宽谱中波紫外线对人表皮黑素细胞非经典Wnt通路的作用研究

目的 探讨宽谱中波紫外线（BB-UVB）照射对黑素细胞增殖率、酪氨酸酶活性、黑素含量的影响。 方法 分别用0、10、20、30、40、50、100、200、300 mJ/cm2 BB-UVB照射原代培养的黑素细胞,采用CCK8法测定黑素细胞增殖率、多巴比色法测定酪氨酸酶活性、NaOH溶解法测定黑素含量。分别用0、30、50、100 mJ/cm2 BB-UVB照射黑素细胞,实时荧光定量PCR检测非经典Wnt通路相关基因mRNA的表达。100 mJ/cm2 BB-UVB照射黑素细胞,用Western 印迹检测作用前后非经典Wnt通路相关基因蛋白的表达。多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用独立样本t检验。 结果 与对照组相比,10 ~ 300 mJ/cm2 BB-UVB照射后,细胞增殖率均逐渐降低,BB-UVB剂量 > 100 mJ/cm2时细胞存活率 < 50%,同时,10 ~ 100 mJ/cm2 BB-UVB照射后酪氨酸酶活性逐渐增加,100 mJ/cm2 BB-UVB组黑素含量明显增加,差异有统计学意义（均P < 0.05）。30、50、100 mJ/cm2 BB-UVB照射后,WIF-1 mRNA的表达均较对照组逐渐减少,JNK、MITF、RAC1、TYR的表达均较对照组逐渐升高,而30、50 mJ/cm2 BB-UVB组WNT5A mRNA表达量均较对照组降低,100 mJ/cm2 BB-UVB组WNT5A mRNA表达量则明显升高（P < 0.05）。100 mJ/cm2 BB-UVB照射后,WIF-1蛋白的表达量较对照组降低,WNT5A、JNK、MITF、RAC1、TYR蛋白表达较对照组升高（P < 0.05）。 结论 紫外线照射降低黑素细胞增殖率,提高黑素细胞酪氨酸酶活性和黑素含量。WIF-1基因可能抑制黑素生成。WIF-1基因表达降低可能通过非经典通路Wnt蛋白的综合作用激活JNK/MITF/TYR通路,最终促进黑素合成。     

全反式维A酸对UVB照射的A375细胞酪氨酸酶代谢及铜锌超氧化物歧化酶的影响

目的 探讨全反式维A酸（ATRA）对中波紫外线（UVB）照射的人A375黑素瘤株细胞黑素含量、酪氨酸酶及铜锌超氧化物歧化酶（Cu/ZnSOD）的影响。方法 将培养的A375细胞分为6组：ATRA + UVB组：A375细胞照射UVB后加入全反式维A酸;氢醌 + UVB组：照射UVB后加入氢醌;UVB组：仅照射UVB;ATRA组：A375细胞加入ATRA;氢醌组：A375细胞加入氢醌;阴性对照组：A375细胞只加入相应溶媒,既不照射UVB,也不加入药物。分别培养,于24 h、48 h和72 h测定黑素含量及酪氨酸酶活性;于培养24 h, Western 印迹检测酪氨酸酶蛋白的变化,实时定量PCR法分别检测酪氨酸酶和Ｃu/Zn SOD在mRNA水平的变化。结果 UVB照射的A375细胞加入全反式维A酸后24 h、48 h、72 h黑素含量及酪氨酸酶活性均下降。UVB照射A375细胞后24 h酪氨酸酶蛋白及mRNA测定值分别为0.72 ± 0.070、1.400 ± 0.135,加入全反式维A酸24 h后酪氨酸酶蛋白及mRNA值分别为0.42 ± 0.056（P < 0.01）、0.810 ± 0.062（P < 0.01）;UVB照射A375细胞后24 h Cu/ZnSOD mRNA水平为0.323 ± 0.066,加入全反式维A酸后Cu/ZnSOD在mRNA水平增高为0.625 ± 0.103（P < 0.01）。结论 全反式维A酸能够通过酪氨酸酶途径抑制UVB辐射导致的A375细胞黑素含量增加,并可提高Cu/ZnSOD水平。     

热处理、UVB辐射及两者联合作用对人表皮黑素细胞合成热休克蛋白72的影响

目的 探讨热处理、中波紫外线（UVB）辐射及两者联合作用下,体外培养的人表皮黑素细胞热休克蛋白72（heat shock protein 72,HSP72）的变化。 方法 热处理（42 ℃,1 h/d,连续3 d）、UVB辐射（50 mJ/cm2,连续3 d）及两者联合（首先42 ℃,加热1 h,然后 50 mJ/cm2 UVB照射,连续3 d）处理正常人表皮（包皮）黑素细胞2 h、6 h后收集细胞,用实时荧光定量PCR技术和 Western 印迹技术分别检测不同组别间HSP72 mRNA及蛋白表达水平的差异。结果 热处理组（6.584 ± 0.871）及联合作用组（7.269 ± 0.454）与对照组（0.975 ± 0.089）相比,mRNA 表达水平明显增加（P < 0.001）;UVB辐射组（0.832 ± 0.084）与对照组相比,mRNA表达水平差异无统计学意义（P > 0.05）。Western 印迹结果显示,热处理组（2.022 ± 0.058）及联合作用组（2.080 ± 0.045）HSP72蛋白表达水平明显高于对照组（0.532 ± 0.033,P < 0.001）;UVB组（0.546 ± 0.021）与对照组相比,表达水平差异无统计学意义（P > 0.05）。析因设计方差分析结果显示,热处理与UVB辐射对HSP72 mRNA和蛋白表达均无交互作用（F = 2.106,1.399,P < 0.05）。结论 热处理引起HSP72表达显著增多,可能与热处理引起黑素细胞功能增强及UVB辐射后的损伤保护作用有关。     

NB-UVB对黑素细胞黑素合成相关基因表达的影响

目的：研究NB-UVB照射对黑素细胞的细胞活性、黑素合成、黑素合成相关基因表达的影响。方法：培养黑素细胞系PIG1，利用MTT法检测不同剂量NB-UVB（400、800、1200、1600、2000 mJ/cm2）照射后细胞的增殖率，采用NaOH裂解法测定细胞中的黑素含量，RT-PCR和Western blot方法检测UVB照射后12个黑素合成相关基因Tyr、Tyrp1、Tyrp2、OA1、MART-1、Pmel17、VAT-1、OCSP、syntenin、CHCHD3、flotillin-1、GPNMB的mRNA和蛋白的表达。结果：NB-UVB照射剂量在400、800、1200 mJ/cm² 时，细胞活力无明显变化，照射剂量为1600、2000 mJ/cm²时细胞活力明显下降。NB-UVB照射剂量为400、800、1200 mJ/cm² 时，随着照射剂量的增加，黑素的合成增加；NB-UVB照射后，12种黑素体蛋白中，Tyr、Tyrp2、GPNMB、Syntenin、MART-1的基因mRNA及蛋白表达显著升高。结论：UVB照射显著增加了黑素合成和相关基因的表达。     

硒代蛋氨酸对中波紫外线致HaCaT细胞氧化损伤的保护作用

目的 研究硒代蛋氨酸对中波紫外线（UVB）致HaCaT细胞氧化损伤的影响及其可能机制。方法 培养HaCaT细胞,分为4组：①正常对照组,不做任何处理;②硒代蛋氨酸组：分别加入1、10、50、100、200 nmol/L和1 μmol/L 硒代蛋氨酸预孵育24 h;③UVB组：30、60、90 mJ/cm2 UVB照射;④硒代蛋氨酸 + UVB组：不同浓度硒代蛋氨酸预孵育24 h后进行不同剂量UVB照射。采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,比色法检测超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）水平。采用析因设计方差分析、单因素方差分析对数据进行统计学分析,多重比较采用LSD法。 结果 析因设计方差分析结果显示,UVB照射对细胞增殖活性有抑制作用（F = 128.04,P < 0.05）,且随UVB强度增加,细胞增殖活性逐渐下降,组间差异有统计学意义（P < 0.05）;硒代蛋氨酸预孵育对细胞增殖活性也有影响（F = 5.95,P < 0.05）,其中10 nmol/L ~ 1 μmol/L硒代蛋氨酸 + UVB组与UVB组比较,细胞增殖活性显著升高（P < 0.05）;UVB照射和硒代蛋氨酸对细胞增殖活性无明显交互作用（F = 1.65,P > 0.05）。30 mJ/cm2 UVB 照射后,UVB组凋亡率（31.9% ± 2.67%）较正常对照组（4.1% ± 0.67%）显著升高（P < 0.05）;而10、50、100、200 nmol/L和1 μmol/L硒代蛋氨酸 + 30 mJ/cm2 UVB组凋亡率［依次为：（21.9 ± 3.72）%、（17.2 ± 1.67）%、（4.6 ± 0.85）%、（7.5 ± 1.86）%、（13.5 ± 1.95）%］均较30 mJ/cm2 UVB组凋亡率显著下降（P < 0.05）。30 mJ/cm2 UVB组与正常对照组相比,SOD和GSH-Px活性降低,MDA含量升高（P < 0.05）;10 nmol/L ~ 1 μmol/L硒代蛋氨酸 + 30 mJ/cm2 UVB组与30 mJ/cm2 UVB组比较,SOD和GSH-Px活性增高,MDA含量下降（P < 0.05）。 结论 硒代蛋氨酸可以减轻UVB诱导HaCaT细胞氧化损伤,其机制与增强抗氧化酶活性、减少氧自由基有关。     

人参皂苷Rb1对人表皮黑素细胞黑素生成的影响

目的 探讨人参皂苷Rb1对体外培养的人黑素细胞黑素生成的影响及其作用机制。方法 人表皮黑素细胞取自小儿包皮环切术标本,取第2 ～ 5代细胞进行实验。采用MTT法测定体外培养的人黑素细胞增殖情况,分光光度计法测定酪氨酸酶的多巴氧化酶活性,氢氧化钠裂解法测定黑素含量,免疫蛋白印记法测定黑素细胞酪氨酸酶、小眼畸形相关转录因子（MITF）的表达及cAMP应答元件结合蛋白（CREB）的磷酸化。结果 体外培养的人黑素细胞分别加入25、50、100 μmol/L人参皂苷Rb1 作用72 h后,黑素细胞存活率3组间差异无统计学意义（P ＞ 0.05）,黑素含量呈浓度依赖性增加（与溶剂对照组相比的相对黑素含量分别为112.4% ± 5.7%、155.7% ± 6.3%、217.2% ± 11.7%）,酪氨酸酶活性增加（相对酪氨酸酶活性分别为117.9% ± 5.7%、158.2% ± 9.6%、182.6% ± 10.0%）。100 μmol/L人参皂苷Rb1作用72 h,黑素细胞酪氨酸酶（225.4 %± 12.8%）、MITF（313.5% ± 16.7%）蛋白表达明显升高（与溶剂对照组相比,P值均 < 0.01）,CREB磷酸化明显增加（322.5% ± 21.1%）（与溶剂对照组相比,P < 0.01）。100 μmol/L人参皂苷Rb1 作用黑素细胞8 h,MITF蛋白表达无明显变化;作用24 h后,MITF表达明显增加,与0时间点相比,P < 0.01。10 μmol/L的蛋白激酶A（PKA）抑制剂H-89预处理细胞,可明显抑制100 μmol/L人参皂苷Rb1引起的CREB激活、酪氨酸酶及MITF蛋白表达的增加,与100 μmol/L人参皂苷Rb1作用72 h比较,P值均 < 0.01,进而抑制人参皂苷Rb1引起的酪氨酸酶活性作用增强及黑素合成增加。 结论 人参皂苷Rb1可促进正常人黑素细胞的黑素合成和酪氨酸酶活性。PKA/CREB/MITF/酪氨酸酶信号通路可能参与了人参皂苷Rb1的促黑素生成机制。     

NB-UVB对白癜风患者黑素细胞生物学特性的影响

目的：明确窄谱中波紫外线(narrow-band UVB, NB-UVB)对白癜风患者的黑素细胞生物学特性的影响。方法：提取34例白癜风患者皮损处黑素细胞进行体外培养。每例样本分组后分别接受不同的照射剂量（0、20、40、60、80、100 mJ/cm2）的NB-UVB处理，照射后1 d采用免疫印迹法对黑素细胞中微管相关蛋白轻链3 II/I(LC3 II/I)、酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、自噬信号磷酸化磷酸腺苷蛋白激酶(p-AMPK)、P26蛋白的表达情况进行测定。照射后2d、3d、4d采用MTT法对黑素细胞的增殖活性进行测定，采用NaOH染色法对黑素细胞中黑素含量进行测定。结果：随着NB-UVB照射剂量的增加,LC3 II/I和p-AMPK表达水平逐渐上调，p-mTOR和P26的表达水平逐渐下降。不同NB-UVB剂量下，黑素细胞增殖水平增加，但随剂量的增加，增殖的程度逐渐减弱。不同NB-UVB剂量黑素细胞中黑素水平升高，且呈剂量依赖式递增。结论：NB-UVB能够有效调节白癜风患者黑素细胞自噬相关蛋白表达水平，活化自噬信号通路，促进黑素细胞增殖及黑素合成能力。     

黄芩甙对紫外线诱导人正常黑素细胞黑素合成的抑制作用研究

体外培养黑素细胞（MC）分别经隔日长波紫外线（UVA）或中波紫外线（UVB）照射和（或）黄芩处理后，观察细胞增殖情况，测定酪氨酸酶活性和黑素含量。结果：（1）UVA使细胞增殖增快，但剂量较大时增殖减发电量；UVB使细胞增殖减慢。二者均可使细胞酪氨酸酶活性和黑素含量高于对照组。（2）黄芩具有抑制UVA和UVB诱导的MC增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成改变的作用。提示黄芩能抑制UVA和UVB诱导的细胞反应，还可通过抑制酪氨酸酶减少MC黑素合成。     

粒细胞集落刺激因子及其受体对人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响

目的 探讨粒细胞集落刺激因子受体（G-CSFR）在人黑素细胞中的表达及重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）对人黑素细胞生物学作用的影响。方法 分别用普通的合成培养基与添加一定浓度rhG-CSF的合成培养基培养健康人的黑素细胞,并对黑素细胞的生长情况及形态进行观察。应用流式细胞仪检测人黑素细胞、中性粒细胞及红白血病细胞（HEL 92.1.7）中G-CSFR的表达率。Western印迹、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法分别检测黑素细胞、中性粒细胞及HEL 92.1.7中G-CSFR蛋白及G-CSFR mRNA的表达情况;噻唑蓝比色法（MTT法）检测不同浓度rhG-CSF（200、400、600、800 μg/L）对黑素细胞增殖作用。多巴氧化法检测黑素细胞的酪氨酸酶活性。 结果 黑素细胞G-CSFR的表达率（76.81% ± 10.70%）较HEL92.1.7（2.53% ± 1.54%） 明显升高（P < 0.01）,略低于中性粒细胞（85.76% ± 15.71%,P < 0.05）;黑素细胞可表达G-CSFR蛋白和mRNA,不同浓度rhG-CSF处理组间比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。黑素细胞G-CSFR蛋白和mRNA的表达水平明显高于HEL 92.1.7 （P < 0.01）,低于中性粒细胞（P < 0.05或P < 0.01）。rhG-CSF在200 ～ 800 μg/L时均有促黑素细胞增殖的能力,与空白对照组相比,差异有统计学意义（P < 0.01或P < 0.05）;在200 ～ 600 μg/L范围内呈浓度依赖性（P < 0.01）,600 μg/L时的效应（164.04% ± 13.0%）与20 μg/L的TPA作用（165.62% ± 10.6%）相当（P > 0.05）;200 ～ 800 μg/L的rhG-CSF对黑素细胞酪氨酸酶活性的影响与空白对照组相比差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 人黑素细胞可表达G-CSFR;rhG-CSF具有促进黑素细胞增殖的作用,但对酪氨酸酶活性无影响。     

玻璃酸钠对黑素细胞生物学活性的影响

目的 观察玻璃酸钠对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响。方法 噻唑蓝法和酪氨酸酶活性测定法分别检测不同浓度玻璃酸钠对正常人黑素细胞生长和黑素合成能力的影响。结果 玻璃酸钠质量浓度为0、0.008、0.016、0.313、0.625、1.250、2.500、5.000、7.500、10.000 g/L时,黑素细胞增殖活性（A490）分别为0.14 ± 0.02、0.37 ± 0.08、0.45 ± 0.11、0.49 ± 0.07、0.55 ± 0.12、0.52 ± 0.11、0.49 ± 0.07、0.39 ± 0.05、0.19 ± 0.03、0.01 ± 0.01,玻璃酸钠质量浓度在0. 08 ~ 5 g/L范围内时,对黑素细胞的增殖有明显促进作用,达10 g/L时会抑制黑素细胞的增长。玻璃酸钠质量浓度在0.2 ~ 5 g/L时可明显促进酪氨酸酶活性,到10 g/L时酪氨酸酶活性反而下降。在接种黑素细胞同时加入玻璃酸钠的黑素细胞增殖作用明显快于接种后8 h再加入玻璃酸钠组。结论 玻璃酸钠在浓度0.2 ~ 5 g/L时既能促进黑素细胞的增殖,又能明显提高黑素细胞的酪氨酸酶活性。     

42 ℃热处理在UVB诱导黑素细胞氧化损伤中的作用

【摘要】 目的 探讨热处理在UVB诱导的人黑素细胞氧化应激损伤中的作用。 方法 体外培养原代人表皮黑素细胞,将纯化的MC分为4个处理组：对照组（37 ℃正常培养）、热处理组（42 ℃孵育1 h）、UVB处理组（100 mJ/cm2 UVB照射）、联合处理组（42 ℃孵育1 h后给予100 mJ/cm2 UVB照射）,各组连续处理3 d。MTT法检测细胞活率,生物化学法检测超氧化物歧化酶活力和丙二醛浓度,流式细胞仪检测细胞内活性氧和细胞凋亡率。 结果 对照组细胞活率、细胞凋亡率、超氧化物歧化酶活力、丙二醛浓度、活性氧荧光强度分别为：（100 ± 6.14）%、（4.66 ± 0.58）%、（53.39 ± 8.23） U/gprot、（1.09 ± 0.32） mmol/gprot、1070.85 ± 42.07。UVB照射可以明显提高MC凋亡率［（24.14 ± 2.90）%］、丙二醛［（1.65 ± 0.33） mmol/gprot］和细胞内活性氧（1416.45 ± 79.12）水平,降低细胞活率［（50.23 ± 5.36）%］和超氧化物歧化酶活力［（31.98 ± 11.89） U/gprot］,而热处理可以显著降低UVB诱导的凋亡［（14.9 ± 1.49）%］,降低丙二醛［（1.10 ± 0.26 ） mmol/gprot］、活性氧（1033.30 ± 68.41）的含量,同时恢复细胞的活率［（74.12 ± 6.17）%）］和超氧化物歧化酶活力［（51.63 ± 6.55）U/gprot］。 结论 热处理对UVB诱导的黑素细胞的氧化应激损伤具有保护作用。     

AQP3、Caspase14、博来霉素水解酶对慢性湿疹皮肤屏障的作用研究

目的 探讨水通道蛋白3（aquaporin 3,AQP3）、半胱氨酸蛋白酶14（Caspase 14）、博来霉素水解酶（bleomycin hydrolase,BH）在慢性湿疹患者皮肤屏障中的作用以及窄谱中波紫外线（NB-UVB）治疗慢性湿疹的部分作用机制。方法 多功能皮肤测试仪测定30例慢性湿疹患者皮损及非皮损处皮肤含水量及经皮水分丢失（TEWL）。免疫组化方法检测AQP3、Caspase14、BH在慢性湿疹患者皮损及非皮损处的表达。400、800、1200 mJ/cm2三组不同剂量NB-UVB照射培养的角质形成细胞,免疫印迹方法检测AQP3、Caspase14及BH蛋白表达变化。结果 慢性湿疹患者皮损部位皮肤含水量显著减少,约为11.32 ± 5.25,经皮水分丢失明显增加,约为86.28 ± 16.35,与非皮损处比较,差异有统计学意义（P < 0.05）。慢性湿疹患者皮损处AQP3及Caspase 14表达显著增高,分别为非皮损处的5.3倍及4.2倍。BH表达显著下降,约为非皮损处的1/3。皮损处与非皮损处比较差异有统计学意义（P < 0.05）。400、800、1200 mJ/cm2 NB-UVB照射角质形成细胞后,AOP3及BH蛋白表达均明显下降,分别为对照组的0.48、0.23、0.16;0.82、0.78、0.22。而Caspase 14表达只有在1200 mJ/cm2较高剂量NB-UVB照射后才显著下降,为对照组的0.34。与对照组相比,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论 慢性湿疹患者皮肤屏障功能受损可能与BH表达减少,Caspase 14及AQP3表达增加有关,NB-UVB治疗慢性湿疹的部分作用机制可能与下调AQP3、Caspase14及BH的表达有关。     

窄谱中波紫外线对体外培养人黑素细胞自噬水平的影响

目的 观察窄谱中波紫外线（NB?UVB）照射对黑素细胞自噬水平的影响,探讨NB?UVB治疗白癜风的可能机制。方法 体外培养正常人黑素细胞给予单次0（对照组）、50、100和200 mJ/cm2 NB?UVB照射,照射后24 h收集细胞,单丹酰戊二胺染色法（MDC）检测细胞自噬体变化,免疫印迹法检测自噬信号磷酸化磷酸腺苷蛋白激酶（p?AMPK）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p?mTOR）、微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ（LC3Ⅱ/Ⅰ）及P62表达变化,透射电镜观察自噬体与黑素小体超微结构变化。免疫印迹结果采用单因素方差分析进行比较,黑素小体、自噬体与自噬溶酶体数量采用Kruskal?Wallis H检验进行统计分析。结果 MDC染色显示,对照组、50、100和200 mJ/cm2 NB?UVB组自噬体染色阳性率分别为（21.83 ± 3.50）、（23.66 ± 4.12）、（38.08 ± 4.10）、（40.23 ± 1.45）%,100、200 mJ/cm2组显著高于对照组和50 mJ/cm2 NB?UVB组（均P < 0.05）。免疫印迹法显示,与对照组相比,100、200 mJ/cm2组p?AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ表达均显著上调（均P < 0.05）,而p?mTOR及P62表达均显著下降（均P < 0.05）。透射电镜结果显示,与对照组自噬体与自噬溶酶体数量（1.88 ± 1.18）相比,100、200 mJ/cm2组（5.12 ± 1.13、5.25 ± 1.04）均显著增多（P < 0.05）。50、100、200 mJ/cm2组黑素小体数量（39.12 ± 9.42、57.38 ± 7.11、59.75 ± 15.15）均较对照组（18.50 ± 4.18）显著增多（均P < 0.05）。结论 NB?UVB照射不仅可以促进黑素小体生成,还可以激活黑素细胞的自噬信号通路,促进自噬体及自噬溶酶体的形成,推测其为白癜风的治疗机制之一。     

中波紫外线对体外培养HaCaT细胞MAPK信号通路的影响

目的 探讨中波紫外线照射后不同时间点体外培养的HaCaT细胞MAPK信号通路受调控效应。 方法 1.5、4.5、7.5、10、20、30、50 mJ/cm2中波紫外线照射HaCaT细胞后8 h,对照组细胞除不进行UVB照射外,其他处理同各剂量UVB组,蛋白免疫印迹法测定ERK1/2、JNK和p38蛋白表达及磷酸化水平;50 mJ/cm2中波紫外线照射HaCaT细胞,蛋白免疫印迹法测定照射后2、4、8、12 h 4个时间点,细胞ERK1/2、JNK和p38蛋白表达及磷酸化水平。使用Quantity One软件计算目的条带吸光度,以相应蛋白条带的吸光度值与GAPDH蛋白内参条带吸光度值的比值表示相对蛋白含量。 结果 7.5、10、20、30、50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后8 h,ERK1/2、JNK磷酸化水平明显上调（P < 0.05）,20、30、50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后p38磷酸化水平上调显著（P < 0.05）,且都在50 mJ/cm2照射后效应最为显著（P < 0.05）。50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后8 h,ERK1/2磷酸化产物水平出现上调,在处理后的12 h,与对照组（10.277 ± 0.320）比较,差异有统计学意义（44.844 ± 2.023,P < 0.05）,而p38和JNK磷酸化产物水平在照射后2 h即开始上调（P < 0.05）,4、8、12 h,p38和JNK与对照相比,UVB照射后虽存在着显著地磷酸化水平差异（P < 0.05）,但随时间推移JNK磷酸化产物水平这种上调的趋势逐渐弱化（P < 0.05）。 结论 在50 mJ/cm2中波紫外线照射后的HaCaT细胞中,ERK1/2、p38、JNK这3种MAPK信号通路产生了活化效应,具有一定的时间效应差异。