HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流治疗慢性肝病重度黄疸适用范围

目的进一步评价HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流在治疗慢性肝病重度黄疸中的价值及最佳适用范围。方法选择2006年10月～2010年7月天津市第三中心医院94例不同病因慢性肝病重度黄疸患者,其中男性68例,女性26例;年龄29～76岁,中位年龄57岁。接受HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流治疗,比较单次HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流治疗前后血清胆红素变化;并探讨不同初始胆红素水平及初始凝血酶原活动度(PTA)水平对HB-H-6树脂吸附胆红素能力的影响。结果单次HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流治疗前血清总胆红素(TBiL)、直接胆红素(DBiL)、间接胆红素(IBiL)分别为(387.80±183.08)、(238.66±103.52)、(127.23±62.00)μmol/L;治疗后分别为(291.80±135.58)、(183.10±76.29)、(92.85±54.25)μmol/L,血浆灌流治疗能显著降低治疗后血清TBiL、DBiL及IBiL的水平(P<0.01);单次HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流治疗对TBiL、DBiL及IBiL的清除率分别为23.68%±9.14%、21.54%±9.90%及27.09%±16.84%,HB-H-6树脂对IBiL的吸附能力略强于TBiL及DBiL(P<0.01)。HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流对不同层次的初始TBiL水平均有效,均能引起治疗后胆红素水平的显著降低(P<0.01);初始TBiL水平越高,HB-H-6树脂清除胆红素的绝对值越高(P<0.01);对初始TBiL水平在200μmol/L以上HB-H-6树脂吸附能力明显高于初始TBiL水平在200μmol/L以下时(P<0.01)。HB-H-6树脂吸附胆红素的能力不受初始PTA影响;无明显不良反应。结论 HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流作为黄疸的人工肝治疗方法之一,安全有效,且适用于TBiL浓度200μmol/L以上的重度黄疸患者。     

不同血液净化方式对CRF患者血清PTH、leptin和Hcy水平的影响

目的：探讨不同净化方式对慢性肾衰（CRF）患者血清甲状旁腺素（PTH）、瘦素（leptin）和同型半胱氨酸（Hcy）水平的影响。方法：选择维持性血液透析患者60例,随机分成2组：血液透析（HD）组30例,血液透析滤过（HDF）组30例。检测治疗前后血清PTH、leptin和Hcy水平。结果：维持性血液透析患者HDF组治疗后血清PTH从（60.8±32.5）pmol/L降至（28.2±17.2）pmol/L,治疗前后比较有显著性差异（P〈0.01）;leptin从（19.7±11.8）μg/L降至（14.1±10.6）μg/L,治疗前后比较有显著性差异（P〈0.05）;Hcy从（32.3±10.7）μmol/L降至（21.1±8.9）μmol/L,治疗前后比较有显著性差异（P〈0.01）。HD组治疗后血清PTH从（61.6±30.8）pmol/L降至（42.2±16.5）pmol/L,治疗前后比较有显著性差异（P〈0.05）;leptin从（19.3±12.1）μg/L降至（18.9±12.3）μg/L治疗前后比较无显著性差异（P〉0.05）;Hcy从（31.5±10.5）μmol/L降至（20.4±8.5）μmol/L,治疗前后比较有显著性差异（P〈0.01）。结论：HDF组与HD组相比较能更好地清除PTH及leptin。     

手机APP在新生儿高胆红素血症早期筛查中应用研究

目的 研究应用智能手机APP软件对新生儿的额头、胸部进行拍照后计算新生儿胆红素(automated image-based bilirubin,AIB)值,为建立适合于农村地区的简便、易行的新生儿高胆红素血症早期筛查机制提供科学依据.方法 选择2019年6月至2020年12月在我院出生的新生儿科住院疑似新生儿高胆红素血症患儿500例,平均出生胎龄37周+3 d,平均体重2.7±0.7 kg,出生日龄8±4 d,男263例、女237例.同时测定其血浆总胆红素值(serum total bilirubin,TSB)、经皮测定胆红素(transcutaneous bilirubinometry,TcB)及AIB值.AIB值由苹果11手机拍照后所得(部分为对照采用华为Mate 20).结果 数据均显示AIB与血浆TSB差异无统计学意义(P=0.10);AIB与TcB差异无统计学意义(P=0.15);TSB与TcB差异无统计学意义(P=0.11);不同品牌手机[苹果11(205±38μmol/L)、华为Mate 20(200±41μmol/L),t=1.70,P=0.14]、不同检测部位[额头(211±48μmol/L)、胸部(201±52μmol/L),t=1.73,P=0.12]等亚组AIB结果 差异无统计学意义.结论 智能手机APP软件对新生儿的额头、胸部进行拍照后计算新生儿胆红素(automated image-based bilirubin,AIB)值能满足患儿家长监测黄疸的需求,为新生儿高胆红素血症随访监测提供了一项方便可靠的新方法.     

应用MARS人工肝治疗急慢性重型肝炎临床研究

探讨分子吸附再循环系统(MARS)人工肝支持系统治疗重型肝炎的疗效和安全性。方法7例重型肝炎患者在内科综合治疗同时,加用MARS人工肝治疗。MARS人工肝治疗每次持续6～8h。结果7例重型肝炎患者在MARS治疗后,血总胆红素和总胆酸分别由(410.90±256.99)μmol/L和(107.37±69.78)μmol/L降至(310.60±88.97)μmol/L和(60.96±36.27)μmol/L(P<0.001);肌苷和尿素分别由(234.43±90.83)mmol/L和(12.64±5.29)mmol/L降至(93.29±45.27)mmol/L和(6.59±3.73mmol/L(P<0.05);凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血酶时间(APTT)分别由(26.81±)13.01s)和(57.54±18.44)s缩短至(17.98±4.52)s和(40.57±11.14)s(P<0.05MARS治疗前后患者血K 、Na 、白细胞和);血小板无显著改变(P>0.05);在MARS治疗期间患者血压、脉搏稳定。4例合并肝肾综合征(HRS)患者中,2例经MARS治疗病情好转,肾功能改善。结论MARS人工肝支持系统是治疗重型肝炎及合并HRS有效和安全的方法。     

人工肝技术治疗前后慢性重症乙肝患者血清IL-18、总胆红素的变化及其临床意义

目的:检测人工肝治疗前、后,重症乙型肝炎患者血清IL-18、总胆红素、γ-球蛋白(γG)水平的变化,分析人工肝技术清除病理性有害物质的功能。方法:34例慢性重症乙型肝炎患者分为两组,18例为人工肝治疗组,进行人工肝 内科综合治疗;16例为对照组,只进行内科综合治疗,血清IL-18、总胆红素及γG的水平,分别采用ELISA法、Beck-manCX4生化仪及Sebia电泳仪进行检测。结果:人工肝治疗组治疗前、后,血清IL-18的含量分别为(499.11±230.24)ng/L和(313.78±83.28)ng/L,差异显著(P<0.05);对照组治疗前、后血清IL-18的含量分别为(477.89±163.79)ng/L和(373.73±148.41)ng/L,差异无统计学意义(P>0.05)。人工肝治疗组治疗前、后,血清总胆红素含量的均值分别为(555.01±17.81)μmol/L和(305.92±62.19)μmol/L;差异显著(P<0.05)。血清γG均值分别为(23.8±12.41)g/L和(22.47±2.28)g/L,无统计学意义(P>0.05)。对照组治疗前、后血清总胆红素含量的均值分别为(543.12±21.77)μmol/L和(513.55±15.58)μmol/L;血清γG均值分别为(21.66±13.48)g/L和(21.96±5.88)g/L,均无统计学意义(P>0.05)。结论:人工肝技术可有效地清除重肝乙肝患者体内IL-18、总胆红素等病理性物质,提高患者的存活率,为肝移植的治疗争取了时间。     

MELD评分对HBeAg阴性慢加急性肝衰竭患者恩替卡韦治疗时机的意义探讨

目的 探索不同MELD评分范围的HBeAg阴性慢加急性肝衰竭患者在内科综合治疗基础上加用恩替卡韦抗HBV治疗的时机和疗效.方法 观察并比较101例三种MELD评分范围HBeAg阴性慢加急性肝衰竭加用恩替卡韦（博路定）抗HBV开始治疗时、恢复期或临终前的MELD评分,HBV DNA载量和死亡率.结果 MELD高评分组（≥30分）20例,用药疗程（14.6±14.1）d,治疗前后MELD评分分别（36.03 ±5.01）分和（39.86±5.95）分,差异有统计学意义（t=-2.994,P =0.007）;治疗前后HBV DNA载量分别为（4.454±1.714）和（3.979±1.947）拷贝log10/ml,差异无统计学意义（t =2.212,P=0.051）,死亡率为100％（20/20）.MELD中评分组（22～30分）47例,用药疗程（51.5±41.6）d,治疗前后MELD评分分别为（25.71 ±2.47）分和（26.18±13.32）分,差异无统计学意义（t=-0.263,P=0.794）;治疗前后HBV DNA载量分别为（6.084±1.795）和（3.378±2.156）拷贝log10/ml,差异有统计学意义（t=7.148,P=0.000）,死亡率53.19％ （25/47）.MELD低评分组（≤22分）34例,用药疗程（67.2±40.9）d,治疗前后MELD评分为（18.85±2.72）分和（11.68±7.23）分,差异有统计学意义（t=5.983,p=0.000）;治疗前后HBV DNA载量分别为（5.945±1.635）和（2.725 ±1.194）拷贝log10/ml,差异有统计学意义（t=9.962,P=0.000）,死亡率2.94％（1/34）.结论 HBeAg阴性慢加急性肝衰竭,在内科综合治疗的基础上加用恩替卡韦进行抗病毒治疗,当MELD评分≤22分时,患者基本可存活;当MEID评分在22～30时,死亡率为53.19％ （25/47）;当MELD评分≥30分时,几乎错过治疗时机,最终出现致死性肝衰竭,应考虑肝移植治疗.     

血清神经元特异性烯醇化酶及S100B蛋白在新生儿胆红素脑损伤的变化及意义

目的通过对患高胆红素血症的足月新生儿检测血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）及S100B蛋白浓度,探讨血清NSE及S100B蛋白在诊断新生儿胆红素脑损伤的临床意义。方法随机选择日龄2～28天的患高胆红素血症的新生儿115例为观察组,正常新生儿24例为对照组。利用酶联免疫吸附测定法检测血清中NSE及S100B蛋白浓度,同时采用重氮法测定血清总胆红素（TSB）。同期检测观察组新生儿脑干听觉诱发电位（BAEP）,受试者工作特征曲线（ROCC）分析NSE、S100B蛋白、TSB与BAEP的相关性。结果 1.观察组TSB、NSE及S100B蛋白（分别为301.4±65.9μmol/L、33.7±25.2ng/ml、2782.9±1585.5ng/L）明显高于对照组（分别为37.4±7.9μmol/L、9.9±4.4ng/m、1143.5±377.3ng/L）,P=0.000;2.BAEP异常组血清TSB（295.1±38.0μmol/L）与正常组（307.0±61.2μoml/L）比较无显著差异性（P=0.527）;3.BAEP异常组血清NSE（64.4±33.6ng/ml）及S100B蛋白（4552.9±1958.1ng/L）与正常组（分别为26.1±21.7ng/ml、2194.2±1336.2 ng/L）比较有显著差异性（P=0.000）;4.根据TSB来判断BEAP的异常并没有显著意义（P=0.793）。NSE、S100B蛋白的最佳工作点分别为30.6ng/ml、2357.4μg/L,预测黄疸新生儿听力损害的敏感性均为90%,特异性分别为75.6%、66.7%。血清NSE及S100B蛋白具有较高的预测敏感性,NSE的特异性略优于S100B蛋白,两者的敏感性及特异性均高于TSB,差异有统计学意义（P均为0.001）。结论患高胆红素血症的新生儿,测定血清中NSE及S100B蛋白的浓度对诊断新生胆红素脑损伤具有较重要的价值;是临床上判断胆红素脑损伤的敏感指标。     

喜炎平注射液治疗新生儿病理性黄疸41例临床观察

目的探讨喜炎平注射液对新生儿病理性黄疸的治疗作用及其与新生儿病理性黄疸常规治疗的区别.方法对我科2003年1月～2004年6月收治的82例病理性黄疸患儿随机分成两组,其中41例加用喜炎平注射液组设为治疗组,另外41例设为对照组.两组患儿日龄、性别及病因、病情轻重程度经统计学处理差异均无显著性,具有可比性.两组患儿常规治疗方法相同.治疗组在常规治疗基础上加用喜炎平注射液0.2～0.4ml/kg,加入10%葡萄糖注射液30ml内qd.ivgtt,5～7d为1个疗程,严密观察治疗组与对照组黄疸消退时间及两组患儿治疗前后血清胆红素的变化.结果两组患儿黄疸消退时间:治疗组平均为4.21±1.14d;对照组平均为8.23±1.02d,两组疗效比较差异有显著性(︱t︱=5.172,P＜0.001).两组患儿血清胆红素水平治疗前后比较:治疗组治疗前血清总胆红素平均为280.3±68.5μmol/L,治疗后血清总胆红素日平均下降值52.3±19.4μmol/L;对照组治疗前血清总胆红素平均为 278.6±70.4μmol/L,治疗后血清总胆红素日平均下降值 43.1±21.3,经统计学处理t=2.53, P＜0.01,两组治疗前后血清总胆红素日平均下降值有显著差异.结论喜炎平注射液辅助治疗新生儿病理性黄疸的效果优于单纯常规治疗,胆红素下降快,明显缩短了疗程,经用喜炎平治疗组无一例发生胆红素脑病,降低了胆红素脑病的发生率,而且喜炎平注射液治疗感染性黄疸也有明显效果,治疗过程中未发现任何毒副作用,安全可靠.     

乙型肝炎肝硬化患者病毒基因型与特异性、非特异性CTL的关系和意义

目的 探讨乙型肝炎肝硬化患者不同HBV基因型与外周血HBV特异性、非特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的关系和意义.方法 91例乙型肝炎肝硬化患者作HBV基因型检测,比较B、C基因型感染者之间HBV特异性、非特异性CTL的差别,并探讨其临床意义.结果 91例乙型肝炎肝硬化患者中,C基因型55例（60.44%）,B基因型35例（38.46%）,B、C混合型1例（1.1%）,C基因型人白细胞抗原（HLA）-A2阳性27例（49.09%）,HBV特异性CTL（0.18%±0.03%）,B基因型HLA-A2阳性18例（51.43%）,HBV特异性CTL（0.38%±0.04%）,高于C基因型,t=5.01,P＜0.01,非特异性CTL：C基因型（11.87%±1.50%）,B基因型（11.90%±1.51%）,t=0.14,P＞0.05.HBV DNA水平：C基因型[（6.01 ±0.81）log10拷贝/ml],高于B基因型[（5.01 ±0.54）log10拷贝/ml],t=5.01,P＜0.01,丙氨酸转氨酶（ALT）：C基因型（251.13 ±131.11）U/L,高于B基因型（121.25±63.21）U/L,t=3.61,P＜0.01,血清总胆红素（TBil 45.61 ±15.11）μmoL/L,高于B基因型（28.11 ±6.25）μmol/L,t=3.05,P＜0.01.结论 与乙型肝炎肝硬化B基因型感染者相比,C基因型感染者的HBV特异性CTL较低,导致HBV DNA水平较高,肝功能损害较重.     

HB-H-6树脂血浆灌流治疗重度黄疸初步临床研究

目的研究HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流对重度黄疸的治疗效果。方法重度黄疸患者76例,其中男性61例,女性15例,年龄41～75岁,平均59岁。均为急慢性肝功能衰竭、重型肝炎造成的肝细胞性黄疸和肿瘤、结石等阻塞胆管而造成的梗阻性黄疸,其中肝细胞性黄疸70例,梗阻性黄疸6例。总胆红素(TBiL)(359±138)μmol/L,直接胆红素(I鄄BiL)(132±76)μmol/L,间接胆红素(DBiL)(227±97)μmol/L;总蛋白(TP)(64±12)g/L,白蛋白(Alb)(28±11)g/L,球蛋白(Glb)(36±13)g/L。采用一次性使用HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流器进行治疗。分别于灌流前、灌流120min取血测定血浆胆红素、蛋白质、电解质、血常规,定时观察患者血压、心率、体温和呼吸变化。结果灌流至2h结束,总胆红素下降29%,直接胆红素下降27%,间接胆红素下降30%;总蛋白下降11%,白蛋白下降14%,球蛋白下降8%;灌流对血浆电解质钾、钠、氯、钙、镁和磷均无明显影响(P>0.05)。灌流前后相比,白细胞升高2%,红细胞下降1%,血小板降低6%(P>0.05)。灌流过程中,患者心率、血压、体温和呼吸等生命指标均无明显变化。结论HB-H-6树脂血浆灌流治疗重度黄疸是一种安全、有效的方法,其血浆灌流器很有发展前途。     

中国人肝细胞系1运用于生物人工肝的生物代谢功能

背景：前期研究发现,中国人肝细胞系1细胞分化程度高且生物代谢功能良好, 并且中国人肝细胞系1细胞组织学上来源于正常肝组织,较其他来源于肿瘤源性的肝细胞系更为安全。 目的：探讨中国人肝细胞系中国人肝细胞系1细胞在混合型生物人工肝中的生物代谢功能。 方法：15只食蟹猴随机分成对照组(n=5)和治疗组(n=10),均建立急性肝功能衰竭模型,治疗组接受以全接触灌流型生物反应器接种微载体微重力中国人肝细胞系1细胞建立的人源细胞混合型生物人工肝进行治疗。 结果与结论：急性肝功能衰竭食蟹猴血清谷氨酸转氨酶、总胆红素、总胆汁酸、尿素氮、肌酐、血氨均明显上升,而白蛋白、Fischer指数则显著下降;人源细胞混合型生物人工肝治疗后,急性肝功能衰竭食蟹猴血清谷氨酸转氨酶、总胆红素、总胆汁酸、尿素氮、肌酐、血氨和白蛋白均恢复。提示中国人肝细胞系1细胞在混合型生物人工肝中生物代谢功能良好,表现出良好的肝特异性生物合成及生物代谢功能。     

人细胞系生物人工肝支持系统治疗慢加急性肝衰竭患者的初步研究

目的 利用自行构建的混合生物人工肝支持系统,探讨其治疗肝衰竭患者的安全性和有效性.方法 采用转染人肝再生增强因子(hALR)的Hep G2细胞为生物材料构建生物反应器,利用慢加急性肝衰竭患者作为治疗对象,随机分组进行混合生物人工肝治疗及普通血浆置换治疗.结果 治疗组6例患者中,4例经住院治疗1个月后临床好转出院,1例在治疗结束20 d后因肝性脑病死亡,1例出院后1个月因肝肾综合征死亡,1例在恢复后1年因消化道出血死亡.对照组6例患者中存活2例,1例肝移植,3例因肝衰竭死亡.结论 自行构建的混合生物人工肝支持系统功能良好,初步论证有一定的安全性和有效性.     

人细胞系生物人工肝支持系统治疗慢加急性肝衰竭患者的初步研究

目的利用自行构建的混合生物人工肝支持系统,探讨其治疗肝衰竭患者的安全性和有效性。方法采用转染人肝再生增强因子（hALR）的HepG2细胞为生物材料构建生物反应器,利用慢加急性肝衰竭患者作为治疗对象,随机分组进行混合生物人工肝治疗及普通血浆置换治疗。结果治疗组6例患者中,4例经住院治疗1个月后临床好转出院,1例在治疗结束20d后因肝性脑病死亡,1例出院后1个月因肝肾综合征死亡,1例在恢复后1年因消化道出血死亡。对照组6例患者中存活2例,1例肝移植,3例因肝衰竭死亡。结论自行构建的混合生物人工肝支持系统功能良好,初步论证有一定的安全性和有效性。     

Artificial liver support: future aspects

Liver transplantation and blood purification therapy, including plasmapheresis, hemodiafiltration, and bioartificial liver support, are available to treat patients with severe liver failure. The two mainstream systems developed for bioartificial liver support are extracorporeal whole-liver perfusion (ECLP) and the bioreactor system (BIS). We developed a method of plasma cross-perfusion, in which plasma is exchanged between the blood circuit of the patient and that of a hepatic function unit, that is, whole liver or a bioreactor through which immunologically free whole human blood is perfused. From the aspects of efficacy and safety, the best system of bioartificial liver support for clinical use is considered to be ECLP in cross plasma perfusion. However, a social objection about zoonosis has consistently been raised, with controversy surrounding the use of xenogeneic organs for human treatment, and this might be a final obstacle to the development of system efficacy. The combination therapy of hemodiafiltration with the administration of human serum albumin and anticoagulant factors can minimize the economic and medical resource costs through the development of transgenic livestock that secrete human pharmaceuticals systemically. It is possible that this therapy will become the most practical treatment for patients with severe hepatic failure.     

体外生物人工肝支持系统生物功能的体外研究

用２×１０８ 个混合聚集球形培养的人肝细胞、肝非实质细胞与中空纤维型生物反应器组成体外生物人工肝支持系统（ＥＢＬＳＳ）,通过循环液（ＰＲＩＭ １６４０）中肝细胞合成分泌产物的分析,评价其生物功能。结果表明,经过６ ｈ 的体外循环,循环液中总蛋白、白蛋白、甲胎蛋白和尿素含量均显著增加,该循环液使体外培养大鼠肝细胞ＤＮＡ 合成率显著增加（与对照组比较Ｐ＜ ００１）,实验后球形体肝细胞仍保持良好的活力。提示由培养人肝细胞和中空纤维型生物反应器组成的体外生物人工肝具备肝脏生物合成功能,并有刺激肝细胞增殖的能力。     

永生化人肝细胞系的建立和生物学特性研究

目的建立永生化人肝细胞系（IHCL），评价其作为制备生物人工肝细胞材料的可行性。方法利用基因转移技术对原代培养的人肝细胞转染永生化基因猴病毒40大T抗原和人端粒酶逆转录酶，建立IHCL。以噻唑蓝法测定IHCL细胞生长曲线；流式细胞仪分析细胞增殖周期；裸鼠皮肤和肝脏局部接种观察细胞致瘤性；RT-PCR检测肝细胞相关基因mRNA表达；蛋白质印迹法检测肝功能相关蛋白的表达。应用Cytodex3微载体培养IHCL，分析细胞的生长状态和细胞密度。将IHCL细胞分别与5例重症肝功能衰竭患者的血清共培养，培养前后检测血清中胆红素和尿素氮水平，评价IHCL的解毒功能。结果所建立的IHCL具有原代肝细胞的形态，并具有较好的增殖能力，细胞已经传代超过80次。IHCL细胞以DNA二倍体整数倍方式增殖，细胞倍增周期为38h。裸鼠接种IHCL部位均未见肿瘤生长。RT-PCR检测显示IHCL细胞表达仅α1-抗胰蛋白酶、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶、谷胺酰胺合成酶和谷胱甘肽硫转移酶的mRNA；蛋白质印迹分析证实IHCL细胞表达这4种蛋白。IHCL细胞可以在微载体上贴附生长，细胞密度可以达到2．86×10^6个／ml。将IHCL细胞与重症肝功能衰竭患者血清共培养12、24和48h后，血清中总胆红素由（346±94）μmol／L分别下降至（330±97）、（315±97）和（295±100）μmol／L，直接胆红素由（243±70）μmol／L下降至（218±76）、（198±79）和（184±75）μmol／L，24、48h与共培养前比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；而尿素氮进行性地升高，由（6．6±0．9）μmol／L分别升高至（9．0±0．9）、（9．9±1．1）和（12．5±1．6）μmol／L，3个时间点与共培养前比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论所建立的IHCL细胞系具有正常人肝细胞的基本生物学特性和主要的功能特性，具备成为生物人工肝细胞     

Human hepatocyte functions in a crossed hollow fiber membrane bioreactor

An important challenge in liver tissue engineering is the development of bioartificial systems that are able to favour the liver reconstruction and to modulate liver cell behaviour.A crossed hollow fiber membrane bioreactor was developed to support the long-term maintenance and differentiation of human hepatocytes. The bioreactor consists of two types of hollow fiber (HF) membranes with different molecular weight cut-off (MWCO) and physico-chemical properties cross-assembled in alternating manner: modified polyetheretherketone (PEEK-WC) and polyethersulfone (PES), used for the medium inflow and outflow, respectively. The combination of these two fiber set produces an extracapillary network for the adhesion of cells and a high mass exchange through the cross-flow of culture medium. The transport of liver specific products such as albumin and urea together with the transport of drug such as diazepam was modelled and compared with the experimental metabolic data. The theoretical metabolite concentration differed 7.5% for albumin and 5% for urea with respect to experimental data. The optimised perfusion conditions of the bioreactor allowed the maintenance of liver functions in terms of urea synthesis, albumin secretion and diazepam biotransformation up to 18 days of culture. In particular the good performance of the bioreactor was confirmed by the high rate of urea synthesis (28.7 μg/h 10⁶ cells) and diazepam biotransformation. In the bioreactor human hepatocytes expressed at high levels the individual cytochrome P450 isoenzymes involved in the diazepam metabolism. The results demonstrated that crossed HF membrane bioreactor is able to support the maintenance of primary human hepatocytes preserving their liver specific functions for all investigated period. This device may be a potential tool in the liver tissue engineering for drug metabolism/toxicity testing and study of disease pathogenesis alternatively to animal experimentation.     

Configuration of a new bioartificial liver support system and in vitro evaluation of its functions

The aim of this study was to configure a new bioartificial liver (BAL) support system and evaluate its functions in vitro. Chinese experimental miniature pig hepatocytes were isolated by an in situ recirculating collagenase perfusion method and were cultured in serum-free medium with restriction attachment and spinner technique to form hepatocyte spheroid suspensions containing 1.0 x 10(10) hepatocytes. The BAL support system was configured by inoculating the hepatocyte spheroids into the cell circuit of a hollow fiber bioreactor (BIOLIV A3A, Cell Biotech Limited, HK, China). The number and viability of hepatocytes, the levels of alanine aminotransferase (ALT), total bilirubin (TBi), and albumin (ALB) in the circulating hepatocyte suspension and RPMI-1640 medium, and lidocaine metabolism were determined during 6 hr of circulation in the BAL devices. Independent experiments were performed 5 times. There were no significant changes in the number and viability of the hepatocytes during the circulation period. The BAL support system demonstrated substantial albumin synthesis and lidocaine metabolism. The results indicate that the new BAL support system has the ability to perform liver functions and could be used to treat liver failure or provide temporary liver support in patients who are candidates for liver transplantation.     

134例HEV相关肝衰竭患者临床特点分析

目的 观察HEV相关肝衰竭患者的临床特点,为HEV相关肝衰竭诊治提供依据.方法 收集我院2002年1月至2012年1月收治的134例HEV相关肝衰竭患者临床资料,回顾性分析其年龄、分型、分期、转归、生化指标等临床特点,比较单纯HEV相关肝衰竭、重叠HBV感染的肝衰竭差异.结果 戊型肝炎患者中共有134例发生肝衰竭,占住院戊型肝炎总数的8.45％.单纯HEV相关肝衰竭患者68例,重叠HBV肝衰竭患者66例.两组年龄分别为(56.12±14.29)岁及(48.59±10.91)岁,两组之间比较差异有统计学意义(P＜0.05).单纯HEV感染组患者老龄患者比率(≥60岁,45.59％)明显高于重叠组患者(13.64％,P＜0.05).单纯组及重叠组患者TBil最高值无差异(P＞0.05),但单纯组ALT更高,两组分别为(1250.90±1593.97) U/L和(616.26±797.62) U/L(P＜0.05);两组直接胆红素/总胆红素比值分别为0.72±0.07及0.69±0.08,差异有统计学意义(P＜0.05).两组肝衰竭患者病情转归、疾病严重程度比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 单纯HEV相关肝衰竭患者年龄较大,转氨酶较高,直接胆红素/总胆红素比值更高,但疾病严重程度及转归无明显差异.     

肝硬化大鼠模型肝细胞移植途径的筛选

目的 通过比较4种同种异体肝细胞移植方法治疗肝硬化大鼠模型的疗效,筛选出较好的细胞移植途径.方法 50只经证实成模的肝硬化大鼠模型动物被完全随机分为5组:肝动脉移植组(G1)、门静脉移植组(G2)、脾动脉移植组(G3)、尾静脉移植组(G4)及对照组(G5).前4组分别自肝动脉、门静脉、脾动脉及尾静脉注射肝细胞悬液2 ml(细胞数量为2×106),对照组(G5)不作干预.移植前后对各组大鼠行肝功能检测及术后处死大鼠取肝脏作病理评分.结果 G1、G2组移植后前3周血清白蛋白水平逐渐下降,第5周后逐渐回升,到第7周达到峰值[(15.4±2.3)g/L,(15.4±2.1)g/L].G1、G2组移植后前3周血清总胆红素水平逐渐上升,到第5周后逐渐回落,到第7周达到移植前的水平[(13.62±2.32)μmol/L].G5组移植前后血清总胆红素水平变化不明显;术后病理G3组改善最为明显,G1、G2组次之,G4组再次之,G5改善情况最差.结论 在针对肝硬化大鼠模型不同的移植途径中,经脾动脉途径移植肝细胞,术后病死率较低,能更有效地改善肝脏功能及减轻肝细胞的变性和坏死.