软骨蛋白聚糖降解与复发性多软骨炎病程进展的相关性

目的 探讨监测复发性多软骨炎(RP)临床不同分期软骨蛋白聚糖酶及其降解表位变化对病情判断的意义.方法 分别采用免疫组织化学和免疫印迹法(WB)检测40例RP患者(稳定期组22例、活动期组18例)和20例意外死亡健康者(正常对照组)耳廓软骨组织基质中软骨蛋白聚糖酶降解表位表达情况；同时分别采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和WB检测软骨蛋白聚糖酶-1,2 mRNA及蛋白质表达水平；并分析比较各组中蛋白聚糖酶降解表位表达和蛋白聚糖酶-1,2 mRNA及蛋白质表达的差异.结果 实时荧光定量RT-PCR检测正常对照组软骨蛋白聚糖酶-1,2 mRNA 2-△△Ct值分别为1.00±0.26、1.00±0.27,RP稳定期组分别为1.47±0.11、1.57±0.13,RP活动期组分别为2.09±0.12、2.09±0.19.经单因素方差分析,各组间差异均有统计学意义(F分别为299.113和459.013,P均＜0.01).进一步两两比较,RP活动期组、RP稳定期组软骨蛋白聚糖酶-1,2 mRNA水平比正常对照组显著升高(P＜0.01),RP活动期组比RP稳定期组显著升高(P＜0.01).WB检测软骨蛋白聚糖酶-1,2蛋白质表达水平,RP活动期组分别在相对分子质量约68 000、73 000处出现明显条带,RP稳定期组相应位置有较弱条带出现,而正常对照组无明显条带.WB检测RP活动期组降解表位NITEGE、ARGSV的表达分别在相对分子质量约70 000、48 000处出现明显条带,RP稳定期组相应位置有较弱条带出现,而正常对照组无明显条带出现.免疫组织化学检测NITEGE、ARGSV表位的表达,在正常软骨基质中无明显表达(无红色着染),RP稳定期组和RP活动期组表位表达明显增加(呈明显红色着染).结论 RP患者软骨蛋白聚糖酶在mRNA及蛋白质水平表达增强；蛋白聚糖降解增加,并与疾病的严重程度相关联.     

SYBR green Ⅰ实时荧光PCR结合熔解曲线检测HBV B和C基因型的研究

国内外研究表明HBV基因型与病毒的感染途径、基因突变、疾病进程、抗病毒药物疗效有一定的关系[1-3]引,了解HBV基因型分布,追溯感染源对判断预后、监测抗病毒用药疗效、选择个体化治疗方案等具有重要应用价值.目前根据全基因序列同源性>92%或S区基因序列同源性≥96%,HBV分为A～H 8个基因型,在亚洲主要是A～F[4],国内主要基因型为B和C型.     

18S rRNA基因序列分析在临床常见酵母样真菌鉴定中的应用

目的 应用18S rRNA基因序列分析技术对临床分离的常见酵母样真菌进行种的分类鉴定,且与传统方法比较,分析基因序列分析法鉴定临床常见酵母样真菌的可行性.方法 收集北京同仁医院微生物室菌库酵母样真菌115株,提取的DNA用18S rRNA通用引物进行PCR扩增,扩增产物直接测序,测序结果提交GenBank通过核酸序列比对对微生物种属进行鉴定,同时进行真菌显色培养基鉴定、Vitek 32 YBC鉴定,比较3种不同方法鉴定酵母样真菌的种鉴定准确率,阐明应用基因序列分析法鉴定临床酵母样真菌的可行性.结果 18S rRNA基因序列分析法与表型鉴定法相比较,有13株酵母样真菌鉴定结果存在差异:显色培养基仅鉴定出102株,与基因序列分析鉴定的符合率为89.2%(91/102),Vitek 32 YBC鉴定结果与基因序列分析鉴定的符合率为91.3%(105/115);显色培养基、Vitek 32 YBC和18S rRNA基因序列分析鉴定到种的比例分别为88.7%(102/115)、100%(115/115)、100%(115/115).结论 18S rRNA基因序列分析法呵对常见酵母样真菌进行准确分类.     

18S rRNA基因序列分析在临床常见酵母样真菌鉴定中的应用

目的 应用18S rRNA基因序列分析技术对临床分离的常见酵母样真菌进行种的分类鉴定,且与传统方法比较,分析基因序列分析法鉴定临床常见酵母样真菌的可行性.方法 收集北京同仁医院微生物室菌库酵母样真菌115株,提取的DNA用18S rRNA通用引物进行PCR扩增,扩增产物直接测序,测序结果提交GenBank通过核酸序列比对对微生物种属进行鉴定,同时进行真菌显色培养基鉴定、Vitek 32 YBC鉴定,比较3种不同方法鉴定酵母样真菌的种鉴定准确率,阐明应用基因序列分析法鉴定临床酵母样真菌的可行性.结果 18S rRNA基因序列分析法与表型鉴定法相比较,有13株酵母样真菌鉴定结果存在差异:显色培养基仅鉴定出102株,与基因序列分析鉴定的符合率为89.2%(91/102),Vitek 32 YBC鉴定结果与基因序列分析鉴定的符合率为91.3%(105/115);显色培养基、Vitek 32 YBC和18S rRNA基因序列分析鉴定到种的比例分别为88.7%(102/115)、100%(115/115)、100%(115/115).结论 18S rRNA基因序列分析法呵对常见酵母样真菌进行准确分类.     

中西医结合护理晚期胰腺癌46例

目的：探讨中西医结合护理在晚期胰腺癌患者的临床护理体会。方法回顾性分析我院自2012年3月至2013年3月间收治的被确诊为晚期胰腺癌的患者46例,随机将其分为两组,即对照组和观察组。对照组患者23例采用常规护理方法,观察组患者23例,采用中西医结合护理方法,观察两种护理方法对于患者并发症的发生情况、不良反应情况以及通过护理之后患者的平均生存期等。结果观察组的患者在并发症的发生率为4.35%,没有出现不良反应情况,平均生存期为16个月;对照组患者的并发症发生率为13.04%,平均生存期为6个月。结论中西医结合护理方法在晚期胰腺癌患者的护理中效果非常好,值得在临床上大力推广。     

18S rRNA基因序列分析在临床常见酵母样真菌鉴定中的应用

目的 应用18S rRNA基因序列分析技术对临床分离的常见酵母样真菌进行种的分类鉴定,且与传统方法比较,分析基因序列分析法鉴定临床常见酵母样真菌的可行性.方法 收集北京同仁医院微生物室菌库酵母样真菌115株,提取的DNA用18S rRNA通用引物进行PCR扩增,扩增产物直接测序,测序结果提交GenBank通过核酸序列比对对微生物种属进行鉴定,同时进行真菌显色培养基鉴定、Vitek 32 YBC鉴定,比较3种不同方法鉴定酵母样真菌的种鉴定准确率,阐明应用基因序列分析法鉴定临床酵母样真菌的可行性.结果 18S rRNA基因序列分析法与表型鉴定法相比较,有13株酵母样真菌鉴定结果存在差异:显色培养基仅鉴定出102株,与基因序列分析鉴定的符合率为89.2%(91/102),Vitek 32 YBC鉴定结果与基因序列分析鉴定的符合率为91.3%(105/115);显色培养基、Vitek 32 YBC和18S rRNA基因序列分析鉴定到种的比例分别为88.7%(102/115)、100%(115/115)、100%(115/115).结论 18S rRNA基因序列分析法呵对常见酵母样真菌进行准确分类.     

ITS序列鉴定真菌性鼻窦炎病原的方法评价

目的 建立ITS(包括ITSI-5.8 rRNA-ITS2)测序鉴定真菌性鼻窦炎病原的方法.方法 收集北京同仁医院2006-2008年,经临床与CT诊断为真菌性鼻窦炎,并行鼻内镜手术切除的组织标本270份.所有标本分别进行组织病理检查、压片直接镜检、真菌培养鉴定和核糖体RNA转录间隔区测序分析,通过方法比较,评价序列分析直接鉴定病原真菌的可行性,同时分析真菌性鼻窦炎病原学特征.结果 在270份标本中,组织病理阳性率为80.0%(216/270),压片阳性率为80.0%(216/270),真菌培养阳性率为53.0%(143/270),ITS测序阳性率为63.0%(170/270).经培养得到22个种,6个属.ITS测序鉴定32个种.培养与ITS序列种水平符合率为76.1%(102/143).结论 ITS测序可成为真菌鉴定的辅助工具.     

1050例鼻窦炎病原菌分析

目的 探讨引起鼻窦炎的病原微生物分布及与鼻窦炎感染类型的关系。为临床医生提供诊断和治疗的依据。方法 对2013-2017年诊治的1 050例鼻窦炎患者,通过鼻内窥镜手术所取的窦腔内容物行标本直接涂片镜检,普通细菌培养、真菌培养、厌氧菌培养和质谱仪菌种鉴定。结果 1 050例鼻窦炎患者分为急性鼻窦炎患者164例、慢性鼻窦炎患者384例和真菌性鼻窦炎患者502例。细菌直接涂片和培养结果一致,2013年~2016年真菌涂片镜检的总体阳性率66.5%,培养阳性率44.0%, 2017年改进了真菌培养前处理方法后培养阳性率87.1%,涂片镜检的阳性率68.8%,真菌涂片阳性率高于培养结果。经培养鉴定共检出1283株病原菌,排在前几位的细菌分别是：金黄色葡萄球菌177株（13.8%）、铜绿假单胞菌101株（7.9%）和流感嗜血杆菌78株（6.1%）为主,其次为链球菌属90株（7.0%）和克雷伯菌54株（4.2%）;厌氧菌主要为普雷沃菌14株（1.0%）、具核梭杆菌5株（0.1%）;真菌以曲霉菌200株（15.6%）为主,多伴有细菌的混合感染。急性鼻窦炎多为一种病原,慢性鼻窦炎多混合2种以上病原菌,急性和慢性鼻窦炎病原菌的种类和排序无明显差异。结论 急性和慢性鼻窦炎的致病细菌以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和流感嗜血杆菌为主,厌氧菌多为普雷沃菌和具核梭杆菌;真菌性鼻窦炎以曲霉菌属为主,同时伴有细菌的混合感染;临床应根据细菌和真菌培养结果合理用药。     

新技术在微生物检验中的应用

近年,各种生物技术和不同学科解释生命现象的手段与方法在微生物检验中得到应用.病原微生物种类多,生态学特征各异,传统方法很难对所有病原微生物进行准确鉴定.因此,采用新的微生物检验技术对提高感染性疾病诊断有重要意义[1].