CD4^＋T细胞识别的肿瘤抗原的研究进展

在以往的肿瘤免疫研究中，人们往往关注肿瘤特异性CD8^ T细胞的抗肿瘤效应，并由此鉴定出许多CD8^ T细胞识别的肿瘤抗原。随着研究的深入，CD4^ T细胞在抗肿瘤免疫中的作用逐渐为人们所关注。联合应用MHCI类和MHCⅡ类限制性抗原的肿瘤疫苗将有可能取得更好的抗肿瘤效果。本文就近年来鉴定的CD4^ T细胞识别的肿瘤特异性抗原进行了综述。     

CD4~+T细胞识别的肿瘤抗原的研究进展

在以往的肿瘤免疫研究中 ,人们往往关注肿瘤特异性CD8+ T细胞的抗肿瘤效应 ,并由此鉴定出许多CD8+ T细胞识别的肿瘤抗原。随着研究的深入 ,CD4 + T细胞在抗肿瘤免疫中的作用逐渐为人们所关注。联合应用MHCⅠ类和MHCⅡ类限制性抗原的肿瘤疫苗将有可能取得更好的抗肿瘤效果。本文就近年来鉴定的CD4 + T细胞识别的肿瘤特异性抗原进行了综述。     

032 CD4+T细胞识别的肿瘤抗原的研究进展

在以往的肿瘤免疫研究中，人们往往关注肿瘤特异性CD8+T细胞的抗肿瘤效应，并由此鉴定出许多CD8+T细胞识别的肿瘤抗原。随着研究的深入，CD4+T细胞在抗肿瘤免疫中的作用逐渐为人们所关注。联合应用MHCⅠ类和MHCⅡ类限制性抗原的肿瘤疫苗将有可能取得更好的抗肿瘤效果。本文就近年来鉴定的CD4+T细胞识别的肿瘤特异性抗原进行了综述。     

表达前列腺特异性膜抗原的DNA疫苗对肿瘤细胞的抑制作用

目的构建表达前列腺特异性膜抗原（PSMA）的DNA疫苗，观察其在体外对肿瘤细胞的免疫攻击和在体内对肿瘤细胞攻击的免疫保护作用。方法通过稳定转染构建表达PSMA的小鼠黑色素瘤细胞系B16-PSMA，将DNA疫苗pCDNA3．1-PSMA通过肌肉注射导入C57BL／6小鼠体内，分离小鼠脾细胞，检测细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes，CTL）反应。以B16-PSMA细胞攻击免骺小鼠，观察免疫动物的无瘤生存期和肿瘤体积增长情况，评价DNA疫苗的抗肿瘤作用。结果DNA疫苗可诱导小鼠脾淋巴细胞CTL活性，经过免疫后的小鼠成瘤率降低，无瘤生存期延长，肿瘤生长缓慢，肿瘤组织内有较多淋巴细胞浸润，表明产生较强的抗肿瘤反应。结论表达PSMA的DNA疫苗能够诱导小鼠产生特异性免疫反应，对表达PSMA的肿瘤细胞的攻击产生免疫保护作用，为前列腺癌的预防和免疫治疗提供了新的思路。     

腺病毒介导的B7—1基因转移对小鼠肝癌成瘤性的影响

腺病毒介导的Ｂ７－１基因转移对小鼠肝癌成瘤性的影响黄洪莲王小宁钱其军沈峰谢天培施乐华陈汉吴孟超郭亚军肿瘤免疫基因治疗的主要目的之一是诱导具有杀伤活性的肿瘤特异性Ｔ淋巴细胞，增强其抗肿瘤排斥反应。许多肿瘤都存在肿瘤抗原或肿瘤相关抗原，但缺乏Ｔ细胞激活所...     

pMAGE-A1／EGFP转染的人树突状细胞体外诱导特异性抗肿瘤免疫效应的研究

树突状细胞（DC）是目前已知功能最强的抗原提呈细胞，被广泛应用于研制各种肿瘤疫苗。肿瘤特异性抗原MAGE-A1在不同来源肿瘤组织中有较高表达幢’，因而在肿瘤免疫治疗中一直备受重视。本实验中我们构建了重组真核表达载体pMAGE-A1／EGFP，体外电转染人人外周血单核细胞来源DC，并评价其体外诱导特异性抗肿瘤免疫的能力，以期为临床开展MAGE-A1为基础的免疫治疗提供有利的分子生物学工具。     

次要组织相容性抗原

次要组织相容性抗原是一组由ＭＨＣ限制、Ｔ＝细胞特异性识别的细胞膜表面同种抗原。它们参与免疫应答，并且在骨髓移植中，与移植物被排斥及移植物抗宿主病有密切的关系。同时，在移植物抗白血病移植物抗肿瘤（ＧＶＴ）效应中发挥重要作用。深入研究ＭｉＨＡｓ，对ＢＭＴ中供受体间的组织配型有重要意义，对防治肿瘤有发生，发展也起到一定的作用。     

新生抗原肿瘤治疗性疫苗进展评述

肿瘤新生抗原是指由肿瘤细胞的基因组突变产生的新生表位免疫原,是一类肿瘤特异性抗原。肿瘤新生抗原比肿瘤相关抗原免疫原性高,没有产生自身免疫应答的风险,是一类极具吸引力的肿瘤治疗性疫苗的抗原。随着新一代测序技术的发展,基于新生抗原的肿瘤治疗性疫苗在过去5年中获得了突破性的进展,呈现出极好的临床前景。本文首先简述新生抗原的免疫学特点,然后展示了新生抗原特异性T细胞应答是抗肿瘤的核心驱动力的证据,最后介绍了新生抗原疫苗的临床前景和临床研究的最新进展,并提出了该领域目前存在的问题和挑战。     

次要组织相容性抗原

次要组织相容性抗原是一组由ＭＨＣ限制、Ｔ细胞特异性识别的细胞膜表面同种抗原。它们参与免疫应答,并且在骨髓移植中,与移植物被排斥及移植物抗宿主病有密切的关系。同时,在移植物抗白血病及移植物抗肿瘤（ＧＶＴ）效应中发挥重要作用。深入研究ＭｉＨＡｓ,对ＢＭＴ中供受体间的组织配型有重要意义,对防治肿瘤的发生、发展也起到一定的作用。     

对携带HCC表位的HBc病毒样颗粒负载的DC疫苗的免疫评价

目的:探讨携带肝细胞癌(HCC)表位的嵌合蛋白颗粒HBc-VLPs负载小鼠BMDCs制备的DC疫苗,免疫小鼠后诱导抗原特异的细胞免疫应答和抗肿瘤效应。方法:制备HLA-A2转基因小鼠来源的BMDCs,将三种带有高表达于HCC的HLA-A2限制的CTL表位的HBc-VLPs、三种抗原表位肽和不含HCC表位野生HBc-VLPs分别负载HLA-A2转基因小鼠BMDCs制备成DC疫苗,阴性对照组用PBS替代。将HLA-A2转基因小鼠分为四组,分别免疫上述DC疫苗并对其免疫效果进行评价:体外检测抗原特异性淋巴细胞内IFN-γ的产生和CTL细胞活性并观察不同方法处理的DCs对肿瘤生长的抑制情况。结果:与其他组相比,HBc-VLPs负载的DCs免疫小鼠后第8天,流式细胞仪即可检测到分泌IFN-γ的CD8+T细胞存在;用LDH法检测到较强的抗原特异性CTL活性;在肿瘤接种后的20天之前均未见到明显的肿瘤块,具有显著抗肿瘤作用。结论:利用携带HCC抗原表位的HBc-VLPs负载DCs后得到可强烈诱导免疫活性和明显抗肿瘤作用的DC疫苗,为DC疫苗的优化和评价提供了实验方法,也为进一步深入研究新型肝细胞癌治疗性疫苗的功能和应用奠定了基础。     

肺癌树突状融合细胞的制备及其生物学特征

目的 探讨利用杂交瘤技术制备肿瘤疫苗的方法,研究肺癌树突状融合细胞的生物学特征。方法 用ＰＥＧ法将ＨＧＰＲＴ缺陷型Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞株ＡＬ９９０１与小鼠骨髓诱生的树突状细胞进行融合,ＨＡＴ筛选融合克隆;Ｓ－Ｐ免疫细胞化学法鉴定融合细胞表型;对融合细胞进行生曲线、克隆形成和体内成瘤等鉴定。结果 树突状细胞与ＡＬ９９０１及６：１比例融合,融合率约为３０％。融合细胞ＦＬＤ－Ａ１１可在体外传代培养,表型为ＣＤ８０＾＋、ＣＤ４０＾＋、Ｈ－２Ｋ＾ｂ＋、ＭＩＤＣ＾＋和肺癌抗原阳性。ＦＬＤ－Ａ１１不能在软琼脂培养基中形成克隆,动物体内不能形成肿瘤。结论 利用杂交瘤技术制备的ＦＬＤ－Ａ１１细胞,具备了在体内激活抗特异性地抗肿瘤细胞免疫功能的分子表型;该细胞不存在体内成瘤的危险。本研究为ＦＬＤ－Ａ１１作为肿瘤疫苗,用于特异性抗肿瘤     

双价痢疾候选疫苗诱导小鼠产生粘膜免疫应答机制的初步研究

目的探讨痢疾疫苗诱导粘膜产生免疫应答的调节机制，为研制安全有效的痢疾疫苗提供免疫学的理论依据。方法以本室构建的两株福氏２ａ、宋内氏双价痢疾候选疫苗ＦＳ－２１１７与ＦＳ－５４１６经不同途径免疫小鼠，分离小鼠ＰＰ结（Ｐｅｙｅｒｓｐａｔｃｈｅｓ）与脾脏中的ＣＤ４＋Ｔ细胞并以ＭＴＴ法检测其对疫苗不同抗原成分的增殖反应。结果（１）口服痢疾疫苗可诱导ＰＰ结中的ＣＤ４＋Ｔ细胞产生显著的增殖反应，而未对脾脏中的ＣＤ４＋Ｔ细胞产生刺激作用；（２）皮下注射痢疾疫苗能使小鼠脾脏中的ＣＤ４＋Ｔ细胞产生显著的增殖反应，但未见ＰＰ结中的ＣＤ４＋Ｔ细胞产生明显的免疫应答；（３）痢疾疫苗可能有多种抗原成分参与了刺激肠粘膜ＰＰ结中ＣＤ４＋Ｔ细胞的增殖反应。结论口服痢疾候选疫苗可有效地诱导肠道粘膜产生免疫应答；免疫应答的产生可能依赖多种抗原成分的共同作用。ＰＰ结中ＣＤ４＋Ｔ细胞的特异性活化可能是诱导肠道粘膜免疫应答最重要的早期事件。     

热休克蛋白—多肽复合物诱导肿瘤特异性免疫的机理

近年研究发现，肿瘤组织的热休克蛋白－多肽复合物具有肿瘤疫苗的免疫作用，可诱导动物产生特异性的抗肿瘤免疫应答。在诱导免疫应答中，巨噬细胞和Ｂ细胞作为抗原提呈细胞而发挥作用。肿瘤细胞表面的热休克蛋白－多肽复合物也可直接激活γδ＾＋Ｔ细胞和ＮＫ细胞。     

热休克蛋白-多肽复合物诱导肿瘤特异性免疫的机理

近年研究发现，肿瘤组织的热休克蛋白－多肽复合物具有肿瘤疫苗的免疫作用，可诱导动物产生特异性的抗肿瘤免疫应答。在诱导免疫应答中，巨噬细胞和Ｂ细胞作为抗原提呈细胞而发挥作用。肿瘤细胞表面的热休克蛋白－多肽复合物也可直接激活γδ＋Ｔ细胞和ＮＫ细胞     

肿瘤疫苗的研究进展

肿瘤疫苗是用肿瘤细胞、肿瘤细胞裂解物或肿瘤抗原激活机体免疫系统产生特异性抗肿瘤细胞免疫效应.它是一种治疗性的、新型的肿瘤治疗方法,也是一种主动性免疫疗法.随着肿瘤免疫学和分子生物学的发展,肿瘤与机体之间的相互作用、肿瘤免疫耐受以及肿瘤抗原鉴定都取得了很大的进展,这也促进了肿瘤疫苗的发展.     

表达HPV16 L1、L2和E7蛋白的非复制重组痘苗病毒诱发的抗肿瘤免疫反应

目的:评价表达HPV16 L1、L2E7的非复制重组痘苗病毒疫苗的抗肿瘤免疫反应.方法:采用肿瘤预防、肿瘤治疗和肿瘤切除等方法,观察疫苗NTVJL1/L2E7的抗肿瘤效果,用酶联免疫斑点(ELISPOT)和CTL检测该疫苗在小鼠体内诱发的细胞免疫应答.结果:在肿瘤预防和肿瘤治疗试验中,疫苗可以分别使60%和50%的小鼠免受HPV16阳性的治疗细胞攻击,肿瘤切除试验中,疫苗可以使70%的小鼠免于肿瘤复发,与对照组之间的差异具有显著性.ELISPOT和CTL均检测出强的特异性细胞免疫水平.结论:NTVJL1/L2E7能够在小鼠体内诱发出理想的抗肿瘤免疫反应,可以作为防治宫颈癌的候选疫苗.     

肿瘤抗原鉴定研究进展

肿瘤抗原的鉴定是设计肿瘤疫苗用于肿瘤免疫治疗的前提。随着对机体抗肿瘤免疫机制的深入了解,发现CD8+、CD4+T细胞识别肿瘤抗原具有MHC分子约束性,CD8+、CD4+T细胞协同作用以清除肿瘤细胞。本文就CD8+、CD4+T细胞识别的肿瘤抗原鉴定方法以及肿瘤抗原特性作一综述。     

MHC I类分子及与之结合的抗原肽

细胞内生性抗原需降解成抗原肽，由ＭＨＣ Ｉ类分子呈递给ＣＤ８＾＋细胞识别，从而诱导特异性细胞免疫应答。ＭＨＣ Ｉ类分子与抗原肽之间的结合表现出ＭＨＣ等位基因特异性，根据此特点可以预测抗原的Ｔ细胞识别表位，对于阐明自身免疫病和器官移植排斥反应的机理，指导人工合成肽疫苗用于病毒感染及肿瘤的免疫防治均具有重要意义。     

弱酸洗脱提取的肿瘤抗原肽致敏的树突状细胞对CTL的体内外激活效应

弱酸洗脱提取小鼠红白血病细胞膜表面肿瘤抗原肽,用于致敏树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉ ｃｅｌｌｓ,ＤＣ）观察其对细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）的体内外激活效应。方法以ＰＨ３．３的枸橼酸－磷酸盐缓冲液室温下处理ＦＢＬ－３小鼠红白血病细胞５ｍｉｎ,流式细胞术检测洗脱效率,弱酸洗脱的抗原肽经ＳｅｐＰａｋＣ１８柱提取纯化,用于致敏ＤＣ,检测其体外刺激ＣＴＬ细胞株增殖的能力及体内激发特异性抗肿瘤免疫应答的能力。     

热休克蛋白gp96与肿瘤免疫研究进展

热休克蛋白gp96作为分子伴侣参与了肿瘤抗原向MHC-I类分子途径的递呈过程,并与抗原肽形成gp96-肽复合物激活CD8 ^＋T淋巴细胞,产生抗肿瘤的特异性免疫反应.此外,还能不依赖于抗原肽通过激活NF-κB信号转导,产生细胞因子和趋化因子,诱导树突状细胞成熟等多种作用而调节非特异性免疫反应.gp96-肽复合物疫苗为肿瘤的免疫治疗提供了新的思路.