Ⅱ型肺泡上皮细胞的分离、纯化及原代培养(摘要)

Ⅱ型肺泡上皮细胞的分离、纯化及原代培养＊（摘要）曾庆富钱仲裴蒋海鹰（湖南医科大学病理学教研室，长沙４１００７８）本文报道了Ⅱ型肺泡上皮细胞（简称Ⅱ型细胞）的分离、纯化、鉴定和原代培养方法。选用ＳＤ大鼠，冲洗净肺内血液，肺泡灌洗尽量清除肺泡腔内巨噬细胞...     

不同甲状腺机能状态下大鼠胃肠道EC细胞的免疫组织化学研究

不同甲状腺机能状态下大鼠胃肠道ＥＣ细胞的免疫组织化学研究白咸勇贾秀红＊成令忠＊＊顾云娣＊＊钟翠平＊＊朱继红＊＊（滨州医学院组胚教研室＊儿科学教研室＊＊上海医科大学组胚教研室）Ｗｉｓｔａｒ大鼠（雌雄各半）１８只，随机分为３组：①实验性甲状腺机能亢进组（...     

大鼠颌下腺GnRH及其受体的免疫组织化学双标记及年龄变化的研究

大鼠颌下腺ＧｎＲＨ及其受体的免疫组织化学双标记及年龄变化的研究金花淑黄威权＊张金山＊文永植张崇理＊＊（延边医学院组织学与胚胎学教研室）（＊第四军医大学组织学与胚胎学教研室）（＊＊中科院动物研究所生殖生物学开放实验室）本实验用免疫组织化学法，研究了不同...     

HLA-DQA1、DQB1、DRB1 02,07,09等位基因及单倍型在华东地区汉族人群的分布

应用ＰＣＲ－ＳＳＯ方法，对华东地区汉族人群进行了ＨＬＡ－ＤＱＡ１、－ＤＱＢ１和ＤＲＢ１＊０２，０７，０９基因分型。ＤＱＡ１中以ＤＱＡ１＊０３０１基因频率最高（０．３８４４），其次为＊０５０１（０．１４０６）和０１０２（０．１２１９），＊０４０１最低（０．０２８１）；ＤＱＢ１中以ＤＱＢ１＊０３０３基因频率最高（０．２３４２），其次为＊０３０１（０．１８９９）、＊０６０１（０．１２０３）和＊０２０１（０．１１０８），＊０５０１、＊０６０４和＊０６０５最低（均为０．０１２７）；ＤＲ９基因频率较高（０．２３１０），ＤＲ２中ＤＲＢ１＊１５０１占７３％，基因频率为０．０８５４，未见＊１６０１。ＤＱＡ１、ＤＱＢ１及ＤＲＢ１等位基因之间存在显著的连锁不平衡。ＤＲＢ１＊０９０１－ＤＱＡ１＊０３０１－ＤＱＢ１＊０３０３、ＤＱＡ１＊０１０３－ＤＱＢ１＊０６０１等为常见单倍型。本资料与我国其他汉族人群资料有可比性，也存在一定差异。     

湖北土家族人群HLA-A、B等位基因及单倍型多态性的分布

目的研究湖北五峰县土家族190名无亲缘关系健康个体HLA-A、B等位基因及单倍型频率的分布，为进一步研究HLA基因多态性与疾病的关联奠定基础。方法采用序列分型（sequence-baaed typing，SBT）法对最具多态性的HIA-A、B基因2、3外显子进行了基因型分析，采用Arlequin软件对群体基因、单倍型频率进行最大估计值的计算。结果HLA-A、B等位基因符合Hardy-Weinberg平衡定律（P〉0．05），无显著的连锁不平衡现象，共检测出26个HLA-A等位基因及41个HLA-B等位基因，其中频率最高的为A＊0201（0．16053），A＊110101（0．14737），A＊24020101（0．14211），B＊4001（0．14737），B＊4601（0．13947），其次为A＊0207（0．08947），A＊0206（0．08158），B＊1301（0．07632），B＊5801（0．08947），B＊1501（0．09737），而大于0．05％的为A＊330301（0．05526），B＊1502（0．05526），B＊3501（0．05263），单倍型分布较普遍的为A＊0202-B＊4001（0．04196），A＊0201-B＊4601（0．03625）。结论采用高分辨测序分型法对土家族人群HLA-A、B等位基因进行分型的实验结果可做为湖北土家族人HLA-A、B等位基因、单倍型频率的群体资料，对进一步开展群体遗传学、临床器官移植、疾病关联、HLA遗传学特征、法医学、人类学等研究具有重要意义。     

用PCR—RFLP方法研究新疆地区汉族HLA—DQA1和—DQB1基因多态性

应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术，对新疆地区汉族健康群体进行了ＨＬＡ－ＤＱＡ１（４９人）和ＤＱＢ１（４７人）基因分型。在ＤＱＡ１１８个等位基因中，ＤＱＡ１＊０３０１的基因频率最高（３２．５６％），＊０４０１最低（１．０２％）。在ＤＱＢ１１６个等位基因中，ＤＱＢ１＊０２０１（２０．２１％），＊０３０１（１５．９６％）、＊０３０３（１４．８９％）为最常见；没有观察到＊０５０３２、＊０５０４和＊０６０５。与河北     

HLA高分辨等位基因与骨髓移植受者HCMV抗原血症研究

目的 分析HLA高分辨等位基因与骨髓移植术后HCMVpp65抗原血症的相关性.方法 选取2009年2月至2010年10月在我院行骨髓移植术患者48例;采用免疫组化方法检测患者HCMVpp65,采用直接测序分型方法（PCR-SBT）检测患者HLA-A＊1101、HLA-A＊0201、HLA-A＊2402、HLA-B＊4001、HLA-DRB1＊0901五个高分辨等位基因.结果 ①48例骨髓移植术后患者HCMV感染率100％;②HLA-A＊1101、HLA-A＊0201、HLA-A＊2402、HLA-B＊ 4001等位基因阳性率在pp65抗原血症12例低感染组和36例高感染组中比较没有统计学意义（P＞0.05）,其阳性率HLA-A＊1101为33.3％ （8/24）和20.8％ （15/72）、HLA-A＊0201为4.2％ （1/24）和13.9％ （10/72）、HLA-A＊ 2402为12.5％ （3/24）和19.4％ （14/72）、HLA-B＊ 4001 16.7％ （4/24）和12.5％ （9/72）;③HLA-DRB1＊0901等位基因阳性率在pp65抗原血症12例低感染组和36例高感染组中比较有统计学意义（P =0.048）,其阳性率为4.2％ （1/24）和19.4％ （14/72）;④HLA-DRB1＊0901组患者pp65抗原血症高于HLA-A＊2402组（P =0.007）和HLA-A＊1101组患者（P=0.028）,HLA-A＊0201组患者pp65抗原血症高于HLA-A＊2402组患者（P=0.02）,其他高分辨等位基因组之间pp65抗原血症差异没有统计学意义（P＞0.05）.结论 HLA-DRB1＊0901等位基因可能与骨髓移植术后患者发生高HCMVpp65抗原血症有关;HLA-A＊2402等位基因可能与骨髓移植术后患者发生低HCMVpp65抗原血症有关.     

HLA—DR基因多态性与广东汉族泛发型白癜风患者的相关性研究

目的研究广东籍汉族泛发型白癜风患者与HIA—DR的相关性。方法采用聚合酶链反应一序列特异性引物（PCR．SSP）技术，对30例广东籍汉族泛发型白癜风患者和30例健康对照者静脉血样本HLA-DR等位基因多态性进行研究。结果泛发型白癜风患者DRB1^＊0701等位基因频率显著升高（RR=5．216，PC〈0．05），DRw52（DRB3^＊0101／02DRB3^＊0201DRB3^＊0301）、DRw53（DRB4^＊0101／03／05）和DRw51（DRB5^＊0101／02DRB5^＊0202）基因频率明显低于正常组，以上三者两组间比较均有显著性差异（PC〈0．05）。结论HIJA—DRB1^＊0701等位基因可能与广东籍汉族泛发型白癜风的发病有关，而DRw52（DRB3^＊0101／02DRB3^＊0201DRB3^＊0301）、DRw53（DRB4^＊0101／03／05）和DRw51（DRB5^＊0101／02DRB5^＊0202）对泛发型白癜风发病可能有一定保护作用。     

用聚合酶链反应-直接测序分型法研究江苏汉族人群HLA-DQA1和DQB1基因多态性

目的检测江苏地区汉族人群HLA-DQA1和DQB1等位基因及单倍型的频率，分析该人群DQA1、DQB1基因多态性和DQA1-DQB1单倍型特点。方法应用聚合酶链反应-直接测序分型法（PCR-sequence-based typing ，PCR-SBT）方法对100名健康、无血缘关系的江苏汉族人群的HLA-DQA1和DQB1进行基因分型。结果共检出7个DQA1等位基因和13个DQB1等位基因。DQA1等位基因中，DQA1＊0301／02／03的基因频率最高（29．5％），其次为DQA1＊0501（18．5％）、DQA1＊0102（17．0％）、DQA1＊0201（12．5％）；DQB1等位基因中，DQB1＊0201／02（21．5％）、DQB1＊0301／09（14．5％）、DQB1＊0303（13．5％）和DQB1＊0603（11．5％）最为常见。分析得出30种DQA1-DQB1单倍型，DQA1＊0301／02／03-DQB1＊0303（12．5％）、DQA1＊0201．DOB1＊0201／02（10．5％）、DQA1＊0501-DQB1＊0201／02（9．5％）、DQA1＊0501-DQB1＊0301／09（7．0％）为常见的单倍型。结论江苏汉族人群HLA-DQA1和DQB1基因具有较为丰富的多态性，基因频率分布具有中国北方群体的特征且具有一定的独特性。     

干扰素和卡介苗对大鼠肝癌发生的影响

干扰素和卡介苗对大鼠肝癌发生的影响白咸勇贾秀红＊成令忠＊＊顾云娣＊＊钟翠平＊＊朱继红＊＊（滨州医学院组胚教研室＊儿科学教研室＊＊上海医科大学组胚教研室）雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠６０只，体重１５０～２００ｇ，饲以含二乙基亚硝胺（ＤＥＮ，８０ｐｐｍ／ｍｌ）的...     

用核酸序列测定1型糖尿病HLA-DPB1和DQB1第2外显子基因

目的 研究山东省汉族1型糖尿病与HLA－DPB1和HLA－DQB1等位基因的相关性。方法 采用基于核酸序列测定的基因分型技术对52例1型糖尿病患者及38例正常对照进行了DPB1和DQB1基因分析。结果 DPB1＊2201（P＜0．01）和DQB1＊0201（P＜0．01）、＊0303（P＜0．05）及＊0604（P＜0．05）等位基因频率在糖尿病患者组显著高于对照组,而PB1＊0402（P＜0．01）和DQB1＊0301（P＜0．01）等位基因在糖尿病患者组显著低于对照组。结论 DPB1＊2201和DQB1＊0201、＊0303及＊0604等位基因可能是山东省汉族1型糖尿病的易感性等位基因,而DPB1＊0402和DQB1＊0301等位基因可能是山东省汉族1型糖尿病的保护性等位基因。     

KIR及HLA-A、B基因多态性与急性淋巴细胞白血病的相关性

目的探讨急性淋巴细胞白血病患者的杀伤细胞免疫球蛋白样受体（killer cell immunoglobulin-like receptors,KIR）和人类白细胞抗原（human leukocyte antigen,HLA）HLA-A、B等位基因多态性。方法采用Luminex流式技术-序列特异性寡核苷酸探针反向杂交（flow cytometry-sequence specific oligonucleotide probe,FLOW-SSOP）方法对内蒙地区48例急性淋巴细胞白血病患者HLA-A、B等位基因多态性进行分析,PCR-SSP技术进行KIR抑制基因的低分辨率检测。以北方地区健康群体资料作为正常对照。结果 （1）在急性淋巴细胞白血病中HLA-A＊31XX,A＊6901等位基因频率高于对照组（1.955%,0.071%）,差异有统计学意义（P〈0.05）;A＊33XX等位基因频率低于对照组（5.825%）,差异有统计意义（P〈0.05）;（2）在HLA-B等位基因中,急性淋巴细胞白血病B＊07XX,＊27XX,＊38XX,＊41XX,＊49XX,＊59XX等位基因频率高于对照组（2.069%,0.968%,0.702%,0.091%,0.051%,0.061%）,差异有统计学意义（P〈0.05）;其中HLA-B＊59XX的相对危险度高（RR=35.156）,其它等位基因频率在两组之间无显著性差异。在急性白血病患者中,高频率KIR基因有KIR3DP1,2DP1,2DL1,2DL3,3DL1、2DL5,2DS4及3DS1。急性白血病组3DL1基因型频率比对照组的显著降低。结论 HLA-A＊31XX,A＊6901;B＊07XX,B＊27XX,B＊38XX,B＊41XX,B＊49XX,B＊59XX;等位基因与ALL相关联,有遗传易感作用。HLA-B＊59XX等位基因携带者,可能患ALL的危险度增高（RR=35.156）KIR3DL1和2DS4均与ALL呈关联。     

人表皮细胞体外培养方法的改进

人表皮细胞体外培养方法的改进张慧敏郝振林＊王东霞＊（沈阳医学院附属中心医院医学实验科，烧伤科＊沈阳１１００２４）张志芬王连璞＊＊（沈阳医学院生化教研室，解剖教研室＊＊沈阳１１００３１）表皮细胞体外培养技术的建立和发展对于烧伤治疗、皮肤病学研究等方面，...     

肠出血性大肠埃希菌0157:H7型检测方法的建立

肠出血性大肠埃希菌（＊＊＊C）0157：＊7血清型除引起肠出血性结肠炎（HC）易误诊为痢疾外,10％左右患者可出现溶血性尿毒综合征（HUS）和血栓性血小板减少性紫癫汀P）而危及生命。自1982年美国首次暴发＊C,并分离出0157：H7以来,发达国家中暴发流行此起彼伏（’］,已成为一种危害严重的传染病而引起各国政府的高度重视。我国近年来也时有发病（”。因此,我们建立了一种快速、敏感、特异检测粪便标本中＊＊＊C0157：＊7的SPA协同凝集试验,以供临床检验诊断急用。当前,国内外对EHEC的实验室诊断方法,有乳胶凝集试验（LAT）t…     

二尖瓣狭窄并房颤患者的最优心率预测及其临床应用

由超声心动图测得的参量可以得到风湿性二尖瓣狭窄（ＭＳ）并房颤（ＡＦ）患者心输出量（ＣＯ）与心率的关系ＣＯ（ＨＲ）＝Ａ＊［６０＊（ａ＋ｂ＊／Ｔｉ）－（１８００＊ｂ／ＨＲ＋ＨＲ＊ｂ＊Ｔｉ２／２＋ａ＊ＨＲ＊Ｔｉ］及最优心率（ＨＲｏｐ）公式ＨＲｏｐ＝６０／Ｔｉ２＋２＊ａ＊Ｔｉ／ｂ）１／２式中Ａ是二尖瓣开口面积，ｃｍ２，ａ是通过二尖瓣的血流峰速度，ｃｍ／ｓ，ｂ是通过二尖瓣的血流减速度，ｃｍ／ｓ２，Ｔｉ是左室初始充盈时间。由计算机寻优求得了对应于是优心率的最大心输出量（ＭＣＯ）及对应于最大心输出生的９５％及９８％的心率高低值（Ｒ＋及Ｒ一），它可用以指导临床用药调节病人心率到上述心率范围，以获得接近于ＭＣＯ的实际心输出量。结果表明临床效果是满意的，２４个病例中的２１例（８７．５％）得到改善。     

分泌抗MCG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

分泌抗ＭＣＧ单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立周昌奎蓝兰张云峰＊＊（福建省计划生育科学技术研究所，福州３５００１１＊福建省立医院生物治疗中心＊＊福建省福港生物工程研究中心）谢弘王放（中国科学院上海细胞生物学研究所，上海２０００３１）以苯甲酸－丙酮一步法，从...     

用干扰素-β1b治疗多发硬化症可减少TNF-α及增加IL-6的分泌

多发硬化（MutipleSclerosisMS）目前被认为是T细胞介导的中枢神经系统慢性自身免疫脱髓鞘疾病，病程为缓解复发，慢性进行性加重，终至功能丧失。在病变发展过程中．细胞因子发挥了重要作用。肿瘤坏死因于一a（TNF－a）、白介素一6（11。－6）等均可促进此免疫反应导致脱髓鞘。干扰索一Bib（INF－plb）可抑制此免疫反应，促进创伤的修复。检测了复发缓解型MS（RelaPsing－RemittingMS，＊＊＊S）病人1＊卜用b治疗前后外周血单核细胞（＊＊－NCS）；检测OKT3（抗一CD3）单克隆抗体（M。Ah）及ConA刺激后的PMNCs增殖及细胞因…     

中国广东法区汉族补体C4遗传多态性分析

采用国际补体参考实验方法，分析了广东地区３１９例无血缘关系汉族人Ｃ４多态性。共检出５个Ｃ４Ａ和８个Ｃ４Ｂ同种异型：Ｃ４Ａ５、４、３、２及Ｑ０及Ｃ４Ｂ５１４、２、１、９１、９６、９５、及Ｑ０。Ｃ４Ａ以Ａ＾＊３频率（０。６５３８）最高，Ａ＾＊Ｑ０（０．１３９４）及Ａ＾＊２（０．１３９４）及Ａ＾＊２（０．０４１７）次之。Ｃ４Ｂ以Ｂ＾＊２（０．４４０７）和Ｂ＾＊１（０．４１０３）最高，Ｂ＾＊Ｑ０（０．０９     

磁共振检测重型β-地中海贫血患者内分泌腺体铁过载的临床意义

目的 联合肝脏、胰腺、垂体磁共振T2-star（MRI T2＊）评估重型β-地中海贫血（β-TM）患者相关脏器铁过载的临床意义,分析去铁酮治疗前后的肝脏、胰腺、垂体MRI T2＊变化的临床意义。方法 选择长期（输血史≥ 1年,输血次数＞ 10 次）治疗β-TM患者中选择年龄≥ 10岁26例,其中男性7例,女性19例。2010年7月 ～ 2011年7月规律输血,仅口服去铁酮去铁治疗,治疗前、服用去铁酮满1年时分别赴香港威尔斯亲王医院进行胰腺MRI T2＊（胰腺T2＊）、肝脏MRI T2＊（肝脏T2＊）、垂体MRI T2＊（垂体T2＊）检测。结果 服用去铁酮治疗前,肝脏铁浓度（LIC）（22.42 ± 7.21） mg/g;服用去铁酮满1年时,肝脏LIC（21.46 ± 7.69） mg/g。治疗前后肝脏、胰腺、垂体MRI T2＊值[（1.48 ± 1.23） ms vs （1.55 ± 1.18） ms,（9.09 ± 9.96） ms vs （9.51 ± 13.0） ms,（9.74 ± 4.46） ms vs （10.14 ± 4.76） ms]比较,差异无明显统计学意义（P 〉 0.05）。治疗前后肝脏与胰腺MRI T2＊值均呈正相关（P 〈 0.05）;治疗前后LIC与胰腺T2＊值均呈负相关（P 〈 0.05）。肝脏与垂体、胰腺与垂体MRI T2＊值治疗前后均不相关（P 〉 0.05）。年龄与肝脏、胰腺及垂体的MRI T2＊值无相关关系（P 〉 0.05）。结论 MRI T2＊可以作为评估β-TM患者胰腺、垂体铁负荷有效、安全的检测工具;可通过肝脏铁负荷来推测胰腺铁负荷,胰腺铁负荷与年龄无关;但肝脏负荷并不能作为垂体铁负荷的推测手段。去铁酮的临床疗效难以定论,有待进一步研究。     

睫状神经营养因子在大鼠脑干中的分布

睫状神经营养因子在大鼠脑干中的分布杨青峰＊伯音周长满＊＊万选才＊范明（军事医学科学院基础所＊＊解放军北京高等医学专科学校解剖教研室＊中国医学科学院基础所解剖教研室）本研究以重组表达并经纯化的人睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）免疫家兔，得到抗人ＣＮＴＦ的...