细胞凋亡的分子机制研究进展

细胞凋亡(Apoptosis)的分子机制尚不清楚,本文从影响细胞凋亡的因素、细胞凋亡相关基因及其调节和细胞凋亡发生的代谢改变等几个方面。以细胞凋亡相关基因为重点,对细胞凋亡的分子机制加以阐述,以期进一步阐明细胞凋亡的分子机理。     

细胞凋亡相关基因研究进展

细胞凋亡研究已成为当今国内外研究的新热点,本文就近年来有关与细胞凋亡相关的基因或因子研究的进展做一综述,着重阐述了bcl-2、myc、p53和APO-l/Fas以及TGFβ_1等对细胞 凋亡的影响和作用,以期有助于进一步揭示细胞凋亡的分子机理。     

Bcl-2在细胞凋亡调控和肿瘤耐药形成中的作用及其分子机制

细胞凋亡是目前细胞生物学研究热点之一。作为一种细胞内源性基因调控下的生理性细胞死亡方式，其过程发生障碍不仅是肿瘤发生的主要机制之一，而且也与肿瘤治疗和耐药性的形成密切相关。研究表明，ｂｃｌ－２基因的表达和调控是影响细胞凋亡的关键环节。本文对Ｂｃｌ－２在细胞凋亡调控和肿瘤耐药形成中的作用及其分子机制作一综述。     

牛磺酸对家兔缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响

研究表明，牛磺酸（laurine,Tan）对心面缺血再灌注损伤有防护作用，但其确切的机制尚不十分清楚，心肌缺血损伤除引起心肌细胞坏死外，也可诱发心肌细胞的凋亡，近几年的研究表明，细胞凋亡受多种因素调控，其中以细胞凋亡相关基因蛋白（如Bcl-2，Bax和Fas等）的作用较为重要；但牛磺酸对家兔心肌缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡有何影响，以及是否凋控凋亡相关基因的表达，     

冬虫夏草调节细胞凋亡机制的研究进展

冬虫夏草是我国特有名贵中药材,具有广谱的抗肿瘤作用,诱导肿瘤细胞凋亡是其主要机制之一;冬虫夏草对糖尿病等疾病具有一定的疗效作用也与其抑制相关炎性细胞高水平凋亡相关.冬虫夏草诱导肿瘤细胞、免疫细胞等凋亡呈现多靶点、多环节、多效应的特点,其对多种凋亡相关细胞生物因子的调控及不同细胞信号传导通路的影响,诱导不同的凋亡级联反应发生,从而对机体细胞凋亡系统进行适宜调节以发挥其药理作用,如表现为对肿瘤细胞凋亡的诱导而对免疫细胞等凋亡的抑制等.但是,相关研究目前仍集中于对其抗肿瘤、抗病现象的观察及少数重要凋亡指标的检测,而细胞凋亡的过程是多层次、多因素、多基因协同作用的结果,其确切作用及调控机制十分复杂,冬虫夏草重要活性成份调节细胞凋亡分子机制仍有待深入探索.     

用基因芯片研究尼古丁对肺腺癌细胞凋亡基因表达的影响

目的：探讨尼古丁对人肺癌细胞生长的影响及其机制。方法：采用MTT法分析尼古丁处理人肺腺癌细胞SPC-A后生长变化；采用基因芯片技术检测尼古丁处理SPC-A-1细胞前后，细胞凋亡相关基因表达的变化。结果：尼古丁对SPC-A细胞的生长具有显著的促进作用，但随着尼古丁浓度的增大，促进作用也下降。100 μg/L尼古丁处理后，SPC-A-1细胞451个凋亡相关基因中有显著变化的基因有80个，其中，促进凋亡相关基因上调的有 29 个，下调的有13 个；抑制凋亡相关基因上调的有26个，下调的有12个。结论：尼古丁能促进人肺腺癌细胞生长，调节许多凋亡相关基因表达。     

呼吸道合胞病毒感染对细胞凋亡及FasL、Fas、Bcl-2、Bax基因表达的研究

目的：研究呼吸道合胞病毒(RSV)感染与细胞凋亡的关系及对凋亡相关基因FasL、Fas、bcl-2和bax表达的影响。 方法： 采用A549细胞，在RSV感染后不同时点收集细胞，流式细胞仪和透射电镜检测细胞凋亡，免疫组织化学法检测凋亡相关基因FasL、Fas、Bcl-2和Bax表达情况。 结果： 流式细胞仪检测结果RSV感染后72 h（6.61%）、120 h（10.94%）的细胞凋亡指数明显高于对照组（4.32%、5.31%）；免疫组化法检测结果对照组FasL、Bax基因呈现无表达或局部弱表达；随着RSV感染时间的延长，bax、 Fas、 FasL基因的表达均高于对照细胞，bcl-2基因呈现弱表达或无表达。 结论： RSV在感染后期能诱导宿主细胞发生凋亡，促凋亡基因FasL、Fas 、Bax和抗凋亡基因Bcl-2表达水平的差异是RSV诱导凋亡的机制之一。     

基因转移及其诱导的肿瘤细胞凋亡

凋亡是一种特殊类型的细胞死亡，受某些基因及分子的调控。基因转移可导肿瘤细胞凋亡，根据不同肿瘤基因变异或基因表达的特点，采用不同的目的基因对肿效率细胞进行基因修饰以诱导细胞凋亡的发生可能成为肿瘤免疫基因治疗的有效手段。     

细胞辐射抗性相关基因的研究进展

电离辐射能够诱导细胞一系列基因的表达。与辐射抗性相关的基因如p53抑癌基因、癌基因、DNA损伤修复相关基因以及影响细胞生长分化的多种调控基因等,通过参与调节细胞周期、促进细胞DNA损伤修复和抑制细胞凋亡等多种途径,最终使得细胞的辐射抗性增加。目前人们对其中一些基因的作用机制已有所了解,而对更多的基因的作用机理尚不清楚。认识细胞辐射抗性相关基因的表达调控和生物功能对阐明细胞辐射抗性分子机制至关重要。     

PIG7基因与疾病

P53分子介导的凋亡途径是细胞内重要的信号整合机制,通过识别细胞损伤启动下游促凋亡信号.PIG7是与P53诱导凋亡密切相关的基因,与代谢、炎症、肿瘤等关系紧密,逐渐成为近年相关领域的研究热点.本文从PIG7基因的发现、生物学功能及与人类疾病的关系等方面对该基因的研究进展予以综述.     

细胞凋亡基因Fas的研究进展

细胞凋亡的研究方兴未艾，日益引起人们的关注。本文扼要介绍了细胞凋亡相关基因Ｆａｓ的基因结构，表达调控，信号传导在细胞凋亡中的作用及与某些人类重大疾病的关系。     

凋亡抑制蛋白XIAP和促凋亡因子Smac在胰腺癌化疗抵抗中的作用

目的探讨x-相关凋亡抑制蛋白（XIAP）和促凋亡因子Smac在胰腺癌细胞化疗抵抗中的作用，以及转染胞浆表达型Smac基因靶向下凋XIAP对化疗药物诱导的胰腺癌细胞凋亡的影响。方法应用流式细胞术检测顺铂、5-FU介导的Panc-1、BXPC-3的凋亡率及胞浆染色分析细胞XIAP表达变化，Western blot分析XIAP、Smac、Caspase-3表达水平；构建pEGFP-NI／Smac真核表达载体并转染胰腺癌Panc-1细胞，流式细胞术检测转染Smac基因前后Panc-1细胞的凋亡敏感性。结果与BXPC-3细胞相比，Panc-1对顺铂或5-FU介导的凋亡具有较强抵抗性，Western blot分析显示Panc-1细胞高表达XIAP，在化疗药物作用下化疗敏感细胞BXPC-3胞浆内XIAP水平下降明显多于Panc-1细胞，而且凋亡的BXPC-3细胞释放入胞浆内的成熟Smac蛋白水平明显高于Panc-1细胞。转染胞浆表达型Smac基因至化疗抵抗Panc-1细胞，可明显下调其XIAP表达水平，促进效应Caspase-3分子活化，显著提高顺铂、5-FU诱导的细胞凋亡率。结论胰腺癌细胞XIAP的表达水平下调与其化疗敏感性有关，XIAP是克服化疗抵抗的重要靶分子，而上调Smac活性蛋白的胞浆表达作为一种有效调节信号，通过拮抗XIAP的凋亡抑制作用协同化疗药物促进胰腺癌细胞凋亡。     

细胞凋亡及其相关基因在冷灌注保存大鼠肝脏组织中的作用

目的通过检测凋亡细胞计数及凋亡相关基因bax和Fas的表达。探讨细胞凋亡及其相关基因在冷灌注保存大鼠肝脏组织中的作用。方法本研究采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的末端标记法（TUNEL法）及RT-PCR．按照供肝保存时间30、60、90、120、180、300min分为6组进行凋亡细胞计数及其相关基因的检测。结果不同保存时间大鼠肝脏组织中均有凋亡细胞发生。随着时间延长，凋亡细胞计数呈进行性增加趋势；未检测到bcl-2的表达．但可明显检测到bax和Fas基因的表达。结论在冷灌注保存肝组织中，细胞凋亡是早期细胞死亡的主要原因之一。细胞凋亡的发生可能与bax和Fas的高表达以及bcl-2的低表达有关。     

黏膜相关淋巴组织淋巴瘤和凋亡相关基因

细胞凋亡受抑是黏膜相关淋巴组织(mucosa-associated lymphoid tissue, MALT)淋巴瘤发生的重要机制。MALT淋巴瘤凋亡相关基因的研究逐渐引起了重视。API2-MALT1融合基因和bcl-10过表达分别激活NF-κB，以NF-κB激活为核心，涉及到p53，Fas，API2，MALT1等凋亡相关基因，导致细胞凋亡受抑。     

Bcl—2和caspase—3在创伤性脑损伤后细胞凋亡中的作用

Bcl-2和caspase-3分别是Bcl-2基因族和caspase-3基因族中具有代表性的基因，它们参与对细胞凋亡的调控．研究表明创伤性脑损伤后存在细胞凋亡及凋亡相关基因的表达．从基因水平探讨创伤性脑损伤后细胞调亡调控机制是近年研究的一个热点．本文仅综述Bcl-2和caspase-3基因在创伤性脑损伤研究中的最新进展．     

GADD45β参与类风湿关节炎发病机制研究(2)—GADD45β介导类风关CD4~+T细胞抗凋亡研究

在发现了GADD45β在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)病灶局部组织细胞中、CD4+T细胞表达增高并参与介导IFN-γ产生的基础上,进一步探讨GADD45β参与RA的其他机制。用siRNA干扰人PBMC中GADD45β基因表达。Real-time PCR检测GADD45β和凋亡相关基因的表达格局。用RA患者滑膜液(RA synovial fluid,RA SF)刺激GADD45β基因敲除的健康人PBMC并用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果RA患者的SFMC中T细胞凋亡减少。用SF刺激正常人PBMC时细胞凋亡减少。经siRNA干扰后PBMC中GADD45β的表达明显降低,同时细胞凋亡增加。同时检测与凋亡相关基因发现SF刺激后Bcl-2分子在凋亡的细胞中表达明显降低,而Fas-FasL、Bcl-2家族其他分子如Bcl-xl、Bax、Bim等变化不明显。GADD45β参与介导RA的炎症性T细胞凋亡,而Bcl-2分子参与了由GADD45β介导抗凋亡作用,而这一作用与RA患者滑膜液中炎症细胞能够长期存活并介导炎症可能有密切关系。     

磷脂信使与细胞凋亡

近年来，磷脂类信号分子如磷脂酸，溶血磷脂酸，神经酰胺，神经鞘氨醇及1-磷酸-鞘氨醇等与其特异性的膜受体结合在调节细胞生长，分化及凋亡中的作用引起了人们的极大关注。根据靶细胞种类，磷脂分子剂量以及相关受体信号的不同其产生的生物效应各不相同，磷脂类信号分子与内皮分化基因（Edg)家族G蛋白耦联受体。MAPK/ERK，PI3K/Akt,JNK/SAPK等信号系统相互作用，从而影响细胞凋亡。磷脂酰丝氨酸暴露于细胞表面是细胞凋亡过程中的重要事件，氨基磷脂易位酶及磷脂scramblase酶与此事件密切相关。暴露于细胞表面的磷脂酰丝氨酸在鞍细胞的识别及凋亡细胞的清华中发挥重要的信号作用。对磷脂类信号分子及其受体信号系统的调节为某些相关疾病的防治提供了有意义的靶点。     

活性氧与血管内皮细胞的信号转导

一定量的活性氧 (ROS)可作为血管内皮细胞内信号转导分子 ,通过作用于细胞内相关靶分子 ,调节细胞生长、凋亡和生存的相关基因 ,从而对生理和病理生理情况下血管自稳调节起重要作用。     

TLR4活化对肝癌细胞H7402生物学特征的影响

目的:分析TLR4在肝癌细胞H7402的表达水平,研究其活化对肿瘤细胞生物学功能、炎症应答以及对化疗药物治疗的影响。方法:RT-PCR方法检测肝癌细胞TLR4基因、细胞凋亡和细胞周期相关基因的表达水平。LPS作用于肝癌细胞后,利用MTT法检测细胞增殖,AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡,荧光定量PCR法检测肿瘤相关细胞因子的表达水平,流式细胞术检测肿瘤细胞表面淋巴细胞受体的配体及CyclinD1表达,Western blot检测Bcl-xl表达水平。结果:TLR4在人肝癌细胞系HepG2、H7402、PLC/PRF/5中都有表达,LPS能促进肝癌细胞系的增殖,抵抗顺铂的抗肿瘤作用。进一步的机制研究表明,LPS能上调肝癌细胞周期相关分子CyclinD1、凋亡相关分子Bcl-xl的表达,并下调Fas的表达、上调肿瘤相关的炎症因子的表达。结论:LPS诱导肝癌细胞H7402表达炎症因子、促进肿瘤细胞的增殖,导致肿瘤细胞对化疗药顺铂产生抵抗作用。     

野生型p53基因诱导凋亡相关基因ANNEXIN A2的表达研究

目的探讨胡基因过表达介导不同转移潜能肿瘤细胞的凋亡分子机理，寻找与细胞凋亡和肿瘤转移的相关基因。方法应用mRNA差异显示方法分析腺病毒介导的野生型,053基因感染不同转移潜能的肺癌细胞系前后存在的表达差异基因，并用逆转录一聚合酶链反应、Northern印迹和Western印迹方法加以验证。结果分析发现，在柳基因诱导后ANNEXIN A2基因的表达显著差异有统计学意义，经加基因诱导后ANNEXIN A2基因的表达有明显下调。并且以Arfip 973细胞的表达缺失最为显著。经逆转录一聚合酶链反应、Northern印迹和Western印迹方法也验证了这种差异的存在。结论表明ANNEXIN A2基因的表达与p53基因诱导的肿瘤细胞凋亡存在密切的相关性。