痘苗病毒天坛株基因组病毒生长因子基因结构的研究

克隆了位于我国痘苗病毒天坛株基因组左端的病毒生长因子（ＶＧＦ）基因并对其编码多肽的结构特点进行了分析。结果表明，由天坛株ＶＧＦ基因所推导的氨基酸序列具有典型的上皮生长因子（ＥＧＦ）超家族成员的特征序列和结构特点，在核苷酸及氨基酸水平上天坛株ＶＧＦ与其他正痘病毒ＶＧＦ的同源性在８５％～９５％之间，氨基酸残基的缺失和插入等变异主要集中出现在多肽的信号肽和穿膜区，推测对功能的影响不大。此外，我们发现由天坛株基因组右末端的开放读码框架（ＯＲＦ）ＴＢ２２Ｌ推导的氨基酸序列与天坛株ＶＧＦ多肽第６７位至１４０位完全相同，提示ＯＲＦＴＢ２２Ｌ可能是天坛株基因组第二个ＶＧＦ基因的变异产物。     

脊髓灰质炎病毒受体的结构和功能

脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)是脊髓灰质炎的致病因子。与宿主细胞上特异性的脊灰病毒受体(poliovirus receptor,PVR)结合,是PV感染和致病的第一步。因此,PVR在PV感染的早期起着非常重要的作用。近几年,已克隆出PVR cDNA,并对PVR的结构和功能进行了很多研究。本文对这方面的进展,进行综述。     

中国呼吸道合胞病毒地方株G蛋白在重组痘苗病毒中的表达

目的　构建表达中国呼吸道合胞病毒 (RSV)地方株G蛋白基因的重组痘苗病毒 ,以用于RSV感染防治的研究。方法　用基因克隆技术将中国RSV地方株G蛋白基因插入到痘苗病毒载体中 ,与痘苗病毒共感染获得重组病毒。用免疫印迹、ELISA、蚀斑减少试验等方法检测表达产物的免疫原性及生物活性。结果　RSV地方株G蛋白在痘苗病毒中获得较好的表达 ,表达产物的糖基化程度较高 ,且该重组病毒免疫家兔可诱发特异性抗体产生。蚀斑减少试验证明 ,用该表达产物制备的抗血清具有中和病毒的活性。结论　重组病毒表达的中国RSV地方株G蛋白具有较好的抗原性、免疫原性等生物活性     

临床诊断为乙型脑炎等病人血清的Colti病毒抗体检测

对河南，南方，福建等地临床诊断为乙型脑炎等病人的血清１５９人份，采用酶联免疫吸附试验和反向被动血凝抑制试验，分别检查Ｃｏｌｔｉ病毒和乙型脑炎病毒抗体。８９例对血清经ＥＬＩＳＡ检查发现，７例恢复期血清较急性期血清Ｃｏｌｔｉ病毒抗体有４倍或４倍以上升高。     

TTV相关病毒的发现

近年来发现一些ＴＴＶ相关病毒 ,如ＴＴＶ样微小病毒 (ＴＬＭＶ)、ＰＭ病毒 (ＰＭＶ)、ＳＡＮＢＡＮ病毒 (ＳＡＮ ＢＡＮ)、ＹＯＮＢＡＮ病毒 (ＹＯＮＢＡＮ)和ＳＥＮ病毒 (ＳＥＮＶ)等 ,并对其致病性进行了一些研究。一、ＳＡＮＢＡＮ病毒ＳＡＮＢＡＮ(日文意“第三”)病毒是从日本一名健康供血员血清中分离的 ,该供血员用原型ＴＴＶＰＣＲ检测为ＴＴＶＤＮＡ阴性 ,但用测定ＴＴＶＤＮＡ覆盖面更广的ＰＣＲ检测为阳性。Ｈｉｊｉｋａｔａ等〔1〕 对该株病毒的全序列分析表明 ,其基因组全长为 380 8个核苷酸 ,较ＴＴＶ原型株ＴＡ2 78(385 2ｂ…     

RNA病毒不依赖免疫选择的抗原变异

从ＲＮＡ准病毒结构的角度，通过对野毒株的研究和细胞培养传代病毒群落的分析，证实抗原变异不一定是免疫选择的结果，氨基酸序列的变异在促进抗原变异上有重要作用。     

人巨细胞病毒基因活性与受染细胞病变的相关性研究

目的： 探讨人巨细胞病毒（HCMV）感染后病毒基因表达活性与细胞病变的关系。方法: 不同滴度HCMV感染传代培养的人胚肺成纤维细胞，以3个浓度接种HCMV AD169毒株稀释液：10^-5(A组)、10^-3(B组)、10^-1(C组)，建立HCMV梯度感染细胞模型，分别应用FQ-PCR法测定感染细胞内HCMV基因拷贝数、RT-PCR法测定MCP mRNA转录水平，同时光镜观察致细胞病变作用（CPE）、电镜检查细胞超微结构改变。结果: HCMV感染后，HCMV DNA在病毒滴度最低的A组细胞内负荷量最低（P<0.05，P<0.01），复制速度也最慢；仅在病毒滴度较高的B、C组内检出MCP mRNA，水平持续升高。A组未发现细胞病变，B、C组细胞检测到随感染时间延长而加重的CPE及超微结构改变。结论: HCMV感染细胞内病毒基因高负荷及MCP mRNA转录与细胞病变进展密切相关。     

病毒受体：结合和粘附增强及病毒结构的变化

本文阐述了病毒受体的多样性，以及病毒受体结合过程包括初步结合、粘附增强和病毒结构变化等多个步骤。     

痘苗病毒的结构特点及应用

过去，痘苗病毒一直被用作预防天花的疫苗，随着分子生物学的发展，人们又发现了它的新价值－基因工程有利载体，近几年，国外许多学者对痘苗病毒的结构特点和应用进行了研究，本文就此作一综述。     

以原核细胞表达的人PrP蛋白为抗原制备抗人朊蛋？…

目的 制备针对朊蛋白的特异性抗体。方法 以初步纯化的原核细胞表达的ＧＳＴ－ＰｒＰ融合蛋白免疫家兔,制备朊蛋白特异的抗体。结果 以ＧＳＴ－ＰｒＰ－ｓ为抗原,用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测免疫家兔血清中的朊病毒抗体效价最高可达至１２８０００。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｏｌｔ检测显示所制备的抗体不仅可以与体外表达的全长及不同Ｃ－末端缺失的人朊蛋白反应,而且能够识别人,鼠脑组织中内源性朊蛋白。结论 利用ＧＳ     

儿童呼吸道感染临床病毒学研究

目的了解广州地区呼吸道病毒感染情况.方法采用咽拭子和部分血清进行病毒分离、红细胞凝集试验、红细胞凝集抑制试验和免疫酶标固相吸附试验进行研究.结果 4298例咽拭子中分出流感病毒200例,其中上呼吸道流感病毒172例阳性,占流感病毒阳性率的86.0%;分出呼吸道合胞病毒150例,下呼吸道合胞病毒139阳性,占呼吸道合胞病毒阳性率92.7%;及分出单疱病毒20例;单疱病毒阳性率0.5%.460例肺炎和支炎血清检测巨细胞病毒IgM 82例阳性,CMV-IgM阳性率17.7%.结论流感病毒为上呼吸道感染的主要病原,呼吸道合胞病毒、巨细胞病毒是下呼吸道感染的主要病原.流感病毒流行有2个高峰(每年3～4月及7～8月份).单疱病毒在上下呼吸道感染中为散发病例.     

甲型流感病毒NSl蛋白功能研究进展

流感病毒NSl蛋白的功能研究是一个逐渐深入的过程。以前的研究着重于它对宿主细胞蛋白合成的抑制作用方面考虑。随着研究的深入，发现流感病毒的NSl蛋白与流感病毒所诱导的细胞凋亡之间存在一定的联系。目前的研究认为，流感病毒的NSl蛋白能够抑制病毒感染细胞干扰素的产生，在流感病毒拮抗干扰素的抗病毒效应中发挥起了重要的作用，并且这种干扰素拮抗作用可能与流感病毒的毒力有关。     

云南省澜沧江下游地区虫媒病毒的调查研究

目的 了解云南澜沧江下游地区自然界虫媒病毒流行情况。方法 从云南澜沧江下游地区(澜沧县和思茅市)所属乡村采集蚊虫,分类后保存于液氮。经消毒、研磨、离心等处理后接种组织培养细胞分离病毒,并进行初步鉴定。结果从233份标本中,分离到22株致C6/36细胞病变的病毒,表现为细胞圆化、聚集、脱落。分离阳性率为9.4％(22/233)。经鉴定10株对乙醚和5’-磺脱氧尿苷抵抗,为无包膜双链RNA病毒,核酸电泳为12节段RNA病毒。9株对乙醚敏感,对5’-碘脱氧尿苷抵抗,为有膜RNA病毒,核酸电泳为10条带。Colti病毒95-75单克隆抗体与新分离的12节段RNA病毒的酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验呈阳性反应,而与10节段病毒呈阴性反应。3株病毒为对乙醚敏感,其中1株被乙型脑炎病毒A2株免疫腹水中和,并与A2免疫腹水荧光试验呈阳性反应;1株(云南92-4)与布尼亚病毒组特异免疫腹水的荧光试验和ELISA试验均为强阳性,而与甲病毒组特异性免疫腹水及黄病毒组的乙型脑炎病毒免疫腹水均呈阴性反应;经负染在电镜下观察毒粒呈圆形,直径约为(87.00±0.05)nm。外层可见表面突起。结论 从云南澜沧江下游地区采集的蚊标本分离到10株Colti病毒,9株环状病毒,1株为乙脑病毒,1株为布尼亚病毒,1株尚在研究中。     

登革2型43株病毒包膜蛋白E基因的聚合酶链反应扩增

以我国登革２型４３株病毒ＲＮＡ为模板，采用逆转录－聚合酶链反应技术（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增Ｅ基因片段。拟扩增的Ｅ基因片段始于登革病毒编码序列５＇端的１０３６ｂｐ，止于３＇端的２３０４ｂｐ，其间含有１个ＨｉｎｄⅢ酶切位点，３＇端有１个ＳｍａⅠ位点，５＇端有１个ＥｃｏＲⅠ位点。建立了扩增大片段的实验条件并制备出了大于１２００ｂｐ以上的片段。该片段与标准分子量对比为１２９２ｂｐ左右，经ＨｉｎｄⅢ酶切，出现７８１ｂｐ和５１１ｂｐ２个片段，用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和光敏生物素标记核酸探针证实制备出的１２９２ｂｐ片段为Ｅ基因片段，此片段可直接用于克隆表达。     

乳头瘤病毒病毒样颗粒的研究进展

乳头瘤病毒病毒样颗粒（VLP）主要依壳蛋白L1体外表达后处我组装成结构和功能类似天然病毒的颗粒,在HPV诊断,防治等方面有重要作用。本文就HPV VLP的制备、结构,病毒组装机理,病毒与细胞相互作用以及VLP在血清学检测中的应用等方面作一综述。     

Epstein—Barr病毒膜抗原在昆虫细胞sf9中的表达,纯 …

将Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒膜抗原基因（ＥＢＶ－ＭＡ）称ＭＡ１和截去穿膜区的ＭＡ基因称ＭＡ２分别插入杆状病毒表达载体ｐＶＬ－９４１。将两种重组质粒分别与杆状病毒ＤＮＡ共转染ｓｆ９细胞后获得Ｂａｃｕｌｏ－ＭＡ１和Ｂａｃｕｌｏ－ＭＡ２两种重组病毒，表达产物分别位于重组病毒感染的细胞表面或释放到细胞培养液中。免疫荧光方法检查，在感染的细胞表面表达产物与抗ＭＡ的单克隆抗体特异性地结合，ＳＤＳ－Ｐ     

阿瓦朗病毒和休斯病毒实时荧光RT-PCR检测方法研究

目的建立可以检测阿瓦朗病毒(Avalon virus,AVAV)和休斯病毒(Hughes virus,HUGV)两种内罗病毒的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并进行初步的评价。方法收集、整理、比对、分析在公共数据库发布的两种病毒基因组核苷酸序列,确定检测靶标,设计特异性引物、探针,优化检测程序,建立实时荧光定量RT-PCR检测方法。利用体外转录技术制备的模拟样本、其他病毒感染标本、病毒株和正常人血标本比较评价所建方法的检测限、特异性、重复性特征。结果所建实时荧光定量RT-PCR检测方法可有效扩增检测AVAV和HUGA靶标RNA,检测限分别约为20拷贝/μl和70拷贝/μl,检测科萨努尔森林病毒、乙型流感病毒BV和BY型、甲型流感病毒H3N2、黄热病毒、乙型脑炎病毒、克里米亚-刚果出血热病毒、发热伴血小板减少综合征、内罗毕羊病毒和塔西那病毒样本无非特异性扩增,两种内罗病毒相互间无交叉反应,重复性比较分析显示变异系数小于2%。结论本研究建立的检测AVAV和HUGV的实时荧光定量RT-PCR方法,可用于临床样本检测和媒介生物、宿主动物标本筛查,便于病原的快速识别和疾病诊断。