MRSA与新抗生素研究

40年代末当青霉素应用治疗葡萄球菌感染不久 ,出现了耐药性金黄色葡萄球菌和耐药性凝固酶阴性葡萄球菌。目前 ,90 %的金黄色葡萄球菌对青霉素耐药。 1 960年诞生了第一个对青霉素酶稳定的半合成青霉素叫甲氧西林 (methicillin)应用于临床克服耐药菌。不幸在 1 961年就出现了对甲氧西林耐药性的金黄色葡萄球菌称MRSA (methicillin resistantStaphylo coccusaureus) ,此后在世界许多国家逐步上升流行直至 70年代后才下降。典型的MRSA编码链霉素高度耐药和诱导性红霉素耐药基因在染色体上、编码重金属耐药和 β 内酰胺酶在一个 3 0kb质粒上…     

金黄色葡萄球菌临床分离株对夫西地酸的耐药性检测及分子特征研究北大核心CSCD

目的 调查金黄色葡萄球菌临床分离株对夫西地酸的耐药情况并对其进行相关分子特征的研究.方法 收集温州医科大学附属第一医院2013年10月—2016年3月间临床分离的金黄色葡萄球菌,共1333株,用K-B法筛选耐夫西地酸菌株,并用琼脂稀释法测定夫西地酸的最小抑菌浓度（MIC值）.PCR法检测耐药基因fusB、fusC、fusD和金黄色葡萄球菌A蛋白基因（spa基因）,同时用测序方法对fusB、fusC、fusD阴性的耐药菌株进行fusA基因突变检测.PCR法检测金黄色葡萄球菌管家基因并进行多位点序列分型.结果 1333株金黄色葡萄球菌中,共检出52株对夫西地酸耐药,占3.90％.2013—2016年的耐药率分别为：5.3％（7/132）、3.5％（20/571）、4.1％（21/510）、3.3％（4/120）.夫西地酸对金黄色葡萄球菌的MIC值为2、4、8、64和〉64μg/ml分别占26.9％（14/52）、34.6％（18/52）、13.5％（7/52）、1.9％（1/52）、23.1％（12/52）.52株夫西地酸耐药株中,多位点序列分型（MLST）分型共发现13种序列型（ST）,其中以ST630为主,占50％（26/52）,其次为ST5,占17.3％（9/52）;spa分型共19种序列型,以t4549（11/52）、t2460（8/52）、t377（8/52）为主.52株耐夫西地酸的菌株中耐药基因总携带率为17.3％（9/52）,其中fusB基因阳性菌株共7株,fusD阳性株共2株,未检测到fusC阳性菌株.另外,本研究中共检出11株fusA基因突变菌株,占21.2％,且MIC值均〉64μg/ml,分子分型以ST5-t2460为主.结论 夫西地酸对金黄色葡萄球菌表现出较好的体外抗菌活性,且保持相对稳定的耐药趋势.对夫西地酸高水平耐药的机制与fusA基因突变密切相关.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因型及耐药谱研究

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus ，MRSA）常引起医院感染的暴发流行。MRSA由于获得了外源性甲氧西林耐药决定子A（methicillin resistance determinant A，mecA），该基因编码青霉素结合蛋白2a，造成对所有β内酰胺类药物耐药。mec基因存在于葡萄球菌盒式染色体（Staphylococcal cassene chromosome mec，SCCmec）中，SCCmec是一种新型的可移动元件，不同于噬菌体和转座子，而且该元件还携带除mecA基因外的其他抗生素耐药基因，造成多重耐药。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对消毒剂和常用抗菌药物的耐药性及相关基因的研究

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus ，MRSA）已成为医院感染的重要病原菌，流行、暴发常有报道，同时社区获得性感染亦逐年增多。金黄色葡萄球菌对甲氧西林耐药是由于获得了携带mec基因的葡萄球菌盒式染色体（staphylococcal cassette chromosome mec，SCCmec），并通过SCCmec不断积累抗生素耐药基因。近年来国内外学者已从金黄色葡萄球菌中检出耐消毒剂基因的菌株。因此，控制MRSA特别是对常用消毒剂如季铵盐类等消毒剂耐药菌株的传播具有实际意义。     

40株MRSA菌消毒剂及抗菌药物耐药基因研究

近年国外学者从金黄色葡萄球菌中检出耐消毒剂的菌株。为了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)的耐消毒剂和抗菌药物耐药基因状况 ,我们收集了 2 0 0 3年 12月～ 2 0 0 4年 5月苏州大学医学院附属第三医院分离到的 2 0株MRSA菌和解放军 98医院分离到的 2 0株MRSA菌 ,共 4 0株。对其进行了耐消毒剂基因 (qacA)和 β内酰胺类耐药相关基因 (mecA、TEM)、氨基糖苷类耐药相关基因 [aac(6′) /aph(2″)、aph(3′) Ⅲ、ant(3″) Ⅰ、ant(2″) Ⅰ、ant(6 ) Ⅰ ]、四环素耐药相关基因 (tetM)、红霉素耐药相关基因 (erm )、万古霉素耐药相…     

抗耐药革兰阳性菌药物研究进展

近年耐药革兰阳性菌感染有增多趋势，如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNs）感染，近期报道的个别耐万古霉素金黄色葡萄球菌（VISA或GISA）及异质性耐万古霉素葡萄球菌（vancomycin hetero—resistance staphylococci）、耐万古霉索肠球菌（VRE）及耐青霉素肺炎链球菌（PRSP）感染等，引起了医药界关注，本文将简要介绍近年研究开发的抗耐药革兰阳性菌药物，供临床参考。     

异质性万古霉素耐药葡萄球菌分离及生物学特性观察

目的　了解本地区临床标本中异质性万古霉素耐药葡萄球菌 (h VRS)分离率 ,并对其生物学特性进行观察。方法　采用琼脂筛选和菌谱分析法对 5 6株甲氧西林耐药的葡萄球菌进行检测 ,同时对分离细菌的生长特性和超微结构进行观察 ,并与同源性敏感菌株及金黄色葡萄球菌标准菌株相比较。结果　本地区h VRS检出率为 14 .3% ,其中血浆凝固酶阴性葡萄球菌的分离率 (2 3.1% )明显高于金黄色葡萄球菌 (6 .7% ) ;耐药亚群与同源性敏感菌株和标准菌株比较 ,生长速度减慢 ,在固体培养基上菌落大小不等 ,在液体培养基中呈沉淀生长 ,电镜观察可见细胞壁增厚。结论　h VRS在本地区的临床标本中有一定的分离率 ,应引起重视 ;该菌的很多生物学特性与同源性敏感菌株有所不同 ,其中细胞壁增厚是比较明显的改变 ,并与该菌的耐药性有关。     

采用PCR快速检测金葡菌的mecA基因

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (ＭＲＳＡ)是医院内感染的重要病原之一 ,除对甲氧西林耐药外 ,还对临床上广泛应用的多种抗生素耐药 ,其所致感染呈散发或爆发流行 ,治疗困难、死亡率高 ,已成为临床治疗上的一大难题。我们根据ＰＢＰ2ａ编码基因设计了一对ｍｅｃＡ引物 ,用 16ＳｒＲＮＡ基因作为内参照 ,采用ＰＣＲ法可快速检测临床分离的金黄色葡萄球菌中的ｍｅｃＡ基因 ,用于ＭＲＳＡ的筛选和鉴定。1　材料和方法ＡＴＣＣ2 5 92 3。溶葡萄球菌素为美国Ｓｉｇｍａ公司产品 ,蛋白酶Ｋ为Ｍａｒｋ公司产品。苯唑西林青霉素 (批号 :0 10 4 0 0 4 )为…     

外科感染细菌分布及耐药分析

目的：探讨我院外科感染的细菌分布及其耐药情况。方法对2011年1月~2013年1月外科感染病患的送检标本进行细菌鉴定及药物敏检测。结果外科最常见的前三类感染细菌分别为假丝酵母菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌。外科感染细菌多对一线抗菌药物耐药,二线抗菌药物耐药率为50.88%,三线抗菌药物的耐药情况较为少见。结论普通外科感染常见菌多为肠道正常寄生菌,其中金黄色葡萄球菌的耐药性最强。     

医院耐甲氧西林葡萄球菌感染的生态学特征

目的研究葡萄球菌医院感染的生态学特征，为β-内酰胺类抗生素过度使用导致的医院内肺感染提供预防措施。方法以多重耐药凝固酶阴性葡萄球菌作为主要研究对象，采用临床追踪、痰微生物种群定量分析、苯唑西林和头孢西丁耐药表型筛选以及mecA基因检测及序列同源性比较。结果30％（56／185）重症监护病人分离到耐药表型符合研究对象的葡萄球菌；感染与住院时间、病种、头孢哌酮／舒巴坦和亚胺培南使用有关，常与多重耐药鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌同时出现；当葡萄球菌超过细菌总数的50％时，应高度警惕继发感染和菌群失调；13％（24／185）病例以菌群交替为特征；64％（36156）的病例凝固酶阴性葡萄球菌出现在亚胺培南或头孢哌酮／舒巴坦使用1周后；所有耐甲氧西林葡萄球菌菌株含1个533bp的mecA基因；17株溶血葡萄球菌mecA基因间同源性为99．74％；56株葡萄球菌mecA基因的同源性是97．9％。结论从生态学的3个层面：宏观生态（医院环境、病人条件、抗生素使用等情况）、微生物生态（呼吸道微生物种群变化）、分子生态（mecA基因耐药基因同源性分析）分析葡萄球菌医院感染的特征，为控制医院感染提供新的思路。     

医院感染患者痰液中分离细菌的分布特征和耐药性变迁分析

目的了解2003—2005年医院感染患者痰液中分离细菌的分布特征和耐药性，为合理使用抗菌药物提供依据。方法大多数分离细菌的鉴定和药敏试验利用BD Phoenix仪，少数利用手工鉴定和K—B法药敏试验。数据分析用WHONET5．0软件。结果医院感染患者痰液中最常见的为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌。痰液中分离的G-杆菌合计，耐药率低于40％的为美洛培南、亚安培南、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、头孢他啶和头孢吡肟。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLa）的检出率为45．2％-62．5％和36．7％-52．3％。葡萄球菌对多肽类抗菌药物万古霉素的敏感率一直为100％，对其他抗菌药物的耐药率均大于30％。金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌甲氧西林耐药性居高不下，分别为69．8％-72．0％、77．3％-87．1％。非发酵菌碳青霉烯类耐药率不断升高，铜绿假单胞菌对美洛培南和亚安培南耐药率已分别高达30．5％和49．4％。结论医院感染患者痰液中肠杆菌科产ESBLa比例、葡萄球菌甲氧西林耐药率和非发酵菌碳青霉烯类耐药率均较高，应加强抗菌药物的合理使用和采取有效的隔离措施以降低耐药率及多重耐药菌的扩散。     

深圳市龙岗区患者痰培养细菌菌谱和耐药性研究

目的研究深圳市龙岗区患者痰培养细菌菌谱和耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法对来自深圳市龙岗区4间医院2007年1月至2008年6月患者合格痰标本中培养的细菌药敏试验进行回顾性分析。结果727株细菌中,革兰阴性杆菌595株,占81．8％,以鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主;革兰阳性球菌132株,占18．2％,以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌为主,而且凝固酶阴性葡萄球菌株数超过金黄色葡萄球菌。药敏结果提示革兰阴性杆菌及革兰阳性球菌对相当多数的抗生素耐药率较高。结论深圳市龙岗区患者痰培养细菌耐药情况较严重,条件致病菌菌株数比例较高。应加强药物尤其是抗菌药物的使用管理,规范应用抗生素。     

儿童社区获得性呼吸道感染的病原学研究

目的探讨儿童呼吸道感染的病原学特点,以期为临床治疗提供依据.方法采集1784名呼吸道感染患儿咽拭标本常规细菌培养和/或PCR法支原体,K-B法测定流感嗜血杆菌、肺炎链球菌耐药性,以套式-聚合酶链反应及PCR技术进行肺炎链球菌耐药基因TEM基因、ermB基因和mefA基因检测,加DAN测序分析.结果 129例细菌培养阳性,依次为流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌属;153例支原体阳性,以肺炎支原体、人型支原体为主,少数为肺炎衣原体.其中流感嗜血杆菌、肺炎链球菌对青霉素、克林霉素、红霉素、阿奇霉素、阿莫西林/克拉维酸、复方甲基异恶唑、头孢菌素及红霉素等10种常用抗生素均不同程度耐药,但对氯霉素和万古霉素均敏感;肺炎链球菌β内酰胺酶基因(TEM)、红霉素耐药基因(甲基化酶基因ermB)表达阳性,但未表达红霉素耐药基因(外排基因mefA).结论流血嗜血杆菌和肺炎链球菌本地区呼吸道感染儿童主要致病菌,对常用抗生素有不同程度耐药,肺炎支原体和人型支原体也是重要致病原;肺炎链球菌耐药可能是通过表达TEM基因和ermB基因实现的.     

检测克林霉素诱导耐药的葡萄球菌

为了检测葡萄球菌中克林霉素诱导性耐药，正确报告药物敏感试验结果，临床实验室标准化委员会（CLSI，即NCCLS）2004年发布N100．S14，增加了克林霉素对葡萄球菌纸片诱导试验，国内陈民钧教授作了介绍旺]。我们根据文件规定，在128株金黄色葡萄球菌（金葡）和283株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）中操作D试验，现将结果报告如下。     

MRSA全基因结构及SCCmec分型的意义

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methieillin-resistant S．aureus，NRSA）1961年首次在英国报导，因其耐药谱广、耐药性高、传播速度快而成为全世界关注的焦点，其鉴定、分型、基因结构、致病机理、耐药机制和耐药基因传递方式均成了研究的热门课题。     

婴幼儿耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染状况和耐药基因的研究

目的了解感染婴幼儿的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）耐药性和耐药基因,明确检测青霉素结合蛋白2a（PBP2a）和甲氧西林耐药基因（mecA）的临床价值。方法用金黄色葡萄球菌乳胶凝集试验和梅里埃鉴定金黄色葡萄球菌,同时用纸片扩散法完成12种常用抗生素的药敏试验。对头孢西丁的结果,按当年CLSI标准执行,用于判断菌株甲氧西林的耐药性。采用PBP2检测试剂盒检测PBP2a蛋白,PCR检测mecA基因。结果 2007-2009年婴幼儿共检出245株金黄色葡萄球菌,其中MRSA检出率为17.6%（43/245）。MRSA对庆大霉素、复方新诺明、克林霉素、红霉素、氯霉素的耐药性均显著高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（P〈0.05）,其余抗生素的差异无统计学意义（P〉0.05）,43株MRSA的PBP2a蛋白和mecA基因的检测结果全为阳性,阳性率为100%。结论用头孢西丁（30μg）能有效地筛查MRSA,检测PBP2a蛋白和mecA基因均能正确地确认MRSA。且检测PBP2a蛋白方便快捷,特异性好,值得临床推广。     

青霉素结合蛋白与金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类抗生素的耐药机制

金黄色葡萄球菌是临床上常见致病菌,β-内酰胺类抗生素是治疗主要抗生素之一。但近年来,金葡菌对其产生的耐药日趋严重。其中,甲氧西林耐药金葡菌(MRSA)尤为突出,现已成为     

临床分离的4379株病原菌的分布特征及药敏结果分析

目的了解本院2008年临床分离的病原菌的分布特征及药敏结果,为合理使用抗菌药物提供依据。方法大多数细菌鉴定和药敏试验利用BD Phoenix仪,少数利用手工鉴定和K-B法药敏试验。念珠菌利用显色平板分离和鉴定,K-B法进行药敏试验。结果4379株细菌念珠菌中最常见的为大肠埃希菌（10.2%）、铜绿假单胞菌（9.4%）、金黄色葡萄球菌（7.7%）、鲍曼不动杆菌（7.7%）、白色念珠菌（7.0%）和肺炎克雷伯菌（6.2%）。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs比例分别为47.8%和41.3%。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌和腐生葡萄球菌甲氧西林耐药率分别为58.1%、82.8%、83.6%和73.1%。G-杆菌中耐药率较低的为头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星。G＋球菌,万古霉素和替考拉宁的敏感率均为100.0%,其他抗菌药物耐药率较低的为氯霉素。念珠菌对两性霉素B和制霉菌素的耐药率均低于2.0%。结论本院临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs水平、非发酵G-杆菌碳青霉烯类耐药率和葡萄球菌甲氧西林耐药率居高不下,应加强抗菌药物的合理使用,以降低耐药率。     

两例产NDM肺炎克雷伯菌耐药基因分析及治疗方案

目的 对某三甲医院临床分离的肺炎克雷伯菌进行耐药基因及表型分析，为临床治疗和预防耐药菌感染提供参考。方法 对某三甲医院临床分离的两株产NDM型金属β-内酰胺酶(new delhi metallo-beta-lactamase, NDM)进行全基因组检测。结果 两分离菌株含有多种质粒，在质粒上有NDM的耐药基因位点。结论 产NDM耐药菌的基因主要在质粒上，应加强抗生素的合理使用和感染控制措施，以减缓耐药基因的播散，预防耐药菌的产生。     

121例慢性细菌性前列腺炎病原菌检测及耐药谱分析

目的: 了解引起我院慢性细菌性前列腺炎的病原菌分布及其耐药谱特征,为临床诊断和治疗细菌性前列腺炎提供依据。方法: 用无菌方法采集前列腺炎患者的前列腺液进行细菌培养,利用VITEK2 Compact生物鉴定系统对细菌培养阳性的菌株进行种属鉴定,参照美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的方法,采用K-B法进行体外药敏试验,用WHONET 5.6软件分析病原菌的耐药谱特征。结果: 121例细菌性前列腺炎患者中,革兰阳性细菌感染患者93例(76.8%),革兰阴性细菌28例(23.2%),其中分离率前3位的细菌分别是金黄色葡萄球菌(29例,23.9%)、溶血性葡萄球菌(23例,19.0%)和表皮葡萄球菌(18例,14.9%)。药敏试验结果显示,3种主要革兰阳性细菌对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺全部敏感,对庆大霉素、红霉素、克林霉素、头孢西丁、苯唑西林和环丙沙星存在不同程度的耐药(7.1%~78.4%),对青霉素的耐药率高达90%以上;大肠埃希菌对亚胺培南、美罗培南和厄他培南全部敏感,对头孢噻肟、头孢曲松、环丙沙星、四环素、复方新诺明等抗生素有不同程度的耐药(14.5% ~69.7%)。结论: 我院慢性细菌性前列腺炎患者的病原菌主要是金黄色葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、表皮葡萄球菌和大肠埃希菌。慢性细菌性前列腺炎患者的治疗应以药敏试验结果为依据,合理选用抗菌药物。