小柴胡汤对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

本实验用测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的方法，观察中药小柴胡汤对小鼠免疫功能的影响。实验结果表明：小柴胡汤在４、８、１６ｈ实验观察小鼠腹腔巨噬细胞，其吞噬率和吞噬指数，均有不同程度的提高，以１６ｈ组提高最为显著。实验各组与对照组比较，差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。从而表明，中药小柴胡汤有提高体内单核－吞噬细胞系统的吞噬功能     

戴氏虫草和粉被虫草多糖对巨噬细胞等活性的影响

目的 研究虫草属新种-戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖（CDP1）和粉被虫草菌丝体多糖（CPP1）在体外对小鼠腹腔巨噬细胞（Mφ）吞噬功能和脾细胞免疫功能的影响。方法 MTT比色法测定淋巴细胞增殖,孔雀绿比色法测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,中性红比色法测定细胞毒淋巴细胞（CTL）活性,结果 CDP1在正常情况下不能促进小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,而CPP1却有促进作用;在免疫抑制的情况下,一定浓度的戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖和粉被虫草多糖能恢复提高吞噬细胞的吞噬功能,而CPP1却有促进作用;在免疫抑制的情况下,一定浓度的戴氏虫草菌丝体细外水溶性多糖和粉被虫草多糖能恢复提高吞噬功能,它们不仅能促进正常脾活化T淋巴细胞的增殖,而且能恢复环磷酰胺和氢化可的松抑制免疫小鼠脾活化T淋巴细胞的增殖,在合适的浓度下能增高小鼠脾CTL活性,同时在一定浓度下能恢复免疫抑制小鼠脾CTL活性。结论 两者具有增强免疫功能的作用。     

红景天苷对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、凋亡、吞噬、ROS和NO产生的影响

目的:研究红景天苷(Sal)对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、凋亡、吞噬、胞内活性氧簇(ROS)及分泌一氧化氮(NO)的影响,初步探讨其对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用。方法:无菌分离小鼠腹腔巨噬细胞,并制备单细胞悬液,以不同终浓度(80μmol/L、160μmol/L及320μmol/L)的Sal和巨噬细胞共培养4 h,再以脂多糖(LPS)和γ-干扰素(IFN-γ)进行共刺激。利用MTT比色法检测Sal对巨噬细胞体外增殖的影响。用放线菌酮(CHX)诱导巨噬细胞凋亡,用Sytox G reen染色结合荧光酶标仪检测Sal对CHX诱导巨噬细胞凋亡的影响。用流式细胞术(FCM)检测Sal对巨噬细胞吞噬功能的影响。用2-7-二氯氢化荧光素乙二脂(H2DCFDA)染色法结合荧光酶标仪检测Sal对胞内ROS产生的影响;用G riess反应检测Sal对巨噬细胞分泌NO的影响。结果:MTT比色法检测显示,终浓度为80、160、320μmol/L的Sal均可显著促进LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞增殖(P<0.05)。荧光酶标仪检测Syto xG reen染色法的结果显示,160μmol/L的Sal可抑制CHX诱导的巨噬细胞凋亡(P<0.01)。FCM结果显示,各浓度的Sal均能促进单纯药物组和实验药物组LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞的吞噬功能(P<0.05)。用荧光酶标仪检测DH2DCFDA染色结果表明,各浓度的Sal对LPS+IFN-γ刺激的巨噬细胞胞内ROS的产生均具有显著的抑制作用(P<0.01)。Griess反应检测NO含量的结果显示,各浓度的Sal对LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞产生NO均具有促进作用(P<0.05)。结论:Sal对LPS和IFN-γ刺激的巨噬细胞增殖具有显著的促进作用,对CHX诱导的巨噬细胞凋亡具有显著的抑制作用,对静息态和活化态的巨噬细胞的吞噬功能均有增强作用,并能减少LPS和IFN-γ活化的巨噬细胞胞内ROS的产生;但能促进LPS和IFN-γ活化的巨噬细胞NO的分泌。     

5种沙眼衣原体分泌蛋白对小鼠巨噬细胞和树突状细胞吞噬功能的影响北大核心CSCD

目的探索5种沙眼衣原体分泌蛋白在体外对小鼠巨噬细胞和树突状细胞吞噬功能的影响。方法原核表达蛋白GST-CT311、GST-GIgA、GST-cHtrA、GST-OmcBc和GST-Pgp3中,同时表达了衣原体膜蛋白GST-IncA作为对照,经谷胱甘肽巯基转移酶（GST）磁珠纯化、PreScission蛋白酶切除GST标签后得到蛋白CT311、GIgA、cHtrA、OmcBc、Pgp3以及IncA。取C3H/HeJ小鼠骨髓细胞制备巨噬细胞和树突状细胞,分别用100μg/ml和500μg/ml的蛋白质预处理巨噬细胞和树突状细胞,4h后加入荧光珠,1h后固定细胞,直接免疫荧光法计数每100个细胞吞噬荧光珠的平均数量（吞噬量）及每100个细胞中吞噬的细胞百分比（吞噬率）。结果高、低浓度蛋白质组对巨噬细胞及树突状细胞的吞噬率均无明显影响;与无处理组相比,LPS以及低浓度（100μg/ml）的各蛋白组对巨噬细胞和树突状细胞的吞噬量无明显影响;高浓度组（500μg/ml）的Pgp3、cHtrA及CT311预处理的巨噬细胞和树突状细胞吞噬量明显升高,GIgA、OmcBc以及IncA对巨噬细胞和树突状细胞的吞噬量无明显影响。结论在体外,沙眼衣原体分泌蛋白Pgp3、cHtrA及CT311可以促进巨噬细胞和树突状细胞的吞噬功能,这可能有助于沙眼衣原体在宿主体内的播散感染。     

脾内途径GM—CSF基因疗法增强巨噬细胞功能的研究

探讨了该脾内途径的ＧＭ－ＣＳＦ基因疗法对化疗小鼠腹腔巨噬细胞功能活性的影响及其机制。化疗小鼠脾内移植ＧＭ－ＣＳＦ－ＦＬＣ后ｄ７，巨噬细胞数目升高１．５倍，移植后ｄ１４升高６￣８倍；巨噬细胞的吞噬功能、抗原提呈功能及肿瘤杀伤活性在治疗后ｄ１４明显增强，同时发现巨噬细胞ＭＨＣⅡ类抗原（Ｉａ）表达水平以及ＩＬ－１、ＴＮＦ和ＮＯ分泌水平亦有不同程度的升高，这些分子变化可能是上述巨噬细胞功能活性增强的基础。     

莪莲小柴胡汤的抗癌作用及其机制研究

目的：通过重复观察莪莲小柴胡汤（ELXCHT）对荷瘤鼠的抑瘤作用和免疫功能的影响，及其毒副作用，探究其抑瘤机制，为该复方的临床开发和研究提供实验资料。 方法:高、中、低浓度ELXCHT处理组分别给予ELXCHT灌服，对照组给予等量无菌生理盐水，阳性药物处理组给予环磷酰胺(CTX)。通过观察肿瘤生长情况、小鼠体重的变化、胸腺系数、脾脏系数和肿瘤组织光、电镜检测，探索ELXCHT的抑瘤作用和机制及其对免疫功能的影响和副作用。 结果:各用药组均较对照组有明显抑瘤作用（P<0.05），高浓度组与CTX组具有同等的抑瘤效应（P>0.05）。与CTX相比，ELXCHT能够显著提高机体的免疫功能，高浓度组的胸腺系数和脾系数与阳性组的比较有显著差异（P<0.05）；ELXCHT毒副作用较小，实验前各组小鼠体重无显著差异（P>0.05），实验结束时各用药组小鼠体重与CTX处理组比较有显著差异（P<0.05），高、中浓度ELXCHT处理组结束时小鼠体重与对照组比较也有显著差异（P<0.05）；光镜和电镜检测发现3种不同浓度ELXCHT处理组均可见瘤细胞凋亡和坏死，及巨噬细胞吞噬凋亡小体等改变，其中以高浓度ELXCHT处理组最为显著，而CTX处理组部分瘤细胞则以坏死为主。 结论:ELXCHT能有效抑制肿瘤生长，增强机体免疫力和诱导肿瘤细胞凋亡，不良反应少，是应用前景广阔的抗癌中药。     

脂氢过氧化物和氧化修饰的低密度脂蛋白对巨噬细胞免疫功能的影响

叔丁基脂氢过氧化物（tbooH)、脂质过氧化修饰的低密度脂蛋白（mLDL)可引起巨噬细胞免疫功能损伤，显示明显的时间和浓度效应。tbooH(10μmol/L)和mLDL(1同μmol/L)培养4小时使巨噬细胞Fc受体阳性率分别降至24．8％和46．3％（对照85．3％），吞噬阳性率分别降至44．1％和72．6％（对照92．1％）。当tbooH浓度增至100μgmol/L作用1小时，可使巨噬细胞Fc受体率和吞噬阳性率分别降至17．5％（对照87．8％）和42．1％（对照94．5％）。云芝多糖对脂质过氧化物引起的巨噬细胞免疫功能损伤显示明显的保护作用。     

灰树花提取成分对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的:以NK细胞杀伤活性,巨噬细胞吞噬功能及TNFα,IL-1的产生水平为指标,对灰树花乙醇沉淀物（ET-Pre）和RNA提取物影响小鼠非特异性免疫功能及其抗肿瘤机制作初步探讨。方法:以常规生物学测定的乳酸脱氢酶法,吞噬中性红法,结晶紫染色法,MTT生物活性测定法进行检测。结果:灰树花ET-Pre和RNA提取物处理组小鼠脾NK细胞杀伤活性,巨噬细胞吞噬功能及TNF-α,IL-1的产生水平均较对照组呈现有显著意义的增高或增强。并且灰树花RNA提取物提高NK细胞杀伤活性和巨噬细胞吞噬功能的程度大于灰树花ET-Pre的作用。结论:灰树花两种提取物可增强机体非特异性免疫功能,间接发挥抗肿瘤作用。     

灵芝活性多糖GLIS对正常和荷瘤小鼠骨髓巨噬细胞的激活作用

为研究灵芝活性多糖GLIS对正常和荷瘤小鼠巨噬细胞的激活作用,用灵芝活性多糖GLIS刺激体外培养的正常和荷瘤小鼠的巨噬细胞,检测GLIS刺激后巨噬细胞分泌至培养基中的TNF-α、IL-1β和NO的含量,以及小鼠巨噬细胞对乳胶颗粒的吞噬率的变化,并检测GLIS刺激的巨噬细胞对肿瘤细胞的抑制作用,同时研究灵芝活性多糖GLIS组成的糖和蛋白部分对活性的影响。结果显示经灵芝活性多糖GLIS刺激后,能显著刺激巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β,并产生大量的NO。小鼠巨噬细胞对乳胶颗粒的吞噬功能也明显的增强,且荷瘤小鼠的巨噬细胞对GLIS的敏感度要优于正常小鼠,GLIS中的糖部分对它的活性作用起主要作用。该研究表明,灵芝活性多糖GLIS对正常和荷瘤小鼠巨噬细胞均具有明显的激活作用。     

邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞吞噬能力的影响研究

目的:近期台湾地区食品及饮料中添加邻苯二甲酸酯类(塑化剂)的安全问题受到广泛关注,已有研究证实邻苯二甲酸酯类物质能影响人类生殖系统发育,但其对人体免疫系统影响尚不清楚。本文研究邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞吞噬能力的影响,以期揭示其对人类健康的危害。方法:使用不同浓度邻苯二甲酸二丁酯体外处理小鼠腹腔巨噬细胞24小时,然后进行巨噬细胞对细菌E.coli以及诱导凋亡的小鼠胸腺细胞的吞噬实验,并检测其吞噬率和吞噬指数,从而评价其对巨噬细胞吞噬能力的影响。用流式细胞仪检测邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞表面吞噬相关分子CD11b、CD54、CD36、TLR4和CD64的影响;利用siRNA技术对吞噬相关受体CD36进行表达干扰,验证其在邻苯二甲酸二丁酯抑制巨噬细胞吞噬能力中的作用。结果:经过24小时体外处理,不同浓度邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞吞噬能力均有抑制作用,并且具有剂量依赖性。此外,邻苯二甲酸二丁酯能显著降低巨噬细胞清道夫受体CD36的表达。结论:研究结果证实邻苯二甲酸二丁酯通过降低细胞膜表面CD36表达从而抑制巨噬细胞吞噬能力。     

低强度半导体激光照射对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的：观察低强度650nm半导体激光对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。方法：用不同功率和照射时间的650nm半导体激光辐照小鼠腹腔巨噬细胞，采用中性红吞噬实验测定巨噬细胞的吞噬能力。结果：在适当的激光功率和照射时间下巨噬细胞的吞噬能力有显著性增强。结论：低强度650nm半导体激光照射对小鼠腹腔巨噬细胞有激活作用，可增强其免疫活性。     

北豆根提取物对小鼠和人淋巴细胞及巨噬细胞作用的体外实验研究

目的：探讨中药北豆根提取物的免疫学调节作用及其作用机制；比较北豆根水提物、醇提物和多糖成分的生物学活性。方法：采用水提取、醇提取及水回流等方法对北豆根进行成分分离。采用MTT法、中性红法检测了北豆根提取物对淋巴细胞增殖的作用以及对小鼠巨噬细胞代谢和吞噬功能的影响。结果：北豆根多糖成分(RMP)具有丝裂原样作用，可刺激小鼠脾细胞及人淋巴细胞增殖，对小鼠巨噬细胞的吞噬功能有一定的促进作用。而北豆根水提物(RMW)和醇提物(RME)对小鼠脾细胞、人淋巴细胞的增殖具有抑制作用，对小鼠巨噬细胞的代谢及吞噬功能也有抑制作用。结论：不同的北豆根成分对免疫细胞有不同的作用，水提物和醇提物对免疫细胞的增殖、代谢和功能具有一定的抑制作用；北豆根多糖成分对淋巴细胞具有丝裂原样作用，能增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能，该活性可用于临床辅助治疗肿瘤。     

免疫小鼠及正常小鼠巨噬细胞对利什曼无鞭毛期的吞噬作用

内脏利什曼原虫主要寄生在巨噬细胞系统的单核吞噬细胞内,在一般情况下其无鞭毛期能抵抗巨噬细胞的杀灭作用。 为了观察经杜氏利什曼原虫免疫后的小鼠其巨噬细胞的作用,我们采用了CFW纯系小鼠,经不同免疫方法于免疫后不同时间观察了体外培养中巨噬细胞的吞噬功能。实验采用的巨噬细胞与杜氏利什曼原虫前鞭毛期的比例为1:4。从每24小时吞噬功能的结果表明,经利什曼鞭毛体纯抗原免疫及福氏佐剂加利什曼抗原免疫的两组小鼠,均以免疫后3周的吞噬率最高,分别为72％及96％;两组吞噬指数的均值±SD(4.46±1.72,6.99±4.36)亦较正常组小鼠(1.68±1.25,1.72±1.15)为高,并具有显著差异(P<0.05)。提示了特异性抗原以及与佐剂合并具有对吞噬功能的激活作用。实验并观察了巨噬细胞内利什曼原虫无鞭毛期的活力作用,从吞噬原虫后20小时开始至 144小时,正常小鼠巨噬细胞内的无鞭毛期再经三恩氏培养基培养后均能恢复为前鞭毛期,而经免疫小鼠巨噬细胞内的利什曼原虫无鞭毛期在72小时后即消失活力。 另外,对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬利什曼原虫的动态亦作了仔细观察。 实验结果说明了经过免疫的小鼠,由于被淋巴细胞激活后的巨噬细胞能杀死利什曼原虫,巨噬细胞在宿主对感染应答中是一个重要部分,对于探索黑热病的免疫机理具有一     

血管紧张素Ⅱ和心房肽对小鼠细胞免疫功能的影响

机体在应激状态下血浆血管紧张素Ⅱ（ＡⅡ）和心房肽（ＡＮＰ）浓度均显著升高，同时免疫功能亦有明显改变。本文采用免疫学方法检测了应激激素ＡⅡ和ＡＮＰ对小鼠细胞免疫功能的影响。结果表明：（１）ＡⅡ（１０－１２～１０－１０ｍｏｌ／Ｌ）在体外明显抑制脾细胞对分裂原（刀豆蛋白Ａ，ＣｏｎＡ）的增殖反应及白细胞介素２（ＩＬ２）的产生，而ＡＮＰ（１０－１２～１０－１０ｍｏｌ／Ｌ）可协同ＣｏｎＡ促进脾细胞增殖和ＩＬ２产生。（２）ＡⅡ可显著促进巨噬细胞（Ｍ）的吞噬功能，而ＡＮＰ则起抑制作用。提示：ＡⅡ和ＡＮＰ对细胞免疫功能有显著影响，且二者的作用表现出相互制约、相互平衡。     

波形蛋白的警报素功能鉴定

目的：鉴定胞外可溶性波形蛋白（Vim）促进相关细胞增殖、活化、趋化的能力。方法：体外检测Vim刺激大鼠脾细胞的增殖情况。体内检测Vim免疫小鼠的外周血淋巴细胞数及Vim抗体水平。收集小鼠腹腔巨噬细胞与不同浓度Vim共培养,检测其对巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响。以Transwell小室法检测Vim对NIH3T3成纤维细胞的趋化作用。结果：体外实验Vim剂量依赖性地促进大鼠脾细胞增殖,16 μg/ml浓度的Vim刺激预致敏或未致敏脾细胞增殖率分别高达（196.0±9.7）%、（208.9±4.6）%,且该二者无显著性差异。体内实验单用Vim免疫小鼠的外周血淋巴细胞浓度（10.9 L -1 ）激增（5.74±0.51 vs 1.69±0.13）,同时激发了Vim特异性抗体水平（OD值2.31±0.06 vs 0.19±0.08）;且与Vim辅以佐剂免疫小鼠的相应指标均无显著性差异。体外实验Vim浓度依赖性地促进巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力,并能够对NIH3T3成纤维细胞产生趋化作用。结论：胞外可溶性Vim非特异性促进炎症反应相关细胞增殖、活化、趋化,具有警报素功能。     

秃疮花注射对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

本文从体内外研究了秃疮花（DLF）提取物对小鼠腹腔巨噬细胞（PMΦ）免疫功能的影响。结果显示，DLF可诱发PMΦ产生强烈的呼吸爆发作用，并能提高PMΦ的吞噬功能和溶菌酶水平，且具有剂量效应关系。在体试验明，剂量为50－100mg/mlDLF能有效促进PMΦ的活化，提高其吞噬能力和溶菌酶活力（P＜0．05），其中100mg/mlDLF诱发PMΦ产生超氧阴离子（O2）的效应最为显著（P＜0．01）；体内试验时发现，0．5－2g/kgDLF对PMΦ的活化作用及其吞噬能力有显著作用，其中1g/kgDLF可诱导PMΦ产生O2（P＜0．01）提高PMΦ吞噬能力（P＜0．001）和溶菌酶水平（P＜0．05）均有显著性效果。以上结果表明，DLF可诱导PMΦ活化并提高其免疫功能，从而提示DLF的临床治疗作用可能与此有关。     

连翘提取物对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬和NO释放的影响

目的:分析连翘(FS)对小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和体外NO释放的影响.方法:无菌收集小鼠腹腔巨噬细胞和羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记大肠杆菌DH5α,短期培养3 h后流式细胞术(FCM)分析FS对腹腔巨噬细胞体外吞噬的影响.用LPS体外刺激活化腹腔巨噬细胞,Griess Reagent试剂盒检测并分析FS对巨噬细胞体外释放NO的影响.结果:FCM分析显示,终浓度为40、80、160 mg/L的FS对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬具有明显的促进作用(P<0.05).不同终质量浓度的FS对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞体外NO的释放均有抑制作用(P<0.05).结论:FS可以促进小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和抑制NO体外的释放.     

调衡方多糖增强体外培养巨噬细胞的吞噬能力

目的研究调衡方多糖对巨噬细胞吞噬功能的影响,探讨其多糖对巨噬细胞吞噬作用的免疫调节机制。方法依照中药多糖的制备方法从调衡方中提取粗多糖;从小鼠腹腔分离提取并培养巨噬细胞;(500、200、10)μg/m L调衡方多糖处理巨噬细胞48 h,光学显微镜下观察活细胞的形态,墨汁吞噬实验以及金黄色葡萄球菌吞噬实验观察巨噬细胞的吞噬能力,酶细胞化学染色观察巨噬细胞胞内酸性磷酸酶的变化。结果与对照组比较,(500、200、10)μg/m L调衡方多糖处理巨噬细胞后,巨噬细胞体积显著增大,对墨汁和金黄色葡萄球菌的吞噬能力均显著提高,酸性磷酸酶的活性也明显增强,并与多糖浓度呈正相关。结论调衡方多糖能增强巨噬细胞的吞噬功能,并提高细胞内酸性磷酸酶的活性。     

温针灸关元穴对小鼠补益作用的实验研究

本实验观察了关元穴对小鼠巨噬细胞吞噬能力、运动耐力和耐缺氧能力的影响，结果表明：温针、针刺和艾灸关元穴可显著增加小鼠巨噬细胞吞噬能力、运动耐力和耐缺氧能力，提示可提高机体免疫防御和适应调节能力，对机体有较强的补益作用。     

玉屏风散多糖对小鼠免疫功能的影响

目的分析玉屏风散多糖类成分对小鼠免疫功能的影响。方法用环磷酰胺制作免疫功能下降的小鼠模型;利用腹腔巨噬细胞吞噬实验观察药物对机体非特异性免疫产生的影响;采用溶血素抗体方法分析药物对体液免疫应答的影响;利用DNCB迟发型超敏实验,分析药物将对细胞免疫的影响;同时用ELISA法检测小鼠脾细胞IL-2的分泌量、肠道灌流液和呼吸道里面的IgA含量。结果玉屏风散总提取物和多糖类成分对上述各项指标均有明显增强效果;防风对于促进呼吸道和道肠道的IgA分泌有明显效果,而对细胞免疫的影响不大;白术只加强了巨噬细胞的吞噬能力。结论玉屏风散中的多糖类成分是发挥免疫干预作用的主要成分。