氧化应激诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡及Bax和p53的表达变化

目的 探讨氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)凋亡的变化规律及Bax和p53表达的变化.方法 用过氧化氢(H2O2,500 μmol/L)处理不同时间模拟机体活性氧攻击损伤ATⅡ细胞的体内情况,建立氧化损伤性细胞模型;用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测Bax和p53的蛋白表达变化.结果 与对照组比较,随H2O2刺激时间延长,ATⅡ细胞存活率明显下降(F=85.211,P＜0.05),线粒体膜电位也明显下降(F=72.453,P＜0.05),凋亡率却明显增加(F=54.002,P＜0.05);同时发现Bax蛋白和p53蛋白表达均明显增加(F1=28.118,F2=43.456,P均＜0.05).结论 氧化应激能损伤ATⅡ细胞,使细胞线粒体膜电位下降,细胞凋亡率增加、存活率下降,Bax和p53可能参与了ATⅡ细胞的凋亡.     

激动维甲类X受体抑制过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡

目的 探讨维甲类X受体(retinoid X receptor,RXR)激动剂9-顺式维甲酸(9-cis retinoid acid,c-RA)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的体外培养大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制.方法 以培养的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌细胞为实验对象,随机分为三组:正常对照组(N组)、100 μmol/ H2O2刺激组(H组)和100 nmol/L c-RA干预组(H+R组).应用MTT法检测细胞活力,以Hoechst 33258荧光染色观察凋亡细胞,流式法检测细胞凋亡比率,JC-1荧光染色法检测细胞线粒体膜电位(△(ψ)m)变化,CM-H2DCFDA荧光探针测定细胞内活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)水平.所有计量资料以均数±标准差(x±s)表示,采用单因素方差分析,Dunnett-t检验,以P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 c-RA明显增强H2O2刺激后的心肌细胞活力,减少凋亡比例,稳定线粒体膜电位,减轻细胞活性氧产生.结论 RXR受体激动剂c-RA能够部分抑制H2O2诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能与减轻细胞氧化应激损伤有关.     

黄芪注射液对心肌细胞氧化应激性损伤的保护作用

目的探讨黄芪注射液(AI)对培养的心肌细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法体外培养的新生Wistar大鼠心肌细胞,分为对照组、 H₂O₂损伤组、药物治疗组： AI低、中、高（10、30、90 g/L）剂量组及AI(90 g/L)+L-NAME(20 μg/L)组。药物预先处理心肌细胞30 min后,加入H₂O₂损伤心肌细胞5 h,MTT法测定心肌细胞存活力,测定乳酸脱氢酶(LDH)和一氧化氮（NO）含量的变化;激光共聚焦检测心肌细胞活性氧（ROS）的变化;流式细胞仪检测心肌细胞线粒体膜电位及细胞凋亡率的变化。结果与H₂O₂损伤组比较,各剂量AI可提高细胞存活力 (P＜0.05),LDH漏出量降低(P＜0.01),活性氧荧光强度降低(P＜0.01),NO含量升高(P＜0.01),线粒体膜电位升高(P＜0.05),细胞凋亡率降低(P＜0.05)。与AI高剂量组比较,L-NAME组细胞存活力降低(P＜0.01),LDH漏出量升高(P＜0.01),活性氧荧光强度升高(P＜0.01), NO含量升高(P＜0.01),线粒体膜电位降低(P＜0.05),细胞凋亡率升高(P＜0.05)。结论黄芪注射液可对抗H₂O₂ 对心肌细胞的损伤,其机制与诱导NO生成、抑制活性氧生成引起的细胞凋亡有关。     

ERK1/2和P38在7-二氟甲氧基金雀异黄素抗H2O2损伤PC12细胞中的作用

[目的]探讨7-二氟甲氧基金雀异黄素(FMGEN)对神经细胞氧化应激损伤的保护作用机制.[方法]以H2O2损伤PC12细胞为神经细胞氧化应激模型,多功能生化分析仪测定培养液上清中的乳酸脱氢酶(LDH)活性,Western-Blot测定磷酸化ERK1/2蛋白和磷酸化p38蛋白的表达水平.[结果]H2O2孵育的PC12细胞培养液中LDH量明显增高,FMGEN呈浓度依赖性的降低H2O2诱导PC12细胞LDH的释放;FMGEN处理细胞后均可使ERKl/2蛋白的磷酸化水平升高,ERK1/2特异性抑制剂U0126可显著阻断FMGEN对H2O2损伤PC12细胞的拮抗作用;FMGEN抑制H2O2激活PC12细胞P38,P38特异性抑制剂SB203580可显著减轻H2O2对PC12细胞的损伤作用.[结论]FMGEN对PC12细胞氧化应激损伤的拮抗作用可能与其激活ERK1/2和抑制P38的活性有关.     

黄芩茎叶总黄酮对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用及其机制

目的探讨黄芩茎叶总黄酮(SSTF)对过氧化氢(H2O2)所致人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用及其可能机制。方法在由H2O2制备血管内皮细胞氧化损伤模型的基础上,采用MTT法测定各组细胞活力;生化比色法测定各组细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;流式细胞术检测各组细胞的凋亡率以及western-blot法测定各组细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达情况。结果 H2O2处理HUVEC后其存活率较正常HUVEC下降,细胞培养上清液中LDH活性和MDA含量明显增加,SOD活性较正常HUVEC降低;HUVEC凋亡率明显升高(P<0.05或P<0.01);而SSTF(100~400mg/L)各剂量都能提高H2O2损伤的HUVCE的细胞活力,明显降低LDH活性,显著减少MDA的含量,提高SOD的活性,明显降低HUVEC凋亡率,明显提高Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论 SSTF能减轻H2O2对HUVEC的氧化损伤作用,降低H2O2所致HUVEC的凋亡率,其机制可能与上调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达水平有关。     

过氧化氢对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响

目的 观察过氧化氢(H2O2)诱导SH-SY5Y细胞损伤后对线粒体膜电位的影响.方法 向培养的SH-SY5Y细胞加入H2O2 100、200、500 μmol/L作用24 h诱导产生氧化损伤,应用MTT比色法检测细胞存活率,测定培养液中一氧化氮(NO)含量;并采用流式细胞仪检测细胞凋亡及线粒体膜电位.结果 与空白对照组...     

氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡及细胞外信号调节激酶信号转导机制的研究

目的 探讨氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞（ATⅡ型细胞）修复存活、凋亡及其细胞外信号调节激酶（ERK）对凋亡的调控作用。方法 采用过氧化氢（H2O2）处理体外分离纯化培养的原代大鼠ATⅡ型细胞；用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测H2O2刺激后ATⅡ型细胞磷酸化ERK1／2（p—ERK1／2）的表达，用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）检测细胞存活率；用流式细胞仪检测细胞凋亡率，并观察ERK特异性抑制剂PD98059干预后细胞凋亡的变化。结果 与对照组比较，10μmol／L和100μmol／L的H2O2处理对ATⅡ型细胞存活率和凋亡率无明显影响；500μmol／L和1000μmol／L的H2O2处理可导致ATⅡ型细胞的存活率明显降低，凋亡率显著升高（P均＜0．05），呈剂量依赖性。500μmol／LH2O2处理ATⅡ型细胞30min，细胞存活率和凋亡率均无显著变化；处理180min细胞存活率明显降低，凋亡率明显增高（P均＜0．05），呈时间依赖性。500μmol／LH2O2可刺激P—ERK1／2阳性表达，以刺激30min表达最强；使用ERK抑制剂（PD98059）干预后，ATⅡ型细胞凋亡率明显增高。结论 H2O2可以剂量和时间依赖的方式诱导ATⅡ型细胞凋亡，ERK信号转导途径参与了ATⅡ型细胞的凋亡调控，对氧化应激状态下的ATⅡ型细胞可能起到保护作用。     

线粒体分裂蛋白抑制剂对小胶质细胞氧化损伤的保护作用

目的：研究线粒体分裂蛋白抑制剂(mdivi-1)能否减轻β淀粉样蛋白（Aβ）诱导的体外原代培养小鼠小胶质细胞的氧化应激损伤。方法：随机将体外原代培养BALB/C小鼠小胶质细胞分为con组、Aβ组、mdi组和 Aβ+mdi 组,con 组不予处理,Aβ组中加入 Aβ,mdi 组中加入 mdivi-1,Aβ+mdi 组分别加入2、5、10、20μmol/L mdivi-1后1 h加入Aβ。分别检测小胶质细胞存活率及凋亡、线粒体膜电位、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量。结果：与con组相比,Aβ组小胶质细胞存活率下降,凋亡增加,线粒体膜电位下降,MDA和8-OHdG含量升高,SOD活性下降,差异有统计学意义（＜0.05）;与Aβ组相比,Aβ+mdi组小胶质细胞存活率上升,凋亡减少,线粒体膜电位增加,细胞内MDA和8-OHdG水平下降,SOD活性上升,差异有统计学意义（＜0.05）。结论：mdivi-1对Aβ诱导的体外原代培养小胶质细胞氧化应激损伤具有保护作用。     

利拉鲁肽对缺氧/复氧诱导的乳鼠心肌细胞损伤的影响

[目的]观察新型降糖药物利拉鲁肽对缺氧/复氧(H/R)诱导的乳鼠心肌细胞损伤的影响.[方法]将体外培养Wistar大鼠乳鼠心肌细胞进行分组:单纯H/R组(A组)、利拉鲁肽组+H/R组(B组)、正常对照组(C组),将A,B两组细胞同时进行H/R损伤,复氧后分别检测3组的乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛含量(MDA)、超氧化酶歧化酶(SOD)活性及各组心肌细胞凋亡率.[结果]A组与C组比较,其细胞培养液中LDH、MDA含量、细胞凋亡率均增加,SOD活性降低,且差异有显著性(P＜0.01).与A组相比,B组LDH、MDA含量、细胞凋亡率则明显降低(P＜0.01),但仍高于C组,且差异有显著性(P＜0.01);SOD活性较A组增高,差异亦有显著性(P＜0.01).[结论]H/R可以造成心肌细胞的损伤,增加细胞的凋亡;利拉鲁肽作为胰高血糖素样肽-1类似物,其直接作用于心肌细胞,可减轻H/R造成的心肌细胞损伤,抑制心肌细胞的凋亡,具有潜在的心脏保护作用.     

维生素C对大鼠肾小管上皮细胞增殖活力的影响

目的优化大鼠肾小管上皮细胞的培养方法,为肾脏疾病的体外研究提供一定的技术支持。方法采用Ⅱ型胶原酶消化法结合Percoll密度梯度离心法,分离纯化肾小管节段,对肾小管节段进行贴壁培养,待上皮细胞爬出后,通过流式细胞仪分析细胞角质素-18（CK-18）的表达情况,并用免疫组化方法对CK-18在肾小管上皮细胞中的表达进行定位;通过不同剂量的维生素C作用,CCK-8方法分析大鼠肾小管上皮细胞的增殖活力改变。结果肾小管节段贴壁培养1-2天后,肾小管上皮细胞从节段内爬出,培养3-4天,细胞密集生长;随着传代进行,肾小管上皮细胞凋亡比例增加,增殖活力减弱,在维生素C的作用下,可在一定程度上减缓细胞的老化速度。结论维生素C可适度延长肾小管上皮细胞的体外培养时间,增强细胞活力,方法经济简便。     

前列腺素E1对1-甲脲乙醇酸酐所致肾小管上皮细胞损害的保护作用

[目的]研究前列腺素E1 (PGE1)对1-甲脲乙醇酸酐所致肾小管上皮细胞凋亡的保护作用.[方法]人近端肾小管上皮细胞(HK2)分三组培养,A组正常对照组;B组1-甲脲乙醇酸酐组:培养基中加入0.5 mmol/L1-甲脲乙醇酸酐;C组PGE1+1-甲脲乙醇酸酐组:培养基中加入0.5 mmol/L 1-甲脲乙醇酸酐和PGE12μg/L.培养48 h后用MTT比色法测光密度(OD)值,并检测培养液NAG酶(N-乙酰-p氨基葡萄糖苷酶)活性;用Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测胞凋亡.[结果]B组HK-2细胞OD值较A组显著下降,NAG酶活性上升;C组较B组OD值显著上升而NAG酶活性下降;B组HK-2细胞凋亡率显著高于对照组,C组的凋亡率较B组显著下降,其差异均有统计学意义(P＜0.01).[结论]1-甲脲乙醇酸酐有促进肾小管上皮细胞凋亡的作用.PGE1对1-甲脲乙醇酸酐所致肾小管上皮细胞凋亡有一定的保护作用.     

兔急性缺氧复氧肾脏损伤与氧化应激和细胞凋亡的相关性研究

目的探讨急性肾缺氧复氧损伤过程中氧化侵袭与肾细胞凋亡在肾损伤发生机制中的作用。方法 20只雄性新西兰大白兔随机分成两组,每组10只。正常对照组（A组）：吸入空气6h。单纯缺氧复氧组（B组）：经自制面罩吸入8%O23h,缺氧结束后吸入空气复氧3h,制成全身缺氧复氧模型。复氧结束后立即处死动物,取出肾脏组织,一份行HE染色,观察组织病理学改变,一份供半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）检测,一份供检测丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）。结果病理学检查结果显示,A组肾脏组织结构基本正常,未见病理性改变,肾脏组织中极少的caspase-3阳性细胞表达。B组：肾小管上皮细胞肿胀,空泡变性;可见少量坏死,管腔明显扩张;caspase阳性蛋白表达指数（29.3±5.7）%。B组和A组MDA分别为（28.05±1.92）、（7.88±1.69）nmol/g;SOD分别为（218±18.41）、（372±13.14）U/g,两组比较,均有统计学意义（P〈0.05）。结论兔肾脏缺氧复氧损伤与氧化侵袭与细胞凋亡密切相关。     

PAX2基因在梗阻性肾病大鼠肾小管上皮细胞重新表达的意义

【目的】探讨PAX2基因在梗阻性肾病大鼠肾小管上皮细胞的重新表达对肾间质纤维化的意义。【方法】80只大鼠随机分为：假手术组（sham组）和模型组（UUO组）各40只。于术后3d、5d、7d、14d（每组10只）处死取肾组织。光镜观察肾脏病理形态改变,免疫组化、Westernblot及realtimePCR检测肾组织PAX2蛋白和mRNA的表达。【结果】①HE和Masson染色观察到UUO组肾间质呈现明显的纤维化。②免疫组化发现sham组肾小管上皮细胞无PAX2表达;UUO组肾小管上皮细胞表达较多;③Westernblot显示PAX2蛋白水平在UU0组术后3d相比sham组明显的增加（P〈0．05）,随着梗阻时间延长PAX2蛋白表达更加明显;④realtimePCR显示,PAX2mRNA与PAX2蛋白的,矗达趋势相同。⑤相关分析：PAX2蛋白水平与肾小管损伤程度呈正相关（r=0．991,P〈0．05）,与肾间质纤维化程度呈正相关（r=0．985,P〈0．05）。【结论】胚胎发育基因PAX2在梗阻性肾病大鼠肾小管存在重新表达;并参与了梗阻性肾病肾小管损伤和肾间质纤维化的过程。     

芦荟大黄素对PC12细胞骨架保护作用的实验研究

目的 研究芦荟大黄素(AE)对H2O2及甲醛引起的PC12细胞损伤的保护作用.方法 将PC12细胞分成AE+H2O2干预组、H2O2损伤组、AE+甲醛干预组、甲醛损伤组、AE对照组和正常对照组6组.各组加入相应药物干预2 h后用不同浓度H2O2或甲醛损伤后进行细胞骨架及凋亡染色、LDH检测.结果 AE+H2O2干预组LDH(67.7±5.5)U/L显著低于H2O2损伤组的(92.0±9.9)U/L(P<0.01);AE+甲醛干预组LDH与甲醛损伤组比较差异无统计学意义(P>0.05);AE+H2O2干预组细胞骨架损伤、凋亡较H2O2损伤组少.结论 AE可通过纠正H2O2诱导的细胞骨架的异常改变,阻滞或延缓PC12细胞的过度凋亡但对甲醛诱导的细胞骨架重排无明显保护作用.     

NADPH氧化酶抑制剂对高糖刺激大鼠近端肾小管上皮细胞中内质网应激的作用机制探讨

目的探讨在有或无还原型烟酰胺腺嘌呤核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂存在的条件下,高糖刺激大鼠近端肾小管上皮细胞中内质网应激蛋白GRP78及凋亡蛋白caspase-12表达的变化,从细胞和分子水平探讨糖尿病肾病中氧化应激和内质网应激的相互作用机制。方法大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E)培养,使用高糖(30mmol/L)DMEM培养基刺激NRK52E细胞24 h,荧光显微镜检测细胞内活性氧ROX的产生量,Western-blot检测细胞内内质网应激蛋白GRP78及凋亡蛋白Caspase12的表达;并且使用NADPH氧化酶抑制剂DPI(10μM)预处理细胞,并观察其对细胞内ROX产生及GRP78和Caspase12蛋白的表达影响。结果高糖刺激24 h可明显增加细胞内ROS的产生,为正常对照组的2.5倍(P<0.05)。NADPH氧化酶抑制剂DPI(10μΜ)预处理后,高糖诱导的细胞内ROS产生明显受到抑制,较高糖刺激刺激组降低了43.69%(P<0.05)。高糖刺激NRK52E细胞24 h后可,细胞内内质网应激蛋白GRP78蛋白表达显著上调,为正常对照组的5倍(P<0.05)。与正常对照组相比,高糖刺激组NRK52E细胞凋亡相关蛋白caspase12的表达也显著增加(P<0.05)。NADPH氧化酶抑制剂DPI(10μΜ)预处理后并高糖刺激NRK52E细胞24 h,与高糖刺激组相比,DPI处理组NRK52E细胞内质网应激蛋白GRP78表达显著下调(P<0.05),凋亡相关蛋白caspase12的表达显著下调(P<0.05)。结论高糖刺激大鼠近端肾小管上皮细胞后,细胞内发生氧化应激与内质网应激反应,并且氧化应激可能作为上游信号诱导细胞内内质网应激反应的发生,并最终导致细胞凋亡的发生。     

H2O2诱导内皮细胞凋亡及其机制探讨

【目的】探讨过氧化氢（H2O2）所致内皮细胞功能损害中的作用及其机制。【方法】人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养后，分为对照组（A组），H2O2处理组（B组），H2O2和蛋白激酶C（PKC）抑制剂GF109203处理组（C组），H2O2和P38抑制剂Apigenin处理组（D组）。H2O2处理细胞30min后加入相应试剂作用24h。MTT法测定细胞存活率，Ki-67染色检测HUVEC增殖活性，免疫荧光染色方法检测细胞凋亡，Western blotting检测p53蛋白表达。【结果】①B组可诱导HUVEC功能损伤，使HUVEC的存活率降低、增殖活性降低、细胞凋亡增加，并使p53蛋白的表达上调；②C组可显著抑制H20z诱导的HuVEC功能损伤和p53蛋白表达的上调；而D组不能抑制H2O2诱导的HUVEC功能损伤和p53蛋白表达的上调。【结论】p53在氧化应激所致内皮细胞功能损害中起重要作用；而这些作用与PKC信号转导通路有关。     

外源性硫化氢对高糖诱导人腹膜间皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的外源性硫化氢(H2S)对高糖诱导人腹膜间皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法用4.25%D-葡萄糖(高糖)和5×10-5、10-4、5×10-4、10-3和5×10-3mol/L的外源性H2S供体硫化氢钠(NaHS)处理人腹膜间皮细胞株HMrSV5细胞24h,MTT比色法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞内的内活性氧(ROS)水平,检测细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果与对照组比较,高糖组HMrSV5细胞活力显著降低(t=3.67,P<0.05),细胞培养液中LDH水平显著增加(t=2.94,P<0.05),ROS水平显著增加(t=4.28,P<0.01),MDA含量显著增加(t=2.84,P<0.05)而SOD活性降低(t=3.57,P<0.01)。与高糖组比较,5×10-4、10-3和5×10-3mol/L的NaHS显著抑制了高糖诱导的HMrSV5细胞活力的降低(t1=2.43;t2=3.68;t3=3.12,均P<0.05)和细胞培养液中LDH水平的增加(t1=2.83;t2=3.71;t3=3.44,均P<0.05)。与高糖组比较,10-3mol/L的NaHS显著抑制了高糖诱导的细胞内ROS(t=3.12,P<0.05)和MDA水平的增加(t=2.59,P<0.05)和SOD活性降低(t=2.61,P<0.05)。结论外源性H2S抑制了高糖诱导的人腹膜间皮细胞损伤,其机制可能与外源性H2S抑制氧化应激有关。     

原钙黏附蛋白7在脂多糖诱导的肾小管上皮细胞焦亡中的作用

目的 探讨原钙黏附蛋白7（PCDH7）是否参与脂多糖（LPS）刺激引起的肾小管上皮细胞（HK-2）焦亡过程。方法 构建LPS刺激HK-2损伤模型,使用RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测细胞中PCDH7、NLR家族Pyrin域蛋白3（NLRP3）、caspase-1、和IL-1β蛋白的表达变化。MTT法测定细胞活力,TUNEL法确定细胞焦亡率,ELISA法检测细胞分泌TNF-α、IL-6水平,全自动生化分析仪检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH）含量。结果 与Control组比较,LPS组细胞生存率下降,细胞凋亡率升高,炎症因子TNF-α和IL-6水平升高,细胞损伤指标LDH含量明显升高,PCDH7的蛋白和mRNA表达明显下调,细胞焦亡指标NLRP3、caspase-1、IL-1β蛋白和mRNA表达明显上调（P均< 0.05）。结论 LPS通过下调PCDH7的表达,促进肾小管上皮细胞发生明显细胞焦亡损伤。     

丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导人腹膜间皮细胞氧化应激及其损伤的影响

【目的】研究丹参酮ⅡA对腹膜透析液（PDF）诱导人腹膜间皮细胞（HPMCs）氧化应激及其损伤的影响。【方法】体外培养的HPMCs同步后分为五组：A组即对照组（DMEM培养基＋完全培养基）;B组即腹膜透析液组（含4．25％PDF的完全培养基）;C组即丹参酮组（含100μmmol／L丹参酮的完全培养基）;C1组即丹参酮1组（含50μmol／L丹参酮ⅡA的PDF）、C2组即丹参酮2组（含100μmol／I。丹参酮ⅡA的PDF）,干预72h后（其中B组、C1、C2组为加热的PDF）,流式细胞仪及荧光显微镜检测线粒体膜电位的变化;荧光显微镜检测胞内钙离子浓度的变化。采用活性氧捕获剂二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯（DCFH—DA）孵育细胞,通过流式细胞仪检测细胞内的荧光强度而测得细胞内活性氧水平。并检测上清液中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、和丙二醛含量;不同浓度丹参酮ⅡA干预48h后,MTT比色法检测不同浓度丹参酮ⅡA干预下细胞增殖活力。【结果】B组上清液丙二醛含量、胞内钙离子、细胞内活性氧水平较对照组及C1、C2组显著增加（P〈0．01）,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶及线粒体膜电位水平显著降低（P〈0．01）。不同浓度丹参酮ⅡA组HPMCs的增殖活性显著高于B组（P〈0．01）,丹参酮ⅡA不同浓度间无显著差异（P〉0．05）。【结论】丹参酮ⅡA可以通过降低PDF干预下丙二醛含量、减轻钙离子负荷、维持线粒体膜电位的水平、保护抗氧化还原酶的活性来拮抗商业性PDF对HPMCs的氧化应激及其损伤。     

依达拉奉在星形胶质细胞持续缺糖缺氧损伤中的作用

【目的】研究自由基清除剂依达拉奉对持续缺糖缺氧诱导的星形胶质细胞（AS）损伤的影响。【方法】用缺糖缺氧4h处理大鼠原代AS星形胶质细胞作为As持续缺血的体外模型,实验分为4组：①空白对照组,②依达拉奉对照组（300uM）,③缺糖缺氧组,④依达拉奉（300uM）＋缺糖缺氧组。测定各组细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放量,观察并测定细胞内活性氧簇（ROS）含量、线粒体膜电位（MMP）水平。【结果】AS经持续缺糖缺氧损伤后,与空白对照组相比,细胞LHD释放量及ROS含量显著增加（P〈0．05）,MMP显著下降（P〈0．05）;依达拉奉＋缺糖缺氧组与缺糖缺氧组相比,细胞LDH释放量及R0s含量显著下降（P〈0．05）,MMP显著升高（P〈0．05）;依迭拉奉对照组与空白对照组相比3项指标无显著差异（P〉0．05）。【结论】依达拉奉通过减轻氧化应激、保护线粒体功能,减轻持续缺糖缺氧诱导的As。