西藏麻花艽种质资源的遗传多样性分析

目的 对西藏不同产地17份麻花艽Gentiana straminea样品的遗传多样性进行比较分析。方法 居群采样,以相同产地同属近缘种粗茎秦艽G. crassicaulis为外类群比对,nrDNA ITS区序列分析,构建UPGMA系统树。结果 西藏产麻花艽nrDNA ITS区序列有1个多态性位点;外类群粗茎秦艽6份样品序列完全一致。结论 麻花艽与外类群种间区别明显;17份不同产地麻花艽被划分为2类,遗传多样性较为丰富,为西藏麻花艽药材品质评价及麻花艽核心种质的构建提供基础资料。     

大叶秦艽HPLC指纹图谱研究

目的建立大叶秦艽药材HPLC指纹图谱分析方法,为其质量控制和药材鉴别提供依据.方法高效液相色谱法,色谱柱Shimadzu C18(150mm×4.6 mm, 5μm);洗脱条件甲醇-0.4%磷酸水溶液梯度洗脱;检测波长230nm;柱温25℃;流速1.0mL/min.结果确定构成大叶秦艽药材指纹的5个共有峰,所测定的14批秦艽药材具有很高的相似度,劣质秦艽及伪品秦艽相似度较低.结论大叶秦艽药材的HPLC指纹图谱可用于药材鉴别和质量控制.     

不同“发汗”处理对麻花艽药材有效成分的影响

目的：“发汗”是麻花艽产地加工中一种特殊的处理方式,明确麻花艽“发汗”加工的必要性,以及不同“发汗”药垛高度和不同“发汗”时长对青海产地麻花艽有效成分含量的影响,为麻花艽药材的“发汗”加工提供参考。方法：采用HPLC指纹图谱技术对“发汗”和不“发汗”麻花艽中5种有效成分进行指纹图谱分析和含量测定。结果：HPLC指纹图谱分析发现“发汗”与不“发汗”的麻花艽药材之间相似度≥0.998,二者指纹图谱相似度较高,整体化学成分较相似;药垛高度为75 cm的“发汗”药材有效成分含量高于不“发汗”药材和其他药垛高度“发汗”药材;“发汗”72 h干燥药材有效成分含量高于其他“发汗”时长处理药材。结论：麻花艽“发汗”产地加工方法具有科学性,堆置“发汗”的药垛高度对麻花艽有效成分含量有影响,建议麻花艽“发汗”加工时药垛高度以75 cm为宜,青海产地麻花艽最佳“发汗”时长为72 h。     

粗茎秦艽药材HPLC指纹图谱研究

目的 建立粗茎秦艽药材的HPLC指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法.方法 以龙胆苦苷为内参照物,分析13批粗茎秦艽药材的HPLC色谱行为.并进行相似度计算,色谱条件:Ultimate XB-C18柱(250 minX4.6 mm,5μm),乙腈-0.05%磷酸水梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长240 nm.结果 标定了10个共有峰,建立了HPLC指纹图谱,该图谱相关系数均在0.98～1.0.结论 该方法准确可靠,重现性好,可为控制粗茎秦艽药材内在质量提供科学依据.     

青海道地药材秦艽HPLC指纹图谱研究

目的利用高效液相色谱法建立了青海秦艽药材的色谱指纹图谱。方法以青海产秦艽药材为分析对象,通过正交试验设计、信息理论及化学计量学的相关方法,确定适宜的色谱条件,从而建立了10个不同产地青海秦艽药材样品的指纹图谱。结果指纹图谱中共有峰面积及其精密度、稳定性及重现性均符合《中药注射指纹图谱研究的技术要求(暂行)》中的相关规定。结论采用HPLC指纹图谱可有效控制秦艽的质量。     

空心莲子草的高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立空心莲子草药材的指纹图谱分析方法,探讨不同国家和地区空心莲子草药材的品质差异.方法 采用反相高效液相色谱法,Alltima C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.12%磷酸水溶液系统,线性梯度洗脱,检测波长345mm,进样量为10μl.结果 建立了空心莲子草药材的HPLC指纹图谱,确立了空心莲子草药材指纹图谱中的17个共有峰,计算了12批空心莲子草药材指纹图谱与对照图谱的相似度.结论 所建立的HPLC指纹图谱有很好的精密度、重复性和稳定性,能够用于空心莲子草药材的质量控制.     

广西产桑椹HPLC指纹图谱研究

目的:采用HPLC建立广西产桑椹的指纹图谱。方法:采用Agilent Zobax C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相进行梯度洗脱,检测波长360 nm,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃。结果:检测了广西不同来源10批桑椹药材,标定了10个共有峰,相似度较高,建立的桑椹指纹图谱稳定性、重复性好。结论:桑椹HPLC指纹图谱可用于桑椹药材的鉴别及质量控制。     

续断药材的HPLC指纹图谱研究

目的:建立续断药材的HPLC指纹图谱,为续断药材质量控制提供有效方法。方法:采用HPLC测定10个不同产地的续断药材,制定指纹图谱。色谱柱为SinoChrom ODS-BP(250mm×4.60mm,5μm);流动相:乙腈-0.05%磷酸水线性梯度洗脱;流速:1.0mL.min-1;检测波长:220nm;进样量:20μL;柱温:25℃。结果:10个不同产地续断药材的指纹图谱相似度较高,有18个共有峰,各共有峰之间的分离度较好。结论:不同产地续断的化学组成存在一定差异,固定产地来源对保障续断药材质量的稳定性极为重要。续断药材的指纹图谱特征性及专属性强,可用于续断药材的鉴别和质量控制。     

不同产地牛蒡子药材炮制前后HPLC指纹图谱研究

目的:应用HPLC对不同产地牛蒡子药材炮制前后进行指纹图谱研究。方法:采用Agilent EclipseXDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL.min,检测波长254 nm。结果:炮制对牛蒡子的HPLC指纹图谱模式有影响:生品共有峰有12个,指认了3个峰,炮制品共有峰有19个,指认了3个峰,本实验建立了牛蒡子药材及其制品的HPLC指纹图谱。结论:各产地牛蒡子药材HPLC色谱图中各成分得到了很好的分离,本实验建立的HPLC指纹图谱分析方法可用于区分牛蒡子药材生品及制品,可作为牛蒡子药材的专属性指纹。     

经典名方大秦艽汤HPLC指纹图谱及含量测定方法研究

目的制备10批大秦艽汤标准煎液,建立其HPLC指纹图谱并计算指标成分含量、转移率等数据,为建立大秦艽汤的质量控制标准提供参考。方法依据古方要求还原至现代煎煮方式制备大秦艽汤标准煎液。采用岛津Inertsil ODS-3 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量为1.0 m L/min;柱温为30℃;检测波长为237 nm;进样量为10μL。建立10批大秦艽汤HPLC指纹图谱,使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012A版)进行相似度分析,最后对共有峰进行鉴定和药材归属,并定量测定大秦艽汤中马钱苷酸、龙胆苦苷、升麻素苷的含量。结果建立了10批大秦艽汤的指纹图谱,相似度介于0.902～0.953,确认36个共有峰,指认出7、15、18～21、23、27、31、33、35号峰分别为马钱苷酸、龙胆苦苷、芍药苷、升麻素苷、阿魏酸、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、黄芩苷、黄芩素、甘草酸、汉黄芩素共11个成分;其中4～8、10～12、15号峰归属于秦艽,19、23号峰归属于防风,17、18号峰归属白芍,30号峰归属于独活,21、25、33号峰归属于甘草,22、27～29、35号峰归属于黄芩,1号峰归属于当归和独活,2号峰归属于秦艽、当归和细辛,3号峰归属于川芎和白芍,13号峰归属于甘草和独活,16号峰归属于秦艽和白芍,20号峰归属于川芎、当归和羌活;以马钱苷酸、龙胆苦苷、升麻素苷3项指标建立其质量控制标准,10批次样品中马钱苷酸、龙胆苦苷、升麻素苷质量分数分别为0.158～0.103、0.475～0.373、0.029～0.012mg/g。结论所建立的汤剂制备方法稳定可行,质量控制方法简单、专属性强,结果准确,可用于大秦艽汤的质量评价。     

陕西产秦艽质量变异与遗传多样性研究

目的研究陕西省不同产地秦艽的质量差异,对其遗传多样性进行检测,探讨药材质量和其遗传基础的关系。方法采用HPLC法测定不同产区秦艽药材中的指标成分,进行HPLC指纹图谱分析,计算并比较相似度。依据指纹图谱中的共有峰特征,对不同药材样品进行聚类分析。对药材中提取的总DNA进行RAPD分析,计算遗传距离并聚类。结果陕西省不同产区秦艽药材的质量具有一定的差异,不同产区秦艽药材也表现出一定的遗传多样性。陕西省不同产区的秦艽药材质量变异与遗传多样性之间不具有明显的相关性,而表现出与产地的相关性。结论产地对陕西秦艽药材质量的影响更为重要,提示道地秦艽质量的形成可能属于生境主导型。     

中药鬼臼毒性成分HPLC/UV指纹图谱分析方法研究及与威灵仙、龙胆HPLC图谱比较

目的：建立一个快速鉴别区分鬼臼、龙胆、威灵仙的分析方法。方法：以鬼臼所含毒成分为分析对象,选择适宜的ＨＰＬＣ条件,建立了指纹图谱分析方法,并对该方法进行了考察。结果：方法学考察结果表明,本研究建立的分析方法有较好重现性与复现性;鬼臼指纹图谱与威灵仙、龙胆ＨＰＬＣ图谱截然不同。结论：ＨＰＬＣ指纹图谱分析法可简便快速地鉴别区分鬼臼（桃儿七）、龙胆、威灵仙,并可用于不同来源鬼臼的鉴别。     

甘肃产秦艽的DNA指纹图谱鉴别

目的 对产于我国甘肃省的中药秦艽的3种基源植物秦艽、麻花秦艽与小秦艽进行RAPD分析,建立具有鉴别意义的DNA指纹图谱.方法 采用RAPD分子标记对秦艽的基因组DNA进行PCR扩增,利用NTSYSpc 2.1和Popgene 3.2软件分析3种秦艽间的亲缘关系,构建树系图.结果 从80条RAPD引物中筛选出4条具有鉴别意义的多态性引物,在3种秦艽中共得到39个DNA条带,其中共有条带2条,多态条带37条.据此获得了能有效区别3种秦艽的多态性RAPD指纹谱.结论 甘肃产秦艽的3种基源植物遗传分化明显,RAPD方法能有效地将它们区分鉴别.     

粗茎秦艽道地药材及土壤中有机质与无机元素的分析

目的探讨粗茎秦艽道地药材土壤环境因子的特性。方法于云南省丽江和玉龙纳西族自治县采集粗茎秦艽野生品与栽培品原植物标本、道地药材及其土壤样品,采用原子吸收分光光谱法、重铬酸钾容量法等测定有机质及微量元素含量等。结果获得粗茎秦艽药材野生品、栽培品及其土壤中有机质与14种无机元素含量测定数据,其中药材中所含重金属及有害元素,野生品除铜的含量略高外,其他指标均符合国家药典相关要求,栽培品品质良好;各品种生长土壤主要指标均达到国家土壤一级标准;该物种根部对磷的吸收富集显现较高趋势。结论本研究可为粗茎秦艽道地药材的规范化种植以及种质资源评价提供基础资料。     

中药秦艽生态适宜性区划研究

为了预测中药秦艽在我国的生态适宜区分布,寻找影响适宜性分布的主要生态因子,该研究通过实地调查及网络共享平台数据获取313份秦艽、186份麻花艽、343份小秦艽和131份粗茎秦艽的分布信息,利用Max Ent模型和Arc GIS技术,综合55项环境因子,分析影响中药秦艽生态适宜性的主要环境因子。分别分析影响4个种的主要环境因子后认为,降水量和海拔对4个种生态适宜性分布均产生主要影响。秦艽生态适宜区主要集中甘肃南部、山西全省、陕西中部和青海东部;麻花艽生态适宜区主要集中在甘肃西南部、青海东部、四川北部及西北部和西藏东部;小秦艽生态适宜区主要集中在甘肃西南及南部、青海东部、山西全省和陕西北部;粗茎秦艽生态适宜区主要集中在四川和云南北部,西藏东部、甘肃南部和青海东部也有分布。秦艽药材的生态适宜性区划结果与每种来源的秦艽实际分布相一致。该研究可以为中药秦艽野生资源的收集、保护和栽培区域的选择提供参考依据。     

龙胆掩味前后指纹图谱变化

目的:建立龙胆药材掩味前后的指纹图谱,比较其掩味前后的变化,总结苦味抑制剂对龙胆的掩味规律.方法:采用三氯蔗糖(SL)、单磷酸腺苷(AMP)、阿魏酸钠(SF)3种苦味抑制剂单独或联合应用对龙胆水煎液掩味,并用高效液相色谱法采集掩味前后各样品液的指纹图谱.结果:各平行色谱峰相对保留时间没有显著差异,最大差异仅为2.2％;含AMP组的指纹图谱个别峰的相对峰面积差异较大,最高达93.7％,但龙胆苦苷相对峰面积差异均在4.8％以下,而不含AMP组的指纹图谱中仅1和11号峰变化较大,最大变化达19.0％,16.4％,其他各峰相对峰面积差异均在10％以下.结论:SL,SF对龙胆的成分没有太大的影响,不会影响到龙胆的药物疗效,而AMP对龙胆部分成分有不同程度的影响,但是否影响到龙胆的药效有待进一步的研究.     

γ-巯丙基键合硅胶脱除龙胆提取液中的镉

目的:研究γ-巯丙基键合硅胶(MPS)脱除龙胆提取液中镉(Cd)的最佳工艺,并对其脱镉性能进行评价.方法:采用静态吸附和动态吸附的方式考察镉的脱除率,并以镉脱除率、含固量、HPLC指纹图谱等指标综合评价MPS的脱镉性能.结果:静态吸附的工艺参数:药液浓度相当于0.20 g(药材)·mL-1,吸附时间为120 min,药材量-MPS 15:1;动态吸附的工艺参数:径高比为1:3.5,药液浓度相当于0.20 g(药材)·mL-1,药液流速0.9 mL· min-1,药材量-MPS 50:1;龙胆药液脱镉前后的含固量及HPLC指纹图谱无显著性差异.结论:γ-巯丙基键合硅胶(MPS)能有效地脱除龙胆药液中的镉,脱镉性能良好.     

秦艽药材的品质区划研究

通过文献查阅,明确中药秦艽分布信息,实地采集秦艽药材79份。基于采样信息,利用秦艽药材指标成分和环境因子之间的回归模型,结合MaxEnt对生态适宜区的预测结果和指标成分的主成分分析结果,应用ArcGIS的空间分析功能对秦艽药材的品质进行空间分布估算。结果显示,陕西南部、甘肃南部、四川中部及西藏东南部秦艽药材综合品质较高。研究结果与秦艽药材的产区一致,可以为秦艽资源保护、开发和利用提供参考依据。     

不同提取方法对秦艽2种苦苷成分含量的影响

目的探讨不同提取方法对秦艽中獐牙菜苦苷和龙胆苦苷含量测定的影响。方法采用HPLC法,比较甲醇超声提取法、甲醇索氏提取法、药典法(2005版药典秦艽项下方法)三种提取方法对2种苦苷成分含量测定结果的影响。结果甲醇超声提取法优于其它二种方法。结论甲醇超声提取法操作简便易行,重现性好,准确度高,为科学控制秦艽质量提供一个可靠的方法。