICTP), intact parathyroid hormone (PTH), bone alkaline phosphatase and cystatin C levels were measured in 40 chronic hemodialysis male patients and 32 age- and sex-matched healthy controls. Their lumbar spine bone mineral density (LS-BMD) was measured by dual energy X-ray absorptiometry. RESULTS: Serum OPG, RANKL, PTH, bone alkaline phosphatase and cystatin C levels were significantly increased in patients with CRF. Serum OPG was positively correlated to serum RANKL and cystatin C. Positive correlations were found between serum RANKL and cystatin C and ICTP. LS-BMD was significantly lower in patients with CRF than in controls. In patients with CRF, LS-BMD was inversely correlated to serum RANKL and cystatin C, whereas it was positively correlated to serum OPG. CONCLUSIONS: The OPG-RANKL system is involved in the pathogenesis and regulation of bone turnover in CRF. Circulating levels of OPG and RANKL may be useful markers to assess turnover renal osteopathies.     

雌二醇与孕激素对人成骨细胞护骨素基因作用的比较

背景: 护骨素是一种由成骨细胞表达的蛋白, 可抑制破骨细胞分化和活化。目的: 观察比较 17 β- 雌二醇与孕激素对人成骨细胞护骨素基因表达的调控作用。设计: 对比观察。单位: 中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所。材料: Ⅳ型胶原酶( Sigma 公司), 胎牛血清(Gibico 公司), MEM(Sigma公司), 骨钙素放射免疫法测定试剂盒(Dia2Sorin 公司)。方法: 实验于 2003- 01/2006- 03 在中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所完成。采用正常人髂前上棘松质骨进行成骨细胞的提取和培养, 人成骨细胞用 17β- 雌二醇与孕酮干预, 采用 Northern 杂交检测护骨素mRNA 表达及酶联免疫吸附法检测护骨素蛋白质表达。主要观察指标: ①人成骨细胞鉴定。②Northern 杂交分析 17β- 雌二醇、孕酮对人成骨细胞护骨素 mRNA 表达的影响。③酶联免疫吸附分析17β- 雌二醇、孕酮对人成骨细胞护骨素蛋白质分泌的影响。结果: ①人成骨细胞鉴定: 人成骨细胞分泌的碱性磷酸酶活性为(74.3±4.7) U/g; 培养上清液中骨钙素浓度为(3.84±0.39) μg/L。表明分离培养的人成骨细胞具有成骨细胞的特性。②Northern 杂交分析 17β- 雌二醇、孕酮对人成骨细胞护骨素 mRNA 表达的影响: 人成骨细胞对照组护骨素 mRNA 表达条带弱, 与对照组相比, 1×10-10, 1×10-9, 1×10-8 mol/L17β- 雌二醇干预组护骨素 mRNA 表达条带逐渐增强; 与 0 h 相比, 干预12, 24 及 48 h 护骨素 mRNA 表达逐渐增强; 孕酮对人成骨细胞护骨素mRNA表达无影响。③酶联免疫吸附分析 17β- 雌二醇、孕酮对人成骨细胞护骨素蛋白质分泌的影响: 与对照组比较, 1×10 -10, 1×10-9, 1×10-8 mol/L雌二醇组护骨素蛋白质分泌增加[(0.64 ±0.14), (1.27±0.26), (2.34±0.35),(3.62 ±0.23) μg/ L, P < 0.01]。与对照组相比, 1×10-8 mol/L 17β- 雌二醇干预 12, 24, 48 h, 护骨素蛋白质分泌增加[(0.62±0.12)比(1.30±0.30),(3.07±0.14), (3.50±0.33) μg/L, P < 0.01]。1×(10-10～10-8) mol/L 孕酮干预 12～48 h 对成骨细胞护骨素蛋白质表达无影响(P > 0.05)。结论:17β- 雌二醇促进人成骨细胞护骨素基因表达, 孕酮对其无影响,表明雌激素与孕激素对骨代谢有不同的调节机制。     

聚甲基丙烯酸甲酯颗粒对人滑膜细胞核因子κB受体激动剂配体/骨保护蛋白表达的影响

背景:多种因子可以影响骨保护蛋白/核因子κB受体激动剂配体/核因子κB受体激动剂(Osteoprotegerin/receptor activator of nuclear factor-kappaB/ligand of receptor-activator of nuclear factor-kappaB,OPG/RANKL/RANK)系统的表达影响骨代谢,那么松动假体周围的骨水泥颗粒是否也通过影响其代谢参与假体松动过程?目的:观察聚甲基丙烯酸甲酯颗粒对人滑膜细胞RANKL/OPG表达的影响。方法:体外培养人滑膜细胞,在滑膜细胞培养体系中分别加入质量浓度为0(空白对照),0.2,1,10g/L的聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥颗粒,采用荧光定量PCR检测上述各浓度PMMA颗粒作用不同时间后滑膜细胞内RANKL、OPG的表达量及其比值。结果与结论:与空白对照组相比,各实验组滑膜细胞内RANKL、OPG的表达量均有下降;随着与聚甲基丙烯酸甲酯颗粒共培养时间延长,各实验组滑膜细胞内RANKL、OPG表达均有下降趋势,而RANKL/OPG表达比值无明显变化。说明聚甲基丙烯酸甲酯颗粒在对滑膜细胞产生生物学反应时并不干扰假体周围骨代谢的动态平衡,并未直接参与人工关节假体的无菌性松动。     

增龄因素与压力侧牙周组织Wnt-1及护骨素的表达

背景:护骨素在正畸牙骨改建中具有重要作用,Wnt-1与骨形成密切相关,但与正畸骨改建的相关性未见报道。目的:比较增龄因素对大鼠正畸牙牙周组织Wnt-1及护骨素表达的影响。方法:纳入雄性6,24周龄Wistar大鼠各40只,制备大鼠磨牙向近中移动的正畸牙移动模型,于牙齿移动1,3,7,14d分别取材,采用RT-PCR及免疫组织化学方法检测压力侧牙周组织中Wnt-1及护骨素的表达。结果与结论:护骨素在6,24周龄大鼠压力侧牙周组织中均有表达,其中3,7d表达强于1,14d,相同时间点,6周龄大鼠压力侧护骨素的表达强于24周龄大鼠。6,24周龄大鼠压力侧牙周组织中均未见Wnt-1mRNA的表达,Wnt-1蛋白仅在6周龄大鼠牙齿移动3d时有表达。说明增龄因素是影响正畸骨改建的重要因素,而Wnt-1似乎与正畸骨改建无相关性。