Wortmannin对离体肝星状细胞增殖的影响

目的观察Wortmannin对肝星状细胞增殖的影响,并探讨其作用的可能机制。方法用链酶蛋白酶和胶原酶原位灌流消化正常大鼠肝脏,Nycodenz密度梯度离心分离肝星状细胞,以流式细胞仪检测细胞周期,MTT比色法观察Wortman-nin对肝星状细胞增殖的影响。结果在20～60nmol/L浓度范围内,Wortmannin能剂量依赖性地抑制肝星状细胞增殖;可使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少。结论Wortmannin可显著抑制肝星状细胞增殖,使肝星状细胞阻滞于G0/G1期,该作用可能是Wortmannin抗肝纤维化的机制之一。     

RNAi靶向沉默对人卵巢癌OVCAR3细胞CD105和Ki67基因表达的影响

目的 探讨RNAi靶向沉默对人卵巢癌OVCAR3细胞CD105和Ki67基因的表达。 方法 采用脂质体介导的基因法将不同浓度的CD105-siRNA、 Ki67-siRNA转染至体外培养的人卵巢癌OVCAR3细胞中,检测干扰前后人卵巢癌细胞中CD105、Ki67基因表达的变化以确定沉默效果。构建CD105-siRNA、Ki67-siRNA及各自的阴性对照序列并高效地转染人卵巢癌OVCAR3细胞,采用Western blotting和Real-time PCR从蛋白和基因水平检测CD105和Ki67的表达变化。 结果 转染CD105-siRNA或Ki67-siRNA终浓度为50nmol/L和100nmol/L的人卵巢癌细胞中CD105mRNA或Ki67mRNA的相对表达水平及CD105和Ki67的表达均明显低于空白对照组和阴性对照组（NC1）,差异具有统计学意义（P＜0.001）。 结论 CD105-siRNA和Ki67-siRNA能特异性抑制人卵巢癌OVCAR3细胞中的CD105和Ki67基因表达,下调mRNA和蛋白的表达水平。     

龙血素A对体外培养人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡的影响

观察龙血素A对体外培养人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡的影响。采用龙血素A与MCF-7细胞体外共培养(药物组)干预手段,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况;免疫荧光检测细胞增殖标志性蛋白Ki67的表达;免疫印迹检测凋亡调节蛋白Bax、Bcl-XL/S的表达;annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞的凋亡率。与对照组相比,药物组细胞增殖受到明显抑制,且存在浓度及时间依赖性;药物组Ki67表达显著减少,Bax表达明显增加,Bcl-XL/S表达明显减少;细胞凋亡率增高,上述指标间比较差异均有统计学意义。龙血素A对体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用。     

Effect of human p27 over-expression on Hela cell proliferation

目的 构建抑癌基因p27高表达细胞株,研究其对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.方法 运用RT-PCR技术从HeLa RNA中扩增p27 cDNA,连接酶连接至真核表达载体pcDNA3.1(+),所得的重组质粒pcDNA3.1(+)-p27用脂质体法转染子宫颈癌HeLa细胞,使用RT-PCR以及Western blot法筛选p27基因高表达的细胞株.MTT法和流式细胞术检测p27基因高表达对细胞增殖的影响.结果 成功获得p27高表达的HeLa细胞株.细胞增殖分析和流式细胞术结果显示,p27基因高表达对细胞增殖有抑制作用,并明显增加G1期的细胞数(由44.4%增加到59%,P＜0.05).结论 p27基因在HeLa细胞中高表达能通过抑制细胞G1/S转换从而抑制细胞增殖,提示p27基因可能成为子宫颈癌基因治疗的靶基因.     

拓扑替康对HeLa细胞增殖与凋亡的影响

目的:观察拓扑替康(TPT)对宫颈癌Hele细胞增殖与凋亡的影响.方法:在相同放疗条件下,采用MTT法检测不同浓度TPT对HeLa细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞仪检测细胞周期,TUNEL法检测TPT对HeLa细胞凋亡的影响.结果:随着TPT浓度升高(0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.2 mg/L、升至0.4 mg/L),HeLa细胞的增殖抑制率逐渐升高,细胞的凋亡率依次增加.结论:TPT能抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖并促进其凋亡.     

高表达p27基因对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

目的构建抑癌基因p27高表达细胞株,研究其对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法运用RT-PCR技术从HeLaRNA中扩增p27 cDNA,连接酶连接至真核表达载体pcDNA3.1(+),所得的重组质粒pcDNA3.1(+)-p27用脂质体法转染子宫颈癌HeLa细胞,使用RT-PCR以及Western blot法筛选p27基因高表达的细胞株。MTT法和流式细胞术检测p27基因高表达对细胞增殖的影响。结果成功获得p27高表达的HeLa细胞株。细胞增殖分析和流式细胞术结果显示,p27基因高表达对细胞增殖有抑制作用,并明显增加G1期的细胞数(由44.4%增加到59%,P<0.05)。结论 p27基因在HeLa细胞中高表达能通过抑制细胞G1/S转换从而抑制细胞增殖,提示p27基因可能成为子宫颈癌基因治疗的靶基因。     

舒芬太尼诱导宫颈癌细胞自噬和凋亡并抑制癌细胞恶性增殖

目的 探讨舒芬太尼对宫颈癌细胞 SiHa 自噬、 凋亡及细胞增殖的影响。 方法 采用 CCK8 法检 测舒芬太尼梯度浓度 (3. 125、 6. 25、 12. 5、 25、 50、 100、 200、 400、 800 nmol / L) 作用下宫颈癌细胞 SiHa 细胞活力, 选取 4 个舒芬太尼作用浓度 (0、 25、 50、 100 nmol / L) 处理 SiHa 细胞 24 h, 采用流式细胞法、 克隆形成实验检测 SiHa 细胞凋亡及增殖情况, 免疫荧光法检测各组细胞 LC3 水平, 采用 Western 印迹检测 自噬相关蛋白 LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ、 Beclin1、 ATG7 与增殖、 凋亡相关蛋白 P21、 Survivin 水平, 采用 RT-PCR 检测 细胞增殖相关基因 Ki67、 PCNA 表达水平。 结果 随着舒芬太尼处理浓度的增加, SiHa 细胞活力逐渐降低。 50、 100 nmol / L 舒芬太尼处理下 SiHa 细胞的 LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ、 Beclin1、 ATG7 水平显著高于 0 nmol / L 舒芬太 尼处理, 免疫荧光检测结果显示 50、 100 nmol / L 舒芬太尼处理下 LC3 荧光信号高于 0 nmol / L 舒芬太尼处 理, 流式细胞仪检测结果显示 50、 100 nmol / L 舒芬太尼处理下 SiHa 细胞凋亡高于 0 nmol / L 舒芬太尼处理。 克隆形成实验结果显示 50、 100 nmol / L 舒芬太尼处理下 SiHa 细胞克隆形成率降低, Survivin 水平与 Ki67、 PCNA 表达水平降低, 而 P21 水平升高。 结论 舒芬太尼对宫颈癌细胞自噬、 凋亡有促进作用, 对细胞增 殖有抑制作用, 可能与调节细胞自噬、 凋亡、 增殖相关蛋白或基因水平有关。     

喜树碱诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及其机制

目的 测定不同浓度的喜树碱（CPT）对宫颈癌HeLa细胞促凋亡作用的影响,并探讨其促凋亡的机制。方法 人宫颈癌细胞系HeLa细胞,加入不同浓度的CPT（100 nmol/L~10 μmol/L）,继续培养24 h。MTT方法检测细胞增殖,并通过倒置显微镜观察细胞形态学变化,细胞核染色法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞早期凋亡率。Western blotting法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、cleave-Caspase-3、细胞色素C（Cyt-C）,聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）的表达。结果 MTT实验及细胞形态学结果显示,CPT对HeLa细胞的生长有明显抑制作用,并可导致细胞形态改变,且具有剂量依赖性,其IC₅₀为2.45 μmol/L;细胞凋亡检测表明,不同浓度的CPT可导致凋亡小体出现,并可使早期凋亡比例增加。Western blotting法检测结果显示,不同浓度CPT可使HeLa细胞Bcl-2蛋白表达降低,而Bax、cleaved-Caspase-3蛋白表达,胞质Cyt-C,89 kD 5-磷酸核糖-1-焦磷酸（PRPP）蛋白表达增加且呈剂量依赖性。结论 CPT可以诱导HeLa细胞凋亡,其作用机制可能为激活线粒体依赖途径,并活化作用底物PARP而实现。     

9-顺式维甲酸对甲状腺鳞癌细胞周期及CyclinD1、CDK4表达的影响

 摘 要：目的 探讨9-顺式维甲酸（9-cisRA）对甲状腺鳞癌细胞株SW579细胞周期及周期因子表达的影响。方法以终浓度分别为为10-7 mol/L、10-6 mol/L、5×10-6 mol/L、10-5 mol/L 的9-cisRA处理SW579细胞株，采用MTT比色法测定细胞增殖活性；流式细胞仪检测细胞周期；用RT-PCR方法检测SW579细胞CDK4、CyclinD1mRNA的表达水平；用Western blotting检测SW579细胞CDK4、CyclinD1的蛋白表达。结果 9-cisRA作用后，MTT结果显示，各组细胞均出现显著的生长抑制作用，生长抑制率明显升高，并呈剂量依赖性。流式细胞仪分析，各组细胞均随着药物浓度的升高，S期细胞在细胞周期中所占比例逐渐减少，G1期细胞则明显增加（P<0.01）,细胞滞留在G1期。RT-PCR检测结果表明，经不同浓度9-cisRA处理的细胞CDK4 mRNA表达水平没有明显变化；CyclinD1的表达水平明显下调；Western blotting检测结果表明经不同浓度9-cisRA处理的细胞CDK4蛋白表达水平没有明显变化，CyclinD1蛋白表达水平明显下降。结论9-cisRA对SW579细胞有显著的生长抑制作用，可能与抑制CyclinD1的表达，从而将细胞阻滞于G1期有关。     

C225单用及与DDP联用对HeLa细胞的抑制作用与机制研究

探讨C225单用及与DDP联用对人子宫颈癌HeLa细胞的体外抑制作用及其机制。分别用C225(100、300μg/ml)与DDP(0.1、0.5、1μg/ml)以单用和联用处理HeLa细胞72 h后,MTT法检测对HeLa细胞生长的抑制作用及协同效应;FCM技术检测C225(300μg/ml)与不同工作浓度DDP单用及联用72 h后对细胞周期及凋亡的影响;并用HOE-CHEST33258染色技术进行细胞凋亡的形态学检测。结果C225能明显抑制HeLa细胞增殖,与DDP联合具有协同作用或相加作用;C225能使细胞周期阻滞于G1期,并诱导细胞凋亡;与DDP联用后凋亡率更高,使细胞周期进一步阻滞于G2期,同时降低S期细胞比例。荧光显微镜下可见实验对照组所发荧光较弱,无凋亡小体出现,而各药物干预组均出现一定数量的凋亡细胞,并随药物浓度的增加而增多,其中尤以联合用药组最为明显。两药单用及联用均对HeLa细胞的体外生长具有显著抑制作用,C225可通过将细胞周期阻滞于G0-G1期及诱导细胞凋亡发挥其抑瘤效应;两药间存在协同作用,机制可能与C225增加HeLa细胞对DDP的敏感性有关。     

Effects of Serum Deprivation on Ki-67-reactive Antigen

In order to elucidate the relationship between the level of cellular Ki-67-reactive antigen and cell proliferation activity, the effects of serum deprivation on the antigen expression and cell proliferation of HeLa cells were investigated using flow cytometry. The antigen was constitutively expressed in almost all cells cultured in normal medium containing 10% calf serum. In the serum deprived cells, the antigen negative fraction increased with culture time, and the level of Ki 67 reactive antigen fell rapidly during the first 24 h. The reduction in the antigen caused by serum deprivation was independent of the cell cycle phase. Both BrdUrd incorporation and the S phase fraction were diminished during the experiment with evidence of cell growth retardation. However, after refeeding with fresh normal medium, the antigen level that had been reduced by serum deprivation recovered to the level of the control cells within 24 h. These results suggest that the level of Ki 67 reactive antigen in cells reflects their growth condition. Acta Pathol Jpn 39: 638-642, 1989.     

NO38 expression and nucleolar counts are correlated with cellular DNA content but not with proliferation parameters in colorectal carcinomas.

AIMS: To investigate the expression of nucleolar protein NO38, to determine the numbers of nucleoli per cell, and to examine the relations of these nucleolar parameters to tumour DNA index, total cellular DNA content, S phase fraction, and Ki67 labelling index. METHODS: 36 colorectal tumours and 14 normal mucosas were studied. An anti-NO38 monoclonal antibody, 31A12, and flow cytometric analysis were used to detect expression of NO38 by means of a biotin-streptavidin-FITC (fluorescein isothiocyanate) staining method. Nucleolar counts were determined using fluorescence microscopy. Flow cytometry was used to determine tumour DNA indices and the sizes of the S phase fractions. Ki67 labelling indices were determined from tissue sections stained immunohistochemically with the MIB-1 antibody against the Ki67 nuclear protein. RESULTS: Generally, tumour cell nucleoli were larger and more irregular in shape compared with nucleoli in normal mucosal cells. DNA aneuploid and diploid tumours expressed 2.8 and 2.1 times more NO38 than normal mucosa. The mean (SD) values for nucleolar counts were higher for the DNA aneuploid tumours (3.81 (0.93)) than the diploid tumours (2.62 (0.38)) and normal mucosa (2.34 (0.37)). NO38 expression and numbers of nucleoli correlated significantly (r = 0.52, p = 0.01). There were, however, no significant correlations between these nucleolar parameters and either the sizes of tumour S phase fractions or Ki67 labelling indices. Cell cycle resolved expression of NO38 in tumours and normal mucosa demonstrated that expression increased approximately in proportion to the DNA content throughout the cell cycle. In aneuploid tumours, NO38 expression was 43% and 98% higher in S and G2 phases, respectively, compared with the G1 phase. Sorting of these populations revealed that the nucleolar count also increased as the DNA content increased but by only 29% and 47% in S and G2, respectively. Apoptotic cells lacked NO38. CONCLUSIONS: NO38 expression is higher in tumours than in normal mucosa owing to the increased DNA content and larger nucleoli in tumours; expression increases proportionally with DNA content as cells progress through the cell cycle from G1 through S and G2. However, NO38 expression does not correlate with the tumour S phase fraction or Ki67 labelling index and is lost during apoptosis. Also the results suggest that nucleoli grow in size during the cell cycle, which would account for the doubling of NO38 expression from G1 to G2, as the nucleolar count increased by only 47%.     

碘酸钾对人甲状腺癌细胞系周期的影响

目的探讨碘酸钾(KIO3)对人甲状腺鳞癌细胞系SW579细胞周期/增殖、细胞周期素D1(cyclin D1)及增殖细胞核抗原Ki67 mRNA/蛋白水平的影响。方法 CCK8法检测不同浓度(0、10-6、10-5、10-4、10-3、10-2和10-1mol/L)KIO3对细胞增殖的影响;0、10-6或10-2mol/L KIO3处理细胞48 h后,用碘化丙啶单染流式细胞术检测细胞周期;用实时定量PCR和Western blot分别检测cyclin D1和Ki67的mRNA及蛋白水平。结果 10-6mol/L或10-2mol/L KIO3分别促进或抑制SW579细胞增殖(P0.05);10-6mol/L组细胞G1期比例下降(P0.05),S期比例增加(P0.05),而10-2mol/L组各期细胞比例发生相应变化(P0.05);同时,10-6mol/L KIO3显著上调细胞内的cyclin D1(P0.05)和Ki67(P0.05)mRNA水平;而10-2mol/L KIO3显著下调细胞内的cyclin D1和Ki67 mRNA及蛋白水平(P0.05)。结论 KIO3影响SW579细胞增殖及周期可能与其对cyclin D1和Ki67的调节作用及剂量有关。     

shRNA 干扰长链非编码RNA PVT1 对甲状腺乳头状癌IHH-4细胞增殖、凋亡和周期的影响

目的:探究沉默长链非编码RNA PVT1 对甲状腺乳头癌IHH-4 细胞增殖、凋亡和周期的影响。方法:慢病毒 转染PVT1 shRNA(sh-PVT1),RT鄄PCR 检测PVT1 的表达,CCK8 检测细胞增殖倍数,流式检测细胞凋亡及细胞周期,Western blot 检测细胞Ki67、Caspase-3 和Cyclin A 的表达;复制裸鼠甲状腺乳头状癌肿瘤移植模型,记录肿瘤生长情况,Western blot 检 测肿瘤组织Ki67、Caspase-3 和Cyclin A 的表达。结果:sh-PVT1 转染细胞24 h 后,IHH-4 细胞PVT1 的表达水平明显降低(P< 0.01);转染细胞4 d 后,细胞增殖倍数显著降低,增殖标志蛋白Ki67 表达明显被抑制(P<0.05,P<0.01);同时,sh-PVT1 能显 著升高IHH-4 细胞凋亡率,诱导凋亡标志蛋白Caspase-3 表达(P<0.01);此外,sh-PVT1 还可诱导细胞G2/ M 期阻滞,抑制周期 蛋白Cyclin A 的表达(P<0.05,P<0.01)。干扰PVT1 表达能显著抑制甲状腺乳头瘤生长(P<0.01),下调肿瘤组织Ki67 和 Cyclin A 的表达水平(P<0.01),诱导Caspase-3 表达(P<0.01)。结论:沉默PVT1 表达能显著抑制甲状腺乳头癌IHH-4 细胞 增殖且诱导细胞凋亡和周期阻滞。     

CD4+Ki67+ lymphocytes in HIV-infected patients are effector T cells accumulated in the G1 phase of the cell cycle

Entry into the cell cycle represents a fundamental step before generating an effector immune response. The relationship between the cell cycle and antigen-driven T cell response remains, however, poorly understood in virus infection, including HIV. We have identified a critical fraction of CD4+CD45RO+ memory T lymphocytes that express the Ki67 antigen in chronically HIV-infected patients. A high accumulation of Ki67 protein is detected in CD4+CD45RO+Ki67+ cells that are in the G1 phase of the cell cycle (92 ? 5 %) but not in S and G2 + M phases, in contrast to normal individuals. Of these cells, 20 - 60 % are spontaneously producing IL-2 and IFN-, unlike CD4+CD45RO+ that do not express Ki67. In addition, HIV-p24 antigen is detectable only in a small fraction CD4+Ki67+ cells. In conclusion, CD4+Ki67+ lymphocytes are circulating effector cells accumulated in the G1 phase of the cell cycle and may be involved in the immune surveillance during HIV infection.     

持续母源性经口暴露PBDE-209对其子代大鼠体液免疫毒性影响

目的针对环境污染中十溴联苯醚（PBDE-209）对母婴健康存在潜在危害日益受到重视,研究经口胃灌十溴联苯醚（PBDE-209）对子代大鼠体液免疫毒性的影响。方法经持续性母源暴露PBDE-209,观察其子代大鼠免疫器官脾脏组织结构变化、B淋巴细胞亚群、B淋巴细胞增殖转化功能、细胞因子（IL-4,IFN-γ）等变化,并检测总体血清中PBDEs原型化合物含量。结果子代大鼠在出生2周时实验组CD19百分比低于对照组,差异有统计学意义（t=5.09,P〈0.01）,实验组子代大鼠刺激指数（SI）与对照组比较差异无统计学意义（t=0.42,P=0.684）。实验组的血清IFN-γ明显低于对照组（P〈0.01）。实验组血清总体PBDE-209原型化合物含量为502392ng/glw,对照组血清总体PBDE-209原型化合物含量为46206ng/glw,实验组高出对照组10个数量级以上。实验组血清中其他PBDEs家族原型化合物,且总体含量均高于对照组。结论母代持续暴露高剂量十溴联苯醚（PBDE-209）后,对子代体液免疫功能存在一定的毒性影响。     

上调胰岛素样生长因子结合蛋白6基因对乳腺癌细胞 MDA-MB-231细胞周期和凋亡的影响*

目的：探究上调胰岛素样生长因子结合蛋白6（IGFBP-6）基因对乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞周期和凋 亡的影响。方法：体外培养人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞,转染IGFBP-6 过表达质粒,实时荧光定量PCR 法验证转染效率;流式细胞术检测转染IGFBP-6 后的细胞周期的改变及凋亡的情况;免疫印迹检测增殖细胞核抗 原（PCNA）、细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、凋亡相关蛋白Bcl-2 和Bax 的蛋白表达水平。结果：IGFBP-6 转染 MDA-MB-231细胞后,IGFBP-6 的mRNA水平明显上调;PCNA、细胞周期蛋白D1 的表达水平明显降低;细胞 G1/S 期阻滞;凋亡细胞增多。结论：IGFBP-6 可以显著抑制乳腺癌细胞的增殖,促进细胞凋亡。     

阿霉素对K562细胞凋亡及FAK mRNA的影响

目的探讨阿霉素体外作用于K562细胞后,观察其对细胞增殖的影响,促进细胞凋亡情况,以及调节细胞周期和粘着斑激酶（FAK）mRNA基因,进一步探讨通过调控FAK表达,研究抗白血病的作用机制。方法应用细胞增殖实验（CCK8法）观察不同浓度阿霉素作用不同时间对K562细胞增殖的影响,应用流式细胞仪观察不同浓度阿霉素对K562细胞细胞凋亡,细胞周期的影响,应用RT-PCR和Western blot技术检测不同浓度阿霉素作用对K562细胞36h后FAK mRNA以及蛋白表达水平的变化。结果随着阿霉素浓度增加及作用时间延长,K562细胞的增殖抑制率逐渐升高,同一时间不同浓度之间比较,或者同一浓度不同时间组之间比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;阿霉素能引起K562细胞凋亡,且随着药物浓度增加,凋亡率也逐渐增加,差异均有统计学意义（P〈0.05）;阿霉素能引起K562细胞周期阻滞,多停留在S期;阿霉素能引起K562细胞FAK mRNA表达显著降低。阿霉素能引起K562细胞FAK蛋白表达水平的降低。结论阿霉素抑制分裂期细胞的增殖,诱导细胞凋亡增加,对细胞FAK基因和蛋白水平均显著下调,为进一步研究FAK基因表达的调控与肿瘤细胞凋亡的分子机制提供了实验基础。     

异氟醚对膀胱癌 5637 细胞恶性生物学行为及化疗敏感性的影响

目的 探究异氟醚对膀胱癌 5637 细胞恶性生物学行为及化疗敏感性的影响。 方法 单独或联合 给予异氟醚及顺铂处理膀胱癌 5637 细胞, 将细胞随机分为 4 组: 对照组、 异氟醚组、 顺铂组和异氟醚 + 顺 铂联合处理组。 BrdU 染色检测 BrdU 阳性细胞数; 流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期分布; Transwell 检测侵袭细胞数; 划痕愈合实验检测划痕愈合率; Western 印迹检测 Ki67、 PCNA、 Bax、 Bcl-2、 cleaved caspase-3 和 caspase-3 蛋白表达; 结果 与顺铂组相比较, 异氟醚 + 顺铂联合处理组 BrdU 阳性细胞数和 Ki67、 PCNA 蛋白表达降低, G0 / G1期比率和 S 期细胞数降低, G2 / M 期比率升高, 细胞凋亡率和 Bax / Bcl-2、 cleaved caspase-3 / caspase-3 比值升高, 侵袭细胞数、 划痕愈合率降低, 均有显著性差异 (P< 0. 05)。 结论 异氟醚可通过抑制细胞增殖、 侵袭、 迁移, 诱导细胞凋亡, 提高 5637 细胞对顺铂的敏感性。     

Increased P27KIP1 protein expression in the dentate gyrus of chronically stressed rats indicates G1 arrest involvement

Various chronic stress paradigms decrease new cell proliferation in the hippocampal dentate gyrus, yet the exact underlying mechanism is still unclear. In the first gap (G1) phase of the cell cycle, both stimulatory and inhibitory signals derived from the extracellular environment converge. Corticosteroids, which increase during stress and are well-known anti-mitotics, cause cells in vitro to arrest in the G1 phase. Following 3 weeks of unpredictable stress, we therefore expected a change in protein expression of various important G1 cell cycle regulators in the adult rat subgranular zone. Using quantitative immunocytochemistry, we show that particularly cyclin-dependent kinase inhibitor p27Kip1 expression is significantly increased. In addition, 3 weeks of recovery after stress normalized the numbers of p27Kip1-expressing cells, consistent with the recovered adult cell proliferation in these animals. P27Kip1-positive cells do not overlap with GFAP-staining and only to a limited extent with Ki-67-expressing cells. Numbers of cyclin E- and cyclin D1-expressing cells did not change after chronic stress. These results indicate that chronic stress causes cycling cells in the adult hippocampus to arrest in G1, thereby providing more mechanistic insight in the stress-induced decrease in cell proliferation.