穹窿海马伞切断大鼠不同脑区雌激素受体α的表达

目的：观察穹窿海马伞切断大鼠不同脑区雌激素受体α表达的变化,了解穹窿海马伞切断对雌激素受体α表达的影响.方法：实验于2003-03/12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成.取成年健康雌性Wistar大鼠14只随机分为模型组和对照组,每组7只.模型组大鼠切断双侧穹窿海马伞,对照组不切断穹窿海马伞.所有大鼠术后第28天麻醉状态下处死,取脑组织行雌激素受体α免疫细胞化学染色,观察脑海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核等部位雌激素受体α阳性细胞表达变化.结果：14只大鼠全部进入结果分析.模型组大脑皮质区和基底前脑Meynert核区雌激素受体α阳性细胞数显著少于对照组[（25.71&;#177;1.11）,（58.69&;#177;30.26）个;（3.31&;#177;1.11）,（52.31&;#177;22.52）个,P＜0.01];脑海马CA1区和杏仁复合体区雌激素受体α阳性细胞数与对照组比较无差异（P＞0.05）.结论：穹窿海马伞切断导致大鼠皮质区和基底前脑Meynert核区雌激素受体α表达减少,这种病理变化可能与基底前脑Meynert核到皮质的胆碱能神经蜕变有关.     

穹隆海马伞切断与卵巢切除大鼠大脑皮质和海马CA1区雌激素受体α与淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶共存观察

目的：分析穹隆-海马伞切断加卵巢切除大鼠大脑皮质区、海马CA1区雌激素受体α与淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶共存表达的变化。 方法：实验于2003—03／12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成。成年健康雌性Wistar大鼠14只，随机分为穹隆-海马伞切断加卵巢切除组和对照组，每组7只。穹隆-海马伞切断参照Klein等的方法，动物麻醉固定于脑立体定位仪后，参照Paxinos等大鼠脑立体定位图谱于前囟后2．2～2．5mm，中线外1．0mm处凿开颅骨，切开硬脑膜，自制双刃刀完全切断海马伞外侧缘。双侧卵巢切除参照Singh等的方法，麻醉动物后，打开腹腔，在肾脏下方的脂肪内取出卵巢，结扎并切除。对照组除不切断穹隆-海马伞和不切除卵巢外，其余步骤同穹隆-海马伞切断加卵巢切除组。免疫荧光双标细胞化学法染色，激光共聚焦显微镜下观察大鼠大脑皮质区、海马CA1区雌激素受体α、淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶阳性细胞表达以及共存表达的变化。 结果：14只大鼠参加实验，中途无脱落，均进入结果分析。①穹隆-海马伞切断加卵巢切除组大鼠皮质区绿色雌激素受体α阳性细胞数与对照组比较明显减少，差异有显著性意义[（4．42&;#177;3．99），（9．71&;#177;4．53）。P〈0．05]；红色淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶阳性细胞数量显著增多，差异有显著性意义[（20．00&;#177;5．16），（5．71&;#177;3．14），P〈0．05];共表达双标阳性细胞数量显著增多，差异有显著性意义[（4．00&;#177;2．94），（1．14&;#177;1．67），P〈0．05]。②穹隆-海马伞切断加卵巢切除组大鼠在海马CA1区雌激素受体α阳性细胞数与对照组比较明显减少，差异有显著性[（5．14&;#177;3．80），（12．57&;#177;3．59），P〈0．01]；淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶阳性细胞数量明显增多，差异有显著性意义[（17．14&;#177;4．45），（6．85&;#177;1．95），P〈0．01]；共表达阳性细胞数无显著变化意义[（2．01&;#177;2．08），（2．00&;#177;2.08），P〉0．05]。 结论：穹隆-海马伞切断与卵巢切除可以导致大鼠大脑皮质区、海马CA1雌激素受体α表达减少、淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶表达增多，皮质区接存细胞表达增多，说明雌激素与淀粉样β蛋白前体代谢系统存在内在的联系。     

穹窿海马伞切断大鼠不同脑区雌激素受体α的表达

目的:观察穹窿海马伞切断大鼠不同脑区雌激素受体α表达的变化,了解穹窿海马伞切断对雌激素受体α表达的影响。方法:实验于2003-03／12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成。取成年健康雌性Wistar大鼠14只随机分为模型组和对照组,每组7只。模型组大鼠切断双侧穹窿海马伞,对照组不切断穹窿海马伞。所有大鼠术后第28天麻醉状态下处死,取脑组织行雌激素受体α免疫细胞化学染色,观察脑海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核等部位雌激素受体α阳性细胞表达变化。结果:14只大鼠全部进入结果分析。模型组大脑皮质区和基底前脑 Meynert核区雌激素受体α阳性细胞数显著少于对照组[(25．71±1．11), (58．69±30．26)个;(3．31±1．11),(52.31±22．52)个,P<0．01];脑海马CA1区和杏仁复合体区雌激素受体α阳性细胞数与对照组比较无差异(P>0．05)。结论:穹窿海马伞切断导致大鼠皮质区和基底前脑Meynert核区雌激素受体α表达减少,这种病理变化可能与基底前脑Meynert核到皮质的胆碱能神经蜕变有关。     

穹窿海马伞切断大鼠不同脑区酪氨酸激酶A表达的变化

背景：胆碱能神经系统存在胆碱与神经生长因子受体酪氨酸激酶A共同作用的位点，胆碱能损伤是否影响到酪氨酸激酶A的变化，对于能否应用神经生长因子干预认知障碍疾病具有重要意义。 目的：观察双侧穹窿海马伞切断大鼠脑内不同部位酪氨酸激酶A表达的变化，了解穹窿海马伞切断对神经生长因子受体系统的影响。 设计：以动物为观察对象，完全随机对照实验。 单位：青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所。材料：实验于2003-03／12在青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所完成。14只雌性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组两组，每组7只。 方法：模型组大鼠行双侧穹窿海马伞切断，对照组同样手术，但不切断穹窿海马伞。两组大鼠术后观察28d后麻醉状态下处死，取脑，行免疫组化染色。 主要观察指标：两组大鼠脑海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区酪氨酸激酶A阳性细胞数量。 结果：14只大鼠全部进入结果分析。模型组大鼠大脑皮质区、脑海马CA1区、杏仁复合体区、Meynert核区酪氨酸激酶A阳性细胞数显著少于对照组[（18．91&;#177;6．27），（15．17&;#177;5．23），（18．71&;#177;9．05），（8．03&;#177;2．33）个；（54．77&;#177;11．84），（59．69&;#177;10．40），（49．23&;#177;15．84），（21．49&;#177;1.554）个，t=4．17-10．00；P〈0．01]。 结论：穹窿海马伞切断大鼠脑内多部位酪氨酸激酶A表达减少，这种病理变化可能是认知障碍和老年性痴呆的原因之一。     

穹隆海马伞切断与卵巢切除对大鼠脑内胆碱乙酰化转移酶表达的影响

目的：观察穹隆-海马伞切断与卵巢切除对大鼠脑内皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区胆碱乙酰化转移酶表达的影响，探讨胆碱能损伤和雌激素缺乏对胆碱能神经系统的影响。方法：实验于2003-03／12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成。①分组：成年健康雌性Wistar大鼠28只，随机分为双侧穹隆-海马伞切断组、双侧卵巢切除组、双侧穹隆-海马伞切断加双侧卵巢切除组、对照组，每组7只。②模型制备：穹隆海马伞切断动物麻醉固定于脑立体定位仅后，于前囟后2．2-2．5mm，中线外1．0mm处凿开颅骨，切开硬脑膜，自制双刃刀．完全切断海马伞外侧缘。双侧卵巢切除动物麻醉后，打开腹腔，在肾脏下方的脂肪内取出卵巢，结扎并切除。对照组除不切断穹隆-海马伞和不切除卵巢外，其余步骤同模型组。③免疫细胞化学染色观察皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区等部位胆碱乙酰化转移酶阳性细胞表达的变化。光学显微镜下（10&;#215;40倍）计数平均单个视野胆碱乙酰化转移酶阳性细胞的数量。结果：28只大鼠均进入结果分析。①在皮质区，海马C点1区，杏仁核复合体区，Meynert核区胆碱乙酰化转移酶表达阳性细胞数：双侧穹隆-海马伞切断组、双侧卵巢切除组、双侧穹隆-海马伞切断加双侧卵巢切除组均明显低于对照组[皮质区：（2．97&;#177;1．45），（3．89&;#177;0．65），（4．71&;#177;2．81），（32．60&;#177;7．33）个／视野；海马CA1区：（6．83&;#177;2．41），（4．59&;#177;4．50），（3．67&;#177;3．53），（50．57&;#177;5．85）个／视野；杏仁核复合体区：（14．43&;#177;6．75），（13.80&;#177;3．63），（15．74&;#177;5．72），（35．43&;#177;10．49）个／视野；Meynert核区：（5．77&;#177;6．62），（7．03&;#177;6．77），（0．22&;#177;0．37），（48．77&;#177;7．10）个／视野，（P〈0．01）]。②在Meynert核区，双侧穹隆-海马伞切断加双侧卵巢切除组胆碱乙酰化转移酶表达阳性细胞数明显低于双侧穹隆-海马伞切断组和双侧卵巢切除组（P〈0．05）。结论：穹隆-海马伞切断和卵巢切除可导致大鼠脑内多部位胆碱乙酰化转移酶表达减少，两种方法合用对胆碱能神经损伤更加显著。     

穹隆海马伞切断与卵巢切除大鼠大脑皮质和海马CA1区酪氨酸激酶A与淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶共存观察

目的：观察穹隆海马伞切断加卵巢切除大鼠大脑皮质区、海马CA1区酪氨酸激酶A与淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶共存表达的变化。 方法：实验于2003—03／12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成。选择成年健康雌性Wistar大鼠14只，随机分为穹隆-海马伞切断加卵巢切除组和对照组，每组7只。穹隆海马伞切断参照Klein等的方法，动物麻醉固定于脑立体定位仪后，参照Paxinos等大鼠脑立体定位图谱于前囟后2．2-2．5mm，中线外1．0mm处凿开颅骨，切开硬脑膜，自制双刃刀完全切断海马伞外侧缘。双侧卵巢切除参照Singh等的方法，麻醉动物后，打开腹腔，在肾脏下方的脂肪内取出卵巢，结扎并切除。对照组除不切断穹隆-海马伞和不切除卵巢外，其余步骤同穹隆-海马伞切断加卵巢切除组。免疫荧光双标细胞化学染色。激光共聚焦显微镜下观察大鼠大脑皮质区、海马CA1区酪氨酸激酶A、淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶阳性细胞表达及其共存表达的变化。 结果：实验过程中，无动物死亡，全部进入结果分析。穹隆-海马伞切断加卵巢切除组大鼠大脑皮质区、海马CA1区酪氨酸激酶A绿色荧光细胞数与对照组比较显著减少[皮质区（11．85&;#177;8．11），（22．14&;#177;8．68），P〈0．05]；[海马CA1区（11.28&;#177;3．04），（17.28&;#177;5．85），P〈0．05]。淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶红色荧光细胞数与对照组比较显著增多[皮质区（21.14&;#177;6．20），（5．57&;#177;3.10），P〈0．01];[海马CA1区（12．43&;#177;6．24），（3．42&;#177;2．76），P〈0.01]。海马CA1区呈现黄色荧光的舣标细胞数与对照组比较显著增多[（5．71&;#177;3．64），（0．57&;#177;1．51），P〈0．01]，大脑皮质区呈现黄色荧光的双标细胞数与对照组比较，差异无显著性意义[（5．71&;#177;3．14），（2．85&;#177;3．07）。P〉0．05]。 结论：穹隆海马伞切断加卵巢切除大鼠大脑皮质区、海马CA1区出现淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶表达增多、酪氨酸激酶A表达减少，海码CA1区共存细胞表达增多现象，说明神经生长因子系统与淀粉样β蛋白前体系统可能存在内在的相互联系。     

穹窿海马伞切断大鼠不同脑区胆碱乙酰化转移酶表达的变化

背景：胆碱乙酰化转移酶是乙酰胆碱合成的关键酶，是胆碱能神经系统功能活动的重要标志。胆碱能神经系统损伤与阿尔茨海默病和轻度认知功能障碍的病理过程有关。穹隆-海马伞切断是否影响大鼠脑内不同部位（皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、Meynert核区）胆碱乙酰化转移酶表达的变化，对于了解阿尔茨海默病和轻度认知障碍的病理过程和建立实验性阿尔茨海默病动物模型具有重要意义。目的：观察双侧穹窿海马伞切断对大鼠脑内胆碱乙酰化转移酶表达的影响，探讨模拟实验性阿尔茨海默病的方法。设计：随机对照动物实验。单位：青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所和济宁市第一人民医院神经内科。材料：实验于2003-03／12在青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所完成。实验动物选择成年健康雌性Wistar大鼠14只，5月龄，随机分为模型组和对照组，每组7只。方法：①制作大鼠双侧穹窿海马伞切断模型（模型组），动物麻醉固定于脑立体定位仪后，参照Paxinos和Watson大鼠脑立体定位图谱于前囟后2．2～2．5mm，中线外1mm处凿开颅骨，切开硬脑膜，自制双刃刀完全切断海马伞外侧缘。对照组除不切断穹窿海马伞外，其余步骤同模型组。②常规饲养28d后处死大鼠，取脑组织制作石蜡冠状切片，行胆碱乙酰化转移酶免疫细胞化学染色，观察两组大鼠皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区胆碱乙酰化转移酶阳性细胞数。光镜下见棕褐色细胞为胆碱乙酰化转移酶阳性细胞。主要观察指标：观察两组大鼠皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区胆碱乙酰化转移酶阳性细胞数。结果：实验过程中无动物死亡，全部进入结果分析。模型组大鼠大脑皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、Meynert核区胆碱乙酰化转移酶表达的阳性细胞数与对照组比较显著减少，差异有显著性。[（2．97&;#177;1．45），（32.60&;#177;7．33）个，t=10.51，P〈0．01]；[（6.83&;#177;2.41），（50.57&;#177;5．85）个，t=18．30。P〈0．01]；[（14．43&;#177;6．75），（35．43&;#177;10．49）个，t=4.47，P〈0．01]．[（5．77&;#177;6．62），（48．77&;#177;7．10）个，t=11．72．P〈0．01]。结论：穹窿海马伞切断可致大鼠脑内多部位胆碱乙酰化转移酶表达减少，与阿尔茨海默病和轻度认知功能障碍病变过程有关，这种方法可作为模拟实验性阿尔茨海默病模型的方法之一。     

穹隆海马伞切断与卵巢切除大鼠皮质区及Meynert核区雌激素受体α的表达

目的：观察穹隆海马伞切断与卵巢切除大鼠脑内皮质区、基底前脑Meynert核区雌激素受体α表达的变化，探讨胆碱能和雌激素系统与认知障碍相关的发病过程。 方法：实验于2003—03／12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室（省级重点实验室）完成。①分组：成年健康雌性Wistar大鼠28只，分为穹隆-海马伞切断组、卵巢切除组、穹隆-海马伞切断加卵巢切除组、对照组，每组7只。②模型制备：穹隆-海马伞切断组动物麻醉固定于脑立体定位仪后，于前囟后2．2～2．5mm，中线外1mm处凿开颅骨，切开硬脑膜。自制双刃刀完全切断海马伞外侧缘。双侧卵巢切除组动物麻醉后，打开腹腔，在肾脏下方的脂肪内取出卵巢，结扎并切除。对照组除不切断卵巢和穹隆-海马伞外，其余步骤同模型组。③免疫细胞化学染色法观察皮质区和基底前脑Meynert核区雌激素受体α阳性细胞表达变化。Olympus光学显微镜下（10&;#215;40倍）计数平均单个视野雌激素受体α阳性细胞的数量。 结果：28只大鼠均进入结果分析。在皮质区，Meynert核区雌激素受体α表达阳性细胞数：双侧穹隆-海马伞切断组，双侧卵巢切除组，双侧穹隆-海马伞切断加双侧卵巢切除组均明显低于对照组[皮质区：（25．71&;#177;1．11），（18．29&;#177;7．99），（20．31&;#177;8．96）。（58．69&;#177;30．26）个／视野；Meynert核区：（3．31&;#177;1．11），（3．83&;#177;1．34），（2．26&;#177;2．45），（52．31&;#177;22．52）个／视野，（P〈0．01）]。 结论：穹隆-海马伞切断和／或卵巢切除可以影响大鼠皮质区和Meynert核区雌激素受体α的表达，认为胆碱能系统与雌激案系统可能存在内在的相互作用的病理过程。     

雌激素对穹隆-海马伞切断与卵巢切除大鼠脑内烟碱型乙酰胆碱受体的干预作用

目的：观察雌激素对阿尔茨海默病大鼠脑内不同部位烟碱型乙酰胆碱受体表达的干预作用。方法：实验于2003-11在青岛大学医学院脑病研究所进行。取健康雌性Wistar大鼠10只，随机分为穹隆-海马伞切断＋卵巢切除组和雌激素组，每组5只大鼠．所有大鼠在脑立体定位仪上切断穹隆-海马伞，并切除双侧卵巢，建立模拟伴有体内雌激素水平下降的阿尔茨海默病动物模型。雌激素组大鼠术后第3天皮下注射雌二醇1mg／kg，以后每7d给药1次，30d后应用免疫组织化学技术观察两组阿尔茨海默病大鼠海马CA1区．皮质区．杏仁复合体区和基底前脑Meynert核等部位的烟碱型乙酰胆碱受体阳性细胞的表达．结果：经补充后10只大鼠进入结果分析．雌激组大鼠脑海马CA1区、脑皮质．杏仁复合体区、Meynert核区的烟碱型乙酰胆碱受体阳性细胞数均高于穹隆-海马伞切断＋双侧卵巢切除组[（30．20&;#177;8．65），（64．40&;#177;3．52）个／视野；（41．95&;#177;9．63），（96．81&;#177;9．13）个／视野；（38．18&;#177;9．19），（84．50&;#177;5．48）个／视野；（18．18&;#177;1．65），（89．33&;#177;10．24）个／视野；P〈0．01]。结论：补充外源性雌激素治疗后阿尔茨海默病大鼠各脑区内的烟碱型乙酰胆碱受体表达显著增加，从而提高了胆碱能神经元的功能。     

雌激素对去卵巢大鼠不同脑区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达的影响

背景：脑中雌激素可调节淀粉样β蛋白前体蛋白的代谢与β淀粉样蛋白的产生。了解雌激素与淀粉样β蛋白前体蛋白代谢以及关键酶淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶的关系，对研究轻度认知障碍、阿尔茨海默病的发病原因具有重要作用。目的：利用大鼠卵巢切除模型观察内外源性雌激素缺乏及补充外源性雌激素对大鼠脑皮质区和海马CA1区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达以及血清雌激素含量的影响。设计：完全随机对照实验。单位：青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所，青岛市市立医院病理科。材料：实验于2003—01／12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成。选择健康雌性Wistar大鼠21只，随机分为3组，每组7只。①卵巢切除组：制备大鼠双侧卵巢切除模型。②卵巢切除后补充外源性雌激素治疗组（雌激素组）：卵巢切除后给予苯甲酸雌二醇（1mg／kg），每7d皮下注射1次，共4次。③假手术对照组：手术过程与卵巢切除组相同，但不切除卵巢，不补充雌激素。方法：①第28天时，大鼠在麻醉状态下取脑组织备用，制备冠状切片，用于免疫荧光标记细胞化学染色观察。②激光共聚焦显微镜下观察皮质区、海马CA1区红色荧光标记细胞数量。③体内雌激素水平检测：大鼠眼动脉取血1．5mL，离心取上清备用，运用放射免疫法检测大鼠血清中雌激素含量。主要观察指标：①免疫荧光标记细胞化学法观察大鼠脑皮质区、海马CA1区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶免疫荧光细胞数的变化。②放免法测量大鼠血清雌激素含量的变化。结果：21只大鼠均进入结果分析。①卵巢切除组大鼠皮质区、海马CA1区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶阳性细胞数显著高于对照组和雌激素组[皮质区：（20．00&;#177;5．16），（5．7l&;#177;3．14），（4．00&;#177;4．61）个／视野；海马CA1区：（17．14&;#177;4．45），（6.85&;#177;1．95），（5．14&;#177;5．52）个／视野，P均〈0．011。②卵巢切除组血液雌激素含量显著低于对照组和雌激素组[（5．31&;#177;0．85），（22．94&;#177;9．48），（21．30&;#177;7．62）ng/L，P均〈0．01]。③雌激素组各观察部位淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达阳性细胞数和血液雌激素含量与对照组接近（P均〉0．05）。结论：采用双侧卵巢切除的方法，造成大鼠体内雌激素缺乏，引起大鼠脑内皮质区、海马CA1区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达增多。给予卵巢切除大鼠补充外源性雌激素，其海马CA1区、皮质区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达显著减少，说明体内外雌激素含量的变化可影响大鼠皮质和海马区域淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达。     

大鼠纹状体边缘区与海马逃避性学习记忆功能的比较

背景：脑海马结构是与学习记忆有关的脑区，一般认为与空间认知活动密切相关。纹状体边缘区是新近发现的脑内与学习记忆功能有关的一个亚区．其学习记忆功能是否和海马的学习记忆功能有区别？目的：比较纹状体边缘区与海马两个不同脑区在学习记忆功能上的区作用及地位，观察纹状体边缘区和海马在逃避性学习记忆方面的差别。设计：完全随机分组对照实验。单位：解放军第一军医大学珠江医院神经科学研究所。材料：实验于2002—03／2003—07在解放军第一军医大学珠江医院神经科学研究所完成。选择健康雄性成年SD大鼠109只，经两次Y型迷宫实验筛选后获得合格动物75只，随机分成损毁纹状体边缘区组25只．切断双侧穹窿海马伞组10只、纹状体边缘区对照组30只和双侧穹窿海马伞对照组10只。应用Y迷宫训练大鼠后24h，损毁纹状体边缘区组以10g／L海人藻酸0．1—0．2μL损毁人鼠双侧纹状体边缘区；纹状体边缘区对照组以双侧纹状体边缘区微量注射生理盐水；切断双侧穹窿海马伞组切断双侧穹窿海马伞；双侧穹窿海马伞对照组仅切断双侧穹窿海马伞浅层的皮质组织。手术在第2次筛选的次日进行。术后5d观察大鼠在Y迷宫中学习记忆的行为表现（30次迷宫测试中，正确次数≥15即为学习记忆能力正常）主要观察指标：不同组别大鼠手术前后Y迷宫学习的正确次数。结果：健康雄性成年SD大鼠109只，经两次Y型迷宫实验筛选后获得合格动物75只，实验过程中有3只死亡，还有32只因未能被准确注射药物或生理盐水到纹状体边缘区而被淘汰，最后共有40只大鼠进入分析，其中损毁纹状体边缘区组11只，纹状体边缘区对照组9只，切断双侧穹窿海马伞组10只，双侧穹窿海马伞组10只。①手术后损毁纹状体边缘区组的大鼠Y迷宫学习数据的正确次数低于纹状体边缘区对照组，切断双侧穹窿海马伞组，双侧穹窿海马伞对照组[（9．27&;#177;4.29）次．（22．56&;#177;4.25）次，（21.10&;#177;4．68）次，（22．00&;#177;4.89）次，（P=0．000）]。②损毁纹状体边缘区组手术后Y迷宫学习的正确次数也显著低于手术前[（9．27&;#177;4．29）次，（18.27&;#177;3．07）次，（P=0．000）]：③切断双侧穹窿海马伞组的大鼠Y迷宫学习成绩正确次数与双侧穹窿海马伞对照组及纹状体边缘区对照组基本一致（P=0．660和，P=0．489），手术后Y迷宫学习的正确次数和手术前也基本一致（P=0．700）。结论：损毁纹状体边缘区大鼠在Y迷宫中的学习成绩明显降低，而切断双侧穹窿海马伞大鼠学习记忆成绩与未切断穹窿海马伞大鼠比较无明显变化，证明纹状体边缘区能用反映较复杂条件反射的电Y迷宫检测学习记忆行为，而海马区则不能，进一步说明两者在调控大脑学习记忆功能上的区别，纹状体边缘区对海马的学习记忆功能有调控作用。     

穹窿海马伞切断大鼠不同脑区酪氨酸激酶A表达的变化

背景胆碱能神经系统存在胆碱与神经生长因子受体酪氨酸激酶A共同作用的位点,胆碱能损伤是否影响到酪氨酸激酶A的变化,对于能否应用神经生长因子干预认知障碍疾病具有重要意义.目的观察双侧穹窿海马伞切断大鼠脑内不同部位酪氨酸激酶A表达的变化,了解穹窿海马伞切断对神经生长因子受体系统的影响.设计以动物为观察对象,完全随机对照实验.单位青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所.材料实验于2003-03/12在青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所完成.14只雌性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组两组,每组7只.方法模型组大鼠行双侧穹窿海马伞切断,对照组同样手术,但不切断穹窿海马伞.两组大鼠术后观察28 d后麻醉状态下处死,取脑,行免疫组化染色.主要观察指标两组大鼠脑海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区酪氨酸激酶A阳性细胞数量.结果14只大鼠全部进入结果分析.模型组大鼠大脑皮质区、脑海马CA1区、杏仁复合体区、Meynert核区酪氨酸激酶A阳性细胞数显著少于对照组[(18.91±6.27),(15.17±5.23),(18.71±9.05),(8.03±2.33)个;(54.77±11.84),(59.69±10.40),(49.23±15.84),(21.49±15.54)个,t=4.17～10.00;P＜0.01].结论穹窿海马伞切断大鼠脑内多部位酪氨酸激酶A表达减少,这种病理变化可能是认知障碍和老年性痴呆的原因之一.     

穹隆海马伞切断与卵巢切除大鼠大脑皮质和海马CA1区雌激素受体α与淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶共存观察

目的:分析穹隆-海马伞切断加卵巢切除大鼠大脑皮质区、海马CA1区雌激素受体α与淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶共存表达的变化。方法:实验于2003-03/12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成。成年健康雌性Wistar大鼠14只,随机分为穹隆-海马伞切断加卵巢切除组和对照组,每组7只。穹隆-海马伞切断参照Klein等的方法,动物麻醉固定于脑立体定位仪后,参照Paxinos等大鼠脑立体定位图谱于前囟后2.2～2.5mm,中线外1.0mm处凿开颅骨,切开硬脑膜,自制双刃刀完全切断海马伞外侧缘。双侧卵巢切除参照Singh等的方法,麻醉动物后,打开腹腔,在肾脏下方的脂肪内取出卵巢,结扎并切除。对照组除不切断穹隆-海马伞和不切除卵巢外,其余步骤同穹隆-海马伞切断加卵巢切除组。免疫荧光双标细胞化学法染色,激光共聚焦显微镜下观察大鼠大脑皮质区、海马CA1区雌激素受体α、淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶阳性细胞表达以及共存表达的变化。结果:14只大鼠参加实验,中途无脱落,均进入结果分析。①穹隆-海马伞切断加卵巢切除组大鼠皮质区绿色雌激素受体α阳性细胞数与对照组比较明显减少,差异有显著性意义[(4.42±3.99),(9.71±4.53),P<0.05];红色淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶阳性细胞数量显著增多,差异有显著性意义[(20.00±5.16),(5.71±3.14),P<0.05];共表达双标阳性细胞数量显著增多,差异有显著性意义[(4.00±2.94),(1.14±1.67),P<0.05]。②穹隆-海马伞切断加卵巢切除组大鼠在海马CA1区雌激素受体α阳性细胞数与对照组比较明显减少,差异有显著性[(5.14±3.80),(12.57±3.59),P<0.01];淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶阳性细胞数量明显增多,差异有显著性意义[(17.14±4.45),(6.85±1.95),P<0.01];共表达阳性细胞数无显著变化意义[(2.01±2.08),(2.00±2.08),P>0.05]。结论:穹隆-海马伞切断与卵巢切除可以导致大鼠大脑皮质区、海马CA1区雌激素受体α表达减少、淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶表达增多,皮质区共存细胞表达增多,说明雌激素与淀粉样β蛋白前体代谢系统存在内在的联系。     

电Y迷宫中大鼠纹状体边缘区与海马学习记忆功能的差异

目的：比较大鼠纹状体边缘区(marginal divrision，MrD)与海马在学习记忆方面的差别，探讨MrD与海马两个不同脑区在大脑学习记忆功能上的区别和作用地位。方法：在电Y迷宫训练大鼠后即刻或24h化学损毁大鼠双侧MrD或切断双侧穹窿海马伞(fornix／fimbfia，FF)，训练后6d再观察化学损毁双侧MrD组、MrD对照组、切断双侧FF组和FF对照组大鼠在电Y迷宫中学习记忆的行为表现。结果：训练后即刻或24h后损毁双侧MrD组大鼠的正确反应次数分别为10．11&;#177;3.89和9.27&;#177;4．29，其相应的MrD对照组大鼠正确反应次数则分别为22.63&;#177;3.58和22.56&;#177;4．25，损毁双侧MrD组与MrD对照组的正确反应次数相比均呈显著性意义的减少(P均&;lt;0.01)；训练后即刻切断双侧FF组大鼠正确反应次数为12.80&;#177;3.99，其相应的FF对照组大鼠则为20．60&;#177;4.88，两者相比差异有显著性意义(P&;lt;0.01)，但训陈24h后切断双侧FF组大鼠与其相应的FF对照组大鼠的正确反应次数分别为21.10&;#177;4.68和22．00&;#177;4.89，两者相比差别则无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：海马仅参与电Y迷宫逃避性学习任务记忆巩固的早期阶段，而MrD则与早、晚两个阶段均有关。     

穹窿海马伞切断大鼠不同脑区胆碱乙酰化转移酶表达的变化

背景:胆碱乙酰化转移酶是乙酰胆碱合成的关键酶,是胆碱能神经系统功能活动的重要标志。胆碱能神经系统损伤与阿尔茨海默病和轻度认知功能障碍的病理过程有关。穹隆-海马伞切断是否影响大鼠脑内不同部位(皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、Meynert核区)胆碱乙酰化转移酶表达的变化,对于了解阿尔茨海默病和轻度认知障碍的病理过程和建立实验性阿尔茨海默病动物模型具有重要意义。目的:观察双侧穹窿海马伞切断对大鼠脑内胆碱乙酰化转移酶表达的影响,探讨模拟实验性阿尔茨海默病的方法。设计:随机对照动物实验。单位:青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所和济宁市第一人民医院神经内科。材料:实验于2003-03/12在青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所完成。实验动物选择成年健康雌性Wistar大鼠14只,5月龄,随机分为模型组和对照组,每组7只。方法:①制作大鼠双侧穹窿海马伞切断模型(模型组),动物麻醉固定于脑立体定位仪后,参照Paxinos和Watson大鼠脑立体定位图谱于前囟后2.2～2.5mm,中线外1mm处凿开颅骨,切开硬脑膜,自制双刃刀完全切断海马伞外侧缘。对照组除不切断穹窿海马伞外,其余步骤同模型组。②常规饲养28d后处死大鼠,取脑组织制作石蜡冠状切片,行胆碱乙酰化转移酶免疫细胞化学染色,观察两组大鼠皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区胆碱乙酰化转移酶阳性细胞数。光镜下见棕褐色细胞为胆碱乙酰化转移酶阳性细胞。主要观察指标:观察两组大鼠皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区胆碱乙酰化转移酶阳性细胞数。结果:实验过程中无动物死亡,全部进入结果分析。模型组大鼠大脑皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、Meynert核区胆碱乙酰化转移酶表达的阳性细胞数与对照组比较显著减少,差异有显著性。[(2.97±1.45),(32.60±7.33)个,t=10.51,P<0.01];[(6.83±2.41),(50.57±5.85)个,t=18.30,P<0.01];[(14.43±6.75),(35.43±10.49)个,t=4.47,P<0.01];[(5.77±6.62),(48.77±7.10)个,t=11.72,P<0.01]。结论:穹窿海马伞切断可致大鼠脑内多部位胆碱乙酰化转移酶表达减少,与阿尔茨海默病和轻度认知功能障碍病变过程有关,这种方法可作为模拟实验性阿尔茨海默病模型的方法之一。     

天A1中药对穹隆-海马伞切断模型大鼠脑内乙酰胆碱转移酶和脑源性神经生长因子的影响

目的：利用穹隆-海马伞切断模拟制作大鼠痴呆模型，观察天A1中药对模型大鼠脑内乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferas，ChAT)和脑源性神经生长因子(brain-derived neurotzophic factor，BDNF)的影响。方法：健康雌性Wistar大鼠，随机分为模型组、天A1治疗组和对照组。每组各5只。模型组和治疗组动物切断双侧穹隆一海马伞后，分别用生理盐水和中药煎剂灌胃，对照组不切断海马伞并正常喂养。4周后灌注固定动物，显微镜下进行海马CA1区、皮质、杏仁核、Meynert核ChAT和BDNF免疫组化阳性细胞计数，观察天A1中药治疗效果。结果：对照组比较，模型组大鼠脑内海马CA1区、皮质、杏仁核、Meynert核各区ChAT[(6．76&;#177;2．51)，(3．96&;#177;0．86)．(2．36&;#177;1．23)，(4．88&;#177;4．92)个]和BDNF[(4．3&;#177;0．99，8．3&;#177;0．28)，(6．4&;#177;4．51)，(6．6&;#177;4．51)个]阳性神经元数均显著减少(P均&;lt;0．01)；天A1治疗组大鼠脑内各区ChAT阳性细胞数为(34．76&;#177;5．56)，(50．96&;#177;7．55)．(24．92&;#177;1．92)，(29．36&;#177;12．27)个和BDNF(46．8&;#177;5．54)，(57．6&;#177;6．32)，(51．4&;#177;7．96)，(49．3&;#177;7．47)个阳性神经元数与对照组比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)，而与模型组比较，均明显著增加，差异有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：天A1中药制剂对穹隆一海马伞切断大鼠的胆碱能神经元具有保护作用，并能激活BDNF的表达。     

穹隆海马伞切断与卵巢切除对大鼠脑内胆碱乙酰化转移酶表达的影响

目的:观察穹隆-海马伞切断与卵巢切除对大鼠脑内皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区胆碱乙酰化转移酶表达的影响,探讨胆碱能损伤和雌激素缺乏对胆碱能神经系统的影响。方法:实验于2003-03/12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成。①分组:成年健康雌性Wistar大鼠28只,随机分为双侧穹隆-海马伞切断组、双侧卵巢切除组、双侧穹隆-海马伞切断加双侧卵巢切除组、对照组,每组7只。②模型制备:穹隆海马伞切断动物麻醉固定于脑立体定位仪后,于前囟后2.2～2.5mm,中线外1.0mm处凿开颅骨,切开硬脑膜,自制双刃刀完全切断海马伞外侧缘。双侧卵巢切除动物麻醉后,打开腹腔,在肾脏下方的脂肪内取出卵巢,结扎并切除。对照组除不切断穹隆-海马伞和不切除卵巢外,其余步骤同模型组。③免疫细胞化学染色观察皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区等部位胆碱乙酰化转移酶阳性细胞表达的变化。光学显微镜下(10×40倍)计数平均单个视野胆碱乙酰化转移酶阳性细胞的数量。结果:28只大鼠均进入结果分析。①在皮质区,海马CA1区,杏仁核复合体区,Meynert核区胆碱乙酰化转移酶表达阳性细胞数:双侧穹隆-海马伞切断组、双侧卵巢切除组、双侧穹隆-海马伞切断加双侧卵巢切除组均明显低于对照组[皮质区:(2.97±1.45),(3.89±0.65),(4.71±2.81),(32.60±7.33)个/视野;海马CA1区:(6.83±2.41),(4.59±4.50),(3.67±3.53),(50.57±5.85)个/视野;杏仁核复合体区:(14.43±6.75),(13.80±3.63),(15.74±5.72),(35.43±10.49)个/视野;Meynert核区:(5.77±6.62),(7.03±6.77),(0.22±0.37),(48.77±7.10)个/视野,(P<0.01)]。②在Meynert核区,双侧穹隆-海马伞切断加双侧卵巢切除组胆碱乙酰化转移酶表达阳性细胞数明显低于双侧穹隆-海马伞切断组和双侧卵巢切除组(P<0.05)。结论:穹隆-海马伞切断和卵巢切除可导致大鼠脑内多部位胆碱乙酰化转移酶表达减少,两种方法合用对胆碱能神经损伤更加显著。     

穹隆海马伞切断与卵巢切除大鼠大脑皮质和海马CA1区酪氨酸激酶A与淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶共存观察

目的:观察穹隆海马伞切断加卵巢切除大鼠大脑皮质区、海马CA1区酪氨酸激酶A与淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶共存表达的变化。方法:实验于2003-03/12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成。选择成年健康雌性Wistar大鼠14只,随机分为穹隆-海马伞切断加卵巢切除组和对照组,每组7只。穹隆海马伞切断参照Klein等的方法,动物麻醉固定于脑立体定位仪后,参照Paxinos等大鼠脑立体定位图谱于前囟后2.2～2.5mm,中线外1.0mm处凿开颅骨,切开硬脑膜,自制双刃刀完全切断海马伞外侧缘。双侧卵巢切除参照Singh等的方法,麻醉动物后,打开腹腔,在肾脏下方的脂肪内取出卵巢,结扎并切除。对照组除不切断穹隆-海马伞和不切除卵巢外,其余步骤同穹隆-海马伞切断加卵巢切除组。免疫荧光双标细胞化学染色,激光共聚焦显微镜下观察大鼠大脑皮质区、海马CA1区酪氨酸激酶A、淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶阳性细胞表达及其共存表达的变化。结果:实验过程中,无动物死亡,全部进入结果分析。穹隆-海马伞切断加卵巢切除组大鼠大脑皮质区、海马CA1区酪氨酸激酶A绿色荧光细胞数与对照组比较显著减少[皮质区(11.85±8.11),(22.14±8.68),P<0.05];[海马CA1区(11.28±3.04),(17.28±5.85),P<0.05]。淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶红色荧光细胞数与对照组比较显著增多[皮质区(21.14±6.20),(5.57±3.10),P<0.01];[海马CA1区(12.43±6.24),(3.42±2.76),P<0.01]。海马CA1区呈现黄色荧光的双标细胞数与对照组比较显著增多[(5.71±3.64),(0.57±1.51),P<0.01],大脑皮质区呈现黄色荧光的双标细胞数与对照组比较,差异无显著性意义[(5.71±3.14),(2.85±3.07),P>0.05]。结论:穹隆海马伞切断加卵巢切除大鼠大脑皮质区、海马CA1区出现淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶表达增多、酪氨酸激酶A表达减少,海马CA1区共存细胞表达增多现象,说明神经生长因子系统与淀粉样β蛋白前体系统可能存在内在的相互联系。     

雌激素对穹隆-海马伞切断与卵巢切除大鼠脑内烟碱型乙酰胆碱受体的干预作用

目的:观察雌激素对阿尔茨海默病大鼠脑内不同部位烟碱型乙酰胆碱受体表达的干预作用。方法:实验于2003-11在青岛大学医学院脑病研究所进行。取健康雌性Wistar大鼠10只,随机分为穹隆-海马伞切断+卵巢切除组和雌激素组,每组5只大鼠。所有大鼠在脑立体定位仪上切断穹隆-海马伞,并切除双侧卵巢,建立模拟伴有体内雌激素水平下降的阿尔茨海默病动物模型。雌激素组大鼠术后第3天皮下注射雌二醇1mg/kg,以后每7d给药1次,30d后应用免疫组织化学技术观察两组阿尔茨海默病大鼠海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区和基底前脑Meynert核等部位的烟碱型乙酰胆碱受体阳性细胞的表达。结果:经补充后10只大鼠进入结果分析。雌激组大鼠脑海马CA1区、脑皮质、杏仁复合体区、Meynert核区的烟碱型乙酰胆碱受体阳性细胞数均高于穹隆-海马伞切断+双侧卵巢切除组(30.20±8.65),(64.40±3.52)个/视野;(41.95±9.63),(96.81±9.13)个/视野;(38.18±9.19),(84.50±5.48)个/视野;(18.18±1.65),(89.33±10.24)个/视野;P<0.01。结论:补充外源性雌激素治疗后阿尔茨海默病大鼠各脑区内的烟碱型乙酰胆碱受体表达显著增加,从而提高了胆碱能神经元的功能。     

肿瘤坏死因子α在吗啡依赖和戒断大鼠海马CA1区的表达变化

目的：探讨吗啡依赖和戒断大鼠海马CA1区肿瘤坏死因子α的表达变化。方法：实验于2004—04／2005—03在泸州医学院组织胚胎学实验室完成。实验动物选择普通级两三月龄雄性SD大鼠24只。按随机数字法将实验动物分为4组：对照组、吗啡依赖组和盐酸纳洛酮催促戒断1h组和戒断3h组（后两组合称戒断组），每组6只。采用剂量递增法建立吗啡依赖动物模型，用纳洛酮催促吗啡依赖动物戒断反应。具体方法为每天两次在大鼠背部皮下注射盐酸吗啡，首日10mg／kg，隔日每次增加10mg／kg，至第6天末次注射50mg／kg。吗啡依赖组末次注射后6h麻醉下灌注固定。盐酸纳洛酮催促戒断组大鼠于末次注射吗啡6h后，以盐酸纳洛酮5mg／kg皮下注射激发戒断症状，1h和3h后，同吗啡依赖组处理实验动物。对照组大鼠按照同期平行对照的原则，以相同方式注射同体积的生理盐水。记录大鼠在正常及实验状态下的活动状况。同时取大鼠海马CA1区分别作苏木精一伊红和肿瘤坏死因子α免疫组织化学，测免疫反应阳性细胞的数量和吸光度。结果：整个实验过程未出现大鼠异常死亡，吗啡注射的所有动物均成功建立吗啡依赖动物模型，全部进入结果分析。①海马形态改变：吗啡依赖和戒断大鼠海马CA1区出现结构松散、神经元萎缩和坏死等改变。②肿瘤坏死因子α蛋白表达：对照组大鼠海马CA1区肿瘤坏死因子α蛋白表达轻度阳性，吗啡依赖组和戒断组肿瘤坏死因子α阳性细胞数均增加，各组阳性细胞主要是胶质细胞和神经元。各组阳性细胞均数与对照组比较，差异均有统计学意义[（34．83&;#177;3.54），（17．50&;#177;2．88），P〈0．01]；[（38．83&;#177;4．62），（17．50&;#177;2．88），P〈0．01]；[（58．17&;#177;6．62），（17．50&;#177;2．88），P〈0．01]。而吗啡依赖组与盐酸纳洛酮催促戒断3h组差异无统计学意义[（34．83&;#177;3．54），（38．83&;#177;4．62），P〉0．05]。吗啡依赖组和戒断组肿瘤坏死因子α阳性细胞吸光度增加，各组阳性细胞吸光度均数与对照组比较差异也均有统计学意义[（0．3780&;#177;0．0094），（0．3108&;#177;0．0010），P〈0．01]；[（0.3999&;#177;0．0120）,（0．3108&;#177;0．0010），P〈0．01]；[（0．3855&;#177;0．0066），（0．3108&;#177;0．0010），P〈0．01]，吗啡依赖组与盐酸纳洛酮催促戒断3h组比较差异无统计学意义[（0．3780&;#177;0．0094），（0．3855&;#177;0．0066），P〉0．05]。盐酸纳洛酮催促戒断1h组与戒断3h组肿瘤坏死因子α阳性细胞吸光度差异有显著性[（0．3999&;#177;0．0120），（0．3855&;#177;0．0066），P〈0．05]。结论：肿瘤坏死因子α参与了吗啡依赖和戒断的病理生理过程，可能是药物依赖形成中的脑损伤初始因素之一。