重症急性胰腺炎大鼠甲状腺滤泡上皮细胞功能和超微结构的变化

<正>目的:观察重症急性胰腺炎(SAP)时甲状腺滤泡上皮细胞超微结构和功能变化。方法:雄性Wistar大鼠40只,体重200～250g,随机分为假手术组(SO组)、SAP模型1、3、6、12h组。胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型。采用全自动生化分析仪及放射免疫分析法测定淀粉酶(AMY)、磷脂酶A2(sPLA2)、T3、T4、FT3、FT4水平。心脏抽血后分离甲状腺腺叶组织,一部分以4%多聚甲醛固定后石蜡包埋、HE染色,光学显微镜镜观察组织学改变,另一部分2.5%戊二醛前固定、1%锇酸后固定、梯度酒精脱水后,行电镜观察滤泡上皮细胞超微结构改变。     

重症急性胰腺炎大鼠胰腺内分泌功能研究

目的:观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺内分泌功能的变化。方法:雄性Wistar大鼠48只,随机分为假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组),每组24只。以胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型。成模术后3h、6h、12h分批心脏取血后处死大鼠。肉眼观察胰腺大体形态,显微镜下观察胰头部组织病理学变化并评分,并平行检测各组各时间点血清淀粉酶(AMY)、胰岛素(INS)、C-肽(CP)和胰高血糖素(GG)水平。结果:SAP大鼠随成模时间延长胰腺外分泌部损伤逐渐加重,并在12h达高峰,但内分泌部胰岛仅在12h出现形态学变化。SAP组大鼠成模3h、6h和12h血清INS和CP水平均较SO组升高,差异有统计学意义(P<0.05);6h和12h血清GG与SO组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SAP大鼠存在胰腺内分泌部损伤,表现为分泌激素水平紊乱。     

丹参注射液对高脂血症合并重症急性胰腺炎大鼠胰腺血流量和组织病理改变的影响

目的:观察丹参注射液对高脂血症合并重症急性胰腺炎大鼠(SAP)胰腺局部血流量和组织病理改变的影响。方法:32只雄性SPF级大鼠随机分为普通饮食空白组(SO组,普通饲料喂养)、高脂血症组(HL组,高脂饮食喂饲建立高脂血症模型)、高脂+SAP组(HAP组,高脂血症模型建模成功后再建SAP模型)、高脂+SAP+丹参治疗组(SM组,在HAP组基础上加用丹参注射液干预),每组各8只大鼠。应用多普勒超声检测系统测定各组胰腺局部血流量,下腔静脉取血测定各组血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及淀粉酶(AMY)水平,取各组大鼠胰腺行HE染色,观察组织病理学改变,并行病理评分。结果:HL组大鼠胰腺局部血流量明显低于SO组,HAP组更低(P0.01),而SM组明显高于HAP组(P0.01)。HL组和/或HAP组大鼠AMY、TC、TG水平明显高于SO组,SM组则显著降低(P0.01)。HL组和HAP组胰腺组织分别出现脂肪组织增生、腺泡坏死、出血及炎性细胞浸润、胰腺病理评分显著升高(P0.01),而SM组的上述病理组织学变化缓解,胰腺病理评分也明显下降(P0.01)。结论:丹参注射液能够改善高脂血症合并SAP大鼠的胰腺血流状况和组织病理学变化。     

1α-羟化酶在重症急性胰腺炎大鼠肾脏中的表达及意义

<正>目的:观察1α-羟化酶在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾脏组织中的表达规律及其意义。方法:48只Wistar大鼠随机分为两组:假手术组(SO组)和SAP组,每组再继续分为四个亚组,每组6只(n=6)。采用5%牛磺胆酸钠(STC)逆行胰胆管注射法建立SAP模型。分别于造模后1、3、6及12h分别心脏采血,测定血清淀粉酶、肌酐及尿素氮水平;取胰腺及肾脏组织固定,HE染色后,光镜观察胰腺和肾脏组织病理变化,并以Western Blotting法对肾脏组织中1α-羟化酶的表达水平和趋势进行分析。     

瑞香素预处理对重症急性胰腺炎大鼠的抗氧化保护作用

目的:观察瑞香素预处理对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织中丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)活性及一氧化氮(NO)的影响,探讨瑞香素在SAP中的抗氧化保护作用。方法:雄性Wistar大鼠72只,随机分为四组:假手术组(SO组)、SAP组、瑞香素预处理组(D-SAP组)、瑞香素药物对照组(D-SO组),每组18只。各组均用10%水合氯醛腹腔注射麻醉(0.3ml/100g)。SAP组和D-SAP组采用5%牛磺胆酸钠(1ml/kg)沿胰胆管逆行穿刺注射建立SAP模型。SO组和D-SO组与SAP造模程序相同,但用等量生理盐水代替5%牛磺胆酸钠注入胰胆管。D-SAP组和D-SO组于手术前30min给予瑞香素4mg/kg腹腔内注射。分别在术后3、6、12h分批处死各组大鼠各6只,检测血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIP)活性和胰腺组织MDA、MPO活性及NO含量,并进行HE染色观察大鼠术后12h时胰腺病理损伤程度。结果:D-SAP组大鼠血清AMY、LIP活性以及胰腺组织MDA含量、MPO活性和病理学评分较SAP明显降低(P0.01),但NO水平较SAP组明显升高(P0.01),SO组与D-SO组间各指标无统计学差异(P0.05)。结论:瑞香素预处理对SAP大鼠胰腺损伤具有明显的抗氧化保护作用。     

D-半乳糖胺肝损伤期间甲状腺的组织化学和免疫组织化学变化

用雄性大鼠72只(体重180～250 g),随机为6批。每批12只,分为2组:1.给药组(6只)腹腔1次注射D-半乳糖胺600 mg/kg;2.对照组(6只)腹腔注射等量生理盐水。6批大鼠分别在给药后第1、2、3、5、7和10天取材。将右侧甲状腺固定于Bouin液内,每批两组甲状腺,埋入同一蜡块,制成6μm厚的石蜡连续片。取相邻切片分别进行HE染色、PAS反应、棓花青明矾染色和免疫组织化学PAP法显示T_3和T_4,并对甲状腺滤泡上皮细胞内的胶体小滴数量、滤泡腔内T免疫反应物的含量,分别作半定量分析。左侧甲状腺立即投入液氮骤冷。每批两组大鼠的甲状腺冻结在同一冰托上,恒冷箱切片,厚8μm,进行组织     

N-乙酰半胱氨酸对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤作用的实验研究

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的作用。方法:雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组(SO组)、SAP组、NAC组。胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型,造模后30min腹腔注射5%NAC(0.2ml/100g)干预SAP模型,12h后处死大鼠。检测各组血清淀粉酶(AMY)、肺组织髓过氧化物酶(MPO)、胰腺和肺组织病理学评分、肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA表达的变化。结果:与SO组比较,SAP组AMY、MPO、胰腺和肺组织病理学评分明显升高(P<0.01),TNF-α和ICAM-1mRNA表达明显增强(P<0.01);应用NAC处理后,AMY和MPO水平下降,胰腺和肺组织损伤缓解,TNF-α和ICAM-1mRNA表达减弱,与SAP组有明显差异(P<0.01)。结论:NAC对SAP大鼠肺损伤具有保护作用,其机制可能与抑制肺组织TNF-α和ICAM-1mRNA的表达有关。     

糖尿病大鼠甲状腺组织超微结构的病理变化及胰岛素、氨基胍的干预作用

目的 探讨糖尿病（DM）大鼠甲状腺组织超微结构的病理变化及胰岛素、氨基胍的干预作用。 方法链脲佐菌素制备DM模型大鼠87只,随机分为DM组27只、胰岛素干预组32只、氨基胍干预组28只,成模12周、20周末杀检,取甲状腺组织行超微病理检查。另取25只正常Wistar大鼠作正常对照。 结果 DM大鼠甲状腺滤泡上皮细胞呈扁平状,微绒毛缺失,粗面内质网扩张呈不规则囊泡状,未见胞饮泡,偶见初级和次级溶酶体。滤泡腔扩大,腔内类胶质电子密度较高。间质水肿,微血管基底板阶段性增厚,可见蛋白样物质沉积,呈细颗粒状、云絮状或均质状。甲状腺滤泡旁细胞增多,胞质内含内分泌颗粒较少。胰岛素和氨基胍干预组甲状腺组织超微结构较DM组有不同程度的减轻。 结论 DM大鼠甲状腺滤泡上皮细胞呈功能低下的表现,滤泡腔间质有大量蛋白样物质沉积,甲状腺滤泡旁细胞增多可能与高血糖毒性的作用有关。胰岛素和氨基胍干预有一定的治疗作用。     

罗格列酮对重症急性胰腺炎胰岛β细胞的作用

<正>目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(Peroxisome Proliferator-Activated Receptors-γ,PPAR-γ)激动剂罗格列酮对重症急性胰腺炎大鼠胰岛β细胞的作用。方法:雄性SPF级Wistar大鼠36只、体重200～250g。随机分为假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)和罗格列酮预处理组(ROSI组),每组12只大鼠。胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠(0.1ml/100g)制备SAP模型。SO组仅翻动十二指肠和胰腺后关腹。     

STAT-1对急性胰腺炎大鼠胰腺组织ICAM-1表达的影响

目的:探讨信号转导与转录激活因子-1(STAT-1)在大鼠急性胰腺炎胰腺组织中不同时间点的变化及对细胞黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:36只Wistar大鼠随机分为假手术组(SO组)和急性胰腺炎模型组(AP组)。胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备急性胰腺炎模型。造模后3、6、12h取材,同时观察胰腺组织病理评分,免疫组化SABC法检测不同时间点胰腺组织磷酸化STAT-1和ICAM-1的表达。结果:AP组各时间点胰腺病理评分、磷酸化STAT-1和ICAM-1的表达明显高于SO组(P<0.01);AP组磷酸化STAT-1表达在3h达高峰,后逐渐下降;ICAM-1阳性表达随时间延长逐渐增强,12h达高峰。结论:胰腺炎大鼠胰腺组织STAT-1的活化直接或间接上调ICAM-1的表达可能在其发病过程中起到一定的作用。     

PI3K/AKT/NF-κb信号转导途径对重症急性胰腺炎大鼠肾上腺损伤的作用机制

<正>目的:探讨PI3K/AKT/NF-κb信号转导途径在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾上腺损伤中的机制。方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(SO组,10只)和SAP组(40只,其中3、6、12及24h4个时相各10只)。SO组开腹后仅翻动胰腺即关腹,SAP组则经胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型。测定SO组术后12h和SAP组造模后3、6、12h及24h的腹水量、血清淀粉酶(AMY)及谷氨酸氨基转移酶(ALT)水平。并于光镜下进行胰腺和肾上腺组织病理学评分。用Western Blotting法检测肾上腺蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(P-AKT)、核因子κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白的表达。     

不同剂量花姜酮对大鼠重症急性胰腺炎的影响

目的:探讨花姜酮( Zerumbone)静脉给药对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)的治疗作用。方法:雄性Wistar大鼠50只,随机分为5组:假手术组(SO组)、SAP模型组(SAP组)、5mg/kg花姜酮预处理组(5mg/kg花姜酮组)、10mg/kg花姜酮预处理组(10mg/kg花姜酮组)、20 mg/kg花姜酮预处理组(20mg/kg花姜酮组)。胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型。SO组、SAP组造模前30 min股静脉注射10%二甲基亚砜(DMSO)(2ml/kg),余三组注射等量10%DMSO溶解的等体积、不同浓度花姜酮。术后12h心脏取血检测各组血清淀粉酶(AMY),谷氨酸氨基转移酶(ALT),血肌酐(Cr)浓度变化,并观察胰腺组织病理学改变。结果:与SAP组比较,5 mg/kg花姜酮组AMY和胰腺病理评分没有改变,ALT和Cr有改善(P0.05);10mg/kg花姜酮组上述指标较SAP组显著降低(P0.05);20mg/kg花姜酮组AMY、Cr和胰腺组织病理学评分较SAP组显著降低(P0.05),但ALT与SAP组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:花姜酮治疗大鼠SAP,以10 mg/kg静脉注射比较安全、有效。     

PARP及NF-κB在重症急性胰腺炎大鼠腺垂体中的表达

<正>目的:观察聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)及核因子κB(NF-κB)在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠腺垂体中的表达及对腺垂体损伤的作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为五组:假手术组(SO组)及SAP1、3、6、12h组。胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型。测定腹水量、血清淀粉酶、脂肪酶水平;光镜观察胰腺及垂体病理改变;电镜观察垂体超微结构改变;免疫组化观察垂体PARP及NF-κB的表达。结果:SAP组血清淀粉酶、脂肪酶水平及胰腺病理学评分逐渐增加,均较SO组明显升高(P<0.05)。     

趋化因子Fractalkine在大鼠重症急性胰腺炎中的作用及乌司他丁的干预效应

目的: 探讨趋化因子fractalkine(FKN)在重症急性胰腺炎(SAP)发病过程中的作用及乌司他丁(UT)的干预效应。方法: SD大鼠72只随机分为SAP组、乌司他丁治疗(SAP+UT)组和对照组(control),用4%牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射建立大鼠模型,SAP+UT组在建立模型后立即注射UT进行干预治疗,用ELISA法测定3组大鼠不同时点血清中FKN水平的变化;实时荧光定量PCR检测胰腺和肺组织不同时点FKN mRNA的表达水平;病理组织切片检查各时点胰腺和肺组织的病理变化。结果: SAP组血清中FKN水平随时间的延长逐渐增强,3 h后各时点血清FKN水平高于对照组(P<0.05),SAP+UT组与对照组相比,各时点均无差异,6 h后SAP组与SAP+UT组血清FKN水平差异显著(P<0.05);SAP组术后胰腺组织FKN mRNA的表达随时间延长逐渐增加,术后1 h与对照组无明显差异(P>0.05),3h表达高于对照组(P<0.05),6 h和12 h表达显著高于对照组(P<0.01);SAP组术后肺组织FKN mRNA的表达随时间变化逐渐升高,术后1 h与对照组相比无显著差异,3 h、6 h和12 h表达显著高于对照组(P<0.01);病理组织切片检查显示SAP+UT组各时点与SAP组相比较,胰腺病理损伤显著减轻。结论: FKN可能在SAP发病过程及与SAP相关的急性肺损伤中发挥重要作用;UT能有效干预SAP及SAP相关的急性肺损伤,其机制可能与抑制趋化因子FKN的表达有关。     

水通道蛋白-4在大鼠甲状腺中的表达

目的:观察水通道蛋白-4(AQP4)在甲状腺滤泡细胞的表达和分布特点,为研究甲状腺内分泌及调节机制提供形态学基础。方法:利用免疫组织化学、免疫荧光组织化学和原位杂交组织化学技术,检测大鼠AQP4及其mRNA在甲状腺滤泡上皮细胞的表达。结果:免疫组织化学和免疫荧光组织化学显示,AQP4在甲状腺滤泡上皮细胞膜上有表达,而在上皮细胞基底面和管腔面表达更为明显;原位杂交组织化学显示AQP4 mRNA在上皮细胞中表达明显。结论:AQP4在甲状腺的表达和分布特点,提示其参与了甲状腺素的合成和分泌过程中渗透压的精细调节作用。     

大黄素对重症急性胰腺炎大鼠肺半胱氨酸蛋白酶-1的影响

目的:观察大黄素对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺组织的影响,以及对肺内半胱氨酸蛋白酶Casepase-1的影响。方法:胰腺被膜下均匀注射3%牛磺胆酸钠制备SAP模型,小肠内注射大黄素(25mg.kg-1)给药,分光光度计法检测血浆淀粉酶,HE染色观察肺组织炎性反应情况,免疫组化染色观察肺内Casepase-1表达情况。结果:SAP组淀粉酶较正常组高,且随时间而加重;在各时间点,大黄素给药组淀粉酶较SAP组降低(P<0.05);SAP组肺组织炎症反应随时间明显加重,大黄素治疗组肺组织炎症评分低于SAP组(P<0.05);结论:大黄素可减轻重症急性胰腺炎肺炎症反应并且负性调节前炎症因子Caspase-1的表达。     

心理应激对大鼠甲状腺内分泌细胞的影响

<正> 任何因素使机体产生应激反应都有可能导致机体内分泌功能的改变,引致各种疾病发生.为探讨心理因素对甲状腺内分泌细胞的影响,本实验采用心理应激动物模型:健康雄性成年SD大鼠,随机等分成A、B、C三组,另设正常对照组.分别给予A组:有规律电刺激,前或后加无规律闪光刺激B组:有规律电刺激,加有规律闪光刺激;C组:仅给予无规律闪光刺激.持续6天,第7天晨各组动物仅按先前方式给予闪光刺激后,常规灌流固定,取甲状腺作石蜡包埋切片,采用免疫组化ABC法,检测各组甲状腺滤泡上皮细胞甲状腺球蛋白免疫反应阳性细胞的变化,同时取部分切片作HE染色对照,并以体视学参数进行定量分析.结果:正常组甲状腺滤泡上皮细胞甲状腺球蛋白阳性细胞数目多,呈清晰可辩的单层立方上皮,少数为柱状上皮,细胞密度大,胞质呈深棕色,胞核不着色或淡黄色;应激组阳性细胞明显减少,且呈区域性分布,滤泡上皮细胞以扁平为主,胞核也为扁平形.而不同就激条件下A、B、C三组免疫反应阳性细胞的数量、形态、阳性反应强弱也均有明显的组间差异,以A组     

支松果体大鼠甲状腺形态和机能的变化

观察了去松果体大鼠甲状腺形态和甲状腺激素分泌功能的变化。结果如下（１）去松果体后 １天和１０天，大鼠血清甲状腺激素水平升高；（２）去松果体后１天，大鼠甲状腺滤泡上皮细胞吞噬的胶体颗粒明显增长；（３）去松果体后１０天，大鼠甲状腺滤泡变小，滤泡上皮细胞体积增大，数量增多。     

急性坏死性胰腺炎大鼠垂体功能和结构的变化

目的:观察大鼠垂体组织结构及功能在急性坏死性胰腺炎(ANP)时的变化情况。方法:雄性SD大鼠72只,随机分为正常对照组(N组),假手术(SO)1h、3h、6h、12h组,ANP1h、3h、6h、12h组,每组8只大鼠。ANP组大鼠采取逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠制备ANP模型,各组大鼠于造模后相应时间点通过下腔静脉采取血液,随后摘取胰腺和垂体组织。全自动生化仪检测大鼠血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIP)水平,放射免疫分析法测定血清生长激素(GH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、促甲状腺激素(TSH)及促卵泡激素(FSH)水平,光镜下观察胰腺组织、垂体组织的病理学改变并比较组间差异。结果:N组与SO各组相比,除ACTH外,其余各指标差异均无统计学意义(P0.05);与N组和SO各组比较,ANP各组相应时间点血清AMY、LIP水平明显升高(P0.05);血清GH水平差异无统计学意义(P0.05);6h和12h组ACTH、TSH水平明显降低(P0.05),1h和3h组ACTH、TSH水平无统计学差异(P0.05);1h、6h和12h组FSH水平明显降低(P0.05),3h组FSH水平差异无统计学意义(P0.05)。光镜下,ANP 12h组胰腺病理损伤较SO 12h组明显加重(P0.05),且ANP 12h组垂体组织充血情况较SO 12h组明显加重(P0.05)。结论:ANP时,除胰腺外,大鼠垂体组织亦出现损伤及功能改变。     

花姜酮对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤的保护作用

目的:探讨花姜酮对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝损伤的保护作用。方法:70只Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组(SO组,n=10);重症急性胰腺炎组(SAP组,n=40);花姜酮(ZER)预处理组(ZER组,n=10),ZER药物对照组(ZER-CON,n=10)。其中SAP组又分为造模1h、3h、6h、12h四个时间亚组(n均=10)。SAP组及ZER组大鼠采用胆胰管逆行注射5%硫磺胆酸钠(STC)溶液(1ml/100Kg)造模;SO组及ZER-CON组则向胆胰管注入等量生理盐水。ZER组及ZER-CON组于造模前30min由股静脉注射10mg/Kg的ZER溶液。比较各组大鼠于造模12h死亡情况、腹水量、血清淀粉酶(AMY)、磷脂酶(PLA2)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平以及胰腺肝脏组织病理学评分(分级)。结果:ZER-CON组大鼠死亡率、腹水量、AMY、PLA2、ALT、AST水平以及胰腺和肝脏组织病理学评分(分级)与SO组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。SAP组上述指标明显高于SO组,差异有统计学意义(均P0.05)。ZER组上述指标与SAP组相比明显降低(均P0.05),但均高于SO组和ZER CON组(P0.05)。结论:ZER对SAP大鼠肝脏损伤具有一定的保护作用。