鬼臼毒素-固体脂质纳米粒的制备及质量考察

目的:探讨鬼臼毒素-固体脂质纳米粒的制备方法及其质量。方法:实验于2005-12/2006-08在南方医科大学药学部实验室完成。在制备工艺研究上进行单因素考察和正交实验设计优化处方,以鬼臼毒素-固体脂质纳米粒粒径大小和Zeta电位、形态学、包封率、pH值作为样本质量考察指标,最终确定以改良的乳化蒸发-低温固化法制备鬼臼毒素-固体脂质纳米粒。实验评估:①用透射电镜考察纳米粒的形态。②用粒径分析仪检测纳米粒粒径大小和Zeta电位。③用高效液相色谱法测定纳米粒中鬼臼毒素的包封率。④用pH计测定鬼臼毒素-固体脂质纳米粒混悬液的pH值。结果:①鬼臼毒素-固体脂质纳米粒形态:基本呈圆形或椭圆形。②粒径大小和Zeta电位:分别为(75.3±26.2)nm,(23.2±3.1)mV。③包封率:86.4%。④pH值:4.66±0.18。结论:鬼臼毒素-固体脂质纳米粒制备工艺简单,考察制剂质量较理想。     

鬼臼毒素纳米脂质载体的制备及质量考察

目的:纳米脂质载体是近年来继固体脂质纳米粒发展起来的第2代亚微粒载药系统,具有较高的载药量和物理稳定性.探讨鬼臼毒素-脂质纳米粒(podophyllotoxin-loaded nanostructured lipid carrier,PPT-NLC)的制备方法及理化性质.方法:实验于2006-08/2007-10在南方医科大学药学部实验室完成.选择固体脂质硬脂酸、单硬脂酸甘油脂和液态脂质油酸,采用改良的乳化蒸发-低温固化法制备PPT-NLC,用同法制备不含油酸的PPT-固体脂质纳米粒(Solid lipid nanoparticles,SLN)纳米粒混悬液.用透射电镜、Zeta电位仪、高效液相色谱法、pH计考察PPT-NLC理化性质,并比较SLN与NLC的包封率和稳定性.结果:透射电镜下PPT-NLC外形呈圆形或椭圆形,平均粒径为(88.2±8.4)nm,多分散指数为0.190±0.085,Zeta电位为(-33.2±3.1)mV,包封率为86.6%.PPT-SLN分别为(75.3±16.2)nm,0.300±0.072,(-25.2±3.4)mV,包封率为76.5%.结论:PPT-NLC制备工艺简单,分布均匀,稳定性较SLN好,包封率高.     

鬼臼毒素纳米脂质载体的制备及质量考察

目的：纳米脂质载体是近年来继固体脂质纳米粒发展起来的第2代亚微粒载药系统，具有较高的载药量和物理稳定性。探讨鬼臼毒素-脂质纳米粒（podophyllotoxin-loaded nanostructured lipid carrier，PPT-NLC）的制备方法及理化性质。方法：实验于2006—08／2007—10在南方医科大学药学部实验室完成。选择固体脂质硬脂酸、单硬脂酸甘油脂和液态脂质油酸，采用改良的乳化蒸发-低温固化法制备PPT-NLC，用同法制备不含油酸的PPT-固体脂质纳米粒（Solid lipid nanoparticles，SLN）纳米粒混悬液。用透射电镜、Zeta电位仪、高效液相色谱法、pH计考察PPT—NLC理化性质，并比较SLN与NLC的包封率和稳定性。结果：透射电镜下PPT—NLC外形呈圆形或椭圆形，平均粒径为（88．2±8.4）nm，多分散指数为0．190±0．085，Zeta电位为（-33．2±3．1）mV，包封率为86．6％。PPT-SLN分别为（75．3±16．2）nm，0．300±0．072，（-25．2±3．4）mV，包封率为76．5％。结论：PPT-NLC制备工艺简单，分布均匀，稳定性较SLN好，包封率高。     

布洛芬磁性固体脂质纳米粒的制备

背景:布洛芬因溶解度和溶血问题,目前仍无注射给药剂型上市.目的:将自制的磁流体载入固体脂质纳米粒中,制备布洛芬磁性固体脂质纳米粒.方法:以包封率为指标,用正交设计确定布洛芬固体脂质纳米粒的最优处方.以共沉淀法制备Fe3O4磁流体作为磁性材料,采用乳化分散-超声法,按照最优处方制备布洛芬磁性固体脂质纳米粒.观察其表面形态、粒径大小、分布和Zeta电位、饱和磁化强度、包封率及体外释放特征.结果与结论:通过正交实验得最优处方为布洛芬0.05 g、F-68 0.2 g、吐温80 0.05 g、卵磷脂0.1 g、单硬脂酸甘油酯0.05 g、磁流体2.5 mL.用该工艺和处方制备的布洛芬磁性固体脂质纳米粒粒子呈均匀球形;平均粒径、zeta电位为(122±16) nm和(-13.3±6.94) mV;药物包封率和Fe3O4铁包封率分别为84.15%和83.19%;布洛芬在给定介质中36 h释放较完全,符合制剂学性质要求.     

大黄素固相脂质纳米粒对大鼠帕金森模型的治疗效果

目的评价大黄素固相脂质纳米粒对大鼠帕金森模型的防治效果,为大黄素新制剂的研发提供参考。方法采用乳化蒸发-低温固化法,应用单硬酯酸甘油酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油RH40和聚山梨酯(吐温-80)(3∶1,w/w)将大黄素制成固相脂质纳米粒,通过口服给药,调查其对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱发的帕金森病模型大鼠的行为学、中脑组织中儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)和单胺氧化酶B(MAO-B)含量的影响,评价其对帕金森症的防治作用。结果大黄素固相脂质纳米粒在透视电镜下观察,外观呈圆球形,粒径介于40~100nm;与生理盐水组帕金森模型大鼠比较,大黄素固相脂质纳米粒能够显著降低帕金森模型大鼠的中脑组织中的COMT和MAO-B浓度,大黄素混悬液能显著降低帕金森模型大鼠中脑组织中MAO-B浓度,但对COMT浓度无显著影响。结论大黄素固相脂质纳米粒通过降低6-OHDA诱发的帕金森模型大鼠脑内的COMT和MAO-B水平发挥治疗帕金森症的作用,其效果优于混悬液。     

鬼臼毒素-固体脂质纳米粒的皮肤毒理学实验

目的:考察鬼臼毒素-固体脂质纳米粒经皮肤用药的安全性。方法:实验于2005-12/2006-11在南方医科大学药学部实验室完成。选择Wistar大鼠140只,Fmmu豚鼠78只。采用改良的乳化蒸发-低温固化法制备5,50mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒。①取豚鼠48只,按随机数字表法分成5,50mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒完整皮肤组和破损皮肤组,每组4只,分别进行单次和多次给药皮肤刺激试验。单次给药方法:豚鼠背部两侧对称脱毛后用手术刀片作#字划痕,以渗血为度。采用同体左右侧自身对照法,左侧为受试区,分别取5,50mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒混悬液0.1mL均匀涂布于受试区,右侧为空白对照区,再以自制单层塑料薄膜和双层纱布封包受试区。分别于去除敷料和清洗受试物后1,24,48h观察涂药部位有无红斑和水肿等情况,以及上述变化的恢复情况与时间。多次给药方法:皮肤处理方法、观察指标及评价指标同上,每日给药1次,连续给药14d。②取大鼠140只,按随机数字表法分成5,50mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒完整皮肤组和破损皮肤组、正常对照组,每组10只,分别进行急性和长期皮肤毒性试验。急性毒性试验方法:脱毛后,分别取5,50mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒混悬液1mL均匀涂布于受试区,连续观察14d,每日观察大鼠体质量、进食量、皮肤、呼吸、体态、眼、中枢神经系统、四肢活动、粪便性状及死亡情况。长期毒性实验方法:皮肤处理方法及观察指标同上,每日给药1次,药量均为0.1mL,连续给药30d,末次给药后24h麻醉后处死动物,取血3￣4mL进行血液学、血液生化学及皮肤病理检查。③取豚鼠30只,按随机数字表法分成50mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒组、阴性对照组及阳性对照组,每组10只,进行皮肤变态反应试验。方法:脱毛后,3组左侧脱毛区分别涂50mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒混悬液、空白固体脂质纳米粒混悬液及10g/L二四二硝基氯苯0.1mL,涂药后以自制单层塑料薄膜和双层纱布封包受试区,6h后去除敷料和清洗受试物。第7天和第14天,以同样方法各重复1次,共3次。于末次给受试物致敏后14d,将受试物0.1mL涂于豚鼠背部右侧脱毛区,6h后去掉受试物,即刻观察皮肤变态反应情况,之后于24,48,72h再次观察皮肤反应。结果:纳入大鼠140只,豚鼠78只,均进入结果分析。①单次和多次给予鬼臼毒素-固体脂质纳米粒对豚鼠完整和破损皮肤均无刺激作用。②单次大剂量给予5mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒,未见对大鼠有急性毒性反应。给予50mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒组大鼠分别于给药后的前3,8d出现体质量减轻、食欲下降等全身中毒症状,尤以皮肤破损组表现较明显,以后逐渐恢复;每日小剂量给予5mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒,未见对大鼠有明显长期毒性反应。③给予50mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒组大鼠于给药后的18￣25d,均出现轻度的皮肤红斑、水肿、糜烂和结痂等炎症反应,于停药后1周内消退,皮肤组织病理学检查可见以表皮为主的急性炎症反应;鬼臼毒素-固体脂质纳米粒对豚鼠皮肤无致敏性。结论:在有效观察时间和一定质量浓度范围内,鬼臼毒素-固体脂质纳米粒对豚鼠皮肤无刺激性及致敏性,对破损皮肤大鼠应用50mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒大剂量时易出现全身急性中毒反应而完整皮肤及5mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒应用则较安全,小剂量长期应用鬼臼毒素-固体脂质纳米粒对大鼠比较安全无系统吸收毒性,但应用50mg/L鬼臼毒素-固体脂质纳米粒时可以出现轻度的皮肤炎症反应。     

高温乳化-低温固化法制备芦丁固体脂质纳米粒及理化性质分析

目的观察高温乳化-低温固化法制备的芦丁固体脂质纳米粒（RT-SLN）的理化性质及体外释药特性。方法以硬脂酸为脂质材料,采用高温乳化-低温固化法制备芦丁固体脂质纳米粒,以均匀设计法优化处方及制备工艺,并对其形态、粒径、Zeta电位、包封率（EE）、体外释药特征等进行评价。结果所制备的RT-SLN外观呈类球形,粒径为（192.47±31.8）nm,Zeta电位（-18.90±0.27）mV。以EE为评价指标表进行处方筛选,回归方程计算得优化工艺为药物-硬脂酸比1∶4,硬脂酸用量200mg,聚山梨酯-80浓度12mg/ml,聚乙二醇-400浓度5%、转速1500r/min,初乳与分散相体积比为1∶7,预测优化值为90.11%,其95%的可信区间为83.71%～96.51%,平均EE（89.34±0.93）%。72h药物累积释放约85%,体外释药符合Higuchi方程：Q=8.345t1/2＋15.023（r=0.9892）。结论高温乳化-低温固化法适于制备RT-SLN,制备的RT-SLN具有缓释作用,能提供平稳的血药浓度,利于提高患者的用药依从性。     

载异烟肼利福平聚乳酸纳米粒的制备及体外释药

背景:微载体药物因具有靶向性、控释性、稳定性、更好的安全性备受关注.目的:观察载异烟肼利福平两种抗结核药于同一聚乳酸纳米粒的给药系统及体外释放特性.方法:采用改良的自乳化二元溶剂扩散法制备载异烟肼和利福平纳米粒,亚微粒径分析仪测定纳米粒粒径及分布,透射电镜观察其形态;高效液相色谱仪建立测定异烟肼、利福平的载药量和包封率;以磷酸盐缓冲液为释放介质,观察载异烟肼和利福平纳米粒的体外释药特性.结果与结论:载利福平和异烟肼纳米粒表面完整光滑,无明显粘连现象,纳米粒均匀度好.亚微粒径分析仪测定纳米粒平均粒径80.4 nm.异烟肼载药量为(15.95±1.34)%,包封率为(5.01±0.17)%;利福平载药量为(4.66±0.97)%,包封率为(4.05±0.18)%.体外释药结果显示纳米粒的体外释药过程较平稳.突释期纳米粒中异烟肼释放度为15.22%,到3 d累积释放度可达95.6%;利福平释放度为9.26%,到3 d累积释放度可达90.3%.提示采用改良的自乳化二元溶剂扩散法制备载异烟肼和利福平纳米粒,所得载药纳米粒的粒径小且较均匀.纳米粒体外释药过程较平稳,无明显突释现象.     

脂质微泡-载紫杉醇纳米粒包裹紫杉醇的肝素纳米粒与脂质微泡复合物的制备

目的 制备一种新型包裹紫杉醇的肝素纳米粒-微泡复合物,并对其理化性质进行检测.方法 以肝素为原料制备生物素化包裹紫杉醇的肝素纳米粒,动态光散射仪测定其粒径及电位,透射电镜观察其形态,紫外分光光度计测定载药量.采用机械震荡法制备生物素化脂质微泡.借助生物素-亲和素桥接作用将两者偶联,制备复合物体系,激光共聚焦显微镜观察Oregon green绿色荧光标记的载药纳米粒与DiI红色荧光标记的脂质微泡的连接效果,用库尔特粒度分析仪进行粒度分析.结果 肝素纳米粒的粒径为120 nm,电位为-35 mV,电镜观察呈球形,大小均匀,分散度好,载药量为8.84％.激光共聚焦显微镜观察肝素纳米粒成功连接在微泡表面.库尔特粒度分析仪测定微泡粒径为(2.20±0.93)μm,浓度为(11.31±1.0)×108个/ml,复合物的粒径为(2.26±0.86) μm,浓度为(7.78±1.2)×108个/ml.结论 成功制备具有较好药物运载性能的新型载紫杉醇肝素纳米粒-微泡复合物.     

改良自乳化溶剂扩散法制备MePEG-PLA纳米粒对成骨细胞的毒性

背景:两亲性嵌段聚合物由于其较强的载药能力强、纳米级大小、血液中长循环等优点在载药系统中得到广泛的应用。目的:评估改良自乳化溶剂扩散法制备的甲氧基封端的聚乙二醇-聚乳酸(MePEG-PLA)纳米粒对人骨肉瘤细胞MG63的毒性。方法:通过改良自乳化溶剂扩散法制备MePEG-PLA纳米粒,MTS法测定纳米粒培养1,2,3d后对MG63的毒性。激光粒度分析仪测定纳米颗粒的粒径大小、粒径分布及Zeta电位;透射电镜表征纳米胶束外观形态;酶标仪检测培养1,2,3d细胞吸光度值。结果与结论:MePEG-PLA纳米粒的平均粒径为25.7nm,分布均匀,呈球形,Zeta电位为-8.06mV,MePEG-PLA毒性为0级。提示改良自乳化溶剂扩散法制备纳米粒简单易行,制备的纳米粒无毒,具有良好的应用前景。     

布洛芬磁性固体脂质纳米粒的制备

背景：布洛芬因溶解度和溶血问题,目前仍无注射给药剂型上市。目的：将自制的磁流体载入固体脂质纳米粒中,制备布洛芬磁性固体脂质纳米粒。方法：以包封率为指标,用正交设计确定布洛芬固体脂质纳米粒的最优处方。以共沉淀法制备Fe3O4磁流体作为磁性材料,采用乳化分散-超声法,按照最优处方制备布洛芬磁性固体脂质纳米粒。观察其表面形态、粒径大小、分布和Zeta电位、饱和磁化强度、包封率及体外释放特征。结果与结论：通过正交实验得最优处方为布洛芬0.05g、F-680.2g、吐温800.05g、卵磷脂0.1g、单硬脂酸甘油酯0.05g、磁流体2.5mL。用该工艺和处方制备的布洛芬磁性固体脂质纳米粒粒子呈均匀球形;平均粒径、zeta电位为（122±16）nm和（-13.3±6.94）mV;药物包封率和Fe3O4铁包封率分别为84.15%和83.19%;布洛芬在给定介质中36h释放较完全,符合制剂学性质要求。     

阿克拉霉素A固体脂质纳米粒制备工艺研究

目的为促进固体脂质纳米粒的发展,拓宽阿克拉霉素A(ACM-A)制剂学研究内容。方法采用单因素试验初选阿克拉霉素A固体脂质纳米粒(ACM-SLN)的制备条件,并以正交设计优化了ACM-SLN的处方和制备工艺。结果得到的ACM-SLN的平均粒径为63 nm,平均载药量为(4.47±0.05)%,平均包封率为(89.32±0.91)%。结论以卵磷脂为载体材料制备ACM-SLN工艺简便,重现性好。     

载吲哚菁绿和液态氟碳的光致相变型纳米粒的制备及增强体内成像的实验研究

目的制备一种光致相变型液态氟碳纳米粒,研究其体外相变及体内增强光声、超声成像能力。方法采用三步乳化技术制备出以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体,液态氟碳(PFH)和吲哚菁绿(ICG)为内核的纳米粒,检测该纳米粒的粒径和电位,然后体外激光辐照激发纳米粒相变,体内观察该纳米粒增强超声及光声成像的能力。结果成功制备出包裹PFH和ICG的光致相变型纳米粒,该纳米粒平均粒径(599.2±134.3)nm,平均电位(-24.10±4.09)m V。激光辐照后,纳米粒可发生相变转变成微米级的微泡,体内增强了裸鼠移植瘤的光声及超声信号。结论制备的光致相变型纳米粒在激光作用下发生相变,并可增强体内超声、光声成像,为临床疾病的诊断提供了新的思路。     

改良自乳化溶剂扩散法制备MePEG-PLA纳米粒对成骨细胞的毒性

背景：两亲性嵌段聚合物由于其较强的载药能力强、纳米级大小、血液中长循环等优点在载药系统中得到广泛的应用。目的：评估改良自乳化溶剂扩散法制备的甲氧基封端的聚乙二醇-聚乳酸（MePEG-PLA）纳米粒对人骨肉瘤细胞MG63的毒性。方法：通过改良自乳化溶剂扩散法制备MePEG-PLA纳米粒,MTS法测定纳米粒培养1,2,3d后对MG63的毒性。激光粒度分析仪测定纳米颗粒的粒径大小、粒径分布及Zeta电位;透射电镜表征纳米胶束外观形态;酶标仪检测培养1,2,3d细胞吸光度值。结果与结论：MePEG-PLA纳米粒的平均粒径为25.7nm,分布均匀,呈球形,Zeta电位为-8.06mV,MePEG-PLA毒性为0级。提示改良自乳化溶剂扩散法制备纳米粒简单易行,制备的纳米粒无毒,具有良好的应用前景。     

载紫杉醇的LHRH靶向相变型超声造影剂的制备及其一般特性

目的制备一种载紫杉醇的靶向相变型纳米级超声造影剂,并评价其一般特性。方法通过薄膜水化法、乳化法制备载紫杉醇的非靶向脂质纳米粒(PTX-LNP),通过生物素-亲和素法将生物素化的促黄体生成素释放激素(LHRH)连接于非靶向脂质微球制备载紫杉醇的LHRH靶向相变型脂质纳米粒(PTX-LNP-LHRH),检测PTX-LNP-LHRH的粒径以及表面电位,载药量及包封率,分别观察其声致相变及热致相变情况,检测纳米粒的LHRH靶连接率及其致人卵巢癌OVCAR3细胞的凋亡率。结果成功制备靶向相变型脂质纳米粒,LHRH的靶连接率为(98.85±0.75)%,共聚焦显微镜下可见PTX-LNP-LHRH聚集在OVCAR3细胞周围,PTX-LNP-LHRH组致OVCAR3细胞的凋亡率明显高于PTX-LNP组。结论成功制备靶连接率高且致靶细胞凋亡率较高的PTX-LNP-LHRH,其体外声致相变后可增强超声显影的效果。     

叶酸修饰乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒的制备及性能表征

以聚乙二醇二氨为偶联剂,通过叶酸活性酪和聚合物端基活性酯与聚乙二醇二氨反应,制得叶酸修饰的大分子,再通过乳化法合成载紫杉醇纳米粒,制备叶酸修饰的乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒子.紫外光谱、红外光谱、核磁光谱显示叶酸成功连接在高聚物分子上.所制得的纳米粒粒径(276±12)nm,扫描电镜观察其形态为规整的球形.该方法可成功制备叶酸修饰的乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒.     

乳腺癌改良根治术中不同镇痛药对术后VAS评分和术后早期吗啡镇痛量的影响

目的:比较乳腺癌改良根治术中不同的镇痛药物对患者停药后拔除喉罩时间、疼痛评分、麻醉后监护室(PACU)中吗啡镇痛量及PACU停留时间的影响.方法:选择60例应用喉罩的乳腺癌改良根治术患者,随机分为3组:芬太尼组、舒芬太尼组和瑞芬太尼组(每组20例).术毕前,所有患者均注射氯诺昔康8 mg,术毕拔除喉罩.盲法评估PACU中疼痛评分(VAS)、PACU中的吗啡镇痛量及PACU停留时间.结果:术后拔除喉罩时间瑞芬太尼组(4±3 min)明显短于芬太尼组(10±6 min)和舒芬太尼组(12±5 min)(P<0.05);疼痛评分(VAS)芬太尼组(5.5±1.5)和舒芬太尼组(6.0±1.0)明显低于瑞芬太尼组(7.8±1.2)(P<0.05);瑞芬太尼组PACU停留时间为108± 37 min,明显长于另两组78±31 min和73 ± 25 min(P<0.05).结论:瑞芬太尼维持麻醉镇痛可致术后的痛觉敏感,从而PACU中吗啡滴定镇痛时间延长导致逗留时间延长.     

鬼臼毒素固体脂质纳米粒冻干粉的制备及理化性质考察

目的:制备含有不同冻干保护剂的鬼臼毒素固体脂质纳米粒(POD-SLN)冻干粉,并考察其理化性质,筛选出最佳配方.方法:实验于2006-12/2007-11在南方医科大学药学部实验室完成.冻干配方为15%海藻糖、15%甘露醇和二者联用各取5%,冷冻干燥制作冻干粉制剂.扫描电镜下观察冻干粉复溶后粒子形态,Image-Pro Plus 6.0软件计算粒径大小,高效液相考察固体脂质纳米粒的药物包封率,并考察冻干粉的外观、复溶和4 ℃保存对其影响,评价不同辅料对冻干品的影响.结果:①外观和复溶情况:海藻糖冻干粉、海藻精联用甘露醇冻干粉表面均松脆多孔,疏松,复溶较快,约需20 s,甘露醇冻干粉表面较光滑,结构致密,饼状,复溶较慢,需借助外力.冻干粉样品4 ℃冰箱放置24h、1,3,6个月其外观和复溶均无明显变化.②电镜下粒子形态:呈圆形或椭圆形,分布较均匀,冻干前后无明显差异.③粒径:未加冻干保护剂时为(82.65±18.43) nm,加入海藻糖、海藻糖联用甘露醇、甘露醇后分别为(94.78±21.94), (109.26±16.15),(114.63±21.42) nm.④包封率:未加冻干保护剂时为87.4%,加入海藻糖、海藻糖联用甘露醇、甘露醇后分别为86.2%,80.3%,79.6%.结论:以15%海藻糖为冻干保护剂制备的鬼臼毒素固体脂质纳米粒冻干粉粒径较小,包封率高,稳定性好,其制备工艺合理可行.     

纳米粒包裹氨基吡啶亚乙基双磷酸甜菜碱对巨噬细胞的选择性清除作用

背景:氨基吡啶亚乙基双磷酸甜菜碱(2-(2-aminopyrimidinio)ethylidene-1,1-bisphosphonic acid betaine,ISA)是一种新近人工合成的效力极强的双磷酸酯,将其用纳米粒包裹后通过巨噬细胞的吞噬作用而导入细胞,可以达到选择性清除巨噬细胞的目的.目的:拟验证纳米粒包裹ISA对单核/巨噬细胞选择性的清除作用.设计、时间及地点:分组设计、对比观察,于2003/2007分别在以色列希伯莱大学和解放军总医院实验室完成.材料:ISA由以色列希伯莱大学约学院合成;聚乳酸/乙醇酸共聚物(50∶50),相对分子质量123400;聚乙烯醇,相对分子质量30000-70000.方法:采用双相乳化系统和溶剂蒸发技术制备纳米粒包裹的ISA,另以ISA溶液和等量不含ISA的纳米粒为对照.主要观察指标:①纳米粒形态、大小及纳米粒中ISA含量.②纳米粒中ISA体外释放率.③ISA对培养巨噬细胞、平滑肌细胞增殖的影响.④激光扫描共聚焦显微镜观察培养细胞对荧光标记纳米粒吞噬作用.结果:所制备的纳米粒直径500 nm,表面呈负电荷(-40 mY),ISA包裹率高(17.6%～19.O%),扫描电镜检查见其大小均匀.体外实验证实,ISA在纳米粒包裹后对巨噬细胞、平滑肌细胞增殖抑制作用明显增加,并且对巨噬细胞增殖的抑制作用尼为明显.激光扫描共聚焦显微镜观察发现荧光标记的纳米粒分别与巨噬细胞、平滑肌细胞孵育后,纳米粒可快速进入巨噬细胞内,且包裹ISA的纳米粒对巨噬细胞有明显损伤作用,而平滑肌细胞内无纳米粒.结论:ISA经纳米粒包裹后可选择性清除单核/巨噬细胞,而对非吞噬细胞影响较小.     

载紫杉醇靶向超声脂质微泡对于卵巢癌细胞体外存活率的实验研究

目的制备一种载紫杉醇的靶向相变型纳米级超声造影剂,并评价其一般特性。方法薄膜水化法、乳化法制备载紫杉醇的非靶向相变型脂质纳米粒(PTX-LNP),通过生物素-亲和素法将生物素化的促黄体生成素释放激素(LHRH)连接于非靶向相变型脂质纳米粒制备载紫杉醇的LHRH靶向相变型脂质纳米粒(PTX-LNP-LHRH),于观察室温下PTX-LNP-LHRH的形态,载药量及包封率,致人卵巢癌OVCAR3细胞的凋亡率。结果 PTX-LNP-LHRH的平均粒径为(303±57.76)nm,载药量及包封率分别为(13.37±0.95)%和(80.72±5.19)%,OVCAR3细胞的存活率随各组培养时间延长而下降。空白微球组的细胞存活率均90%。提示该组对细胞活性影响较小。而靶向组联合低强度聚焦超声组(PTX-LNP-LHRH+LIFU)的细胞存活率最低,与其他实验组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论成功制备外接LHRH的载药微泡,并且不影响紫杉醇的载药量及包封率,靶向造影剂组的卵巢癌细胞凋亡率显著增高,且差异均具有统计学意义(P0.05)。