流感病毒两种快速抗原检测方法的对比分析

目的分析比较两种流感病毒抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)检测的一致性,评价新型的基于银盐扩增技术的流感病毒抗原检测试剂盒在临床中的应用。方法选择2015年1月1日-2月28日在复旦大学附属华山医院就诊的体温37.5℃,且具有流感样症状的患者,同时采集双份鼻拭子标本。采用IMMUNO AG Cartridge Flu AB试剂盒(简称AG1法)与甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒(简称CV法)同时检测,并作PCR检测以确证。结果共检测患者91例,AG1法测定甲型流感病毒阳性7例,乙型流感病毒阳性53例;CV法测定甲型流感病毒阳性7例,其中弱阳性3例,乙型流感病毒阳性50例,其中弱阳性4例;PCR法检测甲型流感病毒阳性8例,乙型流感病毒阳性60例。AG1法检测甲型流感病毒灵敏度87.5%,特异度100%,乙型流感病毒灵敏度88.3%,特异度100%。CV法检测甲型流感病毒灵敏度87.5%,特异度100%,乙型流感病毒灵敏度83.3%,特异度100%。AG1法与CV法两种抗原快速检测甲型流感病毒检测的阳性符合率100%,乙型流感病毒的阳性符合率94.3%。结论两种流感病毒快速抗原检测方法一致性较好,AG1检测法可以减少针对弱阳性标本的人为判读误差,可应用于流感早期诊断。     

免疫层析法在流感疑似患者床旁检测中的临床应用

目的评价免疫层析法在流感疑似患者中进行床旁检测（Point of Care Test，POCT）的临床价值。方法收集2008年1～3月北京地区4家医院共计1044例流感疑似患者的一侧鼻拭子标本，在临床诊室内采用免疫层析法进行甲型及乙型流感病毒抗原的快速检测，同时采集另一侧鼻拭子标本进行细胞培养检测。结果免疫层析法检测甲型及乙型流感病毒的阳性率分别为17．5％和14．2％，细胞培养甲型及乙型流感病毒的阳性率分别为16．3％和18．3％；相对于细胞培养鉴定，免疫层析法床旁检测甲型流感病毒的敏感度、特异度、总符合率、阳性及阴性预测值分别为96．5％，97．8％，97．6％，89．6％和100％，乙型流感病毒的敏感度、特异度、总符合率、阳性及阴性预测值分别为77．5％，100％，95．9％，99．3％和95．2％。结论免疫层析法检测能对流感患者进行早期快速诊断，为临床提供及时的病原学诊断。     

甲型流感病毒抗原及核酸检测联合应用研究

目的通过大样本流感样病例检测,明确抗原检测与核酸检测两种方法联合应用原则,从而快速明确流感诊断,控制流感暴发,减少资源浪费。方法采集2019年1月至2020年1月北京同仁医院发热门诊的4622份流感样病例咽拭子标本,其中流感季3230份,非流感季1392份,采用快速抗原法和实时荧光逆转录聚合酶链反应(qPCR)两种方法对其进行流感病毒检测。不一致结果采用第二种核酸检测试剂进行比对。比较快速抗原法对于不同年龄敏感度与特异度的差异,以及不同亚型、不同病毒载量的检出差异。结果甲型流感病毒快速抗原法的敏感度为33.7%(577/1710),特异度为93.5%(2723/2912),与qPCR的一致率为71.4%(3300/4622)。在流感季,甲型流感病毒快速抗原法阳性预测值及阴性预测值分别为84.1%(570/678)和57.4%(1464/2552)。在非流感季,其阳性预测值及阴性预测分别为8.0%(7/88)和96.5%(1259/1304)。甲型流感病毒快速抗原法与乙型流感病毒存在交叉反应,为2.3%(18/766)。儿童的敏感度比成人高[56.7%(164/289)比29.1%(413/1421)]。快速抗原法对于不同流感亚型(H1N1和H3N2)的检出率差异无统计学意义(χ2=0.131,P=0.718),其敏感度随循环阈值(Ct值)增大而降低。结论甲型流感病毒快速抗原法阳性结果可确诊。在流感季,甲型流感病毒抗原阴性应进行核酸检测,而非流感季阴性结果可排除感染。快速抗原法对儿童的敏感度比成人高,敏感度与Ct值呈负相关。     

快速甲型/乙型流感抗原筛查试验与H1N1 PCR检测结果的比较与评价

目的分析比较甲型/乙型流感快速筛查试验与H1N1PCR确证试验结果之间的相关性,为H1N1型流感的快速筛查提供依据。方法采用胶体金免疫层析法甲型/乙型流感检测试剂盒与北京朝阳区疾病预防控制中心的PCR确证方法同时测定87例具有相关体征病人的鼻咽部拭子,确定病人流感病毒的感染状况。结果自2009年6月至2009年9月,我院送检H1N1型流感检测标本248例。其中我院实验室同时用胶体金免疫层析法甲型/乙型流感检测试剂盒筛查测定87例,甲型流感病毒阳性标本15例,乙型流感病毒阳性0例。87例病人中,H1N1阳性标本9例;快速筛查试验与确证试验两种方法同时阳性6例;同时阴性69例。筛查试验阳性而确证试验阴性的标本9例;筛查试验阴性而确证试验阳性的标本3例。筛查试验对甲型H1N1流感病毒的阳性预示值为40.0%,阴性预示值为95.8%。诊断灵敏度是66.7%,诊断特异性是88.5%。结论胶体金免疫层析法甲型/乙型流感快速检测试剂盒可作为甲型H1N1流感病毒的筛查实验,但有一定的局限性,可作为诊断的初步依据。     

快速甲型/乙型流感抗原筛查试验与H1N1 PCR检测结果的比较与评价

目的分析比较甲型/乙型流感快速筛查试验与H1N1PCR确证试验结果之间的相关性,为H1N1型流感的快速筛查提供依据。方法采用胶体金免疫层析法甲型/乙型流感检测试剂盒与北京朝阳区疾病预防控制中心的PCR确证方法同时测定87例具有相关体征病人的鼻咽部拭子,确定病人流感病毒的感染状况。结果自2009年6月至2009年9月,我院送检H1N1型流感检测标本248例。其中我院实验室同时用胶体金免疫层析法甲型/乙型流感检测试剂盒筛查测定87例,甲型流感病毒阳性标本15例,乙型流感病毒阳性0例。87例病人中,H1N1阳性标本9例;快速筛查试验与确证试验两种方法同时阳性6例;同时阴性69例。筛查试验阳性而确证试验阴性的标本9例;筛查试验阴性而确证试验阳性的标本3例。筛查试验对甲型H1N1流感病毒的阳性预示值为40.0%,阴性预示值为95.8%。诊断灵敏度是66.7%,诊断特异性是88.5%。结论胶体金免疫层析法甲型/乙型流感快速检测试剂盒可作为甲型H1N1流感病毒的筛查实验,但有一定的局限性,可作为诊断的初步依据。     

2013-2015年浙江地区新型甲型H1N1流行性感冒的流行病学和临床特征调查

摘要：目的：调查2013-2015年浙江地区哨点医院监测的新型甲型H1N1流行性感冒（简称流感）的临床特征及其流行病学特征。 方法：对2013-2015年浙江地区8家哨点医院纳入的符合急性呼吸道感染的患者进行流行病学和临床特征调查,采集研究对象呼吸道标本进行流感病毒检测,分析新型甲型H1N1流感病毒阳性组与阴性组的临床和流行病学特征。 结果：8家哨点医院共纳入7 602例急性呼吸道感染患者,其中,实验室确诊新型甲型H1N1流感779例（10.2%）,新型甲型H1N1流感患者中位年龄为51岁,115例（33.6%）患有至少1种慢性基础性疾病,新型甲型H1N1流感中哮喘比例（2.6%）高于流感病毒阴性患者（0.6%）,差异有统计学意义（χ²=12.706,P<0.01）。新型甲型H1N1流感中恶心、呕吐所占比例高于流感病毒阴性患者,排痰性咳嗽、腹泻所占比例低于流感病毒阴性患者。新型甲型H1N1流感患者的白细胞计数和中性粒细胞计数均低于流感病毒阴性组,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论：浙江地区人感染新型甲型H1N1流感的高发期为每年的冬春季节,其他时间呈散发。新型甲型H1N1流感的临床症状与非流感患者相比较无特异表现。     

直接免疫荧光法快速检测甲型流感病毒抗原的临床意义

目的探讨直接免疫荧光法快速检测早期甲型流感病毒抗原及其临床应用。方法选择临床上诊断为急性呼吸道感染入院的患者,采集标本200例,将其分为两组:冬春两季流行季节儿童组(100例)和夏秋两季非流感流行期间儿童组(100例),使用美国D3Ultra甲型流感病毒抗原检测试剂,采用荧光标记的单克隆抗体对感冒患者进行甲型流感病毒抗原检测。结果在冬春两季流感流行期间,100例儿童检测有8例阳性,阳性率为8%;在夏秋两季非流感流行期间100例儿童检测有2例阳性,阳性率为2%;两组阳性率比较差异有统计学意义(P0.05)。结论运用直接免疫荧光法快速检测甲型流感毒感抗原是一种经济、高效、快速、特异的检测方法,能指导临床快速诊断,合理用药。     

荧光RT-PCR对乙型流感病毒爆发的检测

目的探讨荧光RT-PCR方法对乙型流感病毒爆发的诊断价值。方法采集暴发性疫情的流感样病例的咽拭子,提取病毒RNA,PCR方法分别检测甲型和乙型流感病毒的核酸。然后,对核酸检测阳性标本进行MDCK培养,经红细胞凝集和凝集抑制试验对病毒进行鉴定和分型。结果 18份咽拭子中15份乙型流感病毒核酸呈阳性,甲型流感病毒未检出;15份乙型流感病毒核酸阳性标本经MDCK培养,9份标本发生细胞病变,经鉴定和分型,都属于乙型流感病毒Victoria系。结论 RT-PCR方法对乙型流感病毒爆发的检测具有快速、敏感和高度特异性的特点。本地区爆发的乙型流感病毒为乙型流感病毒Victoria系,提示在今后决定我国疫苗成份时应考虑地区流行的特点。     

甲型H1N1流感病毒临床实验室诊断策略

目的 探讨用于甲型H1N1流感患者临床实验室诊断的策略.方法 采用Dot-ELISA法检测流感患者中的甲型流感病毒的抗原,初步明确为甲型流感或排除非甲型流感;采用real-time RT-PCR法检测甲型流感病毒抗原阳性患者中的甲型H1N1流感病毒特异性核酸,进一步确定甲型H1N1流感病毒.结果 对44 448例在西安地区就诊的发热伴有流感样症状者的鼻咽腔取分泌物进行甲型流感病毒抗原筛查,其阳性筛检率为28.25%;对甲型流感病毒抗原筛查阳性的17 714例患者进行甲型H1N1流感病毒核酸检测,其阳性检出率为41.92%.结论 首先用甲型流感病毒抗原筛查,排除非甲型流感病毒;进而在甲型流感病毒的范围内进行甲型H1N1流感病毒的检测,即加快了甲型流感病毒的排查效率,又减轻了甲型H1N1流感病毒核酸检测的压力;进而又减轻了大部分非甲型H1N1流感患者核酸检测的经济负担.该文认为该检测策略为甲型H1N1流感病毒的临床实验室诊断提供了参考,可为甲型H1N1流感病毒感染的控制、诊断,以及合理用药和针对性治疗提供依据.     

荧光定量PCR反应监测发热患者甲型H1N1流感病毒感染

目的通过荧光定量PCR反应监测发热患者甲型H1N1流感病毒感染情况,探讨该方法在流行性感冒检测诊断中的意义。方法采用WHO推荐的荧光定量PCR方法对3361例发热患者咽拭子标本进行病毒核酸检测,确定甲型H1N1流感感染患者。结果共检测有流感样症状患者2156例,甲型流感病毒核酸阳性1176例,阳性率35.0%,其中甲型H1N1流感病毒核酸阳性599例,阳性率17.8%。14岁以下儿童甲型H1N1流感病毒核酸阳性283例,占甲型H1N1流感病毒核酸阳性总数的47.2%。结论实时荧光定量PCR反应快速、准确,适用于H1N1流感病毒感染的早期诊断并可作为监测手段在临床广泛开展,为控制疫情的蔓延发挥了重要作用。     

免疫荧光分析法在快速诊断 A、B 型流感病毒中的临床应用

目的：探讨 Sofia Influenza A＋B FIA 检测系统在快速诊断 A、B 型流感病毒中的临床应用价值。方法获取临床168例流感患儿的鼻咽拭子样本,分别通过 Sofia Influenza A＋B FIA 检测系统和胶体金免疫层析（GICA）法分别进行 A、B 型流感病毒检测,并通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）进行验证。结果Sofia Influenza A ＋B FIA 检测系统的阳性检出率为17．86％（30/168）,高于 GICA 法;同时,与 RT-PCR 相比,对 A 型流感病毒和 B 型流感病毒的灵敏度分别达到83．3％和71．4％,特异性均达到100．0％。结论Sofia Influenza A＋B FIA 检测系统是一种灵敏度和特异性均较高,能够快速检测 A、B 型流感病毒的方法。     

2007-2008年泰安市流行期流行性感冒病毒分离及分析

目的　对山东省泰安市2007-2008年流行期流行性感冒（流感）病毒进行分离鉴定及分析,了解泰安市流感流行情况。方法　采集流感样病例（ILI）的咽拭子标本用犬肾传代细胞（MDCK）进行病毒分离,采用血凝抑制方法（HAI）进行流感病毒型别鉴定。结果　2007年10月至2008年3月共检测2所哨点医院ILI咽拭子标本281份,分离到流感病毒94株,阳性分离率为33.45%，经分型鉴定A型H3N2亚型51株,H1N1亚型1株；B型的 Yamagata系39株，Victoria系3株。结论　2007-2008流行季中，泰安市流感病毒流行的优势毒株为A型H3N2亚型和B型Ymagata系,同时有A型H1N1亚型和B型Victoria系毒株的存在。     

快速检测方法在呼吸道感染病原体检测的临床价值

目的探讨快速检测方法对呼吸道流感病毒、肺炎支原体检测的临床应用价值。方法选取该院2011年1月至2015年12月收集的386例上呼吸道感染患者标本进行检测,采用胶体金免疫沉积法检测患者鼻咽部分泌物中的A、B型流感病毒,采用快速培养法检测肺炎支原体,以间接免疫荧光法检测患者的血清病原体抗体IgM结果作为金标准,判断2种快速方法检测的临床价值。结果间接免疫荧光法共检出A型流感病毒感染患者54例,检出率13.59%;检出B型流感病毒感染患者37例,检出率9.59%;检出肺炎支原体感染患者61例,检出率15.80%。胶体金免疫沉积法检出A型流感病毒感染的敏感度为20.37%,特异性为92.77%;胶体金免疫沉积法检出B型流感病毒感染的敏感度为18.92%,特异性为93.41%;快速培养法检出肺炎支原体感染的敏感度为37.70%,特异性为89.85%。结论快速检测方法对呼吸道流感病毒、肺炎支原体检出的敏感度较低,临床上只能作为间接免疫荧光法检测的1种辅助手段。     

Field performance of clinical case definitions for influenza screening during the 2009 pandemic

Purpose

The aim of this study was to assess the performance of 3 different influenza-like illness (ILI) case definitions, adopted by the European (European-CDC), USA (USA-CDC), and Taiwan Centers for Disease Prevention and Control (Taiwan-CDC), as screening tools for influenza during the 2009 H1N1 pandemic.

Methods

From August 15 to 30, 2009, all emergency department patients with clinical symptoms or at epidemiologic risk for influenza were enrolled in an observational cohort study. Influenza diagnosis was established by positive rapid influenza diagnostic test or virus isolation. Sensitivity, specificity, positive predictive value, and negative predictive value of the European-, USA, and Taiwan-CDC ILI case definitions for screening were determined.

Results

A total of 870 patients were screened during the study period. Rapid influenza diagnostic test was positive in 315 patients, 273 (85.6%) of whom had fever duration less than 72 hours. Virus isolation identified 4 more patients with influenza A initially negative by rapid influenza diagnostic test. The mean (SD) age of these 319 patients was 24.3 (18.1) years. Of the 870 screened patients, 670 (77.0%), 476 (54.7%), and 325 (37.4%) met the European-, USA-, and Taiwan-CDC ILI case definition, respectively. Screening sensitivity was 95%, 77.7%, and 57.7% and specificity was 33.4%, 58.6%, and 74.4%, respectively. Differences in sensitivity and specificity between any 2 of the 3 groups were statistically significant (P < .05).

Conclusion

First-line physicians should recognize the advantage and limitation of different ILI case definitions in influenza screening, especially confronted by pandemic or highly pathogenic avian influenza in the future.     

Comparison of BinaxNOW Influenza A&B assay and real-time reverse transcription polymerase chain reaction for diagnosis of influenza A pandemic (H1N1) 2009 virus infection in adult patients

The BinaxNOW Influenza A&;B assay was evaluated for the diagnosis of influenza A pandemic (H1N1) 2009 virus infection in 354 adult patients. The sensitivity, specificity, and positive and negative predictive values were 32%, 100%, 100%, and 67%, respectively. The analytic sensitivity of the assay was log₁₀ 5.0 tissue culture infective dose (TCID)₅₀/mL.     

Evaluation of the specificity and sensitivity of a potential rapid influenza screening system

Influenza remains a serious worldwide health threat with numerous deaths attributed to influenza-related complications. It is likely that transmission of influenza and both the morbidity and mortality of influenza could be reduced if inexpensive but reliable influenza screening assays were more available to the general public or local medical treatment facilities. This report provides the initial evaluation of a pilot system designed by Lucigen Corp. (Middleton, WI, USA) as a potential rapid near point-of-care screening system for influenza A and influenza B. The evaluation of specificity and sensitivity was conducted on stored nasal swab samples collected from emergency department patients presenting with influenza-like symptoms at a large military academic hospital and on de-identified nasal swabs and isolated RNA from a local epidemiology laboratory. The gold standard for assessment of specificity and sensitivity was the Luminex® Respiratory Viral Panel.     

2007-2008年度西安市流行性感冒监测结果分析

目的　通过分析西安市2007-2008年度流行性感冒（流感）监测结果，显示流感的流行趋势，为控制西安市流感流行提供参考。方法　对西安市2007-2008年流感监测年度的流感样病例（ILI）监测资料、病毒分离鉴定结果及暴发疫情信息进行描述分析。结果　2007年10月至2008年3月底西安市3所流感哨点监测医院共统计上报流感样病例17 071例，采集流感样病例标本559份，分离出流感毒株50份，分离率8.94％，其中A型H3N2亚型和B型流感病毒分别为6和44例，流行优势株为B型流感病毒。结论　2007-2008年度西安市流感流行情况较为平稳，流行优势株为B型流感病毒，并检出部分A型毒株，暴发的两起疫情均由H3N2亚型毒株引起，提示H3N2亚型变异活跃。开展流感监测对了解西安市流感流行特点及流感的预防控制具有重要意义。