头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的评价

目的评价头孢西丁（FOX）纸片扩散法（K-B）检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的临床应用价值。方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的139株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）,并与苯唑西林（OXA）纸片扩散法、mecA基因检测进行比较。结果mecA基因阳性的109株CNS对FOX显示耐药,而对OXA则只有97株显示耐药。结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致,苯唑西林纸片扩散法则存在一定的差异,临床实验室应用FOX取代OXA来检测MRCNS。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌的临床应用评价

目的用PCR法检测葡萄球菌的mecA基因为参比方法,评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的临床应用价值。方法临床分离的163株葡萄球菌,分别用头孢西丁、苯唑西林纸片扩散法、PCR法检测mecA基因,以PCR扩增法检测mecA基因作为参比方法进行比较。结果163株临床分离的葡萄球菌经PCR法检测mecA基因,阳性率为81.0%,其中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为74.1%和83.8%。头孢西丁、苯唑西林纸片扩散法用于检测MRSA与PCR法检测mecA基因有很好的一致性,其敏感性和特异性均为100.0%,而对于凝固酶阴性葡萄球菌,头孢西丁纸片扩散法比苯唑西林纸片扩散法检测MRS的敏感性和特异性高,敏感性分别为100.0%和94.3%,特异性分别为96.0%和88.0%。结论头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌具有很高的灵敏度,但对于mecA基因阴性的凝固酶阴性葡萄球菌,用头孢西丁纸片法检测,约有5%菌株要误报为MRCNS。由于头孢西丁纸片扩散法操作简单,较苯唑西林纸片扩散法检出MRS的敏感度和特异性高,结果与PCR法检测mecA基因有很好的相关性,不需特殊仪器设备,可在临床微生物实验室常规开展。     

凝固酶阴性葡萄球菌菌种鉴定与苯唑西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌检测准确性

目的 评价凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)菌种鉴定与苯唑西林耐药凝固酶阴件葡萄球菌(MRCNS)检测的准确性.方法 139株临床分离CNS,经ID 32 STAPH鉴定到种,用头孢西丁(FOX)、苯唑西林(OXA)纸片扩散法检测MRCNS,以Slidex MRSA detection乳胶凝集法检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)作为参考方法.结果 139株CNS鉴定为8个种,依次为溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、木糖葡萄球菌、腐生葡萄球菌、耳葡萄球菌、模仿葡萄球菌、沃氏葡萄球菌.FOX纸片法总的敏感度和特异度为99.0%和86.0%;OXA纸片法总的敏感度和特异度为91.7%和74.4%.影响FOX纸片法敏感度的菌种为1株表皮葡萄球菌;影响其特异度的菌种包括木糖葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、腐生葡萄球菌;而影响OXA纸片法敏感度的菌种包括溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、模仿葡萄球菌、耳葡萄球菌;影响其特异度的菌种包括人葡萄球菌、模仿葡萄球菌、木糖葡萄球菌、耳葡萄球菌、腐生葡萄球菌、沃氏葡萄球菌.结论 FOX纸片法检测MRCNS准确性因菌种不同有所差异,尤其应关注木糖葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、腐生葡萄球菌的影响.建议检测MRCNS时,尽可能将CNS鉴定到种,视菌种必要时用PBP2a或mecA基因予以确认.     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因(mecA基因法)为标准，评价头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌的灵敏度和特异性。方法PCR扩增葡萄球菌的特异性mecA基因片段，头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌，药敏试验方法按标准K—B(Kirby-Bauer)法进行。结果在190株临床分离的葡萄球菌中金黄色葡萄球菌(金葡菌)138株，表皮葡萄球菌30株，溶血葡萄球菌22株，经。PCR法检测mecA基因，金葡菌中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为81.2％(112／138)、96．1％(50／52)。头孢西丁纸片扩散法检测金葡菌中MRSA和CNS中MRCNS的发生率分别为81.2％(112／138)、94．2％(49／52)，与mecA基因法结果相比较，头孢西丁纸片扩散法检测葡萄球菌中MRS的灵敏度和特异度分别为99．4％(161／162)、100．0％(28／28)，两者符合率为99．5％(189／190)。2种方法所获得的结果经统计学处理，两者差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌具有很高的灵敏度和特异度，适合在临床微生物实验室中进行推广。     

表型和基因扩增方法在耐甲氧西林葡萄球菌检测中的应用

目的比较研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的试验检测特性。方法按临床和实验室标准协会的标准分别测定和判断1μg苯唑西林纸片和30μg头孢西丁纸片在30℃和35℃时对金黄色葡萄球菌（138株）和凝固酶阴性葡萄球菌（128株）的抑菌环直径。苯唑西林盐平板采用点种法，mecA基因的检测采用PCR。结果苯唑西林和头孢西丁纸片在30℃孵育时对MRSA检测的敏感性均可达到100％，而在35℃孵育时，头孢西丁纸片对MRSA检出敏感性（94．7％）略高于苯唑西林纸片（93．3％）。苯唑西林和头孢西丁纸片在30℃和35℃对MRCNS检测的敏感性为100％。苯唑西林盐平板法对MRSA检测的敏感性和特异性与苯唑西林和头孢西丁纸片在30℃检测的敏感性和特异性相同，但对MRCNS检测的敏感性低于纸片法。结论利用头孢西丁纸片可提高对耐甲氧西林葡萄球菌的检测。     

问：如何准确检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌？

答：检测mecA基因和其表达的青霉素结合蛋白（PBP2a）是预测葡萄球菌对苯唑西林耐药的最准确方法。罕见非mecA基因介导的苯唑西林耐药机制，纸片法测定苯唑西林为中介或耐药，应加测苯唑西林的MIC，如果MIC≥4ug／ml，即使mecA基因和PBP2a检测阴性，苯唑西林也应报告耐药。在凝固酶阴性葡萄球菌（CONS）中头孢西丁纸片扩散法的结果与检测mecA／PBP2a的一致性好于苯唑西林纸片，     

纸片法头孢西丁敏感的青霉素耐药葡萄球菌分析

目的 评估不同检测方法 对纸片法头孢西丁敏感,苯唑西林耐药葡萄球菌耐药性状的检测能力,并对非mecA基因介导苯唑西林耐药的匍萄球菌进行药敏谱分析.方法 收集2007年1月至2009年5月间复旦大学附属华山医院就诊患者呼吸道、尿、分泌物和无菌体液标本中分离得到的255株金黄色葡萄球菌,采用苯唑西林纸片法、苯唑西林MIC法、头孢西丁纸片法、头孢西丁MIC法枪测金黄色葡萄球菌对苯唑西林的敏感性:用苯唑西林MIC法和头孢西丁纸片法检测75株凝固酶阴性萄萄球菌对苯唑西林的敏感性:将所有葡萄球菌进行mecA基因检测,结合试验结果 分析葡萄球菌苯唑西林耐药原因,并对非mecA基因介导的苯唑西林耐药葡萄球菌用MIC法进行抗菌药敏谱分析.结果 255株纸片法头孢西丁敏感、青霉素耐药的金黄色葡萄球菌苯唑西林纸片法检测出6株中介,4株耐药;头孢西丁纸片法、头孢西丁MIC法、苯唑西林MIC法全敏感、mecA基因检测全阴性.75株纸片法头孢西丁敏感、青霉素耐药的凝固酶阴性葡萄球菌,苯唑西林MIC法59株敏感,16株耐药;mecA基因阴性为71株,阳性为4株.12株非mecA基因介导苯唑西林耐药的葡萄球菌庆大霉素敏感为10株,克林霉素8株、环丙沙星11株、红霉素6株、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑11株,头孢菌素类、替考拉宁、万古霉素、哌拉西林/他唑巴坦、四环素12株.结论 金黄色葡萄球菌用头孢西丁检测mecA基因介导的苯唑西林耐药,具有很好的可靠性.凝固酶阴性葡萄球菌最好同时使用头孢西丁纸片法和苯唑西林MIC法检测mecA基因介导的苯唑西林耐药,以提高检出率.非mecA基因介导的苯唑西林耐药,临床可依据实际药物敏感实验结果 选择性使用β内酰胺酶稳定的青霉素、β内酰胺酶抑制剂复合药、头孢类和碳青霉烯类药物治疗.     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRsA)在临床的应用价值。方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的94株金黄色葡萄球菌，并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂稀释法及mecA基因检测进行比较。结果mecA基因阳性的77株金黄色葡萄球菌，头孢西丁纸片扩散法均显示耐药。结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致，是筛选和确认MRSA的一种可靠的试验方法。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的　评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)在临床的应用价值。方法　用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的 94株金黄色葡萄球菌 ,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂稀释法及mecA基因检测进行比较。结果　mecA基因阳性的 77株金黄色葡萄球菌 ,头孢西丁纸片扩散法均显示耐药。结论　头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致 ,是筛选和确认MRSA的一种可靠的试验方法。     

前列腺液葡萄球菌耐药性检测

目的分析检测前列腺液葡萄球菌耐药性,为临床诊断治疗提供参考依据。方法临床标本分离葡萄球菌经API20 STAPH证实,再采用头孢西丁(FOX)纸片法、苯唑西林(OXA)纸片法、肉汤稀释(MIC)法GPS药敏卡对耐甲氧西林葡萄球菌检测比较,并进行耐药性分析。结果340株葡萄球菌中金黄色葡萄球菌(MRSA)占67.54%(129/191),耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)占65.10%(97/149),两者比较无明显差异(P>0.05)。FOX纸片法与OXA纸片法、MIC法检测MRSA的敏感性和特异性无明显差异(P>0.05)。检测MRCNS的特异性FOX纸片法明显优于OXA纸片法(69.23%)和MIC法(59.62%)(P<0.01),敏感性无明显差异(P>0.05)。耐甲氧西林葡萄球菌耐药率高于甲氧西林敏感葡萄球菌(P<0.01),并且多重耐药。对替考拉宁有11株中敏,但未发现替考拉宁和万古霉素耐药菌株。结论耐甲氧西林葡萄球菌检出率高而且耐药压力增大,检测MRSA和MRCNS应选择操作简单、敏感性和特异性高的FOX纸片法,治疗应根据药敏结果选择抗生素。     

如何准确检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌?

答:检测mecA基因和其表达的青霉素结合蛋白(PBP2a)是预测葡萄球菌对苯唑西林耐药的最准确方法。罕见非mecA基因介导的苯唑西林耐药机制,纸片法测定苯唑西林为中介或耐药,应加测苯唑西林的MIC,如果MIC≥4μg/ml,即使mecA基因和PBP2a检测阴性,苯唑西林也应报告耐药。在凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)中头孢西丁纸片扩散法的结果与检测mecA/PBP2a的一致性好于苯唑西林纸片,可以减少在非表皮葡萄球菌的CoNS中苯唑西林纸片的假阳性问题,所以应该首选头孢西丁纸片。对金黄色葡萄球菌两种纸片的结果相近,但头孢西丁纸片更容易读取结果。如何准…     

两种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的K-B法应用评价

目的评价两种分别使用MH琼脂(头孢西丁)和高盐琼脂(苯唑西林)纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床应用价值。方法用头孢西丁纸片在MH琼脂平板上进行纸片扩散法(K-B法)检测临床分离的89株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法(K-B法)、mecA基因检测进行比较。结果在MH琼脂使用头孢西丁纸片检测MRSA优于高盐琼脂苯唑西林纸片扩散法,并与PCR检测mecA基因的方法高度一致。结论头孢西丁纸片扩散法是筛选和确认耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)一种简单、可靠的实验方法。     

三种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的评估

目的评价PBP2a乳胶凝集法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林纸片扩散法对检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床应用价值。方法以PCR法扩增mecA基因为金标准,用三种方法对临床分离的105株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较。结果105株细菌中有82株mecA基因阳性,头孢西丁纸片扩散法、乳胶凝集法与PCR法结果一致,苯唑西林纸片扩散法与PCR法结果相符合均为98.8%。结论头孢西丁纸片扩散法与PBP2a乳胶凝集法一样比苯唑西林纸片扩散法能更准确检测MRSA,值得推广应用。     

苯唑西林MIC≥0.5ug/ml折点对凝固酶阴性葡萄球菌耐药性高估情况分析

目的：了解使用苯唑西林MIC（最低抑菌浓度）≥0.5ug/ml的折点判断部份凝固酶阴性葡萄球菌为耐甲氧西林葡萄球菌对此类葡萄球菌耐药性高估的情况。方法：对73株苯唑西林MIC法耐药的凝固酶阴性非表皮葡萄球菌同时用头孢西丁纸片法扩散法（K-B法）检测,分析结果。结果：9株表现为敏感（抑菌圈≥25mm）,占12%,其中6株苯唑西林MIC介于0.5-2ug/ml之间,3株苯唑西林MIC≥2ug/ml。头孢西丁敏感与耐药的两组菌对常用抗阳性球菌药物敏感性有明显差别。结论：对于苯唑西林MIC介于0.5-2ug/ml的凝固酶阴性的非表皮葡萄球菌,临床实验室应遵照美国临床和实验室标准化研究所（CLSI）指南,用头孢西丁K-B法或其它方法复核验证其耐药性,苯唑西林MIC≥2ug/ml的菌株,可直接报告为耐甲氧西林的葡萄球菌。     

应用MRSA ID产色琼脂培养基等四种方法检测和鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的比较MRSAID产色琼脂培养基及其他3种方法检测和鉴定甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）。方法选择临床118株葡萄球菌用（118株葡萄球菌中金黄色葡萄球菌108株，凝固酶阴性葡萄球菌10株）细菌鉴定仪鉴定到种，用MRSAID琼脂筛选法、苯唑西林平板筛选法、头孢西丁纸片法比较MRSA的检测情况，同时检测金黄色葡萄球菌的mecA基因作为金标准，同时用大肠埃希菌ATCC25922，金黄色葡萄球菌ATCC25923，铜绿假单胞菌ATCC27853和粪肠球菌ATCC29212做干扰试验。结果金黄色葡萄球菌用PCR检测其meeA基因，共检测到80株阳性菌株；用MRSAID琼脂筛选法符合率为100％，苯唑西林平板筛选法符合率为97．5％，头孢西丁纸片法符合率为100％；有1株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）和1株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）对MRSAID琼脂的显色有干扰，出现了浅绿色的细小菌落。用标准菌株做对照均没有生长。结论MRSAID琼脂平板可以对MRSA进行主动快速监测。     

三种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的评估

目的 评价PBP2a乳胶凝集法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林纸片扩散法对检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床应用价值.方法 以PCR法扩增mecA基因为金标准,用三种方法对临床分离的105株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较.结果 105株细菌中有82株mecA基因阳性,头孢西丁纸片扩散法、乳胶凝集法与PCR法结果一致,苯唑西林纸片扩散法与PCR法结果相符合均为98.8%.结论 头孢西丁纸片扩散法与PBP2a乳胶凝集法一样比苯唑西林纸片扩散法能更准确检测MRSA,值得推广应用.     

三种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的比较

[摘要]目的:对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)3种检测方法的可靠性和临床实用性进行评价。方法：用检测mecA基因的PCR扩增法、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁制片扩散法对临床分离的84株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较。结果:苯唑西林纸片扩散法检的敏感性、特异性分别为97.6%、95.3%,mecA基因的PCR扩增法和头孢西丁纸片扩散法的敏感性、特异性均为100.0%。结论:PCR技术检测MRSA具有快速、敏感和特异的特点,是一种非常有效的鉴别方法。纸片扩散法简便易行,成本低廉, 尤其是头孢西丁纸片扩散法的敏感性和特异性较苯唑西林纸片扩散法更高,值得在临床实验室中推广应用。 [关键词]　耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；mecA基因；PCR；苯唑西林；头孢西丁     

头孢西丁纸片评价耐甲氧西林葡萄球菌的探讨

目的 评价头孢西丁纸片法检测耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的特异性和灵敏度。方法 收集临床分离金黄色葡萄球菌100株、凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS）52株，分别进行头孢西丁纸片法、添加4oANaCl的头孢西丁纸片法、添加2％NaCl的苯唑西林纸片法以及苯唑西林-盐琼脂法检测，以苯唑西林-盐琼脂法作为MRS检测标准，按CLSI2006版标准判读结果。结果 头孢西丁纸片、添加4oANaCl的头孢西丁纸片、添加2oANaCl的苯唑西林纸片检测MRS特异性均达100．0％；对于金黄色葡萄球菌3种纸片法的灵敏度分别为82．7％、79．3％、72．4％；对于凝固酶阴性葡萄球菌，3种纸片法的灵敏度分别为97．9％、95．8oA、95．8％。加盐与不加盐头孢西丁纸片法检测MRS的差异无显著性（P〉0．06），耐药株抑菌圈直径（mm）分别为10．68士6．42、13．36士7．37（P〈0．01）。结论 加盐与不加盐头孢西丁纸片法均能可靠检测MRS，前者对耐药株结果更易判读。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 对头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的可靠性和临床实用性进行评估。方法 用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的124株金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法、琼脂稀释法和胶乳凝集法、mecA基因的检测结果进行比较。结果 mecA基因阳性的90株金黄色葡萄球菌头孢西丁纸片扩散法和胶乳凝集法的敏感性分别为100％和98．9％,特异性均为100％,苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法和琼脂稀释法的敏感性分别为97．8％、98．9％和97．8％,特异性均为100％。结论 头孢西丁纸片扩散法与mecA基因的检测结果高度一致,是筛选和确认MRSA的一种简便可靠的方法。     

一种简单的筛选耐甲氧西林葡萄球菌方法

目的推荐美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)关于6ug／ml苯唑西林 4％NaCl盐平板(以下简称盐平板法)检测甲氧西林耐药葡萄球菌。方法使用NCCLS推荐的盐平板法检测华山医院临床分离的葡萄球菌共894株。结果(1)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)苯唑西林纸片法的检出率为84．2％(538／639)，盐平板法的检出率为86．4％(552／639)，而耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率2种方法分别为82．0(209／255)、90．6％(231／255)；(2)有14株纸片法测定为中介的金黄色葡萄球菌和22株纸片法检测为甲氧西林敏感(MS)的凝固酶阴性葡萄球菌，盐平板检测均为甲氧西林耐药(MR)，经聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因结果均为阳性，显示PCR检测与盐平板检测结果一致；(3)随机取上述纸片法和盐平板2种方法检测均为MS者9株、MR者15株，同时进行mecA基因的PCR检测，结果显示全部与盐平板法和苯唑西林纸片法检测结果符合。结论在临床微生物实验室应该采用NCCLS推荐的6ug／ml苯唑西林 4％NaCl盐平板对MRSA和MRCNS进行检测，以供临床诊断和选用抗生素。